劉欣鈺，劉效栓，李季文，豆金彥，喬嘉周

（1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000；2.甘肅省中醫(yī)院，甘肅 蘭州 730050；3.右江民族醫(yī)學(xué)院，廣西 百色 533000）

養(yǎng)陰生肌方是甘肅省中醫(yī)院協(xié)定處方，由白芍、龍膽、甘草等藥味組成，具有收斂生肌、消腫止痛的功效，原劑型為散劑，臨床應(yīng)用已有三十多年，在治療復(fù)發(fā)性口腔潰瘍、放射性直腸炎、潰瘍性壓瘡、潰瘍性結(jié)腸炎等疾病方面具有較好的療效［1-4］，但其服用時(shí)口感差，混合均一性不佳，揮發(fā)性成分不易保留。為增加養(yǎng)陰生肌方吸收、持續(xù)時(shí)間，增強(qiáng)對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的療效，課題組擬將其制成腸溶膠囊，具有生物利用度高、刺激性小、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)［5-7］。

在中藥膠囊劑制備工藝研究過(guò)程中，評(píng)價(jià)指標(biāo)大多為吸濕性、休止角、成型率，而本實(shí)驗(yàn)增加了水分測(cè)定，使養(yǎng)陰生肌腸溶膠囊成型工藝的評(píng)價(jià)更嚴(yán)謹(jǐn)客觀。首先，采用單因素試驗(yàn)確定各影響因素考察范圍，再通過(guò)信息熵賦權(quán)法結(jié)合Box-Behnken 響應(yīng)面法作進(jìn)一步優(yōu)化，以期為其他中藥膠囊劑成型工藝研究提供參考［8-9］。

1 材料

1.1 儀器 LX2200C 電子分析天平（0.01 g）、LX120A 電子分析天平（0.000 1 g） （瑞士普利賽斯公司）；DHG-9145A 電熱鼓風(fēng)干燥烘箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 試劑與藥物 腸溶空心膠囊（安徽黃山膠囊股份有限公司）。乳糖、麥芽糊精、可溶性淀粉、微晶纖維素（上海源葉生物科技有限公司）。乙醇（甘肅凱飛消毒科技有限公司）；氯化鈉為分析純（天津市大茂化學(xué)試劑廠）。

2 方法與結(jié)果

2.1 制劑制備 取處方量藥材，加12 倍量水浸泡45 min后加熱回流提取2 次，每次90 min，合并濾液，濃縮至1 ∶2，放冷，加95% 乙醇使藥液醇沉體積分?jǐn)?shù)達(dá)50%，靜置30 h，濾過(guò)，濾液濃縮至無(wú)醇味，烘干，粉碎，過(guò)100 目篩，得浸膏粉。按最優(yōu)藥輔比1 ∶1 稱(chēng)取可溶性淀粉、浸膏粉適量，混合均勻，少量多次噴入95% 乙醇（用量25%）制軟材，過(guò)20 目篩制粒，置于60 ℃烘箱中干燥30 min，取出，整粒，膠囊填充板將顆粒裝入腸溶膠囊中，即得。

2.2 指標(biāo)測(cè)定

2.2.1 成型率 稱(chēng)定整粒后顆粒質(zhì)量，即為總顆粒質(zhì)量，再稱(chēng)定能通過(guò)1 號(hào)篩但不能通過(guò)5 號(hào)篩的合格顆粒質(zhì)量，計(jì)算成型率，公式為成型率＝［（總顆粒質(zhì)量-合格顆粒質(zhì)量）／總顆粒質(zhì)量］ ×100%。

2.2.2 吸濕率 取“2.2.1” 項(xiàng)下合格顆粒適量，平鋪于質(zhì)量恒定的稱(chēng)量瓶中，稱(chēng)定質(zhì)量，再將稱(chēng)量瓶打開(kāi)，放入盛有NaCl 過(guò)飽和溶液的干燥器中（相對(duì)濕度75%），每隔一定時(shí)間稱(chēng)定1 次質(zhì)量，計(jì)算吸濕率，公式為吸濕率＝［（吸濕后顆粒質(zhì)量-吸濕前顆粒質(zhì)量）／吸濕前顆粒質(zhì)量］ ×100%。

2.2.3 休止角 采用固定漏斗法，將3 只漏斗串聯(lián)并固定，其中最下方1 只與坐標(biāo)紙的距離控制在1 cm （H），將整粒后的顆粒沿最上方漏斗壁緩緩倒下，直至坐標(biāo)紙顆粒的頂端和漏斗口觸碰，測(cè)量坐標(biāo)紙顆粒形成圓錐的半徑R，計(jì)算休止角α，公式為tanα＝H／R。

2.2.4 含水量 按2020 年版《中國(guó)藥典》 三部通則中0832 水分測(cè)定法項(xiàng)下第二法，取“2.2.1” 項(xiàng)下合格顆粒適量，平鋪于恒重稱(chēng)量瓶中，稱(chēng)定質(zhì)量，打開(kāi)瓶蓋，置于105 ℃烘箱中干燥5 h，取出，蓋好瓶蓋，迅速放入干燥器中冷卻30 min，稱(chēng)定質(zhì)量，再置于105 ℃烘箱中干燥1 h，放冷，稱(chēng)定質(zhì)量，直至連續(xù)2 次的差異不超過(guò)5 mg 為止，計(jì)算含水量，公式為含水量＝（減失水分質(zhì)量／合格顆粒質(zhì)量） ×100%。

2.3 單因素試驗(yàn) 以成型率、休止角、吸濕率為指標(biāo)，篩選輔料種類(lèi)、藥輔比、乙醇體積分?jǐn)?shù)、乙醇用量、干燥溫度、干燥時(shí)間，采用Hassan 法進(jìn)行歸一化處理，其中成型率越大越好，故采用公式越小越好，故采用公式再計(jì)算總評(píng)歸一值（OD），公式為OD＝（d1d2…da）1／a，其中a為評(píng)價(jià)指標(biāo)數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表1。休止角、吸濕率由此可知，浸膏粉+可溶性淀粉OD 值最高，并且后者價(jià)格低廉，故選擇其作為輔料；藥輔比為1 ∶1 時(shí)OD 值最高，考慮到該因素與其余因素的交互作用，故選擇1 ∶1～1 ∶2進(jìn)行后續(xù)考察；不同體積分?jǐn)?shù)乙醇的OD 值相同，但在95%時(shí)成型率、休止角更高，故選擇該數(shù)值并不再進(jìn)行優(yōu)化；乙醇用量為20%時(shí)OD 值最高，15%、25%時(shí)稍低，故選擇15%～25%進(jìn)行后續(xù)考察；干燥溫度為60 ℃時(shí)OD 值最高，故選擇該數(shù)值并不再進(jìn)行優(yōu)化；干燥時(shí)間為10 min時(shí)OD 值最高，20、30 min 時(shí)較低，故選擇10～30 min 進(jìn)行后續(xù)考察。

表1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.4 Box-Behnken 響應(yīng)面法 在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，以藥輔比（A）、乙醇用量（B）、干燥時(shí)間（C） 為影響因素，成型率、休止角、吸濕率、含水量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計(jì)，因素水平見(jiàn)表2，結(jié)果見(jiàn)表3。

表2 因素水平

表3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

2.5 信息熵賦權(quán)法 設(shè)定1 個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)系統(tǒng)由m個(gè)評(píng)價(jià)對(duì)象、n個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)組成，則原始指標(biāo)的數(shù)據(jù)矩陣為X＝（Xij）mn。本實(shí)驗(yàn)建立由表3 數(shù)據(jù)構(gòu)成的原始數(shù)據(jù)矩陣，具體步驟如下。

（1） 將原始數(shù)據(jù)矩陣進(jìn)行歸一化，公式為X'ij＝（Xij-Xmin）／（Xmax-Xmin）、X'ij＝（Xmax-Xij）／（Xmax-Xmin）。

（2） 計(jì)算各指標(biāo)概率Pij，公式為

（3）計(jì)算各指標(biāo)熵Hi，公式為結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 各評(píng)價(jià)指標(biāo)權(quán)重計(jì)算結(jié)果

（4） 計(jì)算各指標(biāo)權(quán)重Wi，公式為Wi＝（1-Hi）結(jié)果見(jiàn)表4。

（5） 計(jì)算綜合評(píng)分Y。

2.6 模型擬合、方差分析 采用Design Expert 8.0.6.1 軟件對(duì)表2 數(shù)據(jù)進(jìn)行二次項(xiàng)擬合，得方程為Y＝29.99-16.4A+0.63B-0.38C-0.96AB-7.01AC-0.048BC+ 20.84A2+16.12B2+2.97C2（R2＝0.959 9），方差分析見(jiàn)表5。由此可知，模型F＝18.60，P＜0.05，表明其誤差小，模擬程度好，具有顯著性；失擬項(xiàng)P＞0.05，表明可用該模型對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析；各因素影響程度依次為A＞B＞C。

表5 方差分析

2.7 響應(yīng)面分析 結(jié)果見(jiàn)圖1。最終確定，最優(yōu)工藝為藥輔比1 ∶1，乙醇用量25%，干燥時(shí)間30 min，綜合評(píng)分為94.518 4 分。

圖1 各因素響應(yīng)面圖

2.8 驗(yàn)證試驗(yàn) 按“2.7” 項(xiàng)下優(yōu)化工藝進(jìn)行3 批驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表6。由此可知，平均綜合評(píng)分與預(yù)測(cè)值94.518 4 分接近，表明該工藝穩(wěn)定性良好，可用于工業(yè)化大生產(chǎn)。

表6 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果（n＝3）

2.9 物理特性考察

2.9.1 堆密度 采用量筒法，取合格顆粒3 g，置于10 mL量筒中，將其從5 cm 高度垂直落在水平面上，反復(fù)3 次，計(jì)算堆密度，公式為堆密度＝顆粒質(zhì)量／顆粒體積，結(jié)果見(jiàn)表7，可知該參數(shù)穩(wěn)定性良好。

表7 堆密度測(cè)定結(jié)果（n＝3）

2.9.2 裝量差異 取3 批樣品，每批10 粒，先稱(chēng)定整個(gè)膠囊質(zhì)量，再倒出內(nèi)容物，用小刷拭凈，稱(chēng)定囊殼質(zhì)量，計(jì)算每粒膠囊內(nèi)容物裝量、平均裝量，其中后者在0.3 g 以下者裝量差異限度為±10%，公式為裝量差異限度＝［（每粒膠囊裝量-平均裝量）／平均裝量］ ×100%，結(jié)果見(jiàn)表8，可知均符合2020 年版《中國(guó)藥典》 要求。

表8 裝量差異測(cè)定結(jié)果（n＝3）

3 討論

養(yǎng)陰生肌方為中藥復(fù)方，中藥膠囊中的內(nèi)容物大多為藥材直接打粉或浸膏粉，為了保證全方綜合療效，本實(shí)驗(yàn)選擇浸膏粉作為內(nèi)容物，但其吸濕性強(qiáng)，易結(jié)塊，需加入輔料可溶性淀粉加以改善［10-15］。為了保證養(yǎng)陰生肌腸溶膠囊的均一性、穩(wěn)定性，本實(shí)驗(yàn)以輔料種類(lèi)、藥輔比、乙醇體積分?jǐn)?shù)、乙醇用量、干燥溫度、干燥時(shí)間為影響因素，成型率、休止角、吸濕率、水分為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用Box-Behnken 響應(yīng)面法進(jìn)行設(shè)計(jì)，該方法既可減少實(shí)驗(yàn)次數(shù)，又可多指標(biāo)對(duì)成型工藝進(jìn)行同步優(yōu)化，與正交試驗(yàn)相比更合理完整［16-18］，再通過(guò)信息熵賦權(quán)法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行多指標(biāo)綜合分析［19-21］，發(fā)現(xiàn)優(yōu)化所得的成型工藝穩(wěn)定可靠，可為該制劑質(zhì)量控制提供依據(jù)。