王詩婷，孔偉華，溫樂樂，金紅婷，劉巨釗，崔 琦

中藥三萜類成分防治膝骨關(guān)節(jié)炎作用機(jī)制研究進(jìn)展

王詩婷，孔偉華#，溫樂樂，金紅婷，劉巨釗*，崔 琦*

浙江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江 杭州 310053

膝骨關(guān)節(jié)炎（knee osteoarthritis，KOA）是一種嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量的膝關(guān)節(jié)功能退行性疾病，目前已成為全球致殘率最高的疾病之一。中醫(yī)藥治療KOA有著悠久的歷史和廣闊的應(yīng)用前景，能夠有效彌補(bǔ)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療KOA的不足。中藥三萜類成分對KOA具有良好的防治作用，可通過抑制炎癥反應(yīng)、抗氧化應(yīng)激反應(yīng)、抑制軟骨細(xì)胞凋亡、促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖、合成膠原蛋白等延緩KOA的進(jìn)程，具有多靶點(diǎn)協(xié)同性的特點(diǎn)。通過對中藥三萜類成分防治KOA的作用機(jī)制進(jìn)行綜述，為開發(fā)臨床治療KOA的藥物提供科學(xué)依據(jù)。

膝骨關(guān)節(jié)炎；中藥；五環(huán)三萜；四環(huán)三萜；木通皂苷D；人參皂苷Rg1；雷公藤紅素；黃芪甲苷

膝骨關(guān)節(jié)炎（knee osteoarthritis，KOA）是一種影響膝關(guān)節(jié)功能的退行性疾病，其病理特點(diǎn)為關(guān)節(jié)間隙狹窄、軟骨下骨硬化、骨贅增生等，臨床表現(xiàn)為關(guān)節(jié)疼痛、活動(dòng)受限、活動(dòng)時(shí)有骨摩擦音等[1-2]。KOA的致病機(jī)制尚不明確，但研究發(fā)現(xiàn)其發(fā)病與年齡、性別、肥胖、創(chuàng)傷等因素有關(guān)。調(diào)查顯示，KOA已成為全球致殘率最高的疾病之一，對患者的生活質(zhì)量及身心健康造成極大影響，而我國KOA的疾病負(fù)擔(dān)總體呈持續(xù)上升趨勢[3-4]。目前西醫(yī)主要采用藥物保守治療及手術(shù)治療，但由于藥物會(huì)引起諸多不良反應(yīng)，手術(shù)治療可能引起并發(fā)癥且對患者身體狀況要求較高，尋求其他更加安全有效的治療方式十分必要。

KOA在中醫(yī)領(lǐng)域?qū)儆凇跋ケ浴狈懂?。中醫(yī)認(rèn)為引起膝痹的主要原因是風(fēng)、寒、濕、熱等外邪入里，痹阻經(jīng)絡(luò)，使氣血運(yùn)行不暢導(dǎo)致關(guān)節(jié)發(fā)生疼痛、活動(dòng)受限等問題[5]。而中藥所含的天然產(chǎn)物，因其結(jié)構(gòu)多樣，具有可作用于多種蛋白質(zhì)、受體、信號通路的優(yōu)勢[6]。傳統(tǒng)中醫(yī)治療KOA的方劑僅可從傳統(tǒng)中醫(yī)理論方面解釋其功效機(jī)制，但就現(xiàn)代醫(yī)學(xué)而言，其物質(zhì)基礎(chǔ)尚不明確。本文通過對中國知網(wǎng)、中國生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫、萬方中國學(xué)術(shù)期刊數(shù)據(jù)庫、PubMed、Web of Science和Google Scholar數(shù)據(jù)庫等國內(nèi)外核心數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，發(fā)現(xiàn)多種中藥三萜類成分能夠有效防治KOA。

三萜類成分是一類由甲戊二羥酸衍生而成，基本碳架具有6個(gè)類異戊二烯結(jié)構(gòu)單元的化合物[7]。三萜類成分廣泛存在于自然界中，一些常見的中藥如人參、甘草、三七等均含有三萜類成分，且具有較強(qiáng)的生物活性。部分中藥中，三萜類成分的主要存在形式為三萜皂苷，由三萜皂苷元和糖組成。三萜皂苷元多為四環(huán)三萜和五環(huán)三萜。研究顯示，三萜類成分普遍具有抗腫瘤、抗糖尿病、肝臟保護(hù)及對微生物和寄生蟲的抑制和殺滅等作用[8]。大量研究表明三萜類成分在KOA的治療方面療效顯著。因此，本文通過對中藥三萜類成分治療KOA的機(jī)制進(jìn)行闡述，為發(fā)現(xiàn)攻克KOA的新思路、新方向，推進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化建設(shè)提供依據(jù)。

1 五環(huán)三萜

五環(huán)三萜在自然界中分布廣泛，因其苷元內(nèi)常含有羧基，又稱酸性皂苷。根據(jù)其E環(huán)和C環(huán)的大小、母核上取代基的位置及構(gòu)型分為：E環(huán)為六元環(huán)（如齊墩果烷、烏蘇烷和木栓烷）、E環(huán)為五元環(huán)（如羽扇豆烷、羊齒烷等）、C環(huán)為七元環(huán)（其他類型）等。近年來，研究者對五環(huán)三萜藥理活性的研究日益深入，針對五環(huán)三萜類化合物生物合成途徑的解析也獲得了較大進(jìn)展。植物三萜類成分的合成主要通過胞質(zhì)中的甲羥戊酸途徑和質(zhì)體中的甲基赤蘚糖醇磷酸途徑，氧化鯊烯環(huán)化酶可催化2,3-氧化鯊烯生成甾醇和三萜類前體物質(zhì)，是該反應(yīng)的關(guān)鍵酶，也是產(chǎn)生三萜類產(chǎn)物多樣性的關(guān)鍵步驟。細(xì)胞色素P450和糖基轉(zhuǎn)移酶對五環(huán)三萜類化合物具有重要的修飾作用[9]。部分具有緩解及治療KOA作用的五環(huán)三萜類成分見表1和圖1。

1.1 齊墩果烷型

1.1.1 木通皂苷D 木通皂苷D（1）是常春藤皂苷元型五環(huán)三萜類化合物，C-3位連接α--阿拉伯吡喃糖苷，C-28位通過酯鍵連接6--β--吡喃葡萄糖基-β--吡喃葡萄糖。木通皂苷D常溫下為白色結(jié)晶，分子式為C47H76O18，微溶于二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）、甲醇，脂水分配系數(shù)（lipid-water partition coefficient，P）為0.8，極性表面積（topological polar surface area，PSA）為29.5 nm，可旋轉(zhuǎn)鍵數(shù)（rotatable bond count，RBC）為10。木通皂苷D能夠抑制白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）調(diào)控的軟骨細(xì)胞產(chǎn)生炎癥介質(zhì)，如環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、一氧化氮、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等，并且能夠抑制解聚蛋白樣金屬蛋白酶-5（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs-5，ADAMTS-5）和基質(zhì)金屬蛋白酶13（matrix metalloproteinase 13，MMP13）的產(chǎn)生，促進(jìn)II型膠原蛋白的形成以治療KOA，同時(shí)木通皂苷D還能夠通過激活核因子E2相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid-2-related factor 2，Nrf2）靶點(diǎn)，上調(diào)血紅素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）的表達(dá)，并阻斷核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）p65與DNA結(jié)合而發(fā)揮抗炎功效[10]。田歡等[11]通過文獻(xiàn)總結(jié)發(fā)現(xiàn)，木通皂苷D可通過磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol-3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）信號通路，促進(jìn)成骨基因堿性磷酸酶、骨鈣素、I型膠原蛋白和Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（Runt-related transcription factor 2，RUNX2）的表達(dá)，達(dá)到抗骨質(zhì)疏松的目的，而PI3K/Akt信號通路也是促使KOA發(fā)生的重要信號通路之一。目前針對木通皂苷D治療KOA的研究仍較少，根據(jù)結(jié)構(gòu)推測其藥理作用主要是C-3和C-28位的糖苷或C-23位的羥基協(xié)同作用的結(jié)果，后續(xù)研究可圍繞其關(guān)鍵官能團(tuán)進(jìn)行針對性的研究或?qū)ζ溥M(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，使其具有更加有效的治療作用。木通皂苷D作為續(xù)斷的有效成分之一，能夠協(xié)同續(xù)斷中的其他三萜皂苷達(dá)到抑制炎癥反應(yīng)、合成膠原蛋白和抑制軟骨細(xì)胞凋亡的目的。

表1 具有治療及緩解KOA作用的三萜類成分

Table 1 Triterpenes components with effect of treating and relieving KOA

編號名稱類型來源文獻(xiàn) 1木通皂苷D齊墩果烷型川續(xù)斷10-11 2山楂酸山楂12-14 3齊墩果酸女貞子15-17 4柴胡皂苷A柴胡18-19 5柴胡皂苷D柴胡20-22 6七葉皂苷天師栗23-25 7甘草甜素甘草26-29 8白樺脂醇羽扇豆烷型白樺40-42 9雷公藤紅素去甲木栓烷型雷公藤43-45 10積雪草苷烏蘇烷型積雪草46-49 11三七皂苷R1達(dá)瑪烷型三七51-52 12人參皂苷Rg1人參53-55 13人參皂苷Rb1人參56-58 14人參皂苷Rb2人參59-60 15絞股藍(lán)皂苷A絞股藍(lán)61-62 16黃芪甲苷環(huán)阿屯烷型黃芪63-67 17羅漢果皂苷Ⅵ葫蘆烷型羅漢果68-69

圖1 具有緩解及治療KOA作用的三萜結(jié)構(gòu)式

1.1.2 山楂酸 山楂酸（2）為齊墩果-12-烯型五環(huán)三萜化合物，結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是C-2和C-3位具有羥基，C-28位被羧基取代（為2α,3β立體異構(gòu)體）。山楂酸為白色或近白色粉末，分子式為C30H48O4，可溶于丙酮，P為6.5，PSA為7.78 nm，RBC為1。山楂酸可顯著降低IL-1β誘導(dǎo)的骨關(guān)節(jié)炎中部分炎癥介質(zhì)的含量，如前列腺素（prostaglandin，PG）、一氧化氮等，并抑制COX-2、TNF-α的表達(dá)，同時(shí)還能夠使PI3K/Akt/NF-κB通路失活達(dá)到抗炎作用[12]。還有研究顯示，對輕度KOA的中老年患者而言，山楂酸能夠在抑制炎癥反應(yīng)的同時(shí)，減輕受試者的體質(zhì)量，減輕其膝關(guān)節(jié)負(fù)擔(dān)，緩解患者的疼痛[13]。山楂酸還可通過調(diào)控NF-κB通路，抑制破骨細(xì)胞分化，對KOA的進(jìn)展起抑制作用[14]。山楂酸存在于多種植物中，對人體具有較高的安全性，但目前針對山楂酸的研究主要圍繞抗癌、抗氧化、抗艾滋病、抗菌、抗糖尿病等藥理作用展開，針對KOA相關(guān)的研究較少。推測其藥理作用可能由其2個(gè)側(cè)鏈、C-2位羥基和C-28位羧基共同決定。

1.1.3 齊墩果酸 齊墩果酸（3）為齊墩-12-烯-28-酸型五環(huán)三萜化合物或羥基單羧酸，結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是C-3位由β-羥基取代，是齊墩果酸羥乙酯的共軛酸。齊墩果酸為淺黃色至白色針狀結(jié)晶，分子式為C30H48O3，加熱條件下微溶于DMSO，P為7.5，PSA為5.75 nm，RBC為1。齊墩果酸能夠抑制、、和的基因表達(dá)，并增加II型膠原蛋白的基因表達(dá)，從而減輕骨關(guān)節(jié)炎對關(guān)節(jié)軟骨的破壞。同時(shí)齊墩果酸能夠抑制MMP3的蛋白分泌，并抑制其活性[15]。Li等[16]研究發(fā)現(xiàn)，齊墩果酸能夠通過微小RNA-148-3p（microRNA-148-3p，miR-148-3p）/成纖維細(xì)胞生長因子-2信號通路預(yù)防IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞功能障礙，達(dá)到預(yù)防KOA的效果。馬天文等[17]通過研究齊墩果酸對于骨關(guān)節(jié)炎大鼠肌肉氧化損傷和軟骨下骨異常骨重建的作用，發(fā)現(xiàn)齊墩果酸能夠有效抑制由骨關(guān)節(jié)炎引起的疼痛，并通過調(diào)控Nrf2/醌氧化還原酶1/HO-1通路抑制肌肉功能障礙，從而延緩由骨關(guān)節(jié)炎引起的軟骨下骨重建。齊墩果酸在植物中廣泛存在，常作為廣譜抗菌藥使用，具有良好的抗炎作用，并通過促進(jìn)膠原蛋白生成而緩解KOA。明確其作用位點(diǎn)，開發(fā)安全有效的齊墩果酸衍生物有待進(jìn)一步研究。推測其藥理活性是由C-3位的羥基、C-28位的羧基、多個(gè)位置的-CH3的空間構(gòu)型共同決定，有待后續(xù)研究。

1.1.4 柴胡皂苷A 柴胡皂苷A（4）C-3位具有葡萄糖和巖藻糖，C-16位連有一個(gè)β-羥基，C-24號上連有羥基，C-13和C-17位間有環(huán)氧鍵連接。柴胡皂苷A為白色或近白色固體，分子式為C42H68O13，微溶于DMSO、甲醇、鹽酸吡啶，P為2.5，PSA為20.8 nm，RBC為6。研究發(fā)現(xiàn)，柴胡皂苷A能夠有效抑制IL-1β的表達(dá)，使軟骨細(xì)胞一氧化氮、PGE2的產(chǎn)生減少，并通過抑制NF-κB表達(dá)，減少M(fèi)MP1、MMP3和MMP13的生成，從而減輕炎癥反應(yīng)[18]。Huang等[19]通過研究柴胡皂苷A對骨質(zhì)疏松癥中骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化的影響，發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷A能夠激活Wnt/β-連環(huán)蛋白（β-catenin）信號通路及包括T細(xì)胞因子-1和淋巴增強(qiáng)因子-1在內(nèi)的下游因子，促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的成骨化。柴胡皂苷A對KOA具有良好的緩解作用，但目前對該成分的研究仍較少。同時(shí)柴胡皂苷A還具有免疫調(diào)節(jié)、抗病毒等作用，其可利用形式眾多，綜合價(jià)值高，故而極具開發(fā)潛力。

1.1.5 柴胡皂苷D 柴胡皂苷D（5）C-3位具有葡萄糖和巖藻糖，C-16位上連有一個(gè)α-羥基，C-24號位上連有羥基，C-13和C-17號位間有環(huán)氧鍵連接，為柴胡皂苷A的同分異構(gòu)體。柴胡皂苷D為白色或近白色固體，分子式為C42H68O13，易溶于水、稀醇，難溶于苯、乙醚、氯仿，P為2.5，PSA為20.8 nm，RBC為6。Wu等[20]發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷D在體外能夠通過激活Nrf2/HO-1/活性氧通路，抑制小鼠成軟骨ATDC5細(xì)胞的炎性凋亡，從而抑制軟骨破壞和軟骨細(xì)胞的缺失，同時(shí)柴胡皂苷D還能夠通過抑制由IL-1β誘導(dǎo)的NF-κB通路激活，以減少炎癥反應(yīng)。Jiang等[21]研究發(fā)現(xiàn)柴胡皂苷D能夠通過抑制哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）/Akt/PI3K信號通路以減輕炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)軟骨細(xì)胞的自噬作用，進(jìn)而保護(hù)軟骨組織。柴胡在治療少陽兼證型的KOA具有重要作用，但其防治KOA的機(jī)制尚有空白。柴胡具有復(fù)雜的活性成分，其中柴胡皂苷D被證實(shí)是柴胡皂苷提取物中發(fā)揮活性的重要單體化合物之一[22]。現(xiàn)有研究顯示該成分可有效緩解KOA，但具體分子作用機(jī)制尚不明確，根據(jù)結(jié)構(gòu)推測其藥理活性主要由C-3位的糖基和C-16、C-24位的羥基決定，故有待深入研究與開發(fā)利用。

1.1.6 七葉皂苷 七葉皂苷（6）提取自七葉樹科植物天師栗的干燥成熟種子娑羅子，由原七葉皂苷配體和玉芯皂苷配體衍生而來，在其C-21、C-22位的羥基上分別與當(dāng)歸酸或巴豆油酸形成酯。七葉皂苷為棕黃色至白色結(jié)晶性粉末，分子式為C55H86O24，可溶于甲醇，P為0.7，PSA為38.8 nm，RBC為16。Maghsoudi等[23]研究發(fā)現(xiàn)七葉皂苷能夠抑制滑膜細(xì)胞中、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，）、、和的基因表達(dá)，并抑制單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞中一氧化氮和PGE2的產(chǎn)生，達(dá)到抗炎的目的。王淼等[24]研究發(fā)現(xiàn)，七葉皂苷A能夠減少由IL-1β誘導(dǎo)的小鼠原代軟骨細(xì)胞凋亡，減少TNF-α、IL-6的生成，并抑制和mRNA的表達(dá)，同時(shí)能夠使II型膠原蛋白表達(dá)增加、MMP9蛋白表達(dá)減少。抑制IL-1β誘導(dǎo)的缺氧誘導(dǎo)因子-2α（hypoxia inducible factor-2α，HIF-2α）與NF-κB信號通路活化，發(fā)揮抗氧化活性抑制小鼠KOA。七葉皂苷來源中藥在傳統(tǒng)方劑中使用較少，且目前針對七葉皂苷的研究主要體現(xiàn)在消炎、抗?jié)B出、增加靜脈張力、改善血液循環(huán)及糾正腦功能失常等，抗KOA的研究較少。七葉皂苷藥效與酯基的存在有關(guān)，后續(xù)可研究其分子作用機(jī)制并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾[25]，開發(fā)安全有效的七葉皂苷衍生物用于治療KOA。

1.1.7 甘草甜素 甘草甜素（7）為齊墩果烷型五環(huán)三萜，甘草次酸作為苷元在C-3位上結(jié)合2分子葡萄糖醛酸而成。甘草甜素為白色至淺黃色粉末，分子式為C42H62O16，易溶于熱水，不溶于醚，難溶于丙二醇、乙醇，P為3.7，PSA為26.7 nm，RBC為7。甘草甜素作為甘草有效活性成分之一，具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等多種藥理作用。Jiang等[26]研究表明，甘草甜素可抑制人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞中IL-1β誘導(dǎo)的PI3K/Akt通路激活，在體內(nèi)可以抑制人關(guān)節(jié)軟骨的破壞。任天琦等[27]研究顯示甘草甜素可降低KOA大鼠血清中的IL-1β、IL-6、TNF-α水平，有效改善關(guān)節(jié)炎癥反應(yīng)和水腫狀態(tài)，且能夠顯著降低軟骨組織中細(xì)胞凋亡率及B淋巴細(xì)胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）相關(guān)X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cystein-asparate protease-3，Caspase-3）蛋白表達(dá)水平，表明甘草甜素可抑制軟骨細(xì)胞凋亡，保護(hù)軟骨組織。也有研究表明甘草甜素能夠通過抗炎和抗氧化作用，對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎起治療效果[28]。甘草甜素能夠有效抑制輔助性T細(xì)胞17/調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的失衡，從而抑制炎性反應(yīng)[29]?？梢姼什萏鹚鼐哂卸喾N藥理作用，有較大的開發(fā)前景。從結(jié)構(gòu)推測其藥理活性可能與C-3位的糖基有關(guān)，后續(xù)可對其進(jìn)行作用位點(diǎn)的研究和修飾以供開發(fā)利用。同時(shí)甘草內(nèi)還具有多種三萜類成分，這些成分是否具有防治KOA的藥理作用有待后續(xù)研究。

1.1.8 威靈仙皂苷 威靈仙皂苷提取自威靈仙，威靈仙的主要活性成分為三萜皂苷，其三萜皂苷分為4類，包括齊墩果酸型、常春藤皂苷元型、表常春藤皂苷元型和絲石竹苷元型，其皂苷元基本骨架均為齊墩果烷型[30]。Hsieh等[31]發(fā)現(xiàn)用丙酮提取的威靈仙三萜皂苷對脂多糖刺激的人原代軟骨細(xì)胞產(chǎn)生的PG、MMP3、MMP13和COX-2有顯著的抑制作用，提示該成分的抗炎能力與抑制MMP3、MMP13有關(guān)，并由此保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨。Wu等[32]通過研究威靈仙總皂苷對碘乙酸鈉誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎大鼠模型的影響，發(fā)現(xiàn)威靈仙總皂苷可以通過防止細(xì)胞外基質(zhì)降解和軟骨細(xì)胞損傷來抑制由碘乙酸鈉引起的關(guān)節(jié)破壞和軟骨侵蝕。Shi等[33]從威靈仙中分離出新的三萜皂苷鐵線蓮皂苷A，并發(fā)現(xiàn)其對COX-2具有顯著的抑制作用，提示其能夠通過抑制COX-2的活性達(dá)到鎮(zhèn)痛、抗炎的功效。目前，已從威靈仙中分離提取出40余種三萜成分，而針對威靈仙中三萜類成分的藥理作用研究主要集中在威靈仙總?cè)疲瑢ν`仙內(nèi)單體三萜成分防治KOA作用的研究報(bào)道較少。

1.1.9 牛膝皂苷 牛膝皂苷提取自牛膝，牛膝中的主要活性成分為三萜皂苷，多以齊墩果酸型五環(huán)三萜為母核[34]。孫雪蓮等[35]發(fā)現(xiàn)牛膝總皂苷可有效降低KOA模型兔膝關(guān)節(jié)液內(nèi)IL-1β水平，提升轉(zhuǎn)化生長因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）水平，并通過光鏡和透射電鏡發(fā)現(xiàn)其軟骨細(xì)胞保護(hù)程度較模型組好，提示牛膝總皂苷能夠抑制促炎因子。馬篤軍等[36]發(fā)現(xiàn)牛膝總皂苷能夠降低實(shí)驗(yàn)兔HIF-1α和血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，）mRNA表達(dá)，并能上調(diào)II型膠原蛋白mRNA表達(dá)，提示牛膝總皂苷在在骨關(guān)節(jié)炎軟骨修復(fù)過程中具有重要作用。張小鴻[37]研究表明牛膝總皂苷能夠降低KOA大鼠血清中IL-1β和一氧化氮的水平，抑制軟骨蛋白聚糖降解，軟骨細(xì)胞中的MMP3、MMP9和COX-2表達(dá)均降低。牛膝中多種三萜成分能夠通過活化多條通路緩解KOA。當(dāng)前多圍繞牛膝總皂苷的藥理作用進(jìn)行研究，但是其具體作用成分尚未明確，有待后續(xù)對單體的研究。

1.1.10 續(xù)斷皂苷 續(xù)斷皂苷提取自續(xù)斷，續(xù)斷中的主要有效成分為三萜皂苷，目前在川續(xù)斷中發(fā)現(xiàn)的22種三萜皂苷均為齊墩果酸型。陳偉達(dá)等[38]發(fā)現(xiàn)續(xù)斷總皂苷能夠通過調(diào)節(jié)13號染色體的的表達(dá)而激活性別決定基因9（methylation of sex determining gene 9，）mRNA及蛋白表達(dá)，并抑制mRNA及蛋白表達(dá)，從而減輕骨關(guān)節(jié)炎的軟骨損傷和炎癥反應(yīng)。商連斌等[39]發(fā)現(xiàn)KOA大鼠的軟骨自噬水平較低，而續(xù)斷總皂苷可以通過抑制PI3K/Akt/mTOR通路的過度活化導(dǎo)致的自噬抑制作用，從而促進(jìn)自噬作用。續(xù)斷作為治療KOA的常用傳統(tǒng)中藥，具有悠久的用藥歷史和較為完善的現(xiàn)代藥理學(xué)研究，但其研究主要針對總?cè)疲鋯误w三萜的藥理作用研究較少。

1.2 羽扇豆烷型

白樺脂醇（8）為羽扇豆烷型五環(huán)三萜，其E環(huán)為五元環(huán)，其C-28位連接有羥甲基。白樺脂醇為近白色結(jié)晶粉末，分子式為C30H50O2，溶于乙醇、氯仿和苯，微溶于冷水、石油醚等，P為8.3，PSA為4.05 nm，RBC為2，保存條件為2～8 ℃。Ren等[40]研究發(fā)現(xiàn)白樺脂醇能夠抑制IL-1β誘導(dǎo)的COX-2和iNOS的生成，達(dá)到抗炎的目的，此外白樺脂醇能夠抑制MMP13和ADAMTS-5的表達(dá)并增加II型膠原蛋白和聚集蛋白聚糖的表達(dá)，抑制細(xì)胞外基質(zhì)的降解。Ra等[41]研究發(fā)現(xiàn)白樺脂醇可抑制MMP3、MMP1、ADAMTS-4的表達(dá)，抑制MMP3的分泌并降低其蛋白活性，以保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨。根據(jù)其結(jié)構(gòu)推測，C-28位的羥甲基對其藥理作用具有決定性。同時(shí)白樺脂醇還能夠通過下調(diào)活化T-細(xì)胞核因子1抑制NF-κB受體激活劑（receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）介導(dǎo)的破骨細(xì)胞分化，從而有效抑制KOA導(dǎo)致的骨質(zhì)破壞[42]。白樺脂醇廣泛存在于天然植物，且具有多種生物活性，可用于食品、化妝品及醫(yī)藥等行業(yè)，目前針對該成分治療KOA的報(bào)道較少，有待后續(xù)研究。

1.3 去甲木栓烷型

雷公藤紅素（9）為基本母核結(jié)構(gòu)失去C-25位上的甲基而形成的木栓烷型五環(huán)三萜衍生物。雷公藤紅素為紅色固體，分子式為C29H38O4，不溶于水，可溶于DMSO、無水乙醇，P為5.9，PSA為7.46 nm，RBC為1。王偉峰[43]研究發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素可有效抑制IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞中、的mRNA及其蛋白表達(dá)，且II型膠原蛋白及蛋白聚糖的表達(dá)顯著升高，并通過抑制基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1/趨化因子受體信號通路延緩KOA的進(jìn)程，因此雷公藤紅素能夠有效抑制炎癥反應(yīng)并促進(jìn)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的修復(fù)。雷公藤紅素被譽(yù)為21世紀(jì)最有可能成藥的5種天然藥物之一，在抗癌、抗腫瘤、腦神經(jīng)方面有突出的功效，且具有抗類風(fēng)濕作用[44]。雷公藤紅素能夠抑制破骨細(xì)胞的分化，以減輕KOA的骨侵蝕發(fā)展[45]。推測其藥理活性可能取決于其特殊母核結(jié)構(gòu)或C-29位的羧基。目前針對雷公藤紅素的研究大多集中在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，而針對骨性關(guān)節(jié)炎的研究較少，后續(xù)可對其治療KOA的藥理作用進(jìn)行深入研究。

1.4 烏蘇烷型

積雪草苷（10）C-2、C-3、C-23位被羥基取代，其苷元為積雪草酸，積雪草苷為近白色至淺黃色晶體，分子式為C48H78O19，易溶于水、乙醇，不溶于乙醚、氯仿，P為0.1，PSA為31.5 nm，RBC為10。丁平等[46]研究顯示，積雪草苷能夠抑制促炎因子釋放，減少M(fèi)MP13的表達(dá)，并增加II型膠原蛋白的合成，減緩KOA患者軟骨的退變，同時(shí)能夠通過調(diào)節(jié)骨保護(hù)素（osteoprotegerin，OPG）/NF-κB受體活化因子（receptor activator of NF-κB，RANK）/ RANKL信號通路達(dá)到緩解KOA的目的。有研究顯示，積雪草苷能夠減少1L-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡，并減少IL-6和TNF-α炎性因子的表達(dá)，通過下調(diào)，上調(diào)水通道蛋白3表達(dá)抑制軟骨細(xì)胞的損傷[47]。研究證明積雪草苷能夠通過活化TGF-β/Smads通路，誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞完成成骨分化，因此積雪草苷具有生成骨組織，抑制骨侵蝕的作用[48]。積雪草苷主要提取自傘形科植物積雪草的干燥全草，可能通過轉(zhuǎn)化為羥基積雪草酸和積雪草酸發(fā)揮其生物活性[49]。該成分能夠通過多條通路延緩KOA的進(jìn)程，具有較高的潛在應(yīng)用價(jià)值，有待積極研究。

2 四環(huán)三萜

四環(huán)三萜類成分在自然界中廣泛分布，具有環(huán)戊烷駢多氫菲的基本母核，C-17位為8個(gè)碳原子組成的側(cè)鏈，母核上一般有5個(gè)甲基，主要包括羊毛脂甾烷型、達(dá)瑪烷型、葫蘆烷型、環(huán)阿屯烷型、原萜烷型及楝烷型。四環(huán)三萜類成分可通過胞質(zhì)中的甲羥戊酸途徑和質(zhì)體中的甲基赤蘚糖醇磷酸途徑生成萜類化合物骨架，經(jīng)過一系列修飾酶，如細(xì)胞色素P450酶、糖基轉(zhuǎn)移酶等進(jìn)行三萜骨架修飾，從而合成結(jié)構(gòu)多樣和功能各異的三萜類成分[50]。部分具有緩解及治療KOA作用的四環(huán)三萜類成分見表1和圖1。

2.1 達(dá)瑪烷型

2.1.1 三七皂苷R1三七皂苷R1（11）C-6位上連有1個(gè)葡萄糖和1個(gè)5碳醛糖，C-21位上連有1個(gè)葡萄糖，C-20位構(gòu)型為R型。三七皂苷R1為白色或近白色晶體，分子式為C47H80O18，可溶于水，P為1.1，PSA為29.8 nm，RBC為12。研究發(fā)現(xiàn)三七皂苷R1與白藜蘆醇調(diào)控KOA的作用機(jī)制相似，均能夠降低NF-κB的活性，增加NF-κB抑制因子含量，從而降低NF-κB下游調(diào)控因子尿激酶型纖溶酶原激活物的表達(dá)，抑制纖維酶原轉(zhuǎn)化為纖維酶，實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞外基質(zhì)成分的保護(hù)[51]。三七皂苷通過抑制RNAKL誘導(dǎo)的絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）和NF-κB信號通路以抑制破骨細(xì)胞生成和骨吸收，還能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖、分化和鈣化[52]。由于三七內(nèi)具有多種三萜類成分，且三七皂苷R1在其中含量較低，因此目前研究多集中在三七總皂苷，而針對該單體成分藥理作用的研究較少，有待后續(xù)深入探索。

2.1.2 人參皂苷Rg1人參皂苷Rg1（12）苷元為20-()-原人參三醇，其C-6位上連接有葡萄糖和6-脫氧--甘露糖，C-21位連有1分子葡萄糖。人參皂苷Rg1為白色或近白色結(jié)晶粉末，分子式為C42H72O14，微溶于DMSO、甲醇和鹽酸吡啶，P為2.7，PSA為23.9 nm，RBC為10。人參皂苷Rg1可顯著抑制兔KOA一氧化氮、IL-1、TNF-α的釋放以減輕炎癥反應(yīng)，保護(hù)細(xì)胞外基質(zhì)，并促進(jìn)軟骨細(xì)胞進(jìn)入S期以完成軟骨細(xì)胞增殖和關(guān)節(jié)軟骨的修復(fù)，同時(shí)能夠通過調(diào)控Bax/Bcl-2的值、降低Caspase-3活性，進(jìn)而抑制軟骨細(xì)胞的過度凋亡[53]。還有研究發(fā)現(xiàn)，該成分能夠抑制由NF-κB通路介導(dǎo)的基因的表達(dá)，保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨[54]。段峰等[55]研究證明人參皂苷Rg1能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖分化，達(dá)到修復(fù)骨缺損的功效。根據(jù)其結(jié)構(gòu)分析，其藥理活性可能主要取決于其C-6和C-21位上連接的糖基。

2.1.3 人參皂苷Rb1人參皂苷Rb1（13）苷元為20-()-原人參二醇，其C-3、C-21位分別連有2分子葡萄糖。人參皂苷Rb1為近白色至米白色粉末，分子式為C54H92O23，易溶于水、甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、醋酸、醋酸乙酯，不溶于乙醚、苯，P為0.3，PSA為37.7 nm，RBC為16。Chen等[56]研究顯示，人參皂苷Rb1能夠顯著降低IL-1β水平，并使MMP13表達(dá)減少，Ⅹ型膠原活性降低，從而減緩KOA的進(jìn)程。高志[57]研究發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rb1可顯著減少M(fèi)MP9、MMP13和ADAMTS-5的表達(dá)，從而抑制軟骨中蛋白聚糖的降解，起到保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨的作用。人參皂苷Rb1能夠有效抑制破骨細(xì)胞的形成，對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖有積極作用[58]。

2.1.4 人參皂苷Rb2人參皂苷Rb2（14）苷元為20-()-原人參二醇，其C-3位上連接有2分子葡萄糖，C-21位上有1分子葡萄糖和1分子吡喃糖。人參皂苷Rb2為白色至近白色粉末，分子式為C53H90O22，微溶于DMSO、甲醇，P為0.3，PSA為35.7 nm，RBC為15。黎立等[59]研究發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rb2能夠通過其較強(qiáng)的抗氧化性減少由H2O2誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡，同時(shí)還能夠降低Caspase-3、Caspase-9的活性以保護(hù)軟骨組織。人參皂苷Rb2能夠通過抑制NF-κB信號通路和mTOR介導(dǎo)的自噬信號通路抑制破骨細(xì)胞的活動(dòng)，從而預(yù)防KOA引起的骨缺損[60]。人參作為傳統(tǒng)中藥，是現(xiàn)代藥理學(xué)研究的熱點(diǎn)。但針對人參中三萜皂苷治療KOA的作用機(jī)制仍研究較少，根據(jù)其結(jié)構(gòu)分析，其藥理活性可能主要取決于其C-3和C-21位上連接的糖。目前研究顯示其對KOA具有一定治療效果，具有潛在的研究價(jià)值。

2.1.5 絞股藍(lán)皂苷A 絞股藍(lán)皂苷A（15）C-13位有β-H，C-10位為β醛基，C-14位為α甲基，C-17位為β側(cè)鏈，C-20位為S型，苷元的C-3位連有由鼠李糖、木糖和阿拉伯糖構(gòu)成的糖鏈，C-20位連有葡萄糖。絞股藍(lán)皂苷A為白色晶體，分子式為C52H86O21，可溶于甲醇、乙醇、DMSO等，P為0.4，PSA為33.4 nm，RBC為15。牛帥帥等[61]研究證實(shí)長鏈非編碼RNA與存在靶向關(guān)系，即IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞中的表達(dá)水平升高，而表達(dá)水平降低，而絞股藍(lán)皂苷A能夠降低的表達(dá)水平，同時(shí)升高的表達(dá)水平，進(jìn)而抑制由IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激、凋亡，并促進(jìn)細(xì)胞增殖，從而抑制KOA的進(jìn)展。絞股藍(lán)內(nèi)的三萜成分復(fù)雜多樣，目前研究主要針對絞股藍(lán)總皂苷，研究表明絞股藍(lán)總皂苷能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和分化，并能通過調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞內(nèi)的Wnt/β-catenin信號通路，提高內(nèi)質(zhì)網(wǎng)成骨折疊蛋白速率[62]。對單體成分絞股藍(lán)皂苷A的研究尚未透徹，根據(jù)結(jié)構(gòu)推測，其C-3位由鼠李糖、木糖和阿拉伯糖構(gòu)成的糖鏈，及C-20位的葡萄糖，對其藥理活性具有決定性作用，后續(xù)可對具體作用機(jī)制進(jìn)行深入探索，并對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾以提高治療KOA的療效。

2.2 環(huán)阿屯烷型

黃芪甲苷（16）以環(huán)黃芪醇為母核，其側(cè)鏈在C-20和C-24位縮合形成四氫呋喃環(huán)，C-3位連接有木吡喃糖基，C-6位上連接有吡喃葡萄糖基[63]。黃芪甲苷為白色結(jié)晶粉末，分子式為C41H68O14，P為1.3，PSA為22.8 nm，RBC為7。余素姣等[64]通過觀察體外培養(yǎng)原代小鼠軟骨細(xì)胞炎性因子受黃芪甲苷干預(yù)影響，發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷能夠有效抑制NOD樣受體蛋白炎癥小體和Caspase-1蛋白表達(dá)，抑制IL-1β和TNF-α的產(chǎn)生，從而達(dá)到治療KOA的目的。王德剛等[65]發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷能夠降低細(xì)胞核內(nèi)β-catenin蛋白的表達(dá)，降低MMP7、軟骨寡聚基質(zhì)蛋白、II型膠原羧基端端肽的含量，從而改善滑膜-軟骨微環(huán)境，抑制軟骨的降解。湯曉晨[66]研究發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷能夠降低IL-1β的表達(dá)，促進(jìn)軟骨外基質(zhì)II型膠原蛋白多糖基因mRNA的表達(dá)，達(dá)到延緩關(guān)節(jié)軟骨退變的目的，并能夠提高軟骨細(xì)胞內(nèi)和基因的表達(dá)，抑制軟骨細(xì)胞的進(jìn)一步蛻變。還有研究表明黃芪甲苷能夠顯著增強(qiáng)人成骨細(xì)胞的增殖和遷移，具有作為促進(jìn)骨整合的生長因子的潛力[67]。目前針對黃芪甲苷的研究已較為透徹，該成分作為黃芪的主要活性成分之一，能夠通過抑制炎癥反應(yīng)、抑制軟骨降解和促進(jìn)膠原蛋白合成等方式，延緩KOA的進(jìn)程，根據(jù)其結(jié)構(gòu)推測其藥理活性可能取決于C-3和C-6位上的糖，后續(xù)可對其進(jìn)行深入研究并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，使其具有更高的療效和開發(fā)價(jià)值。

此外，黃芪甲苷A和黃芪皂苷IV結(jié)構(gòu)相似，在大量研究報(bào)道中被混淆使用，甚至誤判為同一化合物。結(jié)合美國國家生物技術(shù)信息中心、美國國家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院等數(shù)據(jù)庫分析，二者國際純粹與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)命名、異構(gòu)簡化分子線性輸入規(guī)范、國際化合物標(biāo)識(shí)均不相同，可能為旋光異構(gòu)關(guān)系，目前沒有文獻(xiàn)報(bào)道黃芪三萜皂苷糖苷旋光異構(gòu)對其藥理活性的影響，考慮到中藥活性成分具有多靶點(diǎn)、多組分的特征，有望進(jìn)一步深入研究。

2.3 葫蘆烷型

羅漢果皂苷VI（17）皂苷元為羅漢果醇，分別在其C-3位和C-25位上連有2個(gè)和3個(gè)葡萄糖[68]。羅漢果皂苷VI為淺黃色粉末，分子式為C66H112O34，可溶于氯仿、二氯甲烷、醋酸乙酯、DMSO、丙酮等，P為?5.3，PSA為55.6 nm，RBC為23。曾智等[69]研究發(fā)現(xiàn)，高劑量羅漢果皂苷VI可顯著降低KOA大鼠軟骨組織中IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP13水平，減輕軟骨損傷，剪切型Caspase-3和Bax蛋白水平顯著降低，而Bcl-2蛋白水平顯著升高，說明羅漢果皂苷VI能夠抑制軟骨細(xì)胞凋亡；此外，KOA大鼠軟骨組織中p-p38 MAPK、NF-κB p65蛋白水平顯著降低，說明羅漢果皂苷VI可能通過抑制p38 MAPK信號通路活化，降低炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡，從而減輕軟骨損傷。羅漢果并非傳統(tǒng)治療KOA的中藥，且針對羅漢果皂苷的研究主要集中在腫瘤、炎癥、免疫等方面，在治療KOA方面的研究尚有空白，目前研究顯示羅漢果皂苷的苷元羅漢果醇具有多種藥理作用，推測其藥理活性可能主要取決于羅漢果醇，后續(xù)可對羅漢果皂苷的療效及應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行探究，以期對其潛在價(jià)值進(jìn)行開發(fā)利用。

中藥三萜成分治療及緩解KOA的方式復(fù)雜多樣，部分三萜成分具體作用信號通路尚不明確，目前已明確其作用機(jī)制的三萜成分作用的信號通路見圖2。

GF-生長因子 IL-R1-IL受體1 TNF-R1-TNF受體1 MyD88-髓樣分化因子88 TRADD-TNF受體1相關(guān)死亡域蛋白 TRAF2-TNF受體相關(guān)蛋白2 IRAK-IL-1受體相關(guān)激酶 RIP1-受體相互作用蛋白1 TAK1-TGFβ激活激酶1 TAB1-TAK1結(jié)合蛋白1 NIK-NF-κB誘導(dǎo)激酶 MEK6-絲裂原活化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶6 IKK-κB抑制因子激酶 JNK-c-Jun氨基末端激酶

3 結(jié)語與展望

綜上，中藥三萜類成分對KOA具有一定的防治作用。隨著人口老齡化的加劇，KOA的發(fā)病率逐年上升，目前現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對KOA的治療存在一定局限性，中藥作為中華民族的瑰寶，具有較大的潛能，其特有優(yōu)勢亟待發(fā)掘。其中木通皂苷D、齊墩果酸、柴胡皂苷A等三萜類成分對KOA的作用機(jī)制均已得到證明，且這些成分可調(diào)控多條信號通路，通過抑制炎癥反應(yīng)、抗氧化應(yīng)激反應(yīng)、抑制軟骨細(xì)胞凋亡、促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖、合成膠原蛋白等多種方式延緩KOA的進(jìn)程[10-11,15-19]。部分中藥如人參、絞股藍(lán)、娑羅子等，雖然在傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論中并非治療膝痹的主要藥物，但現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，其三萜類成分，如七葉皂苷、人參皂苷Rg1、絞股藍(lán)皂苷等，均能夠有效治療KOA[23-25,53-55,61-62]。同一中藥中的多種三萜類成分可以發(fā)揮協(xié)同作用，通過多種信號通路對KOA進(jìn)行干預(yù)，體現(xiàn)了中藥對KOA的治療具有多靶點(diǎn)、多途徑的特點(diǎn)。

中藥在治療KOA方面有著悠久的歷史和廣闊的前景，雖然近年來中醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展迅猛，但在此方面的研究仍有一定局限性。部分中藥常用于治療KOA，如乳香、沒藥、獨(dú)活、茯苓等，且均含有三萜類成分，但其作用機(jī)制尚不明確。而在實(shí)驗(yàn)方面，部分研究僅采用動(dòng)物或細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證明中藥中三萜類成分對KOA的治療機(jī)制，與中醫(yī)辨證施治的思想有所出入，臨床療效仍有待考證，傳統(tǒng)中藥的四氣五味理論所對應(yīng)治療不同分型的膝痹證尚未得到證明。同時(shí)，如牛膝、威靈仙、續(xù)斷等中藥的研究集中在總皂苷層面，其具體有效成分尚未明確，有待后續(xù)進(jìn)一步研究[30-39]。目前雖然部分三萜類成分的作用機(jī)制及信號通路研究較為明確，但其針對具體作用位點(diǎn)的研究較少。此外，針對中藥三萜成分的不良反應(yīng)及生物利用度研究較為缺乏，且其準(zhǔn)確作用劑量的量效關(guān)系尚不明確，對其臨床應(yīng)用有較大的限制。

在目前已有的研究基礎(chǔ)上，建議后續(xù)研究圍繞以下幾個(gè)方面進(jìn)行深入開展：（1）藥理作用方面，可深入研究中藥三萜類成分在人體內(nèi)對KOA治療的具體藥理作用，并將其與現(xiàn)有治療藥物的臨床效果比較，進(jìn)一步探究這類成分治療KOA的可行性。由于中醫(yī)治療KOA多使用方劑而非單味中藥，故可探究多種中藥聯(lián)合治療與單味藥及多種三萜成分和單種三萜成分的療效對比，以篩選出最佳的治療方案。還可研究如乳香、沒藥等常用于治療KOA的中藥，明確其所含的三萜類成分的藥理作用和具體作用機(jī)制，為臨床用藥提供事實(shí)依據(jù)。另外可繼續(xù)探究目前已知具有治療KOA效果的三萜類成分具體作用位點(diǎn)，圍繞其關(guān)鍵官能團(tuán)進(jìn)行深入研究。（2）結(jié)構(gòu)修飾方面，應(yīng)詳細(xì)分析三萜類成分物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)制后，對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，或針對性合成與靶點(diǎn)結(jié)合更好的化合物，提高其生物利用度，并減少不良反應(yīng)，使其藥理作用更加安全有效。（3）提高藥物品質(zhì)方面，目前中藥三萜類成分的產(chǎn)業(yè)化技術(shù)研究與應(yīng)用較少，需加快提取分離技術(shù)的研究，提高藥材品質(zhì)，還可研究中藥三萜類成分生物合成途徑，為后續(xù)的開發(fā)利用提供依據(jù)。（4）劑型優(yōu)化方面，為達(dá)到最佳臨床防治效果，根據(jù)其給藥途徑的不同，可改變藥物的劑型，如膠囊劑、納米乳劑等。本文通過對中藥內(nèi)三萜類化合物治療KOA的機(jī)制進(jìn)行闡述，為攻克KOA提供新的思路和方向，為新藥開發(fā)和臨床用藥提供理論依據(jù)，推進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化的發(fā)展。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 樊子娟, 王桂杉, 李川, 等. 《中國骨關(guān)節(jié)炎診療指南 (2021年版)》解讀和評價(jià) [J]. 中國循證醫(yī)學(xué)雜志, 2022, 22(6): 621-627.

[2] 陳衛(wèi)衡. 膝骨關(guān)節(jié)炎中醫(yī)診療指南 (2020年版) [J]. 中醫(yī)正骨, 2020, 32(10): 1-14.

[3] Amirkhizi F, Ghoreishy S M, Baker E,. The association of vitamin D status with oxidative stress biomarkers and matrix metalloproteinases in patients with knee osteoarthritis [J]., 2023, 10: 1101516.

[4] 馮曉晴, 蔡道章, 余星磊, 等. 基于GBD大數(shù)據(jù)中國膝骨關(guān)節(jié)炎疾病負(fù)擔(dān)現(xiàn)狀與趨勢分析 [J]. 現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué), 2022, 49(10): 1753-1760.

[5] 宋夢歌. 膝骨關(guān)節(jié)炎中醫(yī)證候聚類分析及臨床分期相關(guān)性研究 [D]. 北京: 中國中醫(yī)科學(xué)院, 2021.

[6] 毛麗斯, 朱曉紅. 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在中藥領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展 [J]. 中醫(yī)藥管理雜志, 2021, 29(13): 98-102.

[7] 何昱. 中藥化學(xué) [M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2017: 208.

[8] 楊洪飛, 閔清. 三萜類化合物的藥理作用研究進(jìn)展 [J]. 湖北科技學(xué)院學(xué)報(bào): 醫(yī)學(xué)版, 2023, 37(1): 67-69.

[9] 李傳旺, 張賀, 饒攀, 等. 植物五環(huán)三萜類化合物生物合成途徑研究進(jìn)展 [J]. 中草藥, 2021, 52(11): 3436-3452.

[10] Gu M B, Jin J, Ren C H,. Akebia saponin D suppresses inflammation in chondrocytes via the Nrf2/HO-1/NF-κB axis and ameliorates osteoarthritis in mice [J]., 2020, 11(12): 10852-10863.

[11] 田歡, 趙鋒, 李曄, 等. 川續(xù)斷皂苷VI的研究進(jìn)展 [J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2018, 24(5): 226-234.

[12] Chen Y L, Yan D Y, Wu C Y,. Maslinic acid prevents IL-1β-induced inflammatory response in osteoarthritis via PI3K/Akt/NF-κB pathways [J]., 2021, 236(3): 1939-1949.

[13] Fukumitsu S, Villareal M O, Aida K,. Maslinic acid in olive fruit alleviates mild knee joint pain and improves quality of life by promoting weight loss in the elderly [J]., 2016, 59(3): 220-225.

[14] Deng J Q, Wang H Y, Mu X D,. Advances in research on the preparation and biological activity of maslinic acid [J]., 2021, 21(1): 79-89.

[15] Bao J P, Yan W F, Xu K,. Oleanolic acid decreases IL-1β-induced activation of fibroblast-like synoviocytes via the SIRT3-NF-κB axis in osteoarthritis [J]., 2020, 2020: 7517219.

[16] Li Y L, Nie J L, Jiang P. Oleanolic acid mitigates interleukin-1β-induced chondrocyte dysfunction by regulating miR-148-3p-modulated FGF2expression [J]., 2020, 22(5): e3169.

[17] 馬天文, 呂良鈺, 于躍, 等. 齊墩果酸抑制骨關(guān)節(jié)炎大鼠肌肉氧化損傷及軟骨下骨異常骨重建 [J]. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào), 2022, 53(11): 4081-4088.

[18] 吳紅偉, 王臨艷, 李東輝, 等. 柴胡皂苷類化合物的藥理作用研究進(jìn)展 [J]. 中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志, 2020, 39(6): 35-39.

[19] Huang W Q, Zheng X L, Yang X D,. Stimulation of osteogenic differentiation by saikosaponin-A in bone marrow stromal cells via Wnt/β-catenin pathway [J]., 2017, 100(4): 392-401.

[20] Wu X H, Zhao K X, Fang X X,. Saikosaponin D inhibited IL-1β induced ATDC 5 chondrocytes apoptosisand delayed articular cartilage degeneration in OA model mice[J]., 2022, 13: 845959.

[21] Jiang J S, Meng Y F, Hu S F,. Saikosaponin D: A potential therapeutic drug for osteoarthritis [J]., 2020, 14(8): 1175-1184.

[22] Manoharan S, Deivendran B, Perumal E. Chemotherapeutic potential of saikosaponin D: Experimental evidence [J]., 2022, 12(4): 378-405.

[23] Maghsoudi H, Hallajzadeh J, Rezaeipour M. Evaluation of the effect of polyphenol of escin compared with ibuprofen and dexamethasone in synoviocyte model for osteoarthritis: Anstudy [J]., 2018, 37(9): 2471-2478.

[24] 王淼, 萬銳杰, 劉偉, 等. 七葉皂苷A在小鼠軟骨細(xì)胞及骨關(guān)節(jié)炎中的作用及相關(guān)分子機(jī)制 [J]. 中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志, 2021, 27(2): 189-197.

[25] 劉立東. 七葉皂苷主要活性成分的藥代動(dòng)力學(xué)研究 [D]. 長春: 吉林大學(xué), 2012.

[26] Jiang R H, Xu J J, Zhu D C,. Glycyrrhizin inhibits osteoarthritis development through suppressing the PI3K/Akt/NF-κB signaling pathwayand[J]., 2020, 11(3): 2126-2136.

[27] 任天琦, 劉澤霖, 胡海, 等. 甘草甜素對膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎大鼠軟骨細(xì)胞凋亡及PTEN/Akt/COX-2信號通路的影響 [J]. 貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2022, 47(7): 785-790.

[28] Shafik N M, El-Esawy R O, Mohamed D A,. Regenerative effects of glycyrrhizin and/or platelet rich plasma on type-II collagen induced arthritis: Targeting autophay machinery markers, inflammation and oxidative stress [J]., 2019, 675: 108095.

[29] 朱濱, 張前燕, 華賢章, 等. 甘草甜素調(diào)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎大鼠軟骨代謝標(biāo)記物表達(dá)及外周血Th17/Treg細(xì)胞失衡 [J]. 廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2021, 38(2): 358-366.

[30] 趙繼榮, 楊文通, 陳文, 等. 威靈仙有效化學(xué)成分及鎮(zhèn)痛機(jī)制研究進(jìn)展 [J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2022, 40(9): 9-12.

[31] Hsieh M S, Wang K T, Tseng S H,. Using 18F-FDG microPET imaging to measure the inhibitory effects ofOsbeck on the pro-inflammatory and degradative mediators associated with inflammatory arthritis [J]., 2011, 136(3): 511-517.

[32] Wu W, Xu X, Dai Y,. Therapeutic effect of the saponin fraction fromOsbeck roots on osteoarthritis induced by monosodium iodoacetate through protecting articular cartilage [J]., 2010, 24(4): 538-546.

[33] Shi S, Dan J, Dong C,. Triterpene saponins from[J]., 2006, 69(11): 1591-1595.

[34] 羅懿釩, 歐陽文, 唐代鳳, 等. 牛膝中皂苷和甾酮類物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理活性研究進(jìn)展 [J]. 中國現(xiàn)代中藥, 2020, 22(12): 2122-2136.

[35] 孫雪蓮, 劉淵, 周紅海. 牛膝總皂苷對兔膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨組織形態(tài)變化及關(guān)節(jié)液中IL-1β、TGF-β1含量的影響 [J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2016, 27(3): 321-326.

[36] 馬篤軍, 彭力平, 余闐, 等. 牛膝總皂苷對骨關(guān)節(jié)炎模型兔軟骨修復(fù)及低氧誘導(dǎo)因子1信號通路的影響 [J]. 中國組織工程研究, 2019, 23(27): 4332-4337.

[37] 張小鴻. 牛膝總皂苷保護(hù)軟骨細(xì)胞作用及其機(jī)制研究 [D]. 廈門: 華僑大學(xué), 2014.

[38] 陳偉達(dá), 石瑋, 楊繼國, 等. 川續(xù)斷總皂苷調(diào)節(jié)對大鼠骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞SOX9/NF-κB信號通路的影響 [J]. 中國藥師, 2020, 23(5): 824-829.

[39] 商連斌, 金連峰, 王哲, 等. 續(xù)斷總皂苷對膝骨關(guān)節(jié)炎大鼠軟骨組織中PI3K/Akt/mTOR信號通路影響的實(shí)驗(yàn)研究 [J]. 遼寧中醫(yī)雜志, 2021, 48(5): 188-191.

[40] Ren C H, Jin J, Hu W,. Betulin alleviates the inflammatory response in mouse chondrocytes and ameliorates osteoarthritis via Akt/Nrf2/HO-1/NF-κB axis [J]., 2021, 12: 754038.

[41] Ra H J, Lee H J, Jo H S,. Betulin suppressed interleukin-1β-induced gene expression, secretion and proteolytic activity of matrix metalloproteinase in cultured articular chondrocytes and production of matrix metalloproteinase in the knee joint of rat [J]., 2017, 21(1): 19-26.

[42] Kim K J, Lee Y J, Hwang H G,. Betulin suppresses osteoclast formation via down-regulating NFATc1 [J]., 2018, 7(6): 154.

[43] 王偉峰. 雷公藤紅素在骨關(guān)節(jié)炎中的作用及其機(jī)制研究 [D]. 濟(jì)南: 山東大學(xué), 2019.

[44] Lee M, Shin H, Park M,. Systems pharmacology approaches in herbal medicine research: A brief review [J]., 2022, 55(9): 417-428.

[45] 彭秋月. 雷公藤紅素通過調(diào)控選擇素-P的表達(dá)抑制破骨細(xì)胞分化的研究 [D]. 南京: 南京醫(yī)科大學(xué), 2016.

[46] 丁平, 張岱陽, 李賀偉, 等. 積雪草苷對膝骨關(guān)節(jié)炎大鼠軟骨損傷的影響及機(jī)制研究 [J]. 中國中醫(yī)骨傷科雜志, 2022, 30(9): 7-13.

[47] 付漣橋, 郭焱雄, 李堅(jiān), 等. 積雪草苷調(diào)控miR-342-5p/AQP3軸保護(hù)IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞損傷 [J]. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué), 2020, 37(3): 10-18.

[48] 曹振宇, 沈曉鐘, 馬建武, 等. 積雪草苷通過TGF-β/ Smads通路對BMSCs成骨分化的影響 [J]. 中國骨質(zhì)疏松雜志, 2022, 28(5): 695-700.

[49] 孫伯菊. 積雪草及其主要三萜成份干預(yù)肥胖小鼠體重增加的作用及機(jī)制研究 [D]. 北京: 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2021.

[50] 朱源, 李檢秀, 李堅(jiān)斌, 等. 藥用植物中四環(huán)三萜皂苷合成生物學(xué)研究進(jìn)展 [J]. 廣西科學(xué)院學(xué)報(bào), 2020, 36(3): 309-316.

[51] 楊萍. 白藜蘆醇通過調(diào)控信號通路治療膝骨關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展 [J]. 中草藥, 2023, 54(4): 1311-1320.

[52] Liu H, Yang J Q, Yang W Q,. Focus on notoginsenoside R1in metabolism and prevention against human diseases [J]., 2020, 14: 551-565.

[53] 段超. 人參皂苷Rg1防治兔膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 武漢: 湖北中醫(yī)藥大學(xué), 2016.

[54] 劉小剛, 李甜, 張舵. 中藥有效成分促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為軟骨細(xì)胞的作用與機(jī)制 [J]. 中國組織工程研究, 2022, 26(1): 119-124.

[55] 段峰, 栗秋, 趙剛. 人參皂苷Rg1對MC3T3-E1成骨細(xì)胞增殖分化的相關(guān)研究 [J]. 黑龍江醫(yī)藥科學(xué), 2016, 39(1): 94-95.

[56] Chen Y, Lin S, Sun Y,. Translational potential of ginsenoside Rb1in managing progression of osteoarthritis [J]., 2016, 6: 27-33.

[57] 高志. 藥用植物人參活性成分人參皂苷Rb1對大鼠骨關(guān)節(jié)炎癥和蛋白多糖降解的作用 [J]. 分子植物育種, 2022, 20(14): 4800-4806.

[58] 張喜武, 張利, 王雅泓, 等. 人參根飲液對模型鼠骨質(zhì)疏松的改善作用 [J]. 中國藥業(yè), 2022, 31(20): 40-44.

[59] 黎立, 李曉旭, 司裕, 等. 人參皂苷Rb2保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞對抗氧化應(yīng)激的作用機(jī)制研究 [J]. 中國矯形外科雜志, 2018, 26(9): 845-849.

[60] 柳嘉偉, 蘇柯, 黃鑫, 等. 人參皂苷Rb2體內(nèi)抑制破骨細(xì)胞的作用及其機(jī)制研究 [J]. 中國骨與關(guān)節(jié)雜志, 2020, 9(4): 293-298.

[61] 牛帥帥, 孫卓偉, 王承群. 絞股藍(lán)皂苷A調(diào)控lncRNA TTTY15/miR-335-5p通路對骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞損傷的影響及機(jī)制 [J]. 河北醫(yī)藥, 2022, 44(7): 981-985.

[62] 黃佳純. 基于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與Wnt/β-catenin信號通路研究絞股藍(lán)皂苷對成骨細(xì)胞增殖分化的影響 [D]. 廣州: 廣州中醫(yī)藥大學(xué), 2020.

[63] 張雨. 黃芪甲苷介導(dǎo)NLRP-3炎癥小體改善小鼠放射性心臟損傷 [D]. 西寧: 青海大學(xué), 2022.

[64] 余素姣, 譚慧. 黃芪甲苷通過炎癥小體活化影響軟骨細(xì)胞炎性因子的表達(dá) [J]. 中國組織工程研究, 2019, 23(11): 1652-1656.

[65] 王德剛, 許傳勇, 姜玉祥, 等. 黃芪甲苷對Wnt/β-catenin信號通路活化的人滑膜及軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)體系相關(guān)因子的調(diào)控作用 [J]. 廣東醫(yī)學(xué), 2017, 38(3): 354-357.

[66] 湯曉晨. 黃芪甲苷干預(yù)人膝骨關(guān)節(jié)炎退變關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的效應(yīng)及機(jī)制研究 [D]. 南京: 南京中醫(yī)藥大學(xué), 2015.

[67] Guo L H, Cao Y, Zhuang R T,. Astragaloside IV promotes the proliferation and migration of osteoblast-like cells through the hedgehog signaling pathway [J]., 2019, 43(2): 830-838.

[68] 唐權(quán). 羅漢果皂苷對帕金森病模型小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究 [D]. 北京: 中央民族大學(xué), 2021.

[69] 曾智, 李浩, 王曉旭, 等. 羅漢果皂苷VI對膝骨關(guān)節(jié)炎大鼠模型的治療作用及其機(jī)制探討 [J]. 免疫學(xué)雜志, 2022, 38(9): 804-809.

Research progress on mechanism of triterpenoids in prevention and treatment of knee osteoarthritis

WANG Shi-ting, KONG Wei-hua, WEN Le-le, JIN Hong-ting, LIU Ju-zhao, CUI Qi

Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China

Knee osteoarthritis (KOA) is a knee functional degenerative disease that can seriously affect the quality of life of patients, and has become one of the most disabling diseases in the world. The treatment of KOA by traditional Chinese medicine (TCM) has a long history and broad application prospects, which can effectively make up for the deficiency of modern medical treatment of KOA. Triterpenoids in TCM have a good effect on the prevention and treatment of KOA, and can delay the process of KOA by inhibiting inflammation, anti-oxidative stress, inhibiting chondrocyte apoptosis, promoting chondrocyte proliferation, and synthesizing collagen, which have the characteristics of multi-target synergism. This mechanism of TCM triterpenoids in the prevention and treatment of KOA was reviewed to provide scientific basis for the development of clinical drugs for the treatment of KOA.

knee osteoarthritis; traditional Chinese medicine; pentacyclic triterpenoids; tetracyclic triterpenoids; asperosaponin D; ginsenoside Rg1; celastrol; astragaloside A

R285

A

0253 - 2670(2023)18 - 6128 - 11

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.18.030

2023-03-23

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（82204552）；國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（82274280）；中國博士后科學(xué)基金項(xiàng)目（2021M692893）；浙江省中醫(yī)藥科技計(jì)劃項(xiàng)目（2023ZR079）

王詩婷，本科生，研究方向?yàn)橹嗅t(yī)骨傷科學(xué)。E-mail: 1404084127@qq.com

劉巨釗，博士，副研究員，從事中藥學(xué)研究。E-mail: 841113678@qq.com

崔 琦，博士，助理研究員，從事中藥學(xué)研究。E-mail: zcmucq@163.com

#共同第一作者：孔偉華，碩士研究生，研究方向?yàn)橹兴帉W(xué)。E-mail: kongweihuajzt@163.com

[責(zé)任編輯 趙慧亮]