呂美艷，方杭，陳俊，王蔚，徐象威

1. 永康市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江 永康 321300；2. 永康市第一人民醫(yī)院科教科，浙江 永康 321300

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）耐藥性主要由甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）獲得了可以在金黃色葡萄球菌染色體間進(jìn)行轉(zhuǎn)移的編碼甲氧西林耐藥性基因盒元件（SCCmec）而產(chǎn)生[1]，是公共感染和醫(yī)院感染的最重要病原體之一，MRSA 具有異質(zhì)性和廣譜耐藥性[2]，不僅對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥，而且對(duì)四環(huán)素或氟喹諾酮類、氨基糖苷類抗生素也有耐藥性，臨床上通常用萬(wàn)古霉素作為經(jīng)典治療手段，同時(shí)也認(rèn)為萬(wàn)古霉素是治療金黃色葡萄球菌感染的“最后防線”[3]，但是國(guó)外已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了耐萬(wàn)古霉素的金黃色葡萄球菌，所以尋找新型抑菌藥或抑菌策略依舊刻不容緩，許多文獻(xiàn)報(bào)道含有黃酮類、生物堿類、多酚類、蒽醌類和有機(jī)酸類等天然產(chǎn)物具有抗耐藥菌活性[4]，應(yīng)用天然產(chǎn)物含有的化學(xué)物質(zhì)作為抗生素增效劑以提升抗生素效用，減緩耐藥性細(xì)菌傳播或降低耐藥性，已成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究熱點(diǎn)。本研究收集2020—2022 年永康市第一人民醫(yī)院就診患者中分離的金黃色葡萄球菌株，了解其耐藥情況，篩選不同中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌效果，以期獲得一種對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌效果好的中藥，為后期天然植物抑菌藥開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 菌株與試劑 收集2020 年10 月—2022 年9 月分離自永康市第一人民醫(yī)院就診患者的794 株金黃色葡萄球菌，-70 ℃保存，質(zhì)控菌金黃色葡萄球菌ATCC25923 購(gòu)自國(guó)家衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心，MSSA 和MRSA 菌株來(lái)自于永康市第一人民醫(yī)院-70 ℃保存的細(xì)菌室。

1.2 菌株分離鑒定與藥敏試驗(yàn) 樣本按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行分離、培養(yǎng)和鑒定，使用法國(guó)生物梅里埃公司的VITTEK MS 質(zhì)譜儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定和VITEK 2 Compact 全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，藥敏結(jié)果根據(jù)CLSI M100 進(jìn)行折點(diǎn)判斷。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 WHONET 5.6 統(tǒng)計(jì)方法分析金黃色葡萄球菌分布和耐藥情況。數(shù)據(jù)采用SPSS22.0 軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，3 組以上比較采用單因素方差分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.4 體外抑菌活性實(shí)驗(yàn)

1.4.1 菌懸液配制 取出在-70 ℃冰箱凍存的菌株，接種于血瓊脂培養(yǎng)基，在35 ℃培養(yǎng)箱中過(guò)夜培養(yǎng)，待長(zhǎng)出單個(gè)菌落后，用無(wú)菌接種環(huán)挑取單個(gè)菌落于0.45%氯化鈉溶液中，配制菌液濃度為1.0×108CFU/mL。

1.4.2 實(shí)驗(yàn)試劑及設(shè)備 試劑：二甲基亞砜（西隴科學(xué)股份，批號(hào)200314）；無(wú)水乙醇（無(wú)錫市晶科化工，批號(hào)20190701）；慶大霉素藥敏紙片（英國(guó)OXOID 公司，批號(hào)20142405149）；環(huán)丙沙星藥敏紙片（杭州濱和微生物試劑，批號(hào)20172400206）；MH培養(yǎng)基（鄭州安圖生物，批號(hào)20220415B）；Mueller-Hinton Broth（溫州市康泰生物，批號(hào)VG2308G）。設(shè)備：GZX-GFC101-2-BS 型電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海博泰實(shí)驗(yàn)設(shè)備）；SB-1300 型恒溫水浴鍋（上海愛(ài)郎儀器）；N-1300 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海愛(ài)郎儀器）；生化培養(yǎng)箱（上海博迅實(shí)業(yè)）；電控高溫接種滅菌鍋（天津開(kāi)發(fā)區(qū)合普工貿(mào)）；生物安全柜（濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)）；梅里埃公司的VITTEK MS 質(zhì)譜儀；梅里埃公司VITEK 2 Compact 全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)。

1.4.3 中草藥鑒定 7 種中草藥由湖南中醫(yī)藥大學(xué)周旭東教授鑒定，采購(gòu)于上?？禈蛑兴庯嬈邢薰尽Ｆ渲?，連翹產(chǎn)自山西（批號(hào)：220205），金銀花產(chǎn)自山東（批號(hào)：220129），廣藿香產(chǎn)自廣西（批號(hào)：220111），黃芩產(chǎn)自吉林（批號(hào)：220213），黃連產(chǎn)自四川（批號(hào)：220215），杜仲產(chǎn)自湖北（批號(hào)：220207），對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)來(lái)源于湖北荊州（批號(hào)：220212）。

1.4.4 提取方法 文獻(xiàn)報(bào)道7 種中草藥均具有體外抗金黃色葡萄球菌作用，中草藥中含有香豆素類、木脂類、環(huán)烯醚萜類、苯乙醇苷類、黃酮類、甾醇及三萜類等[4-7]成分，所以選擇提取揮發(fā)物、水提液和有機(jī)物提取液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)效果比較。揮發(fā)油制備：稱取中草藥粉末100 g 于圓底燒瓶中，加入300 mL蒸餾水，浸泡1 h 后，使用揮發(fā)油提取器回流提取約3 h 至不再有揮發(fā)油增加，所得揮發(fā)油于4 ℃保存?zhèn)溆?。水提物制備：稱取100 g 中草藥粉末加入300 mL蒸餾水，浸泡1 h 后煎煮，煮沸后文火煎1 h，4 層紗布初步過(guò)濾后，重復(fù)操作2 次，濾液合并后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至干膏，放入真空干燥機(jī)凍干成粉，備用。有機(jī)物提取物制備：根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[8]及前期對(duì)乙醇和二甲基亞砜實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，15%濃度的二甲基亞砜作為溶劑，對(duì)菌株干擾最低，同時(shí)對(duì)中草藥抑菌活性成分提取效果最佳，故取100 g 中草藥粉末于300 mL 15%濃度二甲基亞砜溶液中，浸泡1 h 后回流提取1 h，4 層紗布過(guò)濾后重復(fù)操作2 次，濾液合并后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至干膏，放入真空干燥機(jī)凍干成粉，備用。

1.4.5 K-B 紙片擴(kuò)散法藥敏實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)菌株為金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（編號(hào)為ATCC29213）、MSSA 和MRSA。參照美國(guó)CLSI 抗菌藥物敏感試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，水提物、有機(jī)物提取物以相同試劑將凍干粉配置成100 mg/mL 母液，揮發(fā)物使用原液進(jìn)行試驗(yàn)，每個(gè)紙片直徑6 mm，定量載樣20 μL，以相同溶劑制備紙片作為陰性對(duì)照，待紙片晾干后備用，陽(yáng)性對(duì)照選用環(huán)丙沙星和慶大霉素，35 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16～24 h 測(cè)量抑菌圈直徑，判斷標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)抑菌性（6 mm），中度敏感（7～10 mm），高度敏感（＞10 mm），每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

1.4.6 提取物濃度對(duì)金黃色葡萄球菌株抑菌活性的影響 中草藥水提物用超純水稀釋，有機(jī)物提取物以15%二甲基亞砜稀釋，通過(guò)實(shí)驗(yàn)初步獲得提取物較低抑菌濃度進(jìn)行最低抑菌濃度（MIC）實(shí)驗(yàn)，水提物、有機(jī)物提取物濃度范圍按照1.4.4 方法配制為6.25 mg/mL、12.5 mg/mL、25 mg/mL、50 mg/mL、75 mg/mL、100 mg/mL，以溶劑為陰性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

1.4.7 微量肉湯稀釋法藥敏實(shí)驗(yàn) 選取慶大霉素作為陽(yáng)性對(duì)照，對(duì)萃取組分進(jìn)行MIC 測(cè)定，同時(shí)選用醫(yī)院分離的10 株MRSA 作為測(cè)試菌，以驗(yàn)證對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)有機(jī)物提取物對(duì)本地MRSA 的抑菌效果，以15%二甲亞砜為溶劑將提取物配制成濃度為5 120 μg/mL 儲(chǔ)備液，超純水將慶大霉素配制成濃度為1 024 μg/mL 儲(chǔ)備液，96 孔板首孔分別加入200 μL藥物，第2～第10 孔分別加入100 μL MH 肉湯培養(yǎng)基（MHB）肉湯，第11 孔加入200 μL 菌液作為菌液對(duì)照，第12 孔加入200 μL MHB 肉湯作為陰性對(duì)照，第1 ～第10 列的提取物最終濃度配制成5 120 μg/mL、2 560 μg/mL、1 280 μg/mL、640 μg/mL、320 μg/mL、 160 μg/mL、 80 μg/mL、 40 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL，抗生素第1～第10 列的終濃度分別為256 μg/mL、128 μg/mL、64 μg/mL、32 μg/mL、16 μg/mL、8 μg/mL、4 μg/mL、2 μg/mL、1 μg/mL、0.5 μg/mL。放置35 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)16～24 h 后獲得最低濃度即為化合物的MIC 值。

2 結(jié)果

2.1 永康市MSSA 及MRSA 分布情況 見(jiàn)表1。共檢出MSSA 和MRSA 合計(jì)794 株，其中MSSA 檢測(cè)出586 株，占比73.80%，MRSA 檢測(cè)出208 株，占比26.20%，均以痰液檢出占比最多，其次是分泌物、膿液、血液。

表1 永康市MSSA 及MRSA 分布情況

2.2 MRSA 及MSSA 對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物耐藥情況 見(jiàn)表2。MRSA 對(duì)青霉素G、苯唑西林完全耐藥，對(duì)紅霉素、克林霉素耐藥率較高，對(duì)替加環(huán)素萬(wàn)古霉素、替考拉寧和利奈唑胺完全敏感，對(duì)利福平、復(fù)方新諾明、莫西沙星和慶大霉素敏感率均大于80%。MSSA 對(duì)青霉素G 和紅霉素耐藥率較高，對(duì)苯唑西林、替加環(huán)素萬(wàn)古霉素、替考拉寧和利奈唑胺完全敏感，對(duì)利福平、復(fù)方新諾明、莫西沙星、左旋氧氟沙星和慶大霉素敏感率均大于90%。

表2 MRSA 及MSSA 對(duì)常見(jiàn)抗菌藥物耐藥情況 %

2.3 7 種中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌活性情況見(jiàn)表3。紙片擴(kuò)散法是指藥物經(jīng)過(guò)瓊脂擴(kuò)散分布在培養(yǎng)基表面，紙片周邊形成無(wú)菌落或少量菌落生長(zhǎng)的透明半徑圈，據(jù)此粗略判斷受試藥物的抑菌效果，7 種中藥的水提物和有機(jī)物提取物均對(duì)3 種金黃色葡萄球菌抑菌效果，其中，有機(jī)物提取物中對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)對(duì)金黃色葡萄球菌、MSSA 和MRSA 的抑菌效果最好，其余中草藥的有機(jī)物提取物及水提物抑菌效果較對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)差，所以，本研究選擇對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)水提物和有機(jī)物提取物作為MSSA 和MRSA 實(shí)驗(yàn)的主要研究對(duì)象，以驗(yàn)證對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)在MSSA 和MRSA中的抑菌效果。

表3 7 種中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌活性情況（） mm

表3 7 種中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌活性情況（） mm

注：①與相同提取方法的其他中草藥比較，P＜0.05；②與同草藥水提物比較，P＜0.05

中草藥名稱連翹金銀花廣藿香黃芩黃連杜仲對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)慶大霉素環(huán)丙沙星陰性對(duì)照金黃色葡萄球菌MSSA MRSA水提物7.23±0.03 8.71±0.37 7.12±0.48 9.75±0.39①8.36±0.36 8.49±0.47 9.46±0.54①20.72±0.27 20.35±0.78 6有機(jī)物提取物7.83±0.76 7.34±0.20 9.44±0.61 9.33±0.30 10.38±0.56 9.58±0.06 12.26±0.76①②23.76±0.85 21.35±0.18 6揮發(fā)油6 7.51±0.69揮發(fā)油揮發(fā)油6 6 6 6 6---水提物7.08±0.32 7.16±0.57 7.12±0.48 8.43±0.81 8.14±0.25 8.22±0.30 9.15±0.24①20.22±0.34 19.79±0.81 6有機(jī)物提取物7.46±0.11 7.55±0.63 8.58±0.09 8.76±0.18 9.08±0.40 9.17±0.17 10.45±0.66①②22.36±0.55 22.67±0.40 6 6 6 6 6 6 6 6 7.33±0.05 7.98±0.15 6 7.05±0.98---水提物6 7.76±0.62 7.66±0.33 7.58±0.21 8.12±0.59 7.19±0.50 8.83±0.48①19.38±0.79 19.19±0.28 6有機(jī)物提取物7.64±0.47 7.45±0.63 7.67±0.29 8.69±0.45 8.18±0.42 8.55±0.11 10.02±0.33①②20.76±0.92 20.77±0.09 6 6 6 6---

2.4 對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)提取物濃度對(duì)MSSA 及MRSA 抑菌效果 見(jiàn)表4。對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)水提物及有機(jī)物提取物對(duì)MSSA 和MRSA 抑菌圈大小隨著提取物濃度升高而增大，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其中，有機(jī)物提取物對(duì)MRSA 抑菌效果好于水提取物，進(jìn)一步證明對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)對(duì)MSSA 和MRSA 均有抑菌效果，并且有機(jī)物提取物工藝更具有研究?jī)r(jià)值。

表4 對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)提取物濃度對(duì)MSSA 及MRSA 抑菌效果（）mm

表4 對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)提取物濃度對(duì)MSSA 及MRSA 抑菌效果（）mm

注：①與相同菌株的對(duì)應(yīng)濃度水提物比較，P＜0.05

MRSA 7.59±0.26 8.63±0.74 8.71±0.28 9.33±0.21 11.78±0.50 12.35±0.74 7.39±0.46①8.90±0.62①9.55±0.24①9.79±0.22①10.86±0.76①13.82±0.51①6提取物種類水提取物有機(jī)物提取物濃度（mg/mL）6.25 12.5 25 50 75 100 6.25 12.5 25 50 75 100陰性對(duì)照MSSA 7.35±0.54 7.07±0.42 8.78±0.45 10.32±0.93 10.36±0.11 11.63±0.62 7.57±0.16①7.83±0.40①8.44±0.18①9.39±0.17①10.32±1.09 10.65±0.94①6

2.5 對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)提取物對(duì)MSSA 及本地檢出10 株MRSA 的MIC 測(cè)定 見(jiàn)表5。為了進(jìn)一步驗(yàn)證對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)對(duì)本地區(qū)檢出的MRSA 抑菌效果，隨機(jī)選取10 株MRSA 作為研究對(duì)象，采用對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)提取物檢測(cè)其MIC，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)有機(jī)物提取物對(duì)MSSA 和10 株本地區(qū)篩選的MRSA 均具有良好抑菌效果，MIC 值在640 μg/mL～1 280 μg/mL之間。

表5 對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)提取物對(duì)MSSA 及本地檢出10 株MRSA 的MIC 測(cè)定 μg/mL

3 討論

隨著抗菌藥物的濫用，致病菌的耐藥性不斷升高，日本和美國(guó)先后發(fā)現(xiàn)了對(duì)萬(wàn)古霉素不敏感金黃色葡萄球菌株[9]。選擇有效的新型藥物或者方法控制MRSA 感染是當(dāng)前眾多學(xué)者關(guān)注的焦點(diǎn)之一，據(jù)統(tǒng)計(jì)，僅2016—2019 年已發(fā)現(xiàn)包含微生物、海洋生物和植物來(lái)源的256 種生物具有抗菌活性[10]。有文獻(xiàn)報(bào)道，連翹、金銀花、杜仲、藿香、黃芩和黃連等中草藥具有較好的抗MRSA 活性[11-12]。對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)屬木犀科梣屬植物，落葉大喬木，是珍貴的藥材樹(shù)種，在我國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)藥中多以其樹(shù)皮入藥稱為秦皮，主要功效為清熱燥濕、收澀、明目，用于熱痢、泄瀉[13]。目前研究報(bào)道花白蠟樹(shù)、大葉白蠟樹(shù)、秦嶺白蠟樹(shù)和苦櫪白蠟樹(shù)等植物提取物均具有體外抗菌、抗氧化、抗光照損傷、抗病毒等藥理活性[14-15]。王蕾等[16]研究發(fā)現(xiàn)秦皮乙素對(duì)肺炎克雷伯菌具有良好的體外抗菌效果，陳鵬舉等[17]研究報(bào)道秦皮水提物與部分抗菌藥聯(lián)合使用對(duì)含fosA3 大腸桿菌具有更好地抑菌效果，但是目前較少有關(guān)于對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)體外抑菌效果研究的報(bào)道，本研究通過(guò)對(duì)幾種中藥抑菌效果的比較，選取對(duì)金黃色葡萄球菌具有良好抑菌效果的中草藥作為研究對(duì)象進(jìn)行研究。

永康市金黃色葡萄球菌感染樣本來(lái)源最多的是痰液，與陳興英等[18]和謝紅意等[19]報(bào)道的痰液占比最多一致，因?yàn)榻瘘S色葡萄球菌普遍存在于鼻咽及皮膚表面，最容易引起呼吸道感染；其次是分泌物、膿液和血液，這可能由于外科手術(shù)等侵入性操作中導(dǎo)致患者黏膜受到損傷，細(xì)菌趁機(jī)侵入而導(dǎo)致感染有關(guān)；MRSA 對(duì)青霉素G、苯唑西林完全耐藥，對(duì)紅霉素、克林霉素耐藥率較高，對(duì)替加環(huán)素、萬(wàn)古霉素、替考拉寧和利奈唑胺完全敏感；MSSA 對(duì)青霉素G 和紅霉素耐藥率較高，對(duì)苯唑西林、替加環(huán)素、萬(wàn)古霉素、替考拉寧和利奈唑胺完全敏感，說(shuō)明本地區(qū)未出現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺耐藥的金黃色葡萄球菌，萬(wàn)古霉素、替考拉寧和利奈唑胺仍然可以作為治療MSSA 和MRSA 感染的首選藥物，但是在高劑量使用時(shí)必須嚴(yán)密監(jiān)測(cè)肝腎功能等生化檢測(cè)指標(biāo)，以保證治療安全[20]。

我國(guó)有悠久的中藥使用歷史，越來(lái)越多的中藥活性成分被發(fā)掘和利用，本研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)前期文獻(xiàn)查詢[11-12]，選擇連翹、金銀花、杜仲、藿香、黃芩、黃連和對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)，均通過(guò)水提、有機(jī)物提取和揮發(fā)物提取法獲得其提取物進(jìn)行體外抑菌實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，7 種中草藥的水提物和有機(jī)物提取物均具有抑菌效果，但是對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌效果最好的水提物和有機(jī)物提取物均是對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)，并且有機(jī)物提取物效果更好，可能與文獻(xiàn)報(bào)道從對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)活性部位分離得到多個(gè)單體化合物，如五環(huán)三萜類化合物等，具有抗菌、抗病毒、調(diào)節(jié)血糖和降血壓等藥理作用[21-22]有關(guān)；對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)有機(jī)物提取物對(duì)MSSA 和MRSA 的抑菌濃度表明，對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)有機(jī)物提取物在較低濃度（6.25 mg/mL）下對(duì)MSSA 和MRSA均具有抑菌效果；進(jìn)一步通過(guò)對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)提取物對(duì)MSSA 和本地檢出10 株MRSA 進(jìn)行MIC 測(cè)定研究，得出對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)提取物不僅對(duì)金黃色葡萄球菌ATCC29213 具有抑菌效果，而且對(duì)MSSA 和MRSA也具有較好的抑菌效果，但是具體的抑菌活性成分和抑菌機(jī)制需要進(jìn)一步研究確定。

綜上所述，永康市金黃色葡萄球菌樣本主要來(lái)源痰液、分泌物、膿液和血液，MRSA 對(duì)青霉素G、苯唑西林完全耐藥，對(duì)紅霉素、克林霉素耐藥率較高，對(duì)替加環(huán)素、萬(wàn)古霉素、替考拉寧和利奈唑胺完全敏感；MSSA 對(duì)青霉素G 和紅霉素耐藥率較高，對(duì)苯唑西林、替加環(huán)素、萬(wàn)古霉素、替考拉寧和利奈唑胺完全敏感，萬(wàn)古霉素、替考拉寧和利奈唑胺可以作為治療MSSA 和MRSA 感染首選藥物，7 種中草藥提取物體外抑菌效果實(shí)驗(yàn)表明對(duì)節(jié)白蠟樹(shù)有機(jī)物提取物對(duì)MSSA 和MRSA 均具有較好的抑菌效果，該種中草藥可能具備作為新型抑菌藥物進(jìn)一步探討開(kāi)發(fā)的價(jià)值。