王海波，楊 杰，蔣崇輝

(衡陽市中心醫(yī)院，湖南 衡陽 421001)

金蓮花來源于毛茛科植物金蓮花TrolliuschinensisBge.的干燥花，《中國藥典》一部收載品[1]。金蓮花作為藥用，始載于《本草綱目拾遺》，該藥味苦、寒、無毒，主治口瘡、耳和目痛，具有明目、解嵐瘴等功效[2]。近年來研究發(fā)現(xiàn)金蓮花的藥理作用還具有消炎、止痛、抑菌、抗氧化、抗病毒、抗癌等多種功效。

1 材 料

1.1 儀 器

755型紫外-可見分光光度計(全自動掃描波長)，上海菁華儀器有限公司；BK-RE-2A 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海申勝生物科技有限公司；GSC-10L型磁力攪拌水浴鍋，常州朗越儀器有限公司；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵，鄭州長城科工貿(mào)有限公司；HC2006G型分析天平，天津市天馬儀器廠；ZRS-8G型溶出度儀，天津天光儀器有限公司；101-A5型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，無錫瑪瑞特科技有限公司；膠囊填充板，湖南常宏制藥機(jī)械設(shè)備廠。

1.2 試劑與藥物

1～2號膠囊殼，蘇州膠囊有限公司；微粉硅膠、糊精、硬脂酸鎂、乳糖、可溶性淀粉等藥用物質(zhì)，安徽山河藥用輔料有限公司；YZ-100080蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，北京索萊寶有限公司；金蓮花總黃酮，南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥中藥制劑學(xué)教研室自制；所用化學(xué)試劑均為分析純，南京化學(xué)試劑股份有限公司。

2 方 法

2.1 主藥制備

采用纖維素酶輔助超聲波提取金蓮花黃酮，最佳工藝條件為：料液比1∶40，pH為4，超聲功率90 W，酶添加量量為1.4%，乙醇濃度47.0%，提取溫度39.0 ℃，提取時間30.0 min，再濃縮至無醇味，經(jīng)HP 20樹脂純化，最后濃縮至一定體積，置于恒溫鼓風(fēng)干燥箱中40 ℃烘干，過篩(80目)，即得。

2.2 輔 料

輔料種類篩選在查閱文獻(xiàn)[3-9]和預(yù)試驗(yàn)基礎(chǔ)上，本次實(shí)驗(yàn)選擇了以下6種常用輔料：分別是羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)、可溶性淀粉、乳糖、微粉硅膠、糊精、硬脂酸鎂，按表1中各配方量進(jìn)行篩選試驗(yàn)。

表1 不同輔料與主藥的配方比例Table 1 Different proportions of excipients to main drug formulations (g)

2.2.1 吸濕率

將底部盛有NaCl過飽和溶液的燒杯，置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中24 h，樣品平鋪于干燥至恒重的稱量瓶中，厚度約2 mm，精密稱定，打開瓶蓋，置于培養(yǎng)箱中，于0、3、6、12、24、48、72 h稱定，計算其吸濕率，計算公式為：吸濕率=[(吸濕后藥粉質(zhì)量-吸濕前藥粉質(zhì)量)/吸濕前藥粉質(zhì)量]×100%。結(jié)果見表2。由此可知，乳糖、硬脂酸鎂、微粉硅膠、糊精均具有良好的抗?jié)裥浴?/p>

表2 不同輔料與主藥配方比例的休止角和平衡吸濕率Table 2 The angle of repose and equilibrium hygroscopicity of different proportion of excipients and main drug formula

2.2.2 休止角

采用固定漏斗法[10]測定休止角，平行測定5次，計算休止角的平均值。其結(jié)果見表2。

由表2可知，加入可溶性淀粉、微粉硅膠有助于改善藥粉的流動性，乳糖、微粉硅膠還可以降低藥粉吸濕性，故選擇微粉硅膠、乳糖、可溶性淀粉作為輔料。

2.3 潤濕劑

乙醇體積分?jǐn)?shù)篩選按照主藥、可溶性淀粉、乳糖、微粉硅膠1∶2∶2∶1的比例稱取6份樣品，分別加入10%、30%、50%、70%、90%乙醇制成相應(yīng)的軟材，過篩(20目)，置于恒溫鼓風(fēng)干燥箱中，溫度調(diào)至40 ℃，干燥30 min后，進(jìn)行整粒。然后取能通過1號篩，但不能通過5號篩的顆粒，再計算其成型率，計算公式為：成型率=(合格顆粒的質(zhì)量/過篩前顆粒的質(zhì)量)×100%，其結(jié)果見表3。

表3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對成型工藝的影響Table 3 Effect of ethanol volume fraction on molding process

由此可知，用70%乙醇作為潤濕劑時，符合最佳要求。

2.4 主藥與輔料比例篩選

將主藥與輔料分別按1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5比例混合均勻，以70%乙醇為潤濕劑進(jìn)行制粒，以吸濕率、休止角、顆粒成型率為評價指標(biāo)進(jìn)行篩選，其結(jié)果見表4。

表4 主藥與輔料比例對成型工藝的影響Table 4 Effect of ratio of main drug and excipient on molding process

由此可知，主藥與輔料比例為1∶4時，制粒效果最為理想，吸濕率較低，流動性較好，顆粒成型率較高。

2.5 輔料用量比例篩選

將主藥與輔料按1∶4比例混合均勻，以70%乙醇為潤濕劑進(jìn)行制粒，以休止角、吸濕率、顆粒成型率、堆密度等作為評價指標(biāo)，進(jìn)行計算并綜合評分，其公式為：綜合評分=(25/最大成型率)×成型率+(20/最大堆密度)×堆密度+(最小休止角×20)/休止角+(最小吸濕率×35)/吸濕率，其中堆密度采用量筒法[11]進(jìn)行測定，公式為堆密度=樣品質(zhì)量/樣品體積，其結(jié)果見表5。

表5 輔料用量比例對成型工藝的影響Table 5 The influence of the proportion of excipients on the molding process

由此可知，處方6的綜合評分最高，故可確定乳糖與可溶性淀粉最佳比例為2：1，微粉硅膠用量為20%。

2.6 正交試驗(yàn)優(yōu)化

根據(jù)上述結(jié)果，本次實(shí)驗(yàn)選擇乳糖與可溶性淀粉比例(A)、主藥與輔料比例(B)、乙醇體積分?jǐn)?shù)(C)、微粉硅膠用量(D)作為影響因素，測定主藥與輔料按照不同的比例進(jìn)行混合，以休止角和平衡吸濕率作為評價指標(biāo)，計算綜合評分，其公式為：綜合評分=(休止角/最大休止角×50%+平衡吸濕率/最大平衡吸濕率×50%)×100%，采用L9(34)正交試驗(yàn)優(yōu)化成型工藝，其結(jié)果見表6。

表6 正交試驗(yàn)與結(jié)果Table 6 Orthogonal test and results

由此可知，各因素影響程度依次為乙醇體積分?jǐn)?shù)>主藥與輔料比例>微粉硅膠用量>乳糖與可溶性淀粉比例，最優(yōu)工藝為乳糖與可溶性淀粉比例2∶1，主藥與輔料比例1∶4，乙醇體積分?jǐn)?shù)70%，微粉硅膠用量20%。

2.7 質(zhì)量檢測

2.7.1 裝量差異

隨機(jī)抽取10粒膠囊，按照《中國藥典》規(guī)定進(jìn)行測定，結(jié)果平均裝量為0.4370 g±10%，符合2020年版《中國藥典》規(guī)定。

2.7.2 含水量

精密稱取顆粒2.0 g，置稱量瓶中，按照《中國藥典》規(guī)定進(jìn)行測定，平行測定3次。結(jié)果含水量分別為2.00%、4.34%、3.70%，符合2020年版《中國藥典》的規(guī)定。

2.8 臨界相對濕度測定

將顆粒干燥至恒重，取7份，每份約1 g，平鋪于稱量瓶底部，精密稱定質(zhì)量，分別置于55%、50%、45% H2SO4及NaBr、NaCl、KCl、KNO3過飽和鹽溶液(相對濕度分別為29.45%、41.52%、48.52%、59.70%、75.29%、84.26%、97.48%)的干燥器內(nèi)，室溫下放置7 d，取出，稱定質(zhì)量，計算吸濕率。其結(jié)果見圖1。

圖1 臨界相對濕度曲線Fig.1 The critical relative humidity curve

3 結(jié) 論

中藥是我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中獨(dú)具特色的瑰寶。隨著現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)國際化、全球化的發(fā)展，中藥制劑的研制不能適應(yīng)中醫(yī)發(fā)展的需求。為此，大力研發(fā)新型的中藥制劑具有一定價值意義。