鄭冉,呂丹,羅紅兵,2*

1(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)院,湖南 長(zhǎng)沙,410128)2(湖南省玉米工程技術(shù)研究中心,湖南 長(zhǎng)沙,410128)

玉米是我國(guó)重要的糧食作物,其籽粒中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分,具有一定的保健功能,因此玉米加工食品廣受大眾歡迎。但玉米中部分營(yíng)養(yǎng)成分不能直接被人體吸收,必須依賴(lài)相關(guān)酶作用,分解成小分子物質(zhì),才可以被人體利用[1]。

發(fā)芽是一種簡(jiǎn)單的加工技術(shù)手段,可用于改善種子的營(yíng)養(yǎng)比例[2];發(fā)芽期間,玉米種子中的淀粉酶和蛋白酶活性明顯增強(qiáng),可以使不溶性的大分子物質(zhì)水解生成新的還原糖、氨基酸、維生素和礦物質(zhì)[3-4];最近的研究表明,普通玉米發(fā)芽后干物質(zhì)含量明顯降低,可溶性蛋白含量表現(xiàn)出先降低后升高的趨勢(shì),還原糖和可溶性糖的含量呈升高趨勢(shì)[5];同時(shí),通過(guò)發(fā)芽處理,可以改善甜、糯玉米淀粉的利用率[6],增大淀粉溶解度和淀粉糊透光率,減小藍(lán)值、碘結(jié)合力和膨潤(rùn)力[7-8],最終形成特殊的口感,刺激食欲;張鐘等[9]將發(fā)芽玉米粉應(yīng)用到餅干類(lèi)食品的加工中,研制出了口感酥松的餅干;HELLAND等[10]利用發(fā)芽2 d的玉米粉,添加到粥類(lèi)食品中,增加了糖含量與食物能量密度。

目前對(duì)發(fā)芽玉米種子中生理指標(biāo)變化的研究主要集中在單一類(lèi)型上,對(duì)不同類(lèi)型玉米發(fā)芽的研究鮮少報(bào)道。本研究選擇了3種具有代表性的地方玉米品種,普通玉米(湘農(nóng)玉27號(hào))、甜玉米(湘農(nóng)甜玉3號(hào))和糯玉米(湘農(nóng)白糯3號(hào)),對(duì)不同發(fā)芽時(shí)間的胚芽長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)、生理指標(biāo)的變化及其相互關(guān)系進(jìn)行研究,探究不同類(lèi)型玉米間各性狀的變化趨勢(shì),以期評(píng)價(jià)不同類(lèi)型發(fā)芽玉米的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,并且為發(fā)芽玉米在食品加工方面的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

供試普通玉米品種為湘農(nóng)玉27號(hào)、甜玉米品種為湘農(nóng)甜玉3號(hào)、糯玉米品種為湘農(nóng)白糯3號(hào),以上試驗(yàn)材料由湖南省玉米工程技術(shù)研究中心提供。

1.2 儀器與設(shè)備

智能人工氣候培養(yǎng)箱,上海丙林電子科技有限公司;UV-1200紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì),上海美析儀器有限公司;DF-101S磁力攪拌器,上海予華儀器有限公司;Centrifuge 5420R-高速離心機(jī),艾本德(上海)國(guó)際貿(mào)易有限公司;冷凍研磨儀,上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 玉米發(fā)芽處理

挑選適量的玉米種子,在0.1%(體積分?jǐn)?shù))NaClO 溶液中室溫浸泡15 min,蒸餾水沖洗2次,后在25 ℃條件下連續(xù)浸泡12 h,每5 h換水1次。將浸泡后的種子移種到育苗盤(pán)中,放入智能人工氣候培養(yǎng)箱中,于25 ℃、相對(duì)濕度為88%,發(fā)芽72 h,每隔12 h進(jìn)行澆水。按發(fā)芽0(CK)、12、24、36、48、60、72 h 設(shè)置7個(gè)處理,將3種類(lèi)型的玉米種子分別進(jìn)行不同的處理,3次重復(fù)。

1.3.2 玉米的胚芽、胚根長(zhǎng)度的測(cè)定

分別在發(fā)芽后的第12、24、36、48、60、72 h取樣,樣品用蒸餾水沖洗干凈,每個(gè)類(lèi)型玉米挑選20株長(zhǎng)勢(shì)一致的玉米芽苗,測(cè)定胚芽、胚根長(zhǎng)度。將樣品50 ℃下烘至恒重,磨粉至細(xì)度≤80目,密封于塑料袋內(nèi),4 ℃保存待用。

1.3.3 玉米種子蛋白組分的測(cè)定

考馬斯亮藍(lán)比色法測(cè)定玉米種子的蛋白組分。

1.3.4 玉米種子還原糖和總糖含量的測(cè)定

采用DNS法測(cè)定還原糖含量,硫酸蒽酮法測(cè)定可溶性總糖含量。

1.3.5 玉米種子支鏈淀粉、直鏈淀粉和總淀粉含量的測(cè)定

采用紫外吸光光度法測(cè)定直鏈淀粉含量,硫酸蒽酮法測(cè)定總淀粉含量,支鏈淀粉含量計(jì)算如公式(1)所示:

支鏈淀粉含量/%=總淀粉含量-直鏈淀粉含量

(1)

1.3.6 玉米種子賴(lài)氨酸含量的測(cè)定

茚三酮比色法測(cè)定賴(lài)氨酸含量。

1.4 數(shù)據(jù)分析

用Microsoft Excel 20.0對(duì)表型數(shù)據(jù)進(jìn)行整理,用SPSS 24.0和DPS 6.05軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析、相關(guān)性分析,TBtools軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 玉米發(fā)芽過(guò)程中胚芽、胚根長(zhǎng)度的變化

種子發(fā)芽時(shí),胚乳中貯藏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)發(fā)生降解,降解后的產(chǎn)物在胚中合成生命物質(zhì),形成新的器官。由圖1、圖2可知,隨著發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng),各類(lèi)型玉米的胚芽、胚根的長(zhǎng)度均顯著增加。整體來(lái)看,種子在發(fā)芽的48 h后,胚芽長(zhǎng)顯著增加,各品種的胚芽長(zhǎng)大小分別為湘農(nóng)玉27號(hào)>湘農(nóng)甜玉3號(hào)>湘農(nóng)白糯3號(hào)。種子在發(fā)芽的24 h后,胚根長(zhǎng)顯著增加,發(fā)芽72 h后,湘農(nóng)玉27的胚根長(zhǎng)最大,達(dá)(6.81±0.04) cm,湘農(nóng)白糯3號(hào)的胚根長(zhǎng)相對(duì)最低,為(2.58±0.01) cm,因此推測(cè)玉米種子在發(fā)芽24～48 h過(guò)程中主要營(yíng)養(yǎng)成分發(fā)生合成和降解。

圖1 玉米發(fā)芽過(guò)程中胚芽長(zhǎng)度的變化

圖2 玉米發(fā)芽過(guò)程中胚根長(zhǎng)度的變化

2.2 玉米發(fā)芽過(guò)程中蛋白組分含量變化

玉米種子的發(fā)芽與貯藏蛋白含量密切相關(guān),種子發(fā)芽期間,許多與貯藏蛋白相關(guān)的酶被激活,一些蛋白質(zhì)被合成,另一些蛋白質(zhì)被水解,這種平衡決定了蛋白質(zhì)的含量[11]。OSBORNE[12]將提取出的種子貯藏蛋白按溶解性的差異分為清蛋白(albumin)、球蛋白(globulin)、醇溶蛋白(gliadin)和谷蛋白(gluten)四類(lèi)。玉米發(fā)芽過(guò)程中蛋白組分變化如表1所示。

表1 玉米發(fā)芽過(guò)程中生理指標(biāo)含量變化

發(fā)芽72 h內(nèi),湘農(nóng)玉27號(hào)、湘農(nóng)甜玉3號(hào)和湘農(nóng)白糯3號(hào)的清蛋白與球蛋白含量均隨發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng)不斷增加,該變化趨勢(shì)與大麥[13]和燕麥[14]等的研究結(jié)果相似;由于類(lèi)型的差異,清蛋白與球蛋白的變化幅度有明顯區(qū)別,湘農(nóng)玉27號(hào)清蛋白變化幅度最大(1.37%),其次是湘農(nóng)白糯3號(hào)(0.76%),湘農(nóng)甜玉3號(hào)的變化最小(0.31%);球蛋白變化幅度則表現(xiàn)為湘農(nóng)白糯3號(hào)(0.58%)>湘農(nóng)玉27號(hào)(0.53%)>湘農(nóng)甜玉3號(hào)(0.21%)。

3種類(lèi)型玉米的醇溶蛋白、谷蛋白和總蛋白含量的變化趨勢(shì)一致,均隨著發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸降低,不同的是谷蛋白整體上消耗量較多,這可能與谷蛋白是胚和幼芽生長(zhǎng)的主要能源,降解后可以保護(hù)玉米幼苗抵御外界的不良環(huán)境有關(guān),此外總蛋白含量在3種不同類(lèi)型玉米中是隨著發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸減少,種子發(fā)芽早期蛋白質(zhì)的降解幅度小于發(fā)芽后期蛋白質(zhì)的降解幅度,這與張瑜等[15]在研究柱花草種萌發(fā)時(shí)總蛋白的變化趨勢(shì)一致。由于類(lèi)型的差異,醇溶蛋白、谷蛋白與總蛋白的變化幅度有明顯區(qū)別,除湘農(nóng)玉甜3號(hào)變化幅度較小外,其余2種類(lèi)型玉米都在發(fā)芽24 h后出現(xiàn)顯著下降趨勢(shì)。

2.3 玉米發(fā)芽過(guò)程中還原糖和總糖含量的變化

玉米種子在發(fā)芽時(shí),淀粉酶是被激活的狀態(tài),隨著發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng),光合作用產(chǎn)物不斷形成和積累,可溶性總糖劇增,淀粉酶不斷積累,導(dǎo)致總糖迅速分解,生成大量的還原糖[4]。隨著發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng),3種類(lèi)型的玉米種子還原糖含量呈上升趨勢(shì),與總糖的變化趨勢(shì)正好相反,這可能是因?yàn)樵诜N子發(fā)芽時(shí)的呼吸作用加強(qiáng),導(dǎo)致多糖等物質(zhì)的分解,致使還原糖源源不斷的生成,這與黃升謀等[16]對(duì)小麥種子發(fā)芽的研究結(jié)果相似,也與大豆[17]種子發(fā)芽的研究結(jié)果相似。還原糖在不同玉米品種不同發(fā)芽階段的變化幅度存在差異,湘農(nóng)甜玉3號(hào)、湘農(nóng)白糯3號(hào)在發(fā)芽24 h后急劇上升,72 h達(dá)到最大值;湘農(nóng)玉27號(hào)的還原糖含量在發(fā)芽0～12 h、24～48 h呈升高趨勢(shì),其余時(shí)間都趨于穩(wěn)定。

由于類(lèi)型的差異,總糖在不同玉米品種不同發(fā)芽階段的變化幅度有明顯區(qū)別。在發(fā)芽72 h時(shí),總糖含量變化幅度則表現(xiàn)為湘農(nóng)甜玉3號(hào)(8.95%)>湘農(nóng)白糯3號(hào)(3.96%)>湘農(nóng)玉27號(hào)(3.43%),這可能是因?yàn)榉N子發(fā)芽時(shí)伴隨著呼吸作用,消耗了大部分的能量有關(guān)。

2.4 玉米發(fā)芽過(guò)程中支鏈淀粉、直鏈淀粉和總淀粉含量的變化

玉米發(fā)芽過(guò)程中支鏈淀粉、直鏈淀粉和總淀粉含量變化如表1,在發(fā)芽過(guò)程中支鏈淀粉、直鏈淀粉和總淀粉含量總體變化趨勢(shì)一致,均隨發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng)呈降低趨勢(shì)。3種類(lèi)型玉米種子未發(fā)芽前的支鏈淀粉含量為34.88%～49.97%;不同類(lèi)型玉米支鏈淀粉的變化幅度有明顯區(qū)別,湘農(nóng)白糯3號(hào)在發(fā)芽12 h后呈現(xiàn)降低趨勢(shì),湘農(nóng)玉27號(hào)與湘農(nóng)甜玉3號(hào)則在48 h后才有所降低。

3種類(lèi)型玉米種子未發(fā)芽前的直鏈淀粉含量為16.50%～24.36%;發(fā)芽72 h時(shí),湘農(nóng)白糯3號(hào)的直鏈淀粉含量下降幅度最大(11.67%),其次是湘農(nóng)甜玉3號(hào)(10.98%),湘農(nóng)玉27號(hào)的直鏈淀粉含量下降幅度最小(8.70%)。

3種類(lèi)型玉米種子未發(fā)芽前的總淀粉含量為51.38%～72.18%,種子發(fā)芽24 h后,總淀粉含量顯著降低,發(fā)芽72 h時(shí),不同類(lèi)型玉米總淀粉的變化幅度表現(xiàn)為:湘農(nóng)甜玉3號(hào)(36.10%)>湘農(nóng)玉27號(hào)(26.33%)>湘農(nóng)白糯3號(hào)(20.69%)。發(fā)芽過(guò)程中淀粉組分呈下降趨勢(shì),與邢寶[18]和徐惠娟等[19]研究相似,表明隨著種子進(jìn)行露白、胚軸伸長(zhǎng)和子葉生長(zhǎng)等生命活動(dòng),淀粉酶活性的增強(qiáng),淀粉代謝水平上升,種子貯存的淀粉被消耗用于新組織器官的合成以及胚的生長(zhǎng)。

2.5 玉米發(fā)芽過(guò)程中賴(lài)氨酸含量的變化

賴(lài)氨酸是人體所必需的氨基酸,其含量的高低是衡量玉米種子品質(zhì)的重要指標(biāo)。不同發(fā)芽時(shí)間玉米種子中賴(lài)氨酸的含量變化如表1所示。不同類(lèi)型玉米賴(lài)氨酸含量總體變化趨勢(shì)基本一致,隨發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加,這與白永富等[20]對(duì)煙草種子萌發(fā)時(shí)的規(guī)律相似,相同的結(jié)果也出現(xiàn)在大豆[21]中。不同類(lèi)型玉米賴(lài)氨酸的變化幅度有明顯區(qū)別,發(fā)芽前后脯氨酸變化最大的是湘農(nóng)甜玉3號(hào),3種類(lèi)型玉米在發(fā)芽第72 h時(shí)的賴(lài)氨酸含量分別比發(fā)芽前提高1.64、2.00和1.71倍,因此發(fā)芽后的玉米可作為開(kāi)發(fā)高賴(lài)氨酸食品的一種方式,降低人們患癩皮病的風(fēng)險(xiǎn)有重要的意義。賴(lài)氨酸含量的增加可能是內(nèi)源性蛋白酶的活化,它誘導(dǎo)了玉米貯藏蛋白以及肽的水解。

2.6 玉米發(fā)芽過(guò)程中主要生理指標(biāo)與胚芽長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)的相關(guān)性

對(duì)玉米發(fā)芽過(guò)程中清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白、總蛋白、還原糖、總糖、支鏈淀粉、直鏈淀粉、總淀粉、賴(lài)氨酸、胚芽長(zhǎng)與胚根長(zhǎng)進(jìn)行簡(jiǎn)單相關(guān)分析。結(jié)果如圖3所示,玉米發(fā)芽過(guò)程中胚芽長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)與生理指標(biāo)存在密切關(guān)系,各指標(biāo)間相互影響并且也相互制約。玉米種子發(fā)芽過(guò)程中玉米胚芽長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)均與清蛋白和球蛋白呈顯著正相關(guān),因此玉米種子發(fā)芽過(guò)程中清蛋白、球蛋白含量隨著胚的生長(zhǎng)逐漸增加,這與戈珍梅等[22]發(fā)現(xiàn)蛋白含量隨胚根長(zhǎng)增加而持續(xù)增加的結(jié)果相似;玉米中還原糖含量隨胚芽長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)伸長(zhǎng)而顯著增加,這與楊紅等[23]研究中還原糖含量隨胚芽長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)伸長(zhǎng)而增加的結(jié)果一致;此外胚芽長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)與直鏈淀粉呈極顯著負(fù)相關(guān),該結(jié)論在小麥[24]種子中得到了驗(yàn)證。

圖3 玉米發(fā)芽過(guò)程中主要生理指標(biāo)與胚芽長(zhǎng)、胚根長(zhǎng)的相關(guān)性分析

3 結(jié)論

本文研究了發(fā)芽過(guò)程中湘農(nóng)玉27號(hào)、湘農(nóng)甜玉3號(hào)和湘農(nóng)白糯3號(hào)發(fā)芽動(dòng)態(tài)及生理指標(biāo)的變化。結(jié)果表明胚芽、胚根的長(zhǎng)度隨著玉米種子發(fā)芽時(shí)間的延長(zhǎng)而不斷增加。不同類(lèi)型玉米發(fā)芽過(guò)程中的生理指標(biāo)的變化趨勢(shì)相同,僅變化幅度存在差異。發(fā)芽降低了3種不同類(lèi)型玉米的醇溶蛋白、谷蛋白、總蛋白、直鏈淀粉、總淀粉和總糖的含量,但提升了清蛋白、球蛋白、還原糖和賴(lài)氨酸的含量。這些結(jié)果揭示了發(fā)芽一定程度上可以改善玉米理化特性,也為發(fā)芽玉米面包、飲料、嬰幼兒輔食等相關(guān)食品的加工提供參考。發(fā)芽玉米種子中毒素含量極低,大多數(shù)可在高溫下破壞,紫外線(xiàn)照射也可使之破壞,因此發(fā)芽玉米加工后的食品相當(dāng)安全,近年來(lái)人類(lèi)食用的經(jīng)驗(yàn)也證明了這一點(diǎn)。綜合考慮,在健康飲食觀念的廣泛普及的今天,發(fā)芽玉米產(chǎn)品的加工將擁有廣闊前景。