王 丹,毛廣惠,季憶婷,李麗麗,董 爽,馮晨霞,趙曉燕,王琪玉,謝 翌,蔡世忠,陳 艷

(蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院1.兒童保健科;2.兒科研究所,江蘇 蘇州 215021)

維生素D的主要功能是促進(jìn)骨骼生長及維持鈣磷穩(wěn)態(tài),其是人體必需營養(yǎng)素之一。維生素D主要由日光照射經(jīng)皮膚合成,天然含有大量維生素D的食物非常有限。嬰幼兒期至青春期是骨骼健康生長的重要階段,這一時期維生素D的不足會導(dǎo)致許多骨骼負(fù)面后果,包括佝僂病、骨軟化癥和骨折風(fēng)險。除了對骨骼的影響外,缺乏維生素D還被認(rèn)為是齲齒、呼吸道感染、過敏性疾病等的危險因素,維生素D對免疫系統(tǒng)的成熟也很重要。研究證明,在各個經(jīng)緯地帶的光照時間和紫外照射持續(xù)時間并不相同,而在同一經(jīng)緯地帶各個月份的日照持續(xù)時間和紫外線輻射強度也有所不同[1]。血清25-羥基維生素D[25(OH)D]濃度是維生素D狀態(tài)的最佳標(biāo)志,其測試的金標(biāo)準(zhǔn)是液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜[2]法。本研究采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對受檢者進(jìn)行血清25(OH)D水平的檢測,擬針對在蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒童保健科體檢兒童的維生素D營養(yǎng)狀況進(jìn)行研究,分析不同性別、年齡及一年月份中兒童25(OH)D水平的差異,為我國華東地區(qū)兒童維生素D口服量的修正提供理論依據(jù)。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

選擇2019年9月1日至2021年2月28日在蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒童保健科體檢的6 036名15周歲及以下兒童為研究對象,其中男童3 062名,女童2 974名,年齡為>0～15歲,平均年齡為(6.56±2.95)歲;根據(jù)年齡將兒童分為5個年齡段,>0～3歲1 023人,>3～6歲1 849人,>6～9歲2 191人,>9～12歲847人,>12～15歲126人。

納入標(biāo)準(zhǔn):接受常規(guī)健康體檢的兒童。排除標(biāo)準(zhǔn):①伴有基礎(chǔ)疾病,如重大肝腎疾患、遺傳性免疫缺陷疾病、內(nèi)分泌相關(guān)疾病等;②近期有急性感染性疾病;③無法完成相關(guān)的檢查及評估。

本研究已取得兒童監(jiān)護(hù)人的知情同意,并經(jīng)我院倫理委員會審批(倫理號:2022CS013)。

1.2 方法

1.2.1 血清25(OH)D水平的測定

對所有受試者抽取空腹靜脈血2～3mL,于4小時內(nèi)完成血清分離并保存于4℃冰箱,5天內(nèi)完成測定血清25(OH)D水平,分析維生素D的變化規(guī)律。

使用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS,Waters)自動進(jìn)樣器進(jìn)行樣本的處理檢測。啟用UPLC-MS/MS應(yīng)用軟件MassLynx建立工作列表,采用多重反應(yīng)監(jiān)測模式(MRM)進(jìn)行測試。新鮮血清中25(OH)D2/D3檢測試劑盒購于國家質(zhì)譜生物科技公司,色譜級乙酰丙胺購于國家Fisher有限公司,色譜級正己烷購于法國Scharlau有限公司,色譜級甲酸購于德國Merck有限公司。通過室內(nèi)品質(zhì)評估方法評定檢測項目的測量正確率,并使用每批質(zhì)控設(shè)備確保檢測項目的精密性。

1.2.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

參照2016年“營養(yǎng)性佝僂病防治全球共識”[3],血清25(OH)D<30nmol/L為維生素D缺乏,血清25(OH)D在30～50nmol/L為維生素D不足,血清25(OH)D在>50～250nmol/L為維生素D正常,>250nmol/L為維生素D中毒。

1.2.3 質(zhì)量控制

由經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒科研究所檢驗人員統(tǒng)一進(jìn)行維生素D樣品的采集和檢驗。在采樣前,檢驗人員清洗、消毒雙手,采用碘伏對采血區(qū)域消毒,并取同一批次采血管、試劑盒等設(shè)備,嚴(yán)格按照程序進(jìn)行所有操作,確保檢驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可信度。如果樣本不合格,則重新檢驗。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 不同性別兒童維生素D的基本情況

在6 036名兒童中,無維生素D中毒者,維生素D缺乏、不足和正常的比例分別為12.86%、43.24%和43.90%;男童維生素D缺乏率低于女童,男童維生素D正常率高于女童,見表1。

表1 不同性別兒童維生素D的分布狀態(tài) [n(%)]

2.2 不同年齡段兒童血清25(OH)D水平的情況

男童和女童在各個年齡段的血清25(OH)D水平變化趨勢基本一致,其中,>0～3歲的最高,>12～15歲的最低;隨著年齡的增長,男童和女童的血清25(OH)D水平均呈逐漸下降趨勢(P<0.05),而男童和女童的維生素D不足和缺乏率均呈逐漸上升趨勢(P<0.05),其中,在>6歲的兒童中,維生素D不足和缺乏率尤為顯著,均超過60%,見表2。

表2 不同年齡段兒童血清25(OH)D水平及維生素D不足和缺乏率的比較

2.3 不同性別兒童血清25(OH)D水平各月份的變化情況

男童和女童的血清25(OH)D水平均呈現(xiàn)為12月份最低,男童為(39.89±15.11)nmol/L,女童為(38.78±16.18)nmol/L,而9月份最高,男童為(71.08±22.55)nmol/L,女童為(70.49±24.04)nmol/L;兒童血清25(OH)D水平在1、8、10、11月份接近全年平均水平,2月份低于全年平均水平,3、4月份又高于全年平均水平,5、6、7月份顯著下降,之后呈上升狀態(tài),9月份達(dá)峰值,之后再次呈現(xiàn)下降趨勢,12月份最低;除4月份以外,男童的血清25(OH)D水平均高于女童,見圖1。

男童血清25(OH)D水平全年平均為(50.87±19.14)nmol/L,女童為(48.80±20.65)nmol/L,男童血清25(OH)D全年平均水平明顯高于女童,經(jīng)比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);其中,在1、2、3、5、9、10、11、12月份,男童血清25(OH)D水平均稍高于女童,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義P>0.05);在6、7、8月份,男童血清25(OH)D水平均明顯高于女童,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);4月份男童血清25(OH)D水平低于女童,差異無統(tǒng)計學(xué)意義P>0.05),見表3。

表3 不同性別兒童各月份血清25(OH)D水平的比較

2.4 不同年齡段兒童血清25(OH)D水平各月份的變化情況

隨著兒童年齡的增長,各月份兒童血清25(OH)D水平均呈下降趨勢,各月份中>0～3歲兒童血清25(OH)D水平均明顯高于其他年齡段,年齡越大波動幅度越小,>12～15歲兒童血清25(OH)D水平普遍呈現(xiàn)低水平;不同年齡段兒童血清25(OH)D水平普遍在9月份最高,12月份最低,見圖2。

圖2 不同年齡段兒童25(OH)D水平各月份的變化趨勢

在各月份中,不同年齡段兒童血清25(OH)D水平比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表4。

表4 不同年齡段兒童血清25(OH)D水平各月份的比較

3 討論

維生素D是一種人體必需的維生素,被認(rèn)為是兒童健康的重要決定因素,可直接影響到骨骼和礦物質(zhì)的物質(zhì)代謝。維生素D的獲得主要有3種途徑:日光照射、飲食攝入、維生素D補充劑[4],其中日光照射,特別是中波紫外線為維生素D的主要來源。既往的科學(xué)研究證實維生素D缺乏可致營養(yǎng)性佝僂病,同時也與兒童肥胖[5]、齲齒[6]、急性呼吸道感染[7]、支氣管哮喘[8]、尿路感染[9]、腸道感染[10]、糖尿病[11]、過敏性疾病[12]、自身免疫性疾病[13]等存在相關(guān)性。本研究進(jìn)一步探討了性別、年齡和不同月份兒童25(OH)D水平的變化情況,旨在為維生素D的合理補充提供更多的理論依據(jù)。

3.1 不同性別兒童血清25(OH)D水平差異的分析

本研究顯示,男童維生素D缺乏率低于女童,女童維生素D缺乏率更高(17.32%),男童血清25(OH)D全年平均水平明顯高于女童。多項研究表明,女童維生素D水平低于男童,女童維生素D缺乏率更高[14-17]。這與本研究結(jié)果一致。究其原因,與男童相比,女童的體力活動較少,而且女童從食物來源中攝入的維生素D低于男童[18]。維生素D營養(yǎng)狀態(tài)與不同地區(qū)、緯度可能存在相關(guān)性[19];同時,也與性別有關(guān),女童更易出現(xiàn)維生素D水平不足。

3.2 不同年齡段兒童血清25(OH)D水平差異的分析

本研究顯示,兒童血清25(OH)D水平以>0～3歲年齡段最高、>12～15歲年齡段最低,兒童血清25(OH)D水平隨著年齡的增長呈逐漸下降趨勢,與年幼兒童相比,青少年的25(OH)D水平低下更為普遍。這與既往研究結(jié)果[20-21]相符合。血清25(OH)D水平是由多種因素決定的,因此,25(OH)D水平隨兒童年齡增長呈下降趨勢的原因也是多方面的?！毒S生素D缺乏性佝僂病防治建議》[22]中推薦嬰兒在出生2周后開始補充維生素D至2周歲。因此,家長更注重對嬰幼兒維生素D的補充,而對年齡較大的兒童,維生素D主要來自日光照射[23]。青少年學(xué)業(yè)壓力大,進(jìn)而減少了戶外活動,體育課的比例較低,且部分體能訓(xùn)練項目在體育館內(nèi)進(jìn)行,這些都限制了日光照射的時間,而且個別家長不重視維生素D的補充,尤其在年長兒童中多見,導(dǎo)致其維生素D的缺乏。因此,應(yīng)加強宣教工作,有效降低青少年的維生素D缺乏率。

3.3 兒童血清25(OH)D水平各月份差異的分析

本研究顯示,兒童血清25(OH)D水平在1、8、10、11月份接近全年平均水平,2月份低于全年平均水平,3、4月份又高于全年平均水平,5、6、7月份顯著下降,之后呈上升狀態(tài),9月份達(dá)峰值,之后再次呈現(xiàn)下降趨勢,12月份最低,基本上符合秋季(9—11月)偏高、冬季(12月—次年2月)偏低的規(guī)律。這與我國很多地區(qū)維生素D水平與季節(jié)、月份有明顯相關(guān)性的研究結(jié)果[24-25]基本一致。本研究顯示,冬季兒童血清25(OH)D水平保持在較低水平,可能是與蘇州地區(qū)在該季節(jié)氣候較冷、兒童衣著厚實,同時減少了戶外運動、日光照射不足有關(guān)。本研究顯示,6—8月兒童血清25(OH)D水平偏低。這與艾湘麗等[24]研究顯示廈門夏季(6—8月)兒童25(OH)D水平低于其他季節(jié)基本一致?？紤]可能與我國南方地區(qū)夏天天氣炎熱,兒童更傾向于室內(nèi)避暑,日光照射減少有關(guān)。本研究顯示,兒童血清25(OH)D水平在9月份達(dá)到峰值。這與夏黎等[15]研究顯示南京地區(qū)兒童25(OH)D水平9月份高于其他月份的結(jié)果相一致。本研究顯示,3、4、9月份兒童血清25(OH)D處于高水平,究其原因,可能與這些月份是蘇州地區(qū)氣候最宜人的季節(jié)有關(guān),很多家庭周末都會組織戶外活動,期間兒童日照時間較長,因此自身可合成更多的維生素D。

3.4 本研究的優(yōu)點及局限性

本研究采用靜脈采血檢測血清25(OH)D水平,測得的數(shù)值相對精準(zhǔn),且樣本量相對較大,年齡覆蓋比較全面,這是優(yōu)勢所在。但本研究也存在一定的局限性,本次為橫斷面研究,缺乏飲食、服用維生素D的持續(xù)時間或劑量、乳制品攝入量、日常戶外活動、日光照射、體質(zhì)量指數(shù)等補充數(shù)據(jù),因此無法推斷維生素D缺乏與各因素之間的因果關(guān)系。

綜上所述,兒童血清25(OH)D水平在不同的性別、年齡及各月份均有明顯差異,本研究顯示,在3、4、9月份兒童血清25(OH)D水平偏高,而在12月份最低。因此,在制定維生素D補充方案時應(yīng)考慮各月份因素對血清25(OH)D水平的影響,并在后續(xù)研究中進(jìn)一步探討各月份的最佳補充劑量方案。同時,應(yīng)加大對兒童家長開展維生素D相關(guān)方面的衛(wèi)生宣教工作,鼓勵兒童適當(dāng)參加戶外體育鍛煉,增強維生素D的補充及吸收。