諶 歡,何云山,何草芳,毛 婧,周建軍,彭國茳

諶歡,何云山,何草芳,毛婧,周建軍,彭國茳,湘南學(xué)院附屬醫(yī)院 湖南省郴州市 423000

0 引言

食滯胃腸證泄瀉是中醫(yī)泄瀉常見的六大證型之一,發(fā)病率僅次于濕熱證,好發(fā)人群以小兒和脾胃功能不佳者為主,是導(dǎo)致兒童營養(yǎng)不良、影響生長發(fā)育的重要原因,也是影響脾胃功能不佳人群生活質(zhì)量的常見因素[1].保和丸出自《丹溪心法》,是治療食滯胃腸證泄瀉的經(jīng)典方劑,由山楂、神曲、萊菔子、半夏、連翹、陳皮、茯苓組成.山楂為君藥,善消肉食油膩之積;神曲與萊菔子并為臣藥,神曲善化谷食陳腐之積;萊菔子長于消面食痰濁之積.半夏、陳皮行氣化滯,和胃止嘔;茯苓健脾消食,和中滲濕;連翹微苦性涼,具有升浮宣散、清熱散結(jié)之力,同時(shí)還可以防消降太過.全方用藥謹(jǐn)守病機(jī)、配伍嚴(yán)謹(jǐn),共湊消食導(dǎo)滯和胃之功效,可治一切食積[2].腸道微生態(tài)是一個(gè)復(fù)雜且存在個(gè)體差異性的動(dòng)態(tài)平衡的微生態(tài)系統(tǒng),腸道菌群是腸道微生態(tài)的重要組成部分[3].泄瀉是常見的胃腸道疾病,與腸道菌群失調(diào)密切相關(guān)[4].腸道菌群作為中藥的作用靶點(diǎn)之一,可響應(yīng)和介導(dǎo)中藥的干預(yù)作用,在中藥防治疾病的機(jī)制中扮演著關(guān)鍵性作用[5].網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)整合了藥物、靶點(diǎn)、疾病等信息,通過對生物系統(tǒng)的網(wǎng)絡(luò)分析來認(rèn)識藥物與機(jī)體之間的作用,從而高效地闡明中藥多組分和疾病多靶點(diǎn)之間的潛在作用關(guān)系.本文通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對保和丸治療食滯胃腸證泄瀉合并菌群失調(diào)的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制進(jìn)行預(yù)測,以期為該方的進(jìn)一步研究與應(yīng)用提供參考.

1 材料和方法

1.1 材料 活性成分篩選: 采用系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(tái)[(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP),http://tcmspw.com/tcmsp.php]獲取萊菔子、半夏、陳皮、茯苓、連翹活性成分與靶點(diǎn)等信息,參數(shù)設(shè)置為口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%、類藥性(drug-like,DL)≥0.18.以BATMAN-TCM數(shù)據(jù)庫(Bioinformatics Analysis Tool for Molecular mechANism of Traditional Chinese Medicine,http://bionet.ncpsb.org/batman-tcm/)獲取山楂活性成分信息,參數(shù)設(shè)置為score cutoff≥20、adjustedPvalue<0.05.并結(jié)合CNKI中的相關(guān)文獻(xiàn)(1989/2022-11-26)對化學(xué)成分進(jìn)行補(bǔ)充完善,獲取活性成分群.

1.2 方法

1.2.1 保和丸化學(xué)成分靶點(diǎn)的預(yù)測分析: 通過TCMSP平臺(tái)尋找與活性化合物相關(guān)的潛在靶點(diǎn),并通過Uniprot數(shù)據(jù)庫(Universal Protein,https://www.uniprot.org/)將活性化合物對應(yīng)的靶點(diǎn)蛋白轉(zhuǎn)換為基因名.

1.2.2 疾病靶點(diǎn)與腸道菌群靶點(diǎn)的確定: 通過Genecards數(shù)據(jù)庫(https://www.genecards.org/),以“Diarrhea with gastrointestinal food stagnation syndrome”為關(guān)鍵詞獲取食滯胃腸證泄瀉相關(guān)疾病基因,以“Intestinal flora”為關(guān)鍵詞獲取人體腸道菌群相關(guān)基因.(檢索時(shí)間: 2022-11-26).

1.2.3 方-菌-疾病互作基因的確定: 利用Venny2.1.0(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/)在線分析工具對保和丸化學(xué)成分作用靶點(diǎn)基因、食滯胃腸證泄瀉疾病基因及腸道菌群相關(guān)基因進(jìn)行對比分析,繪制Venn圖,得到三者共同靶點(diǎn).

1.2.4 方-菌-疾病靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建: 將活性成分與疾病靶點(diǎn)導(dǎo)入Cytoscape 3.9.1軟件(http://www.cytoscape.org/),構(gòu)建靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò),并將結(jié)果可視化.

1.2.5 方-菌-疾病潛在靶點(diǎn)蛋白互作網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建: 將1.4項(xiàng)中的共同靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫獲取蛋白互作信息,再將結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape 3.9.1軟件進(jìn)行可視化及網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析,構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò),并篩選核心作用靶點(diǎn).

1.2.6 關(guān)鍵靶點(diǎn)富集分析: 采用DAVID數(shù)據(jù)庫(https://david.ncifcrf.gov/)上保和丸有效作用靶點(diǎn),研究對象選擇人類,進(jìn)行GO功能富集分析及可視化處理,包括生物學(xué)過程和分子功能分析;同時(shí)進(jìn)行KEGG通路富集分析,得到保和丸在食滯胃腸證泄瀉合并腸道菌群失調(diào)中的主要作用通路.

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用R4.1.2軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,采用單因素方差分析組間差異,組間兩兩比較用最小顯著性差異法,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2 結(jié)果

2.1 活性成分篩選 通過檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫、BATMANTCM數(shù)據(jù)庫結(jié)合文獻(xiàn)共收集到保和丸中化合物549個(gè).其中通過包括TCMSP數(shù)據(jù)庫檢索出半夏116個(gè),茯苓34個(gè),陳皮63個(gè),連翹150個(gè),萊菔子52個(gè).通過BATMANTCM數(shù)據(jù)庫檢索檢索到山楂化學(xué)成分94個(gè).結(jié)合CNKI相關(guān)文獻(xiàn)(1989/2022-11-26)收集神曲化學(xué)成分40個(gè).

2.2 作用靶點(diǎn)篩選 在利用TCMSP 數(shù)據(jù)庫中選取的每個(gè)活性成分對應(yīng)的靶點(diǎn),在UniProt數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行檢索,得到所有靶點(diǎn)的基因名,去除重復(fù)名后得到259個(gè)靶點(diǎn).根據(jù)GeneCards人類基因組數(shù)據(jù)庫檢索食滯胃腸證泄瀉疾病靶點(diǎn)、腸道菌群失調(diào)的治療靶點(diǎn),得到食滯胃腸證泄瀉疾病靶點(diǎn)298個(gè),腸道菌群失調(diào)靶點(diǎn)424個(gè).采用Venny平臺(tái)對相關(guān)靶點(diǎn)取交集,最終得到11個(gè),見圖1.

圖1 作用靶點(diǎn)的Vene圖.

2.3 活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò) 利用Cytoscape 3.9.1軟件將活性化合物及藥物、疾病、腸道菌群共同靶點(diǎn)導(dǎo)入軟件,構(gòu)建化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)(圖2).從圖2可以看出,過氧化物合酶2(peroxide synthase 2,PTGS2)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)腫瘤蛋白P53(oncoprotein P53,TP53)、細(xì)胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICM1)、白介素10(interleukin-10,IL-10)可能是保和丸治療食滯胃腸證泄瀉合并菌群失調(diào)的關(guān)鍵靶點(diǎn).猜測這些靶點(diǎn)在保和丸治療食滯胃腸證泄瀉合并腸道菌群中起到了橋梁作用.

圖2 活性成分-疾病靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖.BX: 半夏;CP: 為陳皮;FL: 茯苓;LQ: 連翹;SZ: 山楂;A2: 陳皮與神曲共同成分;A3、A4: 神曲與山楂共同成分.

2.4 蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 將11個(gè)交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫,限定物種為人類,相關(guān)度>0.4,剔除游離的靶點(diǎn)蛋白,獲取蛋白互作信息,得到保和丸對食滯胃腸證泄瀉合并菌群失調(diào)作用相關(guān)靶點(diǎn)蛋白互作網(wǎng)絡(luò)(圖3).通過入Cytoscape 3.9.1軟件進(jìn)行Network Analyza,Degree為10的靶點(diǎn)有TNF、IL-10、白介素6(interleukin-6,IL-6)、PTGS2、TP53、ICM1、脂聯(lián)蛋白的C1Q和膠原結(jié)構(gòu)區(qū)域(adiponectin,C1Q and collagen domain containing,ADIPOQ).對比可以發(fā)現(xiàn)2.2中的關(guān)鍵靶點(diǎn)PTGS2、TNF、TP53、ICM1、IL10均在PPI網(wǎng)絡(luò)中有所體現(xiàn),因而進(jìn)一步反映PTGS2、TNF、TP53、ICM1、IL10在保和丸調(diào)控食滯胃腸證泄瀉合并腸道菌群中分作用.

圖3 蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò).PTGS2: 氧化物合酶2;TNF: 腫瘤壞死因子;TP53:腫瘤蛋白P53;ICM1: 細(xì)胞間粘附分子-1;IL-10: 白介素10;IL-6: 白介素6;ADIPOQ: 脂聯(lián)蛋白的C1Q和膠原結(jié)構(gòu)區(qū)域;CRP: C蛋白反應(yīng);MMP2: 基質(zhì)金屬蛋白酶2;CREB1: 環(huán)磷酸腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白1;TIMP1: 基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑1.

2.5 GO功能及KEGG通路富集分析 將保和丸治療食滯胃腸證泄瀉合并菌群失調(diào)的潛在靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能和KEGG通路富集分析,GO功能富集分析包括生物過程(biological processes,BP)、細(xì)胞成分(cellular components,CC)和分子功能(molecular functions,MF)3個(gè)方面.如圖4所示,BP主要包括對平滑肌細(xì)胞增殖的正向調(diào)節(jié)及對外來生物刺激的反應(yīng)等.CC主要包括細(xì)胞外空間、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔及膠原蛋白三聚物等.MF主要包括蛋白酶綁定、組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶結(jié)合及RNA聚合酶Ⅱ序列特異性DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合等過程.KEGG富集分析顯示主要涉及TNF信號通路、IL-17信號通路、NF-κB信號通路等,見圖5.

圖4 GO富集分析.紅色: GO生物學(xué)進(jìn)程;淡藍(lán)色: GO分子功能;綠色: GO細(xì)胞成分;深藍(lán)色: Gene count計(jì)數(shù).GO: 基因本體.

圖5 KEGG富集分析.圓圈的大小表示gene count數(shù),圓圈越大表示count數(shù)值越大;顏色表示P值,顏色越紅表示顯著性越強(qiáng).KEGG: 京都基因與基因組百科全書.

3 討論

從活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的結(jié)果中可以看出,PTGS2、TNF、TP53、ICM1、IL10可能是保和丸治療食滯胃腸證泄瀉合并菌群失調(diào)的關(guān)鍵靶點(diǎn).槲皮素、漢黃芩素、山奈酚、柚皮素等是調(diào)控這些靶點(diǎn)的主要活性成分.槲皮素具有抗炎、抗癌、抗細(xì)胞凋亡和免疫保護(hù)等生物學(xué)功能,是一種廣泛地存在多種中草藥中的多羥基黃酮類化合物[6,7].張文舉等[8]通過觀察槲皮素對豚鼠離體回腸收縮活動(dòng)的影響和對小鼠小腸推進(jìn)功能的影響發(fā)現(xiàn),槲皮素能通過抑制腸道的蠕動(dòng)、抑制腸道毛細(xì)血管的通透性來發(fā)揮其止瀉作用.漢黃芩素是一種黃酮類的物質(zhì),具有抗炎、抗氧化應(yīng)激、抗腫瘤、保護(hù)神經(jīng)等多種藥理活性[9,10].研究顯示漢黃芩素可顯著緩解潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)小鼠體質(zhì)量下降,增加結(jié)腸長度,改善結(jié)腸組織中上皮黏膜炎癥細(xì)胞浸潤和巨噬細(xì)胞浸潤,發(fā)揮保護(hù)腸道黏膜屏障功能[11].山奈酚是一種來源于多種藥食同源性植物中的天然黃酮類化合物,具有行氣溫中,消食止痛之功效.此外山奈酚具有抗氧化、抗炎、抗癌和保護(hù)神經(jīng)等藥理活性[12],可增加閉鎖小帶蛋白1(zonula occludens protein-1,ZO-1)、緊密連接蛋白(Occludin)和緊密連接蛋白1抗體(Claudin-1)三種緊密蛋白的表達(dá),促進(jìn)結(jié)腸黏膜屏障完整性[13].

泄瀉是以排便次數(shù)增多,糞質(zhì)稀溏或完谷不化,甚至瀉出如水樣為主癥的病證,按照中醫(yī)對泄瀉的辨證分型可分為寒濕困脾證、腸道濕熱證、食滯胃腸證、脾氣虧虛證、腎陽虧虛證、肝氣乘脾證等6種證型[2].食滯胃腸證泄瀉常稱為食積瀉、傷食瀉,好發(fā)于小兒和脾胃功能不佳者,對這類人群的生活質(zhì)量有著重要的影響.腸道菌群是腸道微生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分,以一定比例的質(zhì)和量處于相對平衡狀態(tài),對維系人體正常生命活動(dòng)有著重要作用[14].泄瀉是一種常見的胃腸道疾病,常伴隨著菌群失調(diào),而菌群失調(diào)又會(huì)進(jìn)一步加重泄瀉.IL-10是一種抗炎因子[15],其在胃腸道中的主要作用為抑制炎癥反應(yīng)而保護(hù)胃腸道.腸道菌群對IL-10的表達(dá)有著重要的影響,Tanaka等[16]采用葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)C57BL6小鼠建立小鼠結(jié)腸炎模型,予以植物乳桿菌06CC2進(jìn)行干預(yù),發(fā)現(xiàn)IL-10表達(dá)高于對照組.ICAM1能夠介導(dǎo)體內(nèi)細(xì)胞趨化、淋巴細(xì)胞歸巢、細(xì)胞黏附等過程,是體內(nèi)參與免疫調(diào)節(jié)的重要生物活性因子.腸道菌群與ICAM1表達(dá)相關(guān)性分析結(jié)果顯示,腸道雙歧桿菌、乳桿菌與ICAM1水平呈顯著負(fù)相關(guān),腸桿菌和腸球菌與之呈顯著正相關(guān)(P<0.05)[17].腫瘤壞死因子主要由活化的單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,通過與相應(yīng)受體結(jié)合,可激活k基因結(jié)合核因(nuclear factor-k-gene binding,NF-κB)誘導(dǎo)炎癥因子表達(dá)[18].王沙沙等[19]通過腹腔注射雞源大腸桿菌建立細(xì)菌性腹瀉小鼠模型,予以蒲公英粗提物、枯草桿菌進(jìn)行治療.結(jié)果顯示模型組比較空白組小腸組織、血清中腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量有極顯著性升高(P<0.01);中藥組、益生菌組的小腸組織、血清中TNF-α含量相比模型組明顯降低(P<0.05).綜上結(jié)果顯示腸道微生物可通過調(diào)控IL10、TNF、ICAM1等基因的表達(dá)來改善腸道炎癥,促進(jìn)腸道結(jié)構(gòu)與功能恢復(fù),達(dá)到治療泄瀉的作用.

保和丸出自《丹溪心法》,具有消食導(dǎo)滯和胃的功效,是治療食滯胃腸證泄瀉的經(jīng)典方劑.中草藥防治疾病具有多成分-多靶點(diǎn)-多途徑的特點(diǎn),可直接作用于疾病靶點(diǎn),亦可通過其他途徑(如調(diào)控腸道微生物)發(fā)揮作用.筆者課題組團(tuán)隊(duì)研究發(fā)現(xiàn),保和丸水煎液可通過促進(jìn)小腸內(nèi)容物中可培養(yǎng)的乳酸菌生長、抑制可培養(yǎng)的大腸桿菌和雙歧桿菌生長的方式調(diào)節(jié)食滯胃腸證泄瀉小鼠的小腸微生態(tài).通過16S rDNA測序發(fā)現(xiàn),保和丸干預(yù)增加了鼠乳桿菌、羅伊氏粘液乳桿菌等有益菌豐度,降低了隱秘羅爾斯通菌(Ralstonia insidiosa)等機(jī)會(huì)致病菌豐度[20].活性成分是中藥發(fā)揮療效的重要物質(zhì)基礎(chǔ),在槲皮素對腸道菌群的調(diào)節(jié)作用研究發(fā)現(xiàn),在一定的濃度范圍內(nèi)(0.01 μmol/mL、0.05 μmol/mL、0.1 μmol/mL)槲皮素能夠扶植乳桿菌的增植[21].山奈酚可降低變形桿菌等致病菌相對豐度,提高厚壁菌門與擬桿菌門的比例,增加腸道菌群多樣性和豐富度,發(fā)揮緩解腸道炎癥的作用[22].

通過以上分析不難發(fā)現(xiàn)中藥能夠直接調(diào)控疾病靶點(diǎn),腸道菌群對疾病靶點(diǎn)也有調(diào)控作用,而中藥亦可作用于腸道菌群間接調(diào)控疾病靶點(diǎn),同時(shí)腸道菌群也能影響著中藥的活性成分[23].腸道菌群作為機(jī)體的一個(gè)重要“器官”,與多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),許多疾病的發(fā)生往往伴隨著腸道菌群的失調(diào).因此面對藥物、疾病、腸道菌群的復(fù)雜作用體系,如何在三者之間尋找結(jié)合點(diǎn)成為一個(gè)亟待解決的問題.網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是基于系統(tǒng)生物學(xué)、基因組學(xué)、蛋白組學(xué)等學(xué)科理論,運(yùn)用高通量組學(xué)數(shù)據(jù)分析、計(jì)算機(jī)模擬及網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫檢索等技術(shù),揭示中藥多成分、多靶點(diǎn)的作用關(guān)系[24].在許多網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)中,常常只注重中藥對疾病靶點(diǎn)的作用,而忽視腸道菌群對疾病靶點(diǎn)的作用.近些年來,有部分研究者在做網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)時(shí)也會(huì)將腸道菌群納入其中,這為研究中藥多成分-多靶點(diǎn)-多途徑貢獻(xiàn)了一種新思路.如黃浪浪等人基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討健脾化濁調(diào)脂方治療動(dòng)脈粥樣硬化合并腸道菌群失調(diào)的機(jī)制,發(fā)現(xiàn)健脾化濁調(diào)脂方能降低ApoE-/-小鼠主動(dòng)脈白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、PTGS2、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)表達(dá)[25].

4 結(jié)論

綜上所述,基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)研究顯示,保和丸治療食滯胃腸泄瀉的作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)腸道微生態(tài),恢復(fù)腸道黏膜免疫功能、修復(fù)機(jī)械屏障損傷、抑制炎癥反應(yīng)激活等有關(guān).槲皮素、漢黃芩素、山奈酚等活性物質(zhì)可能是保和丸發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎(chǔ),其關(guān)鍵調(diào)控靶點(diǎn)基因?yàn)镮L10、TNF、ICAM1、PTGS2等,涉及的信號通路主要有TNF信號通路、IL-17信號通路、NF-κB信號通路等.

文章亮點(diǎn)

實(shí)驗(yàn)背景

食滯胃腸證泄瀉是中醫(yī)泄瀉常見的六大證型之一,發(fā)病率高、病程反復(fù),對人們的生活質(zhì)量帶來很大的影響.泄瀉的發(fā)生往往伴隨著腸道菌群的失調(diào),研究證明顯示,中藥方劑能夠調(diào)節(jié)腸道菌群達(dá)到治療疾病的作用.

實(shí)驗(yàn)動(dòng)機(jī)

對保和丸治療食滯胃腸證泄瀉合并菌群失調(diào)的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制進(jìn)行預(yù)測,以期為該方的進(jìn)一步研究與應(yīng)用提供參考.

實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)

采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法,探討保和丸治療食滯胃腸證泄瀉合并腸道菌群失調(diào)的可能分子機(jī)制.

實(shí)驗(yàn)方法

通過TCMSP、BATMAN-TCM等數(shù)據(jù)庫,結(jié)合文獻(xiàn)篩選出保和丸活性成分及相應(yīng)靶點(diǎn).通過GeneCards數(shù)據(jù)庫檢索食滯胃腸證泄瀉、腸道菌群的相關(guān)靶點(diǎn),Venny平臺(tái)篩選活性成分與疾病的共同靶點(diǎn).Cytoscape 3.9.1軟件構(gòu)建疾病-靶點(diǎn)-化合物網(wǎng)絡(luò),篩選藥物靶點(diǎn)、腸道菌群靶點(diǎn)和疾病靶點(diǎn)相互作用的有效靶點(diǎn).STRING數(shù)據(jù)庫構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(protein-protein interaction,PPI)網(wǎng)絡(luò).利用DAVID數(shù)據(jù)庫對有效靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體(Gene Ontology,GO)功能分析及京都基因與基因組百科全書(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

共收集549種化學(xué)成分,根據(jù)OB≥30%及DL≥0.18,共得到45個(gè)活性成分,包括槲皮素、皮素、漢黃芩素、山奈酚、柚皮素等.Venn圖顯示保和丸活性成分中對應(yīng)259個(gè)可能蛋白靶點(diǎn),與食滯胃腸證泄瀉存在作用的靶點(diǎn)有34個(gè),與腸道菌群存在作用的有66個(gè),三者共同的靶點(diǎn)數(shù)為11個(gè),其中過氧化物合酶2(peroxide synthase 2,PTGS2)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)、腫瘤蛋白P53(oncoprotein P53,TP53)、細(xì)胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICM1)、白介素10(interleukin-10,IL-10)為關(guān)鍵靶點(diǎn).GO功能富集分析得到 121個(gè)生物過程,KEGG通路富集篩選得到49條通路,包括TNF信號通路、IL-17信號通路、NF-κB信號通路等.

實(shí)驗(yàn)結(jié)論

通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的初步篩選及預(yù)測,保和丸可能通過多途徑、多靶點(diǎn)改善食滯胃腸證泄瀉合并腸道菌群失調(diào).

展望前景

本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析了保和丸治療食滯胃腸證泄瀉合并腸道菌群失調(diào)的作用機(jī)制,篩選了藥物核心治療靶點(diǎn),有望為未來進(jìn)一步的細(xì)胞學(xué)或者動(dòng)物模型驗(yàn)證藥物生物學(xué)功能奠定了基礎(chǔ).