宋 強(qiáng)，李永鋼（內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古包頭 014010）

慢性腎病(chronic kidney disease,CKD)可發(fā)展為終末期腎病，需腎臟替代治療[1-2]。雖然腎小球?yàn)V過(guò)率能反映CKD 的疾病程度，但貧血、腦卒中等疾病可降低腎小球?yàn)V過(guò)率，影響評(píng)估準(zhǔn)確性[3]。Klotho 蛋白是參與尿磷酸鹽排泄過(guò)程的蛋白[4]。FREUNDLICH 等[5]研究發(fā)現(xiàn)，CKD 患者血清中Klotho 水平下降，有助于CKD 的早期診斷。赭曲霉毒素A（Ochratoxin A，OTA）是由青霉屬和曲霉屬菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝物，具有肝腎毒性、致畸和免疫毒性[6]。研究發(fā)現(xiàn)，CKD 患者血清OTA 水平升高，具有促進(jìn)凝血、抑制免疫等作用，促進(jìn)CKD疾病進(jìn)展[7-8]。B 細(xì)胞淋巴瘤因子3(B-cell lymphoma factor 3，Bcl-3)是IκB 家族的成員[9]。BARINOTTI等[10]發(fā)現(xiàn)，CKD 患者血清Bcl-3 表達(dá)升高，與腎纖維化程度有關(guān)，是反映CKD 疾病進(jìn)展的血清標(biāo)志物。目前CKD Ⅲ～Ⅴ期患者血清Klotho，OTA 和Bcl-3 表達(dá)的臨床意義尚不清楚。本研究通過(guò)研究CKD Ⅲ～Ⅴ期患者血清Klotho，OTA 和Bcl-3 表達(dá)與腎功能及預(yù)后的關(guān)系，為臨床診治提供參考價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象 選取內(nèi)蒙古包鋼醫(yī)院自2018 年1月～2019 年1 月期間收治的原發(fā)性CKD Ⅲ～Ⅴ期患者118 例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①CKD 的診斷符合2002 年美國(guó)國(guó)家腎臟基金會(huì)制定的K/DOQI（Kidney Disease Outcome Quality Initiative）指南中的標(biāo)準(zhǔn)[11]；②年齡≥18 歲，CKD 病史＞6 個(gè)月，估計(jì)腎小球?yàn)V過(guò)率(estimated glomerular filtration rate，eGFR）＜60ml/min；③臨床病歷資料完整；④患者無(wú)精神障礙性疾病，能夠配合相關(guān)檢查及隨訪。排除標(biāo)準(zhǔn)：①繼發(fā)性腎病，如糖尿病腎病、高血壓腎病、狼瘡性腎炎等；②eGFR ≤5 ml/min，已開(kāi)始透析的CKD 患者或預(yù)計(jì)短期內(nèi)（≤3 個(gè)月）將進(jìn)行透析治療；③伴有自身免疫性疾病，糖皮質(zhì)激素用藥史或長(zhǎng)期服用免疫抑制劑史等；④并發(fā)急性腎損傷、急性腎衰竭等疾病；⑤伴有其它腎臟疾病，如多囊腎、孤立腎等。CKD 患者病程2～13年，其中男性78 例，女性40 例；年齡45～68（58.18±3.63）歲；體質(zhì)量指數(shù)（body mass index,BMI）22.27±2.30 kg/m2；參考K/DOQI 中CKD 診斷標(biāo)準(zhǔn)[11]：CKD Ⅲ期51 例，CKD Ⅳ期47 例，CKDⅤ期20 例。以同期我院健康查體的健康者60 例為對(duì)照組，其中男性37 例，女性23 例；年齡43～67（57.74±2.30）歲；BMI 22.41±2.29 kg/m2。兩組在性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＞0.05)。患者對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書(shū)，本研究已獲得倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)。

1.2 儀器與試劑 人Klotho ELISA 試劑盒（上海梵態(tài)生物公司，貨號(hào)FT-P31156R）。OTAELISA 試劑盒（上海研域生物公司，貨號(hào)398637）。人Bcl-3 ELISA 試劑盒（上海臻科生物公司）。采用賽默飛 Varioskan LUX 酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)定。

1.3 方法

1.3.1 血清Klotho，OTA，Bcl-3 水平檢測(cè)：留取CKD 組患者治療前及對(duì)照組清晨空腹靜脈血5ml，3 000 r/min 離心10min，取血清于-20℃保存待用。采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（雙抗體夾心法）檢測(cè)血清Klotho，OTA 和Bcl-3 水平。實(shí)驗(yàn)步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔A450nm值，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度的A值，計(jì)算每孔樣品的濃度值。以血清Klotho，OTA 和Bcl-3 水平的均值2.54 mg/L，2.11 mg/L 和81.25 pmol/L為臨界值，分為Klotho高表達(dá)組（n=60）和低表達(dá)組（n=58），OTA 高表達(dá)組（n=59）和低表達(dá)組（n=59），Bcl-3 高表達(dá)組（n=60）和低表達(dá)組（n=58）。

1.3.2 觀察指標(biāo)：收集所有研究對(duì)象性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)（body mass index,BMI）、高血壓史等一般臨床資料，收集患者入院后第一天24 h 尿蛋白量、血紅蛋白、清蛋白、總膽固醇、三酰甘油、血肌酐、尿素氮、血尿酸和血磷等實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)。應(yīng)用腎臟病飲食改良研究公式(the modification of diet in renal disease equation,MDRD)計(jì)算eGFR=186×（Scr/88.4）-1.154×年齡-0.203×0742（女性）。

1.3.3 隨訪：以入組時(shí)間為起點(diǎn)，對(duì)所有CKD 患者進(jìn)行隨訪，每三個(gè)月隨訪一次，以門(mén)診或電話方式進(jìn)行隨訪，隨訪內(nèi)容為患者需要腎臟替代治療或死亡，記錄腎臟存活情況，隨訪截止時(shí)間為2022年3 月30 日。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)性分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，三組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析。用Kaplan-Meier 生存分析（Log-Rank檢驗(yàn)）血清Klotho，OTA和Bcl-3水平對(duì)CKD Ⅲ～Ⅴ期患者腎臟存活率的影響。單因素及多因素COX回歸分析影響CKD Ⅲ～Ⅴ期患者腎臟結(jié)局事件發(fā)生的因素。P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組一般資料及血清Klotho，OTA 和Bcl 3 水平比較 見(jiàn)表1。CKD 組高血壓史、血肌酐、尿素氮、血尿酸、血磷、24h 尿蛋白量、OTA 及Bcl-3高于對(duì)照組，而血紅蛋白、清蛋白、eGFR，Klotho低于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。

表1 各組一般資料及血清Klotho，OTA，Bcl-3水平比較（±s）

表1 各組一般資料及血清Klotho，OTA，Bcl-3水平比較（±s）

類(lèi)別對(duì)照組（n=60）CKD 組（n=118）t/χ2P高血壓史[n(%)]12（20.00） 45（38.14） 6.010 0.014血肌酐（μmol/L） 72.14±10.55 389.74±22.98 101.641 0.000尿素氮（mmol/L）5.19±0.92 14.46±1.02 59.197 0.000 eGFR（ml/min/1.73m2） 98.89±14.62 33.17±10.82 33.901 0.000總膽固醇（mmol/L）4.68±0.824.72±0.930.282 0.778三酰甘油（mmol/L）1.53±0.621.58±0.830.412 0.681清蛋白（g/L）48.25±1.54 39.25±1.39 39.262 0.000 24h 尿蛋白量（g/24h） 0.81±0.075.19±0.8639.330 0.000血紅蛋白（g/L）143.27±9.37 114.08±9.72 19.818 0.000血尿酸（ng/L）233.76±22.37 443.27±25.37 54.141 0.000血磷（mmol/L）1.10±0.381.42±0.424.958 0.000 Klotho（mg/L）8.24±1.302.54±0.3943.996 0.000 OTA（mg/L）0.40±0.132.11±0.4032.111 0.000 Bcl-3（pmol/L）48.14±10.28 81.25±13.67 16.526 0.000

2.2 不同CKD 分期患者血清Klotho，OTA 和Bcl-3水平比較 見(jiàn)表2。不同CKD 分期患者血清Klotho，OTA 和Bcl-3 比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。CKD 分期越高，血清Klotho 越低，血清OTA，Bcl-3 越高。CKD Ⅴ期患者血清Klotho，OTA 和Bcl-3 水平明顯高于CKD Ⅳ期和CKD Ⅲ期患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=20.147,28.709,9.433,13.920; 11.287,15.545,均P=0.000）。CKD Ⅳ期患者血清Klotho,OTA 和Bcl-3 水平明顯高于CKD Ⅲ期患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=10.858,5.709,5.381,均P=0.000）。

表2 不同CKD 分期患者血清Klotho，OTA，Bcl 3 水平比較（±s）

項(xiàng)目CKD Ⅲ期（n=51）CKD Ⅳ期（n=47）CKD Ⅴ期（n=20）FP Klotho（mg/L）3.13±0.372.53±0.411.06±0.37206.0710.000 OTA（mg/L）1.80±0.382.13±0.412.85±0.4548.5440.000 Bcl-3（pmol/L）71.49±10.6180.90±12.66106.96±14.8760.4460.000

2.3 血清Klotho，OTA，Bcl 3 與腎功能指標(biāo)的相關(guān)性 見(jiàn)表3。CKD 組患者中，血清Klotho 與eGFR 呈顯著正相關(guān)（r=0.627），血清OTA，Bcl-3與eGFR 呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.537，-0.489，均P＜0.05）。血清Klotho 表達(dá)與OTA，Bcl-3 表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.689，-0.703，均P＜0.05）。

表3 血清Klotho，OTA，Bcl-3 與腎功能指標(biāo)的相關(guān)性

2.4 血清Klotho，OTA 和Bcl 3 水平對(duì)CKD Ⅲ～Ⅴ期患者的預(yù)后影響 隨訪6～36 個(gè)月，平均隨訪時(shí)間21.58±6.12 個(gè)月，47 例患者發(fā)生腎臟結(jié)局事件，腎臟存活71 例，腎臟存活率為60.17%（71/118）。低Klotho 組腎臟存活率為44.83%（26/58），低于高Klotho 組的75.00%（45/60）,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Log rankχ2=6.988，P=0.008）；高OTA 組腎臟存活率為40.68%（24/59），低于低OTA 組的79.66%（47/59），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Log rankχ2=7.247，P=0.000）；高Bcl-3 組腎臟存活率為46.67%（28/60），低于低Bcl-3 組的74.14%（43/58），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Log rankχ2=7.198，P=0.000），見(jiàn)圖1。

圖1 Kaplan Meier 曲線分析血清Klotho，OTA，Bcl 3 對(duì)腎臟存活率的影響

2.5 單因素及多因素COX 回歸分析影響腎臟結(jié)局事件的因素 見(jiàn)表4，5。24h 尿蛋白量升高，eGFR 降低、血清Klotho 降低，OTA 升高，Bcl-3升高是影響CKD Ⅲ～Ⅴ期患者腎臟結(jié)局事件發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

表4 單因素COX 回歸分析影響腎臟結(jié)局事件發(fā)生的因素

表5 多因素COX 回歸分析影響腎臟結(jié)局事件發(fā)生的因素

3 討論

我國(guó)CKD 疾病負(fù)擔(dān)重，患病率約為10.8%，其中CKD Ⅲ～Ⅴ期患病率相對(duì)較低，但更容易進(jìn)展為終末期腎病，需要接受腎臟替代治療維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定[12]。目前CKD 尚無(wú)有效的防治手段，早診斷、早治療及預(yù)后預(yù)測(cè)對(duì)于提高CKD 患者的腎臟存活率至關(guān)重要。CKD 的病因多樣，包括高血壓、糖尿病及急性腎損傷等已知病因，也可由環(huán)境中的有毒物質(zhì)等因素導(dǎo)致。各種因素引起腎內(nèi)外細(xì)胞的氧化應(yīng)激、炎癥性損傷，導(dǎo)致腎間質(zhì)中成纖維細(xì)胞的活化、腎小球硬化等病理改變，促進(jìn)CKD 向終末期腎病的發(fā)展。深入研究CKD 的病因及疾病機(jī)制，識(shí)別CKD 尤其是CKD Ⅲ期以上患者腎功能進(jìn)展的危險(xiǎn)因素，有助于臨床早期識(shí)別高?；颊?。

Klotho 蛋白是一種單跨膜蛋白，其細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域可以被金屬蛋白酶切割釋放到血清、尿液和腦脊液等體液中被檢測(cè)到。功能上，Klotho 是一種腎臟保護(hù)因子，參與維持鈣磷平衡調(diào)節(jié)，并作為一種抗炎因子抑制腎纖維化發(fā)揮其保護(hù)腎功能的生物學(xué)效應(yīng)[13]。本研究中，CKD 患者血清Klotho 水平降低，這與FREUNDLICH 等[5]學(xué)者研究報(bào)道一致，該研究證實(shí)在CKD 患者早期即出現(xiàn)血清和尿液中Klotho 水平降低，是早期診斷CKD 的生物標(biāo)志物。CKD 中Klotho 水平降低的機(jī)制可能與轉(zhuǎn)錄后調(diào)控異常有關(guān)。MENCKE 等[14]發(fā)現(xiàn)，多種有害刺激誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞損傷后，無(wú)義mRNA 降解因子能夠促進(jìn)Klothom RNA 降解，導(dǎo)致Klotho 蛋白的翻譯和分泌減少。本研究發(fā)現(xiàn)，CKD 分期越高，血清Klotho 水平降低更為明顯，提示血清Klotho水平能夠反映CKD 疾病嚴(yán)重程度。LIU 等[15]發(fā)現(xiàn)，Klotho 作為成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23 受體的共受體，其表達(dá)下調(diào)抑制成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23 及下游細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2 通路，導(dǎo)致磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)缺失，近端腎小管上皮細(xì)胞不能排泄磷酸鹽，導(dǎo)致血磷升高，加重腎功能損傷。此外，Klotho 的表達(dá)降低能夠促進(jìn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 結(jié)合到轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β Ⅱ受體，誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)腎纖維化[16]。本研究發(fā)現(xiàn)，Klotho 低表達(dá)的CKD 患者腎臟存活率較低，并且Klotho 低表達(dá)是CKD Ⅲ～Ⅴ期患者發(fā)生腎結(jié)局事件的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，表明檢測(cè)血清Klotho 水平有助于判斷CKD Ⅲ～Ⅴ期患者的臨床預(yù)后，可能是新的預(yù)后判斷的血清標(biāo)志物。FREUNDLICH 等[5]學(xué)者報(bào)道，通過(guò)外源性的補(bǔ)充Klotho 或內(nèi)源性過(guò)表達(dá)Klotho 能夠抑制腎臟纖維化的發(fā)生，延緩CKD 的疾病進(jìn)展。因此，以Klotho 為靶點(diǎn)的臨床治療可能有助于延緩CKD Ⅲ～Ⅴ期患者的疾病進(jìn)展，增加腎臟存活率，減少腎結(jié)局事件的發(fā)生，是潛在的臨床治療方案，值得深入研究。

OTA 作為一種真菌毒素，進(jìn)入機(jī)體后主要在胃和近端空腸被吸收，未吸收的OTA 可以到達(dá)后腸與腸道菌群相互作用，產(chǎn)生有毒代謝產(chǎn)物，對(duì)腎功能造成損傷[17]。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，血清OTA 在腎結(jié)石、慢性腎衰竭及透析患者中表達(dá)升高，其表達(dá)升高通過(guò)激活核因子kB 通路，誘導(dǎo)促炎癥微環(huán)境，加重腎臟炎癥病理?yè)p傷[8]。本研究中，CKD 患者血清OTA 顯著升高，其原因一方面是CKD 患者胃腸道黏膜上皮細(xì)胞功能障礙，腸黏膜上皮細(xì)胞完整性破壞、黏液屏障的喪失及腸道菌群失調(diào)，均導(dǎo)致OTA 吸收增加[18]。另一方面，由于腎臟是OTA 的主要排泄器官，CKD 患者腎小球?yàn)V過(guò)率的下降導(dǎo)致血清OTA 水平的升高。本研究中，CKD 分期越高，血清OTA 水平升高越明顯，提示血清OTA 升高與CKD 疾病嚴(yán)重程度有關(guān)。其機(jī)制是OTA 能夠激活腎纖維化基因如α-SMA及波形蛋白等的表達(dá)，促進(jìn)腎纖維化的發(fā)生，加重腎功能損傷[19]。此外，OTA 還能夠通過(guò)激活NOD 樣受體3 炎癥小體，促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞焦亡，白介素1β 及白介素18 等大量促炎細(xì)胞因子釋放，加重腎臟炎癥反應(yīng)，促進(jìn)腎臟功能的惡化[19]。本研究進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)血清OTA 高表達(dá)CKD 患者腎臟存活率較低，提示檢測(cè)血清OTA 水平有助于CKD Ⅲ～Ⅴ期患者預(yù)后預(yù)測(cè)。DU 等[20]在腎小球系膜細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞中進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)無(wú)毒濃度的OTA（0.25 mg/kg）能夠激活轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1/SMAD家族成員2 通路，加重阿霉素的細(xì)胞毒性及腎纖維化的發(fā)生，并在小鼠腎病模型進(jìn)一步證實(shí)，OTA 增加了腎病小鼠中纖維化因子、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白和波形蛋白的表達(dá)，誘導(dǎo)的腎纖維化加重，腎損傷加重。因此，血清OTA 是一種新的CKD Ⅲ～Ⅴ期患者預(yù)后相關(guān)血清標(biāo)志物，值得臨床關(guān)注。

Bcl-3 編碼基因位于19q13.32，編碼蛋白是一種轉(zhuǎn)錄共激活因子，通過(guò)結(jié)合核因子kB，發(fā)揮調(diào)控下游靶基因表達(dá)的作用，廣泛參與炎癥、腫瘤及CKD 等疾病的病理生理學(xué)過(guò)程[10,21]。本研究發(fā)現(xiàn)，CKD 患者血清Bcl-3 表達(dá)升高，其機(jī)制尚不清楚，可能是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 信號(hào)通路的激活促進(jìn)Bcl-3 表達(dá)。BARINOTTI 等[10]學(xué)者在單側(cè)輸尿管梗阻的動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn)，在腎梗阻纖維化早期，腎小管上皮細(xì)胞損傷凋亡后Bcl-3 釋放到血清中，導(dǎo)致血清Bcl-3 水平升高。此外，梗阻腎組織中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 表達(dá)升高能夠促進(jìn)Bcl-3 的表達(dá)，導(dǎo)致下游腎纖維化基因如α-平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)上調(diào)，導(dǎo)致腎功能惡化[10]。本研究中，血清Bcl-3 水平與CKD 疾病嚴(yán)重程度有關(guān)，且與eGFR 呈顯著正相關(guān)，與BARINOTTI 等[10]學(xué)者報(bào)道一致，提示血清Bcl-3 水平升高參與促進(jìn)CKD 的疾病進(jìn)展。Bcl-3 能夠通過(guò)激活轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 信號(hào)通路的傳導(dǎo)，促進(jìn)腎纖維化。CARR 等[22]研究發(fā)現(xiàn)，Bcl-3與SMAD 家族成員3 結(jié)合并保護(hù)SMAD 家族成員3 免于泛素化和降解，進(jìn)而激活轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β 信號(hào)通路，促進(jìn)腎小管細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及腎間質(zhì)纖維化，導(dǎo)致CKD 疾病進(jìn)展。本研究中，血清Bcl-3 高表達(dá)CKD 患者腎臟存活率較低，是影響腎結(jié)局事件發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。因此，Bcl-3 是一種新的反映CKD 疾病進(jìn)展的血清標(biāo)志物，有助于評(píng)估CKD Ⅲ～Ⅴ期患者的臨床預(yù)后。本研究中，血清Klotho 與OTA，Bcl-3 表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)。研究表明，核因子kB 能夠抑制腎小管上皮細(xì)胞Klotho 的表達(dá)，而B(niǎo)cl-3 作為核因子kB 的輔因子，在促炎因子的刺激下能夠增強(qiáng)核因子kB 的表達(dá)及活性，進(jìn)而抑制Klotho 的表達(dá)[23]。此外，OTA 的腎毒性損傷腎小管上皮細(xì)胞，并促進(jìn)白介素1β，白介素-6 等促炎因子的釋放，而這些促炎因子能夠激活核因子E2 相關(guān)因子2，抑制抗衰老因子Klotho 的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞衰老[24]。但三者之間的關(guān)系及在CKD 中的作用機(jī)制有待今后深入探索。

綜上所述，CKD Ⅲ～Ⅴ期患者血清Klotho 水平降低，OTA 和Bcl-3 水平升高，血清Klotho，OTA 和Bcl-3 水平與eGFR 有關(guān)，有助于反映CKDⅢ～Ⅴ期患者疾病嚴(yán)重程度。血清 Klotho 降低，OTA 升高，Bcl-3 升高是影響CKD Ⅲ～Ⅴ期患者腎臟結(jié)局事件發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，為預(yù)后評(píng)估提供參考價(jià)值。但本研究樣本量有限，未對(duì)CKD Ⅲ～Ⅴ期患者進(jìn)行分層分析，有待今后設(shè)計(jì)多中心臨床試驗(yàn)，擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步驗(yàn)證本研究的結(jié)論。