周旋,喬逸,王丹,劉小剛,孫世仁,蘇慧*

(空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院:1老年病科,2藥劑科,3中醫(yī)科,5腎臟內(nèi)科,西安710032;4空軍軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科,西安710038)

2022年4月,上海出現(xiàn)新一輪新型冠狀病毒感染(coronavirus disease 2019, COVID-19)疫情。病毒測序顯示為奧密克戎變異株BA.2型和BA.2.2型,傳播力更強(qiáng),更容易突破疫苗防線[1]。研究報道,益生菌可通過腸-肺軸影響免疫功能,提高COVID-19患者病毒清除率[2,3],然而益生菌對奧密克戎變異株的作用目前尚不清楚。上海國家會展中心方艙醫(yī)院三分院病區(qū)收治的部分輕型患者在常規(guī)治療基礎(chǔ)上接受了益生菌輔助治療,本研究首次觀察益生菌制劑對方艙醫(yī)院COVID-19輕型患者病程的影響。

1 對象與方法

1.1 研究對象

回顧性分析2022年5月2日至12日于上海國家會展中心方艙醫(yī)院三分院病區(qū)收治的COVID-19輕型患者的病歷資料。診斷、分型及出院標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第九版)》[4]。疑似病例具備以下病原學(xué)或血清學(xué)證據(jù)之一者可確診:(1)新型冠狀病毒核酸檢測陽性;(2)未接種新型冠狀病毒疫苗者新型冠狀病毒特異性免疫球蛋白M(immunoglobulin M, IgM)和免疫球蛋白G(immunoglobulin G, IgG)均為陽性。同時達(dá)到以下3條標(biāo)準(zhǔn)者可出院:(1)體溫恢復(fù)正常3d以上;(2)呼吸道癥狀明顯好轉(zhuǎn);(3)連續(xù)2次新型冠狀病毒核酸檢測N基因和ORFlab基因的循環(huán)閾值(cycle threshold, Ct)均≥35(熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法,界限值為40,采樣時間至少間隔24h)。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)診斷為COVID-19輕型;(2)年齡≥18歲。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)伴有其他急性疾病或慢病急性加重;(2)妊娠期和哺乳期婦女。輕型患者指臨床癥狀輕微,影像學(xué)未見肺炎表現(xiàn)的患者。

1.2 方法

共納入患者133例,分為成年(18～59歲)和老年(≥60歲)兩個年齡段,各年齡段內(nèi)患者根據(jù)是否接受了益生菌輔助治療分為對照組和益生菌組。成年段共79例,其中對照組40例,益生菌組39例;老年段共54例,其中對照組28例,益生菌組26例。對照組患者接受了與癥狀相應(yīng)的對癥治療,包括連花清瘟顆粒、荊銀固表方、銀黃含片、復(fù)方甘草合劑、蒙脫石散、黃連素等;益生菌組患者在對癥治療基礎(chǔ)上接受了益生菌輔助治療。益生菌輔助治療方法:枯草桿菌二聯(lián)活菌腸溶膠囊(美常安,250mg/粒,含活菌5億個,其中包括屎腸球菌4.5×108個和枯草桿菌5.0×107個)口服,3次/d,每次2粒,入院當(dāng)天開始服用,療程7d,住院時間短于7d的患者用至出院。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)核酸轉(zhuǎn)陰時間,指從入院前核酸篩查陽性到住院后核酸轉(zhuǎn)陰的時間;(2)住院天數(shù);(3)ORFlab基因清除速率,指Ct值≥35的連續(xù)2次核酸檢測中第1次的ORFlab基因Ct值與入院首次核酸檢測Ct值之差值除以間隔天數(shù);(4)N基因清除速率,指Ct值≥35的連續(xù)2次核酸檢測中第1次的N基因Ct值與入院首次核酸檢測Ct值之差除以間隔天數(shù);(5)治療7d后主要癥狀緩解情況。

1.4 病歷資料采集

采用excel軟件從病例系統(tǒng)摘錄患者性別、年齡、合并癥、疫苗接種、入院前核酸陽性天數(shù)、癥狀、用藥、核酸檢測結(jié)果等信息,并進(jìn)行雙人校對。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 各年齡段對照組和益生菌組基線資料比較

各年齡段對照組和益生菌組的性別、年齡、合并癥、疫苗接種、癥狀和用藥情況等均衡性良好,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(表1),具有可比性。

表1 各年齡段對照組和益生菌組基線資料比較

2.2 觀察指標(biāo)比較

成年對照組中因出現(xiàn)肺炎表現(xiàn)轉(zhuǎn)至其他病區(qū)患者1例,其余患者均轉(zhuǎn)陰出院。成年段對照組和益生菌組核酸轉(zhuǎn)陰時間、住院天數(shù)、ORFlab基因及N基因清除速率比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。老年段益生菌組核酸轉(zhuǎn)陰時間、住院天數(shù)均短于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05);ORFlab基因及N基因清除速率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(表2)。

表2 各年齡段對照組和益生菌組間核酸轉(zhuǎn)陰時間、住院天數(shù)、ORFlab基因及N基因清除速率比較

治療7d后各年齡段對照組和益生菌組間主要癥狀緩解比例的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(表3)。

表3 各年齡段對照組和益生菌組主要癥狀緩解比例的比較

2.3 核酸轉(zhuǎn)陰Kaplan-Meier曲線

成年段對照組中位轉(zhuǎn)陰時間為7.0d,益生菌組為6.0d,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Log-rankχ2=0.761,P=0.383);老年段對照組中位轉(zhuǎn)陰時間為11.0d,益生菌組為8.0d,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(Log-rankχ2=10.107,P=0.001;圖1)。

圖1 各年齡段對照組和益生菌組累積核酸陽性率

2.4 成年段與老年段間核酸轉(zhuǎn)陰時間比較

成年患者共79例,老年患者共54例,核酸轉(zhuǎn)陰時間分別為7.0(5.0,9.0)d和10.0(7.0,12.0)d,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3 討 論

本研究結(jié)果顯示老年段益生菌組核酸轉(zhuǎn)陰時間短于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,成年段2組轉(zhuǎn)陰時間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,提示益生菌制劑對老年奧密克戎變異株COVID-19輕型患者核酸轉(zhuǎn)陰有促進(jìn)作用,而對成年患者無明顯影響。兩個年齡段中,主要癥狀緩解情況在對照組和益生菌組間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義,但由于有癥狀的例數(shù)少,檢驗(yàn)效能低,癥狀緩解率的比較結(jié)果存疑,不能確定益生菌是否對癥狀緩解起作用。

目前COVID-19主要流行毒株依然是奧密克戎[4]。與德爾塔毒株相比,奧密克戎具有顯著的增殖優(yōu)勢,導(dǎo)致傳播迅速,發(fā)病率更高[5]。以往臨床研究結(jié)果顯示,接受雙歧桿菌治療的COVID-19患者,血清白細(xì)胞介素-6水平下降,死亡率從25%下降至5%[6]。補(bǔ)充益生菌不僅可定植并黏附在腸上皮表面,直接阻斷病毒附著[7],而且可通過觸發(fā)抗病毒免疫促進(jìn)病毒清除[8]。復(fù)合益生菌可顯著減少COVID-19患者鼻咽部病毒載量、肺部浸潤以及消化道和非消化道癥狀的持續(xù)時間,提高病毒清除率[9],使呼吸衰竭的發(fā)生風(fēng)險降低了8倍[10]。

益生菌使COVID-19患者獲益的機(jī)制目前尚不清楚,腸-肺軸可能在其中發(fā)揮重要作用[2,3]。宏基因組測序結(jié)果顯示,COVID-19患者腸道微生物組中有益菌(如糞桿菌等)豐度明顯降低[11],而且會導(dǎo)致病菌(如黏性放線菌等)增加[12]。補(bǔ)充益生菌有助于恢復(fù)腸道微生物組平衡,維持腸道屏障功能。益生菌還具有調(diào)節(jié)免疫、抗炎、抗氧化作用[13]。Gutiérrez-Castrellón等[9]發(fā)現(xiàn)益生菌補(bǔ)充劑顯著增加了針對新型冠狀病毒的特異性IgM和IgG,而糞便微生物群成分沒有顯著變化,提示益生菌主要通過調(diào)節(jié)宿主免疫系統(tǒng)發(fā)揮作用。因此,益生菌有可能成為COVID-19的預(yù)防或治療策略[14]。

本研究中老年患者核酸中位轉(zhuǎn)陰時間在益生菌組較對照組縮短3d,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。老年人合并慢病多,腸道微生物群失調(diào),免疫系統(tǒng)功能衰退[15],細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)能力受損,存在全身低度炎癥狀態(tài)和大量循環(huán)促炎細(xì)胞因子[16]。炎癥反應(yīng)在導(dǎo)致“細(xì)胞因子風(fēng)暴”的過程中起關(guān)鍵作用,老年COVID-19更容易向重型轉(zhuǎn)化[17]。老年人腸道屏障功能降低,腸道菌群失調(diào),因此有消化道癥狀的老年COVID-19患者較多,腸-肺軸的調(diào)節(jié)機(jī)制也受到影響。補(bǔ)充益生菌后,腸道菌群得到一定程度調(diào)節(jié),屏障功能提高,通過免疫調(diào)節(jié)影響腸-肺軸的作用,進(jìn)而調(diào)節(jié)呼吸道微生物群,促進(jìn)呼吸道病毒清除,另外益生菌可能通過免疫調(diào)節(jié)作用提高了體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答水平,從而加快病毒的清除。成年患者中益生菌組核酸轉(zhuǎn)陰時間短于對照組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。益生菌對成年患者的作用不明顯,可能因?yàn)槌赡耆藱C(jī)體免疫系統(tǒng)功能較強(qiáng),自身的免疫應(yīng)答足以應(yīng)對新冠病毒的侵襲,腸道微生物群平衡狀態(tài)良好,屏障功能多正常,腸道微生物群通過腸-肺軸對呼吸道微生物群的調(diào)節(jié)作用受影響較小,因此補(bǔ)充益生菌后作用不明顯。本研究中成年患者整體中位轉(zhuǎn)陰時間明顯短于老年患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,這也印證了以上觀點(diǎn)。

老年患者中,益生菌組ORFlab基因和N基因清除速率也大于對照組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義?？赡苡幸韵略?(1)Ct值是基因擴(kuò)增的循環(huán)閾值,是一個指數(shù)概念,本研究將其簡化為線性,取2次Ct值之差除以天數(shù)作為基因清除速率,能夠反映核酸轉(zhuǎn)陰趨勢,但并非實(shí)際的速率值,可能對結(jié)果造成一定影響;(2)本研究篩選出的病例數(shù)較少,檢驗(yàn)效能不夠高,以至結(jié)果雖有差異但無統(tǒng)計學(xué)意義。

目前關(guān)于益生菌對COVID-19影響的相關(guān)研究不多,方艙醫(yī)院內(nèi)接受益生菌輔助治療的COVID-19患者有限。受方艙醫(yī)院條件限制,輕型患者除核酸檢測外未做其他實(shí)驗(yàn)室檢查,無法收集更多數(shù)據(jù)資料。未來需開展樣本量更大、設(shè)計更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)那罢靶匝芯?驗(yàn)證本研究的發(fā)現(xiàn),并進(jìn)一步評估益生菌對COVID-19患者腸道微生物組穩(wěn)態(tài)的影響,以及對免疫功能和腸黏膜炎癥的作用。

綜上,益生菌制劑對老年奧密克戎變異株COVID-19輕型患者具有較好的臨床療效,能顯著縮短患者的核酸轉(zhuǎn)陰時間,可以作為COVID-19的一種臨床輔助治療,更好地促進(jìn)老年輕型患者恢復(fù)健康。