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        振腹手法對抑郁癥大鼠模型的干預(yù)機制研究

        2023-08-02 09:48:52周可林魏培棟付國兵楊靖頤
        世界中醫(yī)藥 2023年11期
        關(guān)鍵詞:氟西汀糖水造模

        周可林 董 碩 國 生 魏培棟 付國兵 楊靖頤

        (1 北京中醫(yī)藥大學(xué),北京,100029; 2 北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院,北京,100078)

        抑郁癥以其高患病率、高復(fù)發(fā)率、高致殘率、高自殺傾向的特點,成為全世界醫(yī)學(xué)界亟待解決的問題,目前抗抑郁的治療方法主要以抗抑郁藥物治療為主。中醫(yī)認為抑郁癥屬于“郁病”的范疇,目前認為肝郁脾虛證是抑郁癥最常見的中醫(yī)證型[1-2]。有研究發(fā)現(xiàn),肝郁脾虛的抑郁癥模型大鼠骨骼肌中線粒體含量減少,且線粒體的形狀結(jié)構(gòu)也存在異常,因而導(dǎo)致骨骼肌線粒體的功能出現(xiàn)異常,并認為這可能與抑郁癥的低動力癥狀相關(guān)[3]。前期研究發(fā)現(xiàn)振腹推拿可以明顯改善抑郁癥患者的癥狀評分,對于患者的情緒低落、精力減退等癥狀有明顯的改善作用[4]。因此本研究擬通過慢性不可預(yù)見性溫和應(yīng)激(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)方法建立抑郁癥大鼠模型,探究振腹推拿手法對于抑郁癥模型大鼠骨骼肌組織炎癥介質(zhì)白細胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、腫瘤壞死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)的含量,沉默信息調(diào)節(jié)因子1(SilenceInformation Regulator 1,SIRT1)、過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活物-1α(Peroxisome Proliferator-activated Receptor Gamma Coactivator-1α,PCG-1α)、核因子κB(Nuclear Factor-κB,NF-κB)的蛋白及信使核糖核酸(messenger RNA,mRNA)含量的調(diào)節(jié)作用,分析振腹推拿改善抑郁癥骨骼肌組織炎癥損傷的干預(yù)作用機制。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 動物 健康雄性無特定病原體(Specific Pathogen Free,SPF)級SD大鼠32只,10周齡,體質(zhì)量(330±20)g,購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司,許可證號:SCXK(京)2012-0001。所有大鼠在北京中醫(yī)藥大學(xué)動物房(SPF級)中飼養(yǎng),室溫(21±2)℃,相對濕度30%~40%,光照保持正常晝夜節(jié)律,并且飼養(yǎng)環(huán)境保持安靜。實驗全過程在北京中醫(yī)藥大學(xué)動物倫理委員會的監(jiān)督下完成(倫理審批號:BUCM-4-201911260 2-4049)。

        1.1.2 藥物 鹽酸氟西汀膠囊(禮來蘇州制藥有限公司,國藥準字:J20170022)。

        1.1.3 試劑與儀器 蛋白提取液(貨號:MDL91201)、蛋白酶抑制劑(貨號:MD912893)、二抗(貨號:MD932477),均購自北京Medical Discovery Leader公司;核因子κB一抗(貨號:AF5006)、SIRT1一抗(貨號:DF6033)、PCG-1α一抗(貨號:AF5395),均購自江蘇親科生科研究中心有限公司;IL-1β酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(武漢Elabscience公司,貨號:E-EL-R0012 c);IL-8酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(上海Thermo Fisher公司,貨號:KAC1301);IL-4酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(貨號:SEA077Ra)、IL-6酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(貨號:SEA079Ra)、IL-10酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(貨號:SEA056Ra)、TNF-α化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒(貨號:SCA133Ra),均購自武漢cloud-clone corp公司。

        分光光度儀(Mettler Toledo,瑞士,型號:UV5);電泳儀(北京百晶生物技術(shù)有限公司,型號:BG-subMIDI);離心機(Eppendorf公司,德國,型號:Centrifuge5415D);凝膠成像儀(Bio-rad,美國,型號:GelDoc Go);實時熒光定量PCR儀(Applied biosystems,美國,型號:QuantStudio 3);全波長掃描酶標儀(Thermo Scientific,美國,型號:Multiskan GO51119200)。

        1.2 方法

        1.2.1 分組與模型制備 適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,從32只大鼠隨機選取8只作為正常組,正常飼養(yǎng),不進行任何干預(yù),其余3組大鼠采用CUMS方法建立抑郁癥大鼠模型。造模刺激包括束縛3 h、45 ℃熱烘5 min、孤籠飼養(yǎng)24 h、陌生物體刺激24 h、85 dB白噪聲5 h、45°籠具傾斜24 h、夾尾1 min、禁食禁水24 h等。按照隨機數(shù)字表法分配,使大鼠不能預(yù)料刺激的發(fā)生,造模共持續(xù)7周[5]。在造模第3周末將造模的24只大鼠隨機分為模型組、振腹組、氟西汀組,每組8只。

        1.2.2 干預(yù)方法 造模完成后開始進行手法和藥物干預(yù),正常組不進行CUMS造模刺激,按照1 mL/100 g給予去離子水灌胃,1次/d,共計4周;模型組進行CUMS造模刺激,以1 mL/100 g去離子水灌胃,1次/d,共4周;振腹組進行CUMS造模刺激,進行振腹推拿手法干預(yù),1次/d,共4周;氟西汀組進行CUMS造模刺激,同時給予氟西汀懸濁液灌胃,根據(jù)成人服用20 mg/d氟西汀換算,給藥量為2.083 mg/100 g體質(zhì)量,灌胃總量為11 mL/100 g,1次/d,共4周。振腹推拿操作方法:以神闕穴為中心,行三指振腹手法15 min,頻率300次/min(神闕穴定位:參考《實驗針灸學(xué)》《實驗推拿學(xué)》及相關(guān)文獻,以劍突至恥骨聯(lián)合上緣上2/3與下1/3交界處為穴)。

        1.2.3 標本采集 于第7周末完成干預(yù)和行為學(xué)實驗結(jié)束后處死大鼠并進行組織取材。處死方法:給予3%戊巴比妥鈉40 mg/kg腹腔注射麻醉后斷頭處死,剝離雙下肢腓腸肌-80 ℃保存?zhèn)溆?。分別檢測炎癥介質(zhì)IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α的含量,SIRT1、PCG-1α、核因子κB蛋白及mRNA的含量。

        1.3 檢測指標與方法

        1.3.1 宏觀表征 每天觀察各組大鼠的精神狀態(tài)、皮毛的光澤度、給予不同刺激時產(chǎn)生的反應(yīng)劇烈程度以及便質(zhì)等情況,觀察各組大鼠中這些表現(xiàn)是否隨著造模時間的推移發(fā)生了明顯的變化。

        1.3.2 糖水偏好實驗 在造模及干預(yù)結(jié)束后,先對大鼠進行糖水訓(xùn)練,共3 d。第1天給予每只大鼠2瓶糖水,訓(xùn)練持續(xù)時間為24 h,第2天將其中1瓶糖水換成去離子水,訓(xùn)練時間同樣為24 h。2次糖水訓(xùn)練結(jié)束之后,第3天給予每組大鼠禁食禁水24 h處理,之后正式進行糖水偏好實驗。準備與大鼠數(shù)量相等的糖水瓶和去離子水瓶,并相應(yīng)裝入一定量的糖水和去離子水,然后對糖水瓶和去離子水瓶進行稱重和編號,將每只大鼠單獨放入1個小籠,然后每只大鼠分別給予1瓶糖水和1瓶去離子水,1 h后將糖水瓶和去離子水瓶取下,稱量剩余量,計算出實驗前后糖水瓶和去離子水瓶的重量變化。糖水消耗率=糖水消耗量/(糖水消耗量+去離子水消耗量)×100%。

        1.3.3 強迫游泳實驗 強迫游泳實驗分為2步進行,首先在實驗前1 d將每只大鼠單獨放入1個透明玻璃圓筒中(直徑40 cm,高50 cm),其中倒入(22±1)℃常溫純水,水深20 cm,使其游泳15 min作為正式實驗前的訓(xùn)練。訓(xùn)練完成24 h后進行正式實驗,保持實驗環(huán)境安靜,測試時將大鼠頭部正面朝壁緩慢放入塑料桶內(nèi)使其自由游泳6 min,以大鼠放棄掙扎、露出口鼻、保持漂浮所需的最小運動外肢體的停止運動作為不動標準,用秒表記錄大鼠停止掙扎不動或無任何活動的時間,每只大鼠強迫游泳6 min,其中包括適應(yīng)性游泳1 min,記錄后5 min內(nèi)大鼠的累計不動時間(s),并且在每只大鼠游泳之后進行換水,以免對下1只大鼠行為有影響。通過該試驗?zāi)M抑郁癥核心癥狀之一的“行為絕望”。

        1.3.4 曠場實驗 在操作間的正中放置曠場箱,曠場箱高40 cm,底邊長50 cm,底面平均分為25個小方格,中央9個小格為中央?yún)^(qū)。根據(jù)曠場箱正中格的位置,在其正上方安置攝像頭并連接電腦錄像,使整個曠場區(qū)域能夠清晰地出現(xiàn)在視野中,并對操作間進行避光處理,實驗期間保持安靜。先將大鼠放置于操作間的黑暗環(huán)境中適應(yīng)5~10 min。開始實驗時將大鼠從籠子中拿出放在曠場箱的正中格內(nèi),同時計時并開始錄像,觀察并記錄5 min內(nèi)大鼠活動情況。5 min后取出大鼠,先用衛(wèi)生紙把大鼠遺留的尿液和糞便擦拭干凈,最后用毛巾蘸低濃度乙醇徹底擦拭箱底,消除上1只大鼠遺留氣味后,將下1只大鼠按照以上步驟處理。運用Etho Vision 3.0行為學(xué)分析軟件對各組大鼠的運動情況進行分析,所統(tǒng)計觀察的內(nèi)容包括總運動距離、中央?yún)^(qū)進入次數(shù)、中央停留時間以及穿格次數(shù)。

        1.3.5 酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測炎癥介質(zhì)含量 取適量組織塊,制備細胞裂解液,4 ℃條件下1 000×g,離心20 min,分別設(shè)標準孔、待測樣品孔、空白孔。依次加入不同濃度的標準品及稀釋液,余孔加待測樣品100 μL,37 ℃溫育1 h。每孔加檢測溶液A工作液100 μL,37 ℃溫育1 h。棄去孔內(nèi)液體,每孔用350 μL的洗滌液洗滌,浸泡1~2 min,重復(fù)洗板3次。每孔加檢測溶液B工作液100 μL,37 ℃溫育30 min。每孔加TMB底物溶液90 μL,37 ℃避光顯色。加終止溶液終止反應(yīng)。450 nm波長測量各孔的光密度值(Optical Density,OD)。

        1.3.6 蛋白質(zhì)印跡法檢測蛋白表達 取組織裂解提取蛋白,BCA試劑盒測定蛋白含量;取30 μL蛋白電泳分離,轉(zhuǎn)至聚偏二氟乙烯(Polyvinylidene Fluoride,PVDF)膜,脫脂奶粉封閉1 h;加入對應(yīng)一抗,4 ℃孵育過夜;加入二抗孵育1 h,TBST緩沖液清洗;電致化學(xué)發(fā)光(Electrochemiluminescence,ECL)顯影,以β-機動蛋白為內(nèi)參計算蛋白相對表達。

        1.3.7 實時熒光定量PCR檢測mRNA表達 實時熒光定量PCR提取總RNA,反轉(zhuǎn)錄為cDNA,以β-機動蛋白為內(nèi)參,反應(yīng)條件:95 ℃預(yù)變性5 min,95 ℃變性10 s,58 ℃退火20 s,72 ℃延伸20 s,共40個循環(huán)。引物設(shè)計合成見表1。

        表1 檢測mRNA的引物設(shè)計合成

        2 結(jié)果

        2.1 模型評價

        2.1.1 宏觀表現(xiàn) 造模開始前,所有大鼠均表現(xiàn)活躍、動作靈敏、精神狀況良好、毛發(fā)光澤整齊,大便形態(tài)正常,干濕適中。隨著每日造模的持續(xù)進行,與正常組大鼠比較,造模刺激后的大鼠對外界應(yīng)激的反應(yīng)度逐漸下降,對寒冷等外界刺激的抵抗能力下降,對外界環(huán)境的改變和給予的刺激反應(yīng)遲鈍,活躍程度明顯降低,精神萎靡,毛發(fā)雜亂色澤暗淡無光澤,宏觀表現(xiàn)與正常組大鼠比較出現(xiàn)明顯差異,并且糞便外觀不成形;造模3周后開始對振腹組與氟西汀組大鼠進行干預(yù)直至第7周結(jié)束,經(jīng)過干預(yù)后的大鼠活躍程度逐漸恢復(fù),與模型組比較,在日常造模過程中對外界刺激的抵抗程度顯著增強,抵抗寒冷等外界刺激的抵抗力增強,并且振腹組大鼠的糞便質(zhì)地改善明顯。

        2.1.2 糖水偏好實驗 第0周(即應(yīng)激前)末,各組大鼠的糖水偏好率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05);第3周(即應(yīng)激3周)末,與正常組比較,模型組、振腹組和氟西汀組大鼠的糖水偏好率顯著降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01),模型組、振腹組和氟西汀組3組糖水偏好率組間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),經(jīng)過3周的CUMS造模刺激,模型組、振腹組和氟西汀組3組均已造模成功,且3組造模程度相似;第7周(即干預(yù)4周)末,與正常組比較,模型組大鼠的糖水偏好率顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),與模型組比較,振腹組、氟西汀組大鼠的糖水偏好率顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。見表2。

        表2 各組大鼠糖水偏好率比較

        2.1.3 強迫游泳實驗 第0周(即應(yīng)激前)末,各組大鼠的絕望時間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05);第3周(即應(yīng)激3周)末,與正常組比較,模型組、振腹組和氟西汀組大鼠的絕望時間均顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),模型組、振腹組和氟西汀組3組之間的絕望時間比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),經(jīng)過3周的CUMS造模刺激,模型組、振腹組和氟西汀組3組均已造模成功,且3組造模程度相似;第7周(即干預(yù)4周)末,與正常組比較,模型組大鼠的絕望時間顯著增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),與模型組比較,振腹組、氟西汀組大鼠的絕望時間顯著降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。見表3。

        表3 各組大鼠絕望時間比較

        2.1.4 曠場實驗 經(jīng)過7周的造模刺激,與正常組比較,模型組大鼠的總移動距離、中央進入次數(shù)、中央停留時間和穿格次數(shù)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01);經(jīng)過4周的干預(yù),與模型組比較,振腹組、氟西汀組大鼠的總移動距離、穿格次數(shù)顯著升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01);與模型組比較,氟西汀組的中央進入次數(shù)、中央停留時間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01),振腹組的中央進入次數(shù)、中央停留時間與模型組比較有上升趨勢。見表4,圖1。

        圖1 各組大鼠曠場行為學(xué)檢測

        表4 各組大鼠曠場實驗結(jié)果比較

        2.2 各組大鼠炎癥介質(zhì)含量的比較 經(jīng)過7周的造模刺激,與正常組比較,模型組大鼠IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量顯著升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01),IL-4、IL-10含量降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01);經(jīng)過4周的干預(yù),與模型組比較,振腹組、氟西汀組大鼠IL-4、IL-10含量顯著升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01),IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α含量顯著降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。見表5。

        表5 各組大鼠炎癥介質(zhì)含量比較

        2.3 各組大鼠核因子κB、SIRT1、PGC-1α含量的比較 經(jīng)過7周的造模刺激,與正常組比較,模型組大鼠的SIRT1蛋白含量、SIRT1mRNA含量顯著降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01);經(jīng)過4周的干預(yù),與模型組比較,振腹組大鼠的SIRT1蛋白含量、SIRT1mRNA含量顯著升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01),氟西汀組大鼠的SIRT1蛋白含量、SIRT1mRNA含量均顯著升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。見圖2。

        圖2 各組大鼠SIRT1蛋白和SIRT1mRNA水平注:與模型組比較,**P<0.01

        經(jīng)過7周的造模刺激,與正常組比較,模型組大鼠的PGC-1α蛋白含量、PGC-1αmRNA含量均顯著降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01);經(jīng)過4周的干預(yù),與模型組比較,振腹組大鼠的PGC-1α蛋白含量升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),振腹組的PGC-1α mRNA含量顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),氟西汀組大鼠的PGC-1α蛋白含量、PGC-1αmRNA含量均顯著升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。見圖3。

        圖3 各組大鼠PCG-1α蛋白和PCG-1αmRNA水平注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01

        經(jīng)過7周的造模刺激,與正常組比較,模型組大鼠核因子κB的蛋白含量、mRNA含量均顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);經(jīng)過4周的干預(yù),與模型組比較,振腹組大鼠核因子κB的蛋白含量下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),振腹組的核因子κB mRNA含量顯著下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),氟西汀組大鼠核因子κB的蛋白含量、核因子κBmRNA含量均顯著下降,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01)。見圖4。

        圖4 各組大鼠核因子κB蛋白含量和核因子κB mRNA水平注:與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01

        3 討論

        抑郁癥是一種由于神經(jīng)調(diào)節(jié)系統(tǒng)失調(diào)導(dǎo)致的疾病,目前研究發(fā)現(xiàn)其發(fā)病與中樞系統(tǒng)和外周系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)密切相關(guān)[6]。臨床研究發(fā)現(xiàn),抑郁癥患者外周組織和中樞腦組織中炎癥介質(zhì)水平升高[7];還有研究發(fā)現(xiàn)炎癥介質(zhì)可以直接誘導(dǎo)人類和嚙齒動物產(chǎn)生抑郁行為[8-10],這些都證明了外周組織的炎癥反應(yīng)是抑郁癥發(fā)病的重要環(huán)節(jié)。

        研究發(fā)現(xiàn)增加骨骼肌組織中PGC-1α的含量,可以抑制IL-6、TNF-α等炎癥介質(zhì)的表達[11];相反,如果特異性敲除大鼠的骨骼肌PGC-1α,可以導(dǎo)致大鼠骨骼肌組織中IL-6和TNF-α等炎癥介質(zhì)的表達增加。此外,還有研究發(fā)現(xiàn),小鼠經(jīng)歷5周的慢性應(yīng)激后,骨骼肌特異性PGC-1α轉(zhuǎn)基因小鼠的抑郁程度明顯低于野生型小鼠,并且轉(zhuǎn)基因小鼠海馬組織中TNF-α、IL-1β、IL-6等炎癥介質(zhì)的mRNA含量降低,IL-10、IL-4等抑炎因子的mRNA含量升高。上述研究證明外周系統(tǒng)骨骼肌組織中的PCG-1α不僅可以改善骨骼肌組織的炎癥損傷,還可以調(diào)節(jié)中樞系統(tǒng)海馬組織中的炎癥反應(yīng),因此骨骼肌組織中PCG-1α的含量變化是抑郁癥發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素[12]。此外,有研究表明PCG-1α的這一作用效應(yīng)可能與PGC-1α抑制p65的磷酸化,進而抑制了p65對核因子κB基因的激活作用有關(guān)[13]。因此,研究認為PGC-1α作為核因子κB的上游因子可以抑制核因子κB介導(dǎo)的信號通路的表達,從而減少外周和中樞系統(tǒng)中炎癥介質(zhì)的表達和釋放,有利于緩解中樞系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)[14]。SIRT1可使PGC-1α、核因子κB等核轉(zhuǎn)錄因子去乙酰化,在調(diào)節(jié)線粒體損傷和炎癥損傷等方面具有重要作用[15]。研究發(fā)現(xiàn),SIRT1基因敲除后的小鼠產(chǎn)生了海馬基因表達變化、突觸可塑性缺失和樹突分支減少等表現(xiàn)[16],這可能與SIRT1介導(dǎo)的PGC-1α信號通路表達有關(guān)[17-19]。

        本研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)過4周的振腹推拿手法治療可以明顯改善CUMS誘導(dǎo)的抑郁癥模型大鼠對外界刺激的反應(yīng)、糞便質(zhì)地以及糖水偏好率、絕望時間和曠場試驗的總移動距離、穿格次數(shù),說明振腹推拿可以改善抑郁癥模型大鼠的糖水偏好、行為絕望和自主探索能力,改善抑郁癥狀,與之前的研究結(jié)果相同;前期研究發(fā)現(xiàn),振腹推拿手法干預(yù)可以改善抑郁癥模型大鼠的骨骼肌線粒體能量代謝異常的情況,緩解抑郁癥大鼠的低動力癥狀[20]。在此基礎(chǔ)上本研究發(fā)現(xiàn),振腹推拿手法可以抑制骨骼肌組織IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等炎癥介質(zhì)的表達,增加IL-4、IL-10等抑炎因子的含量,從而改善抑郁癥外周組織的炎癥反應(yīng);進一步發(fā)現(xiàn)振腹推拿是通過抑制核因子κB的蛋白表達,促進SIRT1、PGC-1α的蛋白表達,從而改善抑郁癥模型大鼠骨骼肌炎癥損傷的,并進一步推測振腹推拿手法可能是通過抑制骨骼肌炎癥損傷從而實現(xiàn)改善抑郁癥大鼠骨骼肌線粒體能量代謝的手法作用。

        抑郁癥屬于中醫(yī)“郁病”范疇,中醫(yī)認為其發(fā)病機制與思慮過度導(dǎo)致的肝失疏泄、脾失健運、心失所養(yǎng)、臟腑氣血陰陽虧虛密切相關(guān),這與現(xiàn)代研究認為抑郁癥病因是抑郁癥患者較為敏感、心思細膩、多思的觀點相符合[21-22]。振腹推拿以腹部為主要操作部位,腹部為十二經(jīng)脈匯聚之處,奇經(jīng)八脈中的任、督、沖3脈也皆起于腹部胞中,人體的主要經(jīng)脈均與腹部有著密切的關(guān)系?!妒備洝酚涊d:“五臟六腑之精華,皆見于目,上注于頭?!薄镀諠健酚涊d:“蓋頭者諸陽所會,腦者物所受命?!闭f明五臟六腑的精華上輸于腦,腦正常的功能依賴于這些精華物質(zhì),而行于腹部的經(jīng)脈就是精華運輸至腦的主要通道?!鹅`樞》中指出“胃氣上注于肺……上走空竅……入絡(luò)腦”,《重訂通俗傷寒論》記載“胃之支脈,上絡(luò)心腦……故昏不識人”,李東垣認為“足陽明之別絡(luò)于腦”,通過眾多醫(yī)家的觀點可以發(fā)現(xiàn),在腹部循行的眾多經(jīng)脈中以足陽明胃經(jīng)、足太陰脾經(jīng)尤為重要,胃的受納、腐熟水谷的功能與脾的升清、運化功能相配合,升降相濟的氣機運行既能夠?qū)⒕⑽镔|(zhì)上輸至頭,又能使頭部的濁氣下降,可以帶動全身的氣機運行,從而運送精華、傳導(dǎo)糟粕,對腦神的調(diào)節(jié)至關(guān)重要。振腹推拿利用作用于腹部的振動刺激腹部經(jīng)絡(luò),增強腹部經(jīng)脈的調(diào)節(jié)功能,調(diào)暢氣機,升清降濁,從而調(diào)治腦系疾病。

        綜上所述,振腹推拿手法可以改善抑郁癥模型大鼠的癥狀,增強其自主探索能力,減少其絕望時間,而這一手法效應(yīng)可能是通過調(diào)節(jié)骨骼肌組織SIRT1/PCG-1α/NF-κB信號通路,降低IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等炎癥介質(zhì)的含量,增加IL-4、IL-10等抑炎因子的含量,緩解外周組織的炎癥損傷實現(xiàn)的。

        利益沖突聲明:無。

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