王宏宇 陳巖 張譯文 韓建 陳諾豪 盧鳳志 王偉

摘 要 大瀧六線魚肉質(zhì)鮮美細(xì)嫩，肌肉氨基酸組成種類齊全且含量較高，富含大量多不飽和脂肪酸，有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，出肉率高，經(jīng)濟(jì)價(jià)值較好，市場(chǎng)前景廣闊。飼料中添加蝦青素可改善魚類的生長(zhǎng)。選取平均體重13.00 g的大瀧六線魚幼魚450尾，隨機(jī)分為5組，每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)，配置蝦青素含量為0%、0.05%、0.1%、0.15%和0.2%五種試驗(yàn)處理，每日16時(shí)飼喂，連續(xù)飼喂60 d。結(jié)果表明：當(dāng)基礎(chǔ)飼料中添加不同劑量蝦青素時(shí)，對(duì)大瀧六線魚幼魚體重?zé)o顯著性影響，但添加劑量為0.1%時(shí)幼魚平均增重率、餌料效率和蛋白質(zhì)效率顯著高于對(duì)照組；當(dāng)添加劑量為0.10%～0.20%時(shí)魚體背部的亮度、紅度、黃度，腹部的紅度、黃度及尾部的亮度、黃度均顯著高于對(duì)照組，添加量為0.05%～0.20%時(shí)魚體背部、腹部及尾部皮膚的蝦青素沉積量均顯著高于對(duì)照組；當(dāng)添加量為0.10%～0.20%時(shí)，幼魚血清中SOD、T-AOC和CAT活性均與對(duì)照組有顯著性差異，添加量為0.05%～0.20%時(shí)GSH-Px含量顯著高于對(duì)照組，MDA含量顯著低于對(duì)照組。因此，在基礎(chǔ)飼料中添加蝦青素劑量為0.1%～0.15%時(shí)，可有效提高大瀧六線魚生長(zhǎng)性能，改善體色，提高機(jī)體抗氧化能力。

關(guān)鍵詞 大瀧六線魚；蝦青素；幼魚；生長(zhǎng)；體色；抗氧化能力

中圖分類號(hào)：S965.399 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2023.09.044

大瀧六線魚（Hexagrammos otakii）又名六線魚，歐式六線魚，隸屬于鲉形目六線魚科六線魚屬，俗稱“海黃魚”，可在8～23 ℃水溫中生長(zhǎng)，為冷溫性海洋巖礁性魚類，營(yíng)底棲生活，在北太平洋西北部的朝鮮半島、日本、中國(guó)及俄羅斯遠(yuǎn)東諸海都有自然分布，在中國(guó)主要分布于渤海和黃海[1]。大瀧六線魚肉質(zhì)鮮美細(xì)嫩，肌肉氨基酸組成種類齊全且含量較高，富含大量多不飽和脂肪酸，有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，出肉率高，經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高，市場(chǎng)前景廣闊[2]。

大瀧六線魚人工養(yǎng)殖過(guò)程中環(huán)境和攝食等與自然生長(zhǎng)環(huán)境狀態(tài)存在較大差異，導(dǎo)致其魚體在體色等方面與自然環(huán)境下生長(zhǎng)魚體會(huì)存在著較大差異，影響了養(yǎng)殖大瀧六線魚的商品價(jià)值[3]。類胡蘿卜素中蝦青素對(duì)大瀧六線魚體色有決定性作用，在基礎(chǔ)飼料中添加蝦青素可明顯改善其體色。此外，蝦青素還具有一定的抗氧化功能，一方面可以抑制機(jī)體組織氧化進(jìn)程，促進(jìn)生長(zhǎng)和發(fā)育；另一方面蝦青素能阻斷由不飽和脂肪酸降解而引發(fā)的自由基連鎖反應(yīng)，從而降低或防止自由基的生成[4]。飼料中添加蝦青素可改善魚類的生長(zhǎng)，以大瀧六線魚幼魚為研究對(duì)象，通過(guò)在基礎(chǔ)飼料中添加不同劑量的蝦青素，研究其對(duì)大瀧六線魚幼魚生長(zhǎng)、體色和抗氧化能力的影響，為高效人工養(yǎng)殖提供科學(xué)指導(dǎo)。

1 ?材料與方法

1.1 ?試驗(yàn)材料

1.1.1 ?飼料

蝦青素購(gòu)自江蘇康之健生物科技有限公司，凈含量為5%；基礎(chǔ)飼料購(gòu)自山東升索飼料科技有限公司，為海水魚專用飼料。試驗(yàn)飼料營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)含量）粗蛋白含量51.53%，粗脂肪8.69%，粗灰分15.85%，總能18.31%。將蝦青素溶于水后，基礎(chǔ)飼料放入蝦青素水溶液攪拌均勻，使得蝦青素完全吸附于飼料上，放入烘干機(jī)器中烘干水分，設(shè)置對(duì)照組（添加0%蝦青素）、0.05%組（添加0.05%蝦青素）、0.1%組（添加0.1%蝦青素）、0.15%組（添加0.15%蝦青素）、0.2%組（添加0.2%蝦青素）等5種飼料水平，放于-20 ℃冰箱中冷凍保存。

1.1.2 ?樣品

養(yǎng)殖周期結(jié)束后停食24 h進(jìn)行取樣工作。試驗(yàn)開始時(shí)和結(jié)束后均以網(wǎng)箱為單位進(jìn)行稱重，并記錄每日投喂飼料重量，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)清點(diǎn)各網(wǎng)箱幼魚數(shù)量。每組隨機(jī)抽取6尾體態(tài)健康試驗(yàn)魚，采用MS-222麻醉劑（50 mg·L-1）進(jìn)行麻醉，擦干幼魚體表水分，分別測(cè)得體質(zhì)量、體長(zhǎng)及體色[5]。隨后對(duì)其尾部進(jìn)行采血，用于制備血清樣品，放置于4 ℃冰箱冷藏保存，用于測(cè)定抗氧化能力相關(guān)指標(biāo)。對(duì)試驗(yàn)魚背部、腹部、尾部皮膚及肌肉組織進(jìn)行樣品采集，液氮速凍后轉(zhuǎn)入-80 ℃超低溫冰箱保存，用于測(cè)定類胡蘿卜素含量。

1.2 ?試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)所用大瀧六線魚幼魚由大連鶴圣豐養(yǎng)殖場(chǎng)提供。選取體表無(wú)傷、魚體健康、大小基本一致的實(shí)驗(yàn)用魚450尾，每尾質(zhì)量約13.00 g，體長(zhǎng)約9.50 cm。養(yǎng)殖過(guò)程采用直徑1 m、高度1.2 m的圓柱形網(wǎng)箱，放置于工廠化流水養(yǎng)殖車間同一養(yǎng)殖池中。將450尾大瀧六線魚幼魚隨機(jī)分成五組，每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾實(shí)驗(yàn)魚，放入養(yǎng)殖網(wǎng)箱中，暫養(yǎng)7 d。暫養(yǎng)期間每日16： 00投喂基礎(chǔ)飼料1次。養(yǎng)殖期間定期清理池底糞便殘餌，并移動(dòng)網(wǎng)箱位置，定期做池底消毒。試驗(yàn)過(guò)程出現(xiàn)魚死亡情況及時(shí)撈出并稱重記錄數(shù)據(jù)。水溫保持21～22 ℃，溶解氧始終保持≥4 mg·L-1，pH值控制在7.5左右，水中氨氮含量＜0.44 mg·L-1。試驗(yàn)周期為60 d。

1.3 ?指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 ?生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定

在每個(gè)試驗(yàn)組中取樣6尾大瀧六線魚，麻醉后分別測(cè)量體質(zhì)量、體長(zhǎng)，測(cè)量根據(jù)每組大瀧六線魚初始體質(zhì)量（IBW）、終末體質(zhì)量（FBW）及平均投喂量，計(jì)算平均增重率（AWGR）、特定生長(zhǎng)率（SGR）、飼料效率（FRE）、蛋白質(zhì)效率（PER）。計(jì)算公式如下：

[AWGR=mt-m0m0×100%] ?（1）

[SGR=lnmt-lnm0t×100%] （2）

[FER=mt-m0mi×100%] （3）

[PER=mt-m0mi×mp×100%] （4）

式中：m0、mt分別表示每尾魚初始體質(zhì)量和終末體質(zhì)量（g），t表示試驗(yàn)時(shí)間（d），mi表示每尾魚攝入干飼料質(zhì)量（g），mp表示飼料粗蛋白質(zhì)含量（%）。

1.3.2 ?體色及蝦青素含量測(cè)定

將試驗(yàn)魚體表擦干，用色差儀（深圳林上科技有限公司LS170）分別測(cè)取魚表背部、腹部、尾柄部的色度值，記錄各自的亮度（L*）、紅度（a*）、黃度（b*）。對(duì)試驗(yàn)魚背部、腹部、尾柄部皮膚及背部肌肉進(jìn)行取樣，用魚類類胡蘿卜素測(cè)定試劑盒（上海源桔生物科技中心mlbio酶聯(lián)生物YJ109403）測(cè)定，采用雙抗體夾心法測(cè)定總類胡蘿卜素含量。

1.3.3 ?血清抗氧化指標(biāo)測(cè)定

采用試劑盒（南京建成生物工程研究所）對(duì)超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活力及MDA含量進(jìn)行測(cè)定，依據(jù)試劑盒測(cè)定方法。

1.4 ?數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 25軟件對(duì)各項(xiàng)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（ANOVA），若差異顯著，則采用LSD多重比較法檢驗(yàn)各處理組之間的差異。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?蝦青素對(duì)大瀧六線魚幼魚生長(zhǎng)性能的影響

不同蝦青素添加水平對(duì)大瀧六線魚幼魚生長(zhǎng)性能的影響結(jié)果見表1。與對(duì)照組相比，添加蝦青素可提高大瀧六線魚幼魚的體重，呈現(xiàn)出先增后減的趨勢(shì)，0.10%組每尾質(zhì)量提高1.22 g較為明顯，但各處理組與對(duì)照組間無(wú)顯著性差異；0.1%組平均增重率（AWGR）顯著高于其他處理組（p<0.05）；各處理組中添加蝦青素對(duì)幼魚特定生長(zhǎng)率（SGR）的提升幅度無(wú)顯著性差異，也呈現(xiàn)出先增后減的趨勢(shì)，0.2%組已接近對(duì)照組；添加蝦青素可顯著提升餌料效率（FRE），最佳添加劑量出現(xiàn)在0.1%組；蛋白質(zhì)效率（PER）與餌料效率（FRE）出現(xiàn)同樣先增后減的趨勢(shì)，添加蝦青素可顯著提升大瀧六線魚幼魚對(duì)蛋白質(zhì)的利用，最佳添加劑量出現(xiàn)在0.1%組。

2.2 ?蝦青素對(duì)大瀧六線魚幼魚體色的影響

不同蝦青素添加水平對(duì)大瀧六線魚幼魚體色的影響結(jié)果見表2。可以看出，當(dāng)蝦青素添加量為0.1%～0.2%時(shí)，背部皮膚的亮度、黃度與對(duì)照組存在顯著性差異；當(dāng)蝦青素含量為0.05%～0.2%時(shí)背部皮膚的紅度與對(duì)照組出現(xiàn)顯著差異，且當(dāng)含量為0.15%～0.2%時(shí)，差異極為顯著。當(dāng)蝦青素添加量為0.1%～0.2%時(shí)，幼魚腹部皮膚的紅度、黃度與對(duì)照組之間差異顯著，且當(dāng)添加量為0.2%時(shí)，差異極顯著。當(dāng)蝦青素添加量為0.1%～0.2%時(shí)，尾部亮度、黃度與對(duì)照組相比差異顯著。

不同蝦青素添加水平對(duì)大瀧六線魚幼魚皮膚總類胡蘿卜素含量的影響見表3?？芍?，當(dāng)蝦青素的添加量在0.05%～0.2%時(shí)，大瀧六線魚的背部、腹部及尾部的總類胡蘿卜素的沉積量與對(duì)照組之間差異顯著，且隨著蝦青素添加量的增加，類胡蘿卜素含量越來(lái)越高，差異愈加顯著；背部肌肉總類胡蘿卜素的含量無(wú)顯著差異。

2.3 ?蝦青素對(duì)大瀧六線魚幼魚抗氧化指標(biāo)的影響

不同蝦青素添加水平對(duì)大瀧六線魚幼魚血清抗氧化指標(biāo)的影響結(jié)果如表4所示。當(dāng)蝦青素添加量為0.1%～0.2%時(shí)，幼魚血清中SOD、CAT的活性顯著高于對(duì)照組，且隨著蝦青素添加量的增加，SOD、CAT活性也在不斷提高，差異性越來(lái)越顯著。當(dāng)蝦青素添加量為0.05%～0.2%時(shí)，血清中GSH-Px的活性顯著高于對(duì)照組，但各試驗(yàn)組間無(wú)顯著差異；當(dāng)蝦青素添加量為0.1%～0.2%時(shí)，T-AOC的量與對(duì)照組有顯著性差異，但各試驗(yàn)組間無(wú)明顯差異；各試驗(yàn)組MDA的含量顯著低于對(duì)照組，且蝦青素含量越高，差異顯著性越強(qiáng)。

3 ?結(jié)論與討論

3.1 ?結(jié)論

本試驗(yàn)探究了不同劑量蝦青素對(duì)大瀧六線魚幼魚生長(zhǎng)、體色和抗氧化能力的影響，結(jié)果表明當(dāng)基礎(chǔ)飼料中添加0.1%～0.15%的蝦青素時(shí)，對(duì)大瀧六線魚幼魚的生長(zhǎng)促進(jìn)、體色改善和抗氧化能力提升都有明顯的積極作用。

3.2 ?討論

大量研究表明，蝦青素作為水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物基礎(chǔ)飼料的添加劑可對(duì)其生長(zhǎng)有積極的促進(jìn)作用[6]。大瀧六線魚作為一種冷溫性海洋魚類，其生長(zhǎng)速度較慢，對(duì)于大規(guī)模人工養(yǎng)殖存在著周期長(zhǎng)、風(fēng)險(xiǎn)高、見效慢等一些實(shí)際生產(chǎn)問(wèn)題。在本試驗(yàn)中各添加劑量對(duì)于大瀧六線幼魚的生長(zhǎng)并無(wú)顯著差異，但是對(duì)于其提高平均增重率、特定生長(zhǎng)率及提高餌料的利用率有著顯著作用。周一凡等學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)在基礎(chǔ)飼料中添加茶樹油與蝦青素的劑量為50 mg·kg-1時(shí)，可顯著降低餌料系數(shù)，但對(duì)增重率、特定生長(zhǎng)率的提高不顯著[7]。這與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。陳秀梅等研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加100～200 mg·kg-1的蝦青素對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)有顯著的促進(jìn)作用[8]；姜巨峰等通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出50～150 mg·kg-1的天然蝦青素對(duì)棘頰雀鯛的生長(zhǎng)性能有促進(jìn)作用[9]；李美鑫等人研究認(rèn)為日糧添加100～200 mg·kg-1蝦青素能夠顯著提高烏鱧生長(zhǎng)性能和飼料效率[10]；王海芳等人在南美白對(duì)蝦日糧中添加蝦青素50～200 mg·kg-1可使實(shí)驗(yàn)組增重率和特定生長(zhǎng)率顯著高于未添加蝦青素的對(duì)照組[11]。以上研究結(jié)果表明不同水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)于蝦青素的適宜添加劑量存在差異，這可能是由于不同物種對(duì)于蝦青素的吸收利用能力存在差異。此外，基礎(chǔ)配方飼料的營(yíng)養(yǎng)成分及營(yíng)養(yǎng)因子存在的差異導(dǎo)致水產(chǎn)動(dòng)物消化吸收能力不同。本試驗(yàn)研究所用基礎(chǔ)飼料粗蛋白含量超51%，這與劉洋等關(guān)于大瀧六線魚對(duì)蛋白的最適需求量研究結(jié)果[12]相似，此蛋白含量下可能已經(jīng)充分促進(jìn)了大瀧六線魚的生長(zhǎng)，使得添加蝦青素后的效果減弱。

海洋中水產(chǎn)動(dòng)物呈現(xiàn)出美麗多樣的體色，其主要原因在于魚體內(nèi)類胡蘿卜素作用于魚體皮膚、鱗片等組織器官，如肉鰭魚類中，蝦青素和葉黃素是分布最為廣泛的一種類胡蘿卜素。已有研究報(bào)道指出基礎(chǔ)飼料中蝦青素的不同添加劑量會(huì)對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物著色存在影響。張寶龍等通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明飼料中添加0.08%～0.16%的蝦青素對(duì)黃金鯉的體色有顯著影響[13]；張曉紅等通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出飼料中添加100～900 mg·kg-1的蝦青素對(duì)于血鸚鵡魚的體色有明顯的改善作用[14]；宋雪璐通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到飼料中300～400 mg·kg-1的葉黃素添加量對(duì)于七彩神仙魚的體色有明顯的改善作用[15]。姜志強(qiáng)等報(bào)道在錦鯉體內(nèi)類胡蘿卜素在皮膚中沉積最多，在肌肉中的沉積量最少[16]；李小慧等研究表明蝦青素主要沉積在血鸚鵡魚的皮膚上[17]。本研究結(jié)果證明了在飼料中添加蝦青素對(duì)大瀧六線魚的體色有著明顯的積極改善作用，該結(jié)果與大部分研究報(bào)道高度一致。同時(shí)，水產(chǎn)動(dòng)物的體色差異還可能與調(diào)控色素基因、生長(zhǎng)環(huán)境等方面存在一定的聯(lián)系，其他關(guān)于體色存在差異的原因還需進(jìn)一步分析驗(yàn)證。

天然蝦青素作為一種酮式類胡蘿卜素，是一種萜烯類不飽和化合物。蝦青素分子結(jié)構(gòu)中的共軛雙鍵鏈、共軛雙鍵鏈末端的不飽和酮基和羥基能吸引自由基未配對(duì)的電子或向自由基提供電子，從而清除自由基，起到抗氧化作用[18]。朱曉文等通過(guò)在珊瑚鱒魚的飼料中添加蝦青素的研究得出結(jié)論認(rèn)為，添加1.0 g·kg-1富含蝦青素的雨生紅藻粉（蝦青素含量為0.091 g·kg-1）可以提高珊瑚鱒魚的消化酶活性、抗氧化能力、免疫力及抗哈維弧菌的能力[19]；張娟娟等報(bào)道，在飼料中添加100 mg·kg-1的蝦青素可提高虹鱒魚的抗氧化性能[20]；關(guān)獻(xiàn)濤等研究認(rèn)為，在豹紋鰓棘鱸飼料中添加含量為0.05%～0.2%的蝦青素可使抗氧化性能顯著提升[21]。本試驗(yàn)中，大瀧六線魚幼魚血清中的抗氧化酶活性隨蝦青素含量增加出現(xiàn)明顯上升趨勢(shì)。目前關(guān)于抗氧化能力的研究還停留在抗氧化酶等一些指標(biāo)的測(cè)定，具體的抗氧化機(jī)制及機(jī)體各項(xiàng)調(diào)節(jié)應(yīng)答機(jī)制還需后續(xù)研究揭示。

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（責(zé)任編輯：易 ?婧）