翟麗娜 譚莉霞 魏書堂 武利萍*

（河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，河南 開封 475001）

CHB疾病屬于臨床上常見的肝病內(nèi)科慢性疾患，發(fā)病原因與家族遺傳、幼兒期感染病毒、血液感染等因素影響有關(guān)。其主要臨床表現(xiàn)及體征包括惡心、乏力、腹脹、食納差、肝臟部位疼痛等，進(jìn)一步進(jìn)展可出現(xiàn)脾大、肝掌、食管胃底靜脈曲張、腹水和肝性腦病等，更嚴(yán)重時(shí)甚至危害患者的生命安全，對社會(huì)的危害性較大。肝臟的纖維化屬于CHB疾病的病理基礎(chǔ)，肝纖維化早期尚可逆轉(zhuǎn)，當(dāng)其進(jìn)入發(fā)展期時(shí)，肝纖維化狀態(tài)不可逆，且隨著病齡的增長逐漸發(fā)展至肝硬化。因此盡早發(fā)現(xiàn)并診斷CHB疾病，對幫助評(píng)估病情狀況和制定合理的治療計(jì)劃具有重要意義。臨床上常采用血生化檢查來輔助診斷CHB疾病和評(píng)估該疾病的病情嚴(yán)重程度[1]。其中HA作為糖胺多糖類物質(zhì)的一種，其水平隨著肝纖維化程度的發(fā)展，隨之升高[2]。LN是基底膜的主要成分之一，有文獻(xiàn)報(bào)道，LN水平一定程度上反映了肝纖維化的范圍[3]。PⅢP屬于N端肽，其濃度水平隨著肝纖維化的程度增加[4]。為此，本文探討HA、LN及PⅢP檢測對CHB患者肝纖維化的早期診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2019年8月-2020年3月期間收治的疑似CHB的65例患者的臨床資料，經(jīng)穿刺活檢證實(shí)CHB患者63例。納入標(biāo)準(zhǔn)：實(shí)驗(yàn)資料完整；全程參與并配合研究項(xiàng)目者；均經(jīng)組織穿刺活檢證實(shí)且符合《CHB診斷指南》的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；排除標(biāo)準(zhǔn)：急性乙型肝炎；有精神疾患不能配合研究項(xiàng)目者；合并有其他感染性疾病者。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員為知情同意。其中男性32例，女性31例，年齡19-67歲，平均年齡（36.45±15.01）歲。另外選取同期健康體檢者58例，設(shè)為對照組，其中男性30例，女性28例，年齡21-65歲，平均年齡（36.13±14.98）歲。

1.2 方法

1.2.1 HA、LN和PⅢP的檢測

所有患者于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下采集肘外周靜脈血6 mL，置于三份真空離心管中，晃動(dòng)試管充分混勻，以3000 r·min-1離心10 min，獲得上層血清，置于-20℃冰箱內(nèi)冷凍待測，分別用于檢測HA、LN和PⅢP。采用放射免疫法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，RIA）對血清HA水平進(jìn)行檢測，采用酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）對血清LN、PⅢP水平進(jìn)行檢測，所有配套試劑盒（來自上海奧瑞診斷試劑有限公司）；所有檢測項(xiàng)目均由嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行規(guī)范檢測操作。

1.2.2 CHB患者病情進(jìn)展階段的判定標(biāo)準(zhǔn)及分組

階段包括慢性乙型肝炎輕度、中度、中度及肝硬化。慢性乙型肝炎輕度：沒有黃疸發(fā)生且轉(zhuǎn)氨酶在正常值2倍以下，凝血時(shí)間值正常范圍內(nèi)；慢性乙型肝炎中度：輕度黃疸，轉(zhuǎn)氨酶正常值2倍以上5倍以下，凝血酶時(shí)間輕度延長；慢性乙型肝炎重度：中重度黃疸，轉(zhuǎn)氨酶水平高，凝血時(shí)間中度延長，腹脹乏力等癥狀明顯；肝硬化：重度黃疸，白蛋白水平低于35g，胃鏡提示靜脈曲張征象，血常規(guī)血小板計(jì)數(shù)下降。

1.2.3 肝纖維化分期方法

肝纖維化分期包括：S0、S1、S2、S3、S4期。S0：一般肝臟不存在纖維化；S1：纖維化范圍小，不影響肝臟小葉結(jié)構(gòu)及微循環(huán)狀態(tài)；S2：小葉內(nèi)出現(xiàn)纖維間隔，不影響微循環(huán)狀態(tài)；S3：破壞肝小葉；S4：形成假小葉，并對肝實(shí)質(zhì)產(chǎn)生破壞，影響肝臟功能[6]。

1.2.4 肝功能（Child-Pugh，CHILD）分級(jí)

三個(gè)大項(xiàng)總分為15分，A級(jí)5-6分；B級(jí)7-9分；C級(jí)大于10分[7]。

1.2.5 診斷價(jià)值分析方法

包括診斷準(zhǔn)確率、靈敏度及特異度。診斷準(zhǔn)確率=（真陽性人數(shù)+真陰性人數(shù)）÷總?cè)藬?shù)×100%，特異度=（真陰性人數(shù)÷金標(biāo)準(zhǔn)陰性人數(shù)）×100%，靈敏度=（真陽性人數(shù)÷金標(biāo)準(zhǔn)陽性人數(shù)）×100%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將采用SPSS18.0處理軟件對本研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料使用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）表示，兩兩間數(shù)據(jù)使用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)采用百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用多元Logistic回歸分析影響妊娠期高血壓疾病的危險(xiǎn)因素，所有數(shù)據(jù)均用P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CHB患者病情進(jìn)展階段

63例CHB患者的疾病分型為：23例慢性乙型肝炎輕度，16例慢性乙型肝炎中度，15例慢性乙型肝炎重度，9例肝硬化。

2.2 各階段CHB患者和對照組血清HA、LN及PⅢP水平

肝硬化組血清HA、LN及PⅢP水平均高于慢性乙型肝炎重度組、中度組、輕度組和對照組，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 各階段CHB患者和對照組血清HA、LN及PⅢP水平（±SD）

表1 各階段CHB患者和對照組血清HA、LN及PⅢP水平（±SD）

注：五組間比較，aP＜0.05。

組別 例數(shù) HA(ng·mL-1)慢性乙型肝炎輕度 23 66..69±43.23a 98.69±23.46a 165.21±37.21a LN(μg·L-1) PⅢP(μg·L-1)慢性乙型肝炎中度 16 89.64±54.21a 103.58±38.21a 178.68±55.46a慢性乙型肝炎重度 15 90.68±68.21a 110.47±39.21a 183.54±60.19a肝硬化 9 142.68±77.36a 139.54±12.88a 240.69±79.99a對照組 58 51.03±13.21 75.03±12.36 79.10±19.98

2.3 肝纖維化分期與HA、LN及PⅢP的水平關(guān)系

肝纖維化分期S4期血清HA、LN及PⅢP水平均高于S2-S3、S0-S1期和對照組，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 肝纖維化分期與HA、LN及PⅢP的水平關(guān)系（±SD）

表2 肝纖維化分期與HA、LN及PⅢP的水平關(guān)系（±SD）

注：四組間比較，aP＜0.05。

分期 例數(shù) HA(ng·mL-1) LN(μg·L-1) PⅢP(μg·L-1)S0-S1 20 50.32±11.11a 188.46±23.46a 141.58±21.21a S2-S3 28 53.65±16.25a 289.48±27.68a 185.85±30.12a S4 15 92.36±66.66a 378.36±89.35a 246.38±35.69a對照組 58 48.34±9.98 136.15±18.21 82.32±34.56

2.4 CHILD分級(jí)與血清HA、LN及PⅢP的水平關(guān)系

CHILD分級(jí)C級(jí)組血清HA、LN及PⅢP水平均高于S2-S3、S0-S1和對照組，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 CHILD分級(jí)與血清HA、LN及PⅢP的水平關(guān)系（±SD）

表3 CHILD分級(jí)與血清HA、LN及PⅢP的水平關(guān)系（±SD）

注：三組間比較，aP＜0.05。

分級(jí) 例數(shù) HA(ng·mL-1) LN(μg·L-1) PⅢP(μg·L-1)A級(jí) 21 287.41±66.66 110.41±29.68 12.35±4.21 B級(jí) 32 578.59±144.56a 184.35±39.87a 19.68±8.45a C級(jí) 10 1087±615.42a 241.48±55.51a 22.26±11.24a

2.5 分析HA、LN及PⅢP聯(lián)合檢測對CHB患者肝纖維化的診斷價(jià)值

以組織穿刺活檢為金標(biāo)準(zhǔn)比較，HA、LN及PⅢP聯(lián)合檢測診斷準(zhǔn)確率、靈敏度、特異度分別為83.82%（57/68）、94.82%（55/58）、40.00%（2/5）。

血清HA主要通過肝臟攝取和降解，當(dāng)肝臟細(xì)胞受損后，多種細(xì)胞因子互相作用從而激活了肝竇內(nèi)皮細(xì)胞，使HA水平增高。同時(shí)由于肝細(xì)胞受損，導(dǎo)致HA清除率也隨之下降[2]。正常肝臟內(nèi)LN分布在血管和膽管的基底膜中，且含量極少，隨著肝細(xì)胞的受損，肝纖維化發(fā)生，導(dǎo)致LN沉積量增多，其水平也隨著升高[3]。有文獻(xiàn)報(bào)道，PⅢP是最早隨著肝纖維化發(fā)生而水平升高的血清分子，是反應(yīng)肝纖維化活動(dòng)性的主要指標(biāo)[4]。

本研究結(jié)果顯示，以組織穿刺活檢為金標(biāo)準(zhǔn)比較，HA、LN及PⅢP聯(lián)合檢測診斷準(zhǔn)確率、靈敏度、特異度分別為83.82%（57/68）、94.82%（55/58）、40.00%（2/5）、且肝硬化組血清HA、LN及PⅢP水平均顯著高于慢性乙型肝炎重度組、中度組、輕度組和對照組，表示HA、LN及PⅢP隨著CHB疾病的病情嚴(yán)重程度而升高。分析原因是因?yàn)楦闻K受損后，激活了肝竇內(nèi)皮細(xì)胞HA清除率下降，同時(shí)使LN沉積量增多和PⅢP活性增加。研究結(jié)果顯示，肝纖維化S4組血清HA、LN及PⅢP水平均高于S2-S3、S0-S1和對照組，表明HA、LN及PⅢP水平可以作為輔助診斷CHB疾病和其肝纖維化嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)，分析原因是因?yàn)镠A、LN及PⅢP水平參與了CHB疾病肝纖維的發(fā)生和發(fā)展過程。研究結(jié)果顯示，CHILD分級(jí)C級(jí)組血清HA、LN及PⅢP水平均顯著高于S2-S3、S0-S1和對照組，該結(jié)果與以往實(shí)驗(yàn)相似，間接證實(shí)血清HA、LN及PⅢP水平會(huì)隨著CHB疾病肝纖維化病情嚴(yán)重程度而變化[4]。

綜上所訴，血清HA、LN及PⅢP參與CHB患者肝纖維化的發(fā)生與發(fā)展，能作為早期疾病診斷CHB肝纖維化和評(píng)估病情嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)，具有一定的臨床推廣和應(yīng)用價(jià)值。