侯俊林 劉永 李寧 趙川 秦中朋 呂茹 閆國立 詹向紅

(1河南中醫(yī)藥大學(xué),河南 鄭州 450046;2河南省中西醫(yī)結(jié)合防治腦認(rèn)知疾病工程技術(shù)研究中心;3鄭州市中西醫(yī)結(jié)合防治腦認(rèn)知疾病重點(diǎn)實驗室)

隨人口老齡化而至的認(rèn)知功能障礙性疾病如癡呆和輕度認(rèn)知功能障礙(MCI)等發(fā)病人數(shù)逐年遞增,給社會和家庭造成了沉重負(fù)擔(dān),已成為全世界共同的醫(yī)學(xué)難題。MCI是介于認(rèn)知功能正常與癡呆之間的過渡狀態(tài),在65歲以上人口中發(fā)病率可達(dá)10%～20%〔1〕,且易進(jìn)展為癡呆,而癡呆一旦形成很難逆轉(zhuǎn),因此MCI是防治認(rèn)知功能衰退相關(guān)疾病的最佳節(jié)點(diǎn)。有研究顯示,長期情緒調(diào)節(jié)不良可致中老年人認(rèn)知能力下降〔2〕,情緒調(diào)節(jié)不良者常有肝氣郁結(jié)癥狀,作為疏肝法的代表方,逍遙丸能否改善肝氣郁結(jié)型MCI患者的認(rèn)知功能目前只有量表評測結(jié)果,量表結(jié)果雖然直觀,但易受主觀因素的影響,而事件相關(guān)電位(ERPs)技術(shù)具有時間分辨率高、結(jié)果客觀、無創(chuàng)及成本低廉等優(yōu)勢,其三刺激聽覺Oddball范式的失匹配負(fù)波(MMN)、P3a、P3b等成分可客觀地反映認(rèn)知功能的改變,故本研究采用上述成分結(jié)合量表評測,探討逍遙丸對肝郁型MCI患者認(rèn)知功能的影響。

1 對象與方法

1.1研究對象 2016～2018年從鄭州市部分社區(qū)及河南中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院篩選的年齡46～65歲的肝氣郁結(jié)型MCI患者30例,其中男7例,女23例;平均年齡(55.40±5.52)歲;文化程度:本科1例,大專5例,高中(含中專)12例,初中8例,小學(xué)4例。研究經(jīng)倫理委員會批準(zhǔn)(批號:2015HL-059),所有被試者履行知情同意手續(xù)。

1.2診斷標(biāo)準(zhǔn) 采用歐洲AD協(xié)會2006年制定的MCI診斷標(biāo)準(zhǔn)〔3〕:①患者或其家人主訴有認(rèn)知損害表現(xiàn);②患者或知情人發(fā)現(xiàn)患者過去1年的認(rèn)知功能出現(xiàn)衰退;③臨床評估證實患者存在認(rèn)知障礙;④日常生活能力基本正常;⑤無癡呆。肝氣郁結(jié)證診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《中醫(yī)肝臟象現(xiàn)代研究與臨床》〔4〕制定:①胸脅乳房少腹脹痛;②抑郁太息;③痛經(jīng);④月經(jīng)不調(diào);⑤咽有梗阻感;⑥神疲體倦;⑦納差;⑧腹脹;⑨便溏脈弦。⑤和⑨根據(jù)癥狀有無分別計1或0分,其余7項根據(jù)其癥狀的“輕、中、重、嚴(yán)重”程度分別計1～4分。其中①、②為必備項,當(dāng)①～⑤中具備3項或在①、②的基礎(chǔ)上兼有⑥～⑨中的1項,癥狀持續(xù)6個月以上,且總分≥6分者,即可診斷。

1.3納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn):符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn);且文化程度為小學(xué)及以上,母語為漢語,視、聽功能正常;右利手;可以正常溝通。排除標(biāo)準(zhǔn):不能配合檢測或信息不真實者;腦腫瘤患者;腦血管病患者;有精神疾病史者;活動性癲癇患者;癡呆患者;影響認(rèn)知功能評價的重要臟器損傷患者。

1.4藥物干預(yù) 口服逍遙丸(河南省宛西制藥股份有限公司,Z41021831),8粒/次,3次/d,連服12 w。

1.5認(rèn)知功能和肝郁癥狀評價 分別采用蒙特利爾認(rèn)知評估(MoCA)量表和參考《中醫(yī)肝臟象現(xiàn)代研究與臨床》〔4〕制定的肝氣郁結(jié)證癥狀程度計分表對認(rèn)知功能和肝郁癥狀進(jìn)行評價。

1.6腦電數(shù)據(jù)采集及分析 采用Neuroscan4.5軟件采集并分析腦電數(shù)據(jù)。帶通DC-200 Hz,采樣率1 kHz。實驗范式為三刺激聽覺Oddball范式,共包括1 400個刺激,其中80%為1 kHz標(biāo)準(zhǔn)刺激(滴滴聲)、10%為1.05 kHz偏差刺激(嘟嘟聲),10%為新異刺激(含狗叫、鈴聲等28種聲音,每種均出現(xiàn)5次),刺激間隔為1 000 ms,聲音強(qiáng)度為60 dB NHL。正式檢測時,先連續(xù)播放20個標(biāo)準(zhǔn)刺激,而后在播放標(biāo)準(zhǔn)刺激時隨機(jī)穿插播放新異刺激和偏差刺激,保證在每一個新異刺激和偏差刺激前至少出現(xiàn)兩個標(biāo)準(zhǔn)刺激,每個刺激呈現(xiàn)的時間為100 ms。檢測開始即同步記錄連續(xù)腦電數(shù)據(jù)。

腦電數(shù)據(jù)分析步驟如下:合并眼電;選取腦電圖(EEG)數(shù)據(jù)中刺激前100 ms到刺激后600 ms的片段;以刺激前100 ms的平均電壓為基線進(jìn)行基線校正;進(jìn)行30 Hz(24 dB/oct)無相移低通數(shù)字濾波;剔除波幅超過±100 μV的腦電壞段;分類疊加平均“標(biāo)準(zhǔn)、偏差和新異刺激”3類的ERPs數(shù)據(jù),對應(yīng)記錄為1、2、3;用成分3減去成分2,提取MMN、P3a和P3b。以刺激呈現(xiàn)后150～250 ms內(nèi)的最大負(fù)波峰值及其出現(xiàn)時間為MMN的幅值和峰潛伏期,以刺激呈現(xiàn)后250～400 ms內(nèi)出現(xiàn)的最大正波峰值及出現(xiàn)時間為P3a成分的幅值和潛伏期,以刺激呈現(xiàn)后300～500 ms內(nèi)出現(xiàn)在P3a之后的最大正波峰值及出現(xiàn)時間為P3b成分的幅值和潛伏期。

1.7統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS22.0軟件對量表數(shù)據(jù)進(jìn)行自身配對t檢驗,ERPs數(shù)據(jù)采用重復(fù)測量方差分析,若重復(fù)測量方差分析不滿足球?qū)ΨQ性,用Greenhouse-Geisser法進(jìn)行校正。以α=0.05作為檢驗水準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

2.1肝氣郁結(jié)證癥狀程度計分 與用藥前肝氣郁結(jié)證癥狀程度得分〔(7.07±1.76)分〕相比,用藥后得分〔(4.23±2.25)分〕顯著下降(t=5.201,P<0.05)。

2.2MoCA量表計分 與用藥前相比,用藥后MoCA量表的視空間與執(zhí)行、注意、抽象、延遲回憶、定向得分均升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 肝郁型 MCI用藥前后MoCA量表計分分,n=30)

2.3ERPs檢測結(jié)果 被試者用藥前后均誘發(fā)出了MMN、P3a、P3b成分,FZ、CZ、PZ電極位點(diǎn)差異波的組平均波形見圖1。

圖1 用藥前后FZ、CZ、PZ電極位點(diǎn)差異波的組平均波形

2.4肝郁型MCI用藥前后MMN潛伏期比較 肝郁型MCI的MMN潛伏期在用藥前后主效應(yīng)上差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與用藥前相比,用藥后MMN潛伏期顯著縮短(P<0.05);電極位點(diǎn)主效應(yīng)上差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);用藥前后與電極位點(diǎn)間的交互作用差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 肝郁型MCI用藥前后MMN潛伏期及波幅比較

2.5肝郁型MCI用藥前后MMN波幅比較 肝郁型MCI的MMN波幅在用藥前后主效應(yīng)上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);電極位點(diǎn)主效應(yīng)上差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);用藥前后與電極位點(diǎn)間的交互作用差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.6肝郁型MCI用藥前后P3a潛伏期比較 肝郁型MCI的P3a潛伏期在用藥前后主效應(yīng)上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);電極位點(diǎn)主效應(yīng)上差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);用藥前后與電極位點(diǎn)間交互作用差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 肝郁型MCI用藥前后P3a潛伏期及波幅比較

2.7肝郁型MCI用藥前后P3a波幅比較 肝郁型MCI的P3a波幅在用藥前后主效應(yīng)上差異呈邊緣顯著性(P=0.084),用藥后的P3a波幅顯著大于用藥前(P<0.05);電極位點(diǎn)主效應(yīng)上差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);用藥前后與電極位點(diǎn)間交互作用差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。簡單效應(yīng)分析發(fā)現(xiàn):同一電極位點(diǎn)內(nèi)比較,在CZ電極點(diǎn)患者用藥后的P3a波幅顯著大于用藥前(P<0.05)。見表3。

2.8肝郁型MCI用藥前后P3b潛伏期比較 肝郁型MCI的P3b潛伏期在用藥前后主效應(yīng)上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);電極位點(diǎn)主效應(yīng)上差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);用藥前后與電極位點(diǎn)間交互作用差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 肝郁型MCI用藥前后P3b潛伏期及波幅比較

2.9肝郁型MCI用藥前后P3b波幅比較 肝郁型MCI的P3b波幅在用藥前后主效應(yīng)上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);電極位點(diǎn)主效應(yīng)上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);用藥前后與電極位點(diǎn)間交互作用差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

3 討 論

ERPs技術(shù)是通過給予被試者一定的視、聽等刺激,誘發(fā)被試者產(chǎn)生與該刺激事件相關(guān)聯(lián)的腦電變化,從而反映腦功能。ERPs具有毫秒級的時間分辨率,且安全無創(chuàng),易于操作,結(jié)果客觀。ERPs的成分可分為如下兩類:①外源性成分,易受外部刺激物理屬性的影響;②內(nèi)源性成分,主要受心理認(rèn)知因素的影響,能夠客觀地反映大腦的認(rèn)知過程,因此也被叫做“認(rèn)知電位”。MMN、P300(含P3a、P3b兩個亞成分)即屬于內(nèi)源性成分。

MMN可反映大腦對信息的自動加工。三刺激聽覺Oddball范式是誘發(fā)MMN的常用范式,所謂的三刺激即標(biāo)準(zhǔn)、偏差及新異3種刺激,MMN由新異刺激與其他刺激的差異所誘發(fā)。研究認(rèn)為,MMN的產(chǎn)生與記憶痕跡有關(guān)〔5〕。即標(biāo)準(zhǔn)刺激的多次重復(fù)可形成記憶痕跡,大腦接收到后續(xù)的刺激信號后會自動與記憶痕跡進(jìn)行比較,若發(fā)現(xiàn)不同即產(chǎn)生MMN。MMN在認(rèn)知相關(guān)疾病的研究中應(yīng)用廣泛。Pekkonen等〔6〕研究顯示,與正常青年人相比,正常老年和阿爾茨海默病患者的MMN波幅均下降。丁瑩〔7〕研究發(fā)現(xiàn),肝郁型MCI患者與年齡、性別、文化程度1∶1匹配的正常中老年人相比,MMN波幅明顯降低、潛伏期明顯延長。本研究發(fā)現(xiàn)用藥后MMN顯著縮短,說明肝郁型MCI患者用藥后大腦對信息的自動加工速度得到了提升。

P300是1965年Sutton在Oddball范式中發(fā)現(xiàn)的,后續(xù)證實其他實驗范式中也可誘發(fā)。Oddball范式中的P300有多個腦內(nèi)源,與注意和記憶加工機(jī)制有關(guān)〔8〕。P300主要包含P3a和P3b兩個亞成分。P3a通常由與任務(wù)無關(guān)的意外刺激誘發(fā),體現(xiàn)了對新異刺激的注意朝向,與高級神經(jīng)功能如感知覺、注意、記憶等有關(guān)〔9,10〕;P3b由任務(wù)相關(guān)刺激誘發(fā),體現(xiàn)了被試者在記憶中存儲的期待事件被呈現(xiàn)時的反應(yīng)過程〔11〕。丁瑩〔7〕研究表明,與青年人相比,中老年人P3a波幅減小;此外,與正常組被試者相比,肝郁型MCI患者P3a的波幅減小,推測P3a的波幅減小可作為檢測MCI患者認(rèn)知功能損傷的客觀指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn),用藥后P3a波幅增大,提示肝郁型MCI患者用藥后認(rèn)知功能得到了改善。P300雖然是ERPs研究的重要內(nèi)容,但其受任務(wù)難度、不同類型刺激出現(xiàn)的概率、刺激的重要性、被試者決策及決策信心、刺激的不肯定性等多種因素的影響〔12,13〕。上述影響因素可能是本研究中用藥前后肝郁型MCI患者P3a潛伏期及P3b的波幅和潛伏期未發(fā)生明顯改變的原因。

有研究認(rèn)為,與P300相比,MMN可更敏感地反映大腦功能的障礙〔14〕。本研究表明,逍遙丸可降低肝郁型MCI患者的肝氣郁結(jié)程度,改善患者的認(rèn)知功能。這一結(jié)果為肝郁型MCI患者的臨床治療提供了借鑒。