楊宗朋

（海天醋業(yè)（廣東）有限公司，廣東佛山 528500）

食醋是廣泛使用的調(diào)味產(chǎn)品，在人們?nèi)粘Ｉ钪邪l(fā)揮著不可忽視的作用。液態(tài)發(fā)酵食醋是當(dāng)前主流釀造食醋的發(fā)酵工藝，在中國(guó)、歐洲、日本被廣泛采用。根據(jù)發(fā)酵方式的差異，液態(tài)發(fā)酵食醋可細(xì)分為表面靜態(tài)發(fā)酵法、液態(tài)噴淋發(fā)酵法、深層通風(fēng)發(fā)酵法等，深層通風(fēng)發(fā)酵法的發(fā)酵條件要求較低，可實(shí)現(xiàn)食醋快速、高效生產(chǎn)[1]。液態(tài)發(fā)酵食醋以大米為發(fā)酵基料，蒸煮、液化、糖化和酒精發(fā)酵后壓濾得到米酒清液，接入醋酸菌進(jìn)行液態(tài)深層醋酸發(fā)酵得食醋。與傳統(tǒng)固態(tài)發(fā)酵法相比，該工藝優(yōu)勢(shì)在于生產(chǎn)效率高，但原料和發(fā)酵菌種單一造成產(chǎn)品具有酸味刺激、口感單薄的缺陷。

目前，關(guān)于液態(tài)發(fā)酵食醋已有的研究報(bào)道主要集中在高抗性、高產(chǎn)酸速率醋酸菌的篩選[2]，鮮少見(jiàn)針對(duì)該工藝所產(chǎn)食醋風(fēng)味改善的研究。在傳統(tǒng)食醋釀造過(guò)程中，大量乳酸菌代謝分泌乳酸，促進(jìn)多種風(fēng)味物質(zhì)的形成，對(duì)食醋口感、風(fēng)味改善起到了重要作用。在實(shí)際生產(chǎn)中，液態(tài)深層發(fā)酵米醋具有高通氣和發(fā)酵基質(zhì)方面的問(wèn)題，往往導(dǎo)致發(fā)酵過(guò)程中生成大量泡沫，影響發(fā)酵速率和發(fā)酵罐裝料量。在陳釀過(guò)程中，米醋可發(fā)生生物代謝和非生物反應(yīng)，顯著提升米醋風(fēng)味物質(zhì)的含量，改善產(chǎn)品感官質(zhì)量[3]。在米醋發(fā)酵末期，本研究添加乳酸菌發(fā)酵后的麥麩提取液于發(fā)酵液中，引入后熟工藝，二者充分反應(yīng)，協(xié)同改善液態(tài)發(fā)酵米醋的風(fēng)味品質(zhì)，為優(yōu)化米醋釀造工藝提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

麥麩，市售采購(gòu)；米酒，實(shí)驗(yàn)室自制，乙醇體積百分?jǐn)?shù)為11%，稀釋至10%待用；氫氧化鈉、硫酸鋅等無(wú)機(jī)化學(xué)試劑，國(guó)藥集團(tuán)；2-辛醇、草酸等色譜純標(biāo)準(zhǔn)品，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；羅伊氏乳桿菌（Lactobacillus reuteri），實(shí)驗(yàn)室從米酒發(fā)酵過(guò)程中分離得到。

1.2 儀器與設(shè)備

1260高效液相色譜儀，美國(guó)Agilent公司；7890B-5977B氣質(zhì)聯(lián)用儀，美國(guó)Agilent公司；8 L液態(tài)深層自吸式發(fā)酵罐，實(shí)驗(yàn)室自制；生化培養(yǎng)箱，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；DA-650臺(tái)式酒精度測(cè)定儀，京都電子（KEM）中國(guó)分公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 米醋的液態(tài)深層發(fā)酵

將麥麩與水按1∶4（m∶v）料水比混合，超聲處理20 min，用100目紗網(wǎng)過(guò)濾，得到麥麩提取液；將羅伊氏乳桿菌培養(yǎng)液（OD600=0.703）按2%（v/v）接種量接種至500 mL麥麩提取液中，混合均勻，37 ℃靜置密閉發(fā)酵24 h，得到乳酸發(fā)酵液；在醋酸發(fā)酵罐中加入米酒，按10%（v/v）接種量接入醋種，控制裝液量3 L，通氣量50 L·min-1，分割量1 L，循環(huán)發(fā)酵至第8輪次，當(dāng)發(fā)酵液殘酒為0.6%（v/v）時(shí)，收集排料，按排料體積的10%在試驗(yàn)組中加入乳酸發(fā)酵液，隨后在25～30 ℃下靜置后熟15 d，對(duì)照組僅加入麥麩提取液，不進(jìn)行后熟。

1.3.2 總酸的測(cè)定

按照《食醋衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》（GB/T 5009.41—2003）中總酸測(cè)定方法執(zhí)行[4]。

1.3.3 有機(jī)酸的測(cè)定

按照《國(guó)家地理標(biāo)志產(chǎn)品 鎮(zhèn)江香醋》（GB/T 18623—2011）中有機(jī)酸測(cè)定方法執(zhí)行[5]。

1.3.4 揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)檢測(cè)方法

按照蔣雅君等[6]報(bào)道的檢測(cè)方法執(zhí)行。

1.3.5 感官評(píng)價(jià)

由食醋專業(yè)感官鑒評(píng)小組，按照鄧永建等[7]的方法，對(duì)試驗(yàn)米醋從色澤、體態(tài)、香氣和口感4個(gè)方面進(jìn)行感官評(píng)價(jià)，以樣品各項(xiàng)平均得分為最終評(píng)價(jià)結(jié)果。

1.3.6 數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Excel 2016進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 乳酸菌發(fā)酵麥麩提取液表征

麥麩來(lái)自小麥研磨過(guò)程，內(nèi)含淀粉糖、粗蛋白、維生素和礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在我國(guó)傳統(tǒng)食醋生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用。由表1可知，新鮮麥麩提取液總酸達(dá)到1.58 g·L-1（以乳酸計(jì)），有機(jī)酸組成中酒石酸占比最大，其次為琥珀酸，乳酸、乙酸和檸檬酸處于相同水平，幾乎不含草酸和丙酮酸。經(jīng)羅伊氏乳桿菌發(fā)酵后，麥麩提取液總酸達(dá)到10.03 g·L-1（以乳酸計(jì)），有機(jī)酸中檢出的乳酸、乙酸含量明顯上升，酒石酸、琥珀酸略有下降，草酸、丙酮酸和檸檬酸含量無(wú)明顯變化，表明羅伊氏乳桿菌發(fā)酵以乳酸和乙酸為主要代謝產(chǎn)物。

表1 乳酸菌發(fā)酵24 h后麥麩提取液總酸及有機(jī)酸組成（單位：g·L-1）

2.2 液態(tài)深層發(fā)酵米醋有機(jī)酸組成分析

由表2可知，試驗(yàn)組和對(duì)照組液態(tài)深層發(fā)酵米醋中的主體有機(jī)酸均為乙酸，另含少量酒石酸、乳酸、檸檬酸和琥珀酸，以及微量草酸和丙酮酸。發(fā)酵末期接入羅伊氏乳桿菌發(fā)酵后的麥麩提取液，后熟后發(fā)酵液中乳酸含量明顯增加，表明該試驗(yàn)發(fā)酵體系對(duì)液態(tài)深層發(fā)酵米醋有機(jī)酸的影響主要表現(xiàn)為增加醋體乳酸含量。

表2 液態(tài)深層發(fā)酵米醋的有機(jī)酸組成（單位：g·L-1）

2.3 液態(tài)深層發(fā)酵米醋的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)組成分析

食醋中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的種類和含量是影響風(fēng)味復(fù)雜性的重要因素。由圖1可知，從兩組液態(tài)深層發(fā)酵米醋中共檢出酯類、醇類、酸類、醛類和酮類等10類揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)，對(duì)照組檢出種類數(shù)明顯少于試驗(yàn)組。對(duì)兩組液態(tài)深層發(fā)酵米醋揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)含量進(jìn)行分析，試驗(yàn)組酯類和醇類物質(zhì)含量明顯高于對(duì)照組，酯類物質(zhì)中乙酸異戊酯、乙酸異丁酯、乙酸苯乙酯和丁二酸二乙酯可賦予食醋水果香氣[8]，由表3可知試驗(yàn)組中乙酸苯乙酯和丁二酸二丁酯含量明顯高于對(duì)照組。醇類物質(zhì)中苯乙醇具有玫瑰花香，異戊醇具有醇味和澀味，2,3-丁二醇具有焦香和奶油香氣[9]，試驗(yàn)組中苯乙醇含量明顯高于對(duì)照組。由此可知，試驗(yàn)組相較于對(duì)照組揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)含量高。

圖1 液態(tài)深層發(fā)酵米醋中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)種類和含量分布

表3 主要揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)含量對(duì)比

2.4 液態(tài)深層發(fā)酵米醋感官評(píng)價(jià)結(jié)果

由表4可知，兩組米醋樣品的色澤和體態(tài)評(píng)分接近，差異較小。試驗(yàn)組香氣和口感評(píng)分明顯優(yōu)于對(duì)照組，有較大差異，表明本試驗(yàn)的技術(shù)方案可顯著改善液態(tài)深層發(fā)酵米醋的品質(zhì)。

表4 米醋樣品感官評(píng)分結(jié)果（單位：分）

3 結(jié)論

本研究在液態(tài)深層發(fā)酵米醋的發(fā)酵末期接入羅伊氏乳桿菌發(fā)酵后的麥麩提取液，控溫后熟，結(jié)果表明此法可顯著增加液態(tài)深層發(fā)酵米醋中的乳酸含量，改善米醋口感，增加米醋中揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的種類及濃度，可達(dá)到改善液態(tài)深層發(fā)酵米醋品質(zhì)的目的。在對(duì)液態(tài)深層發(fā)酵米醋發(fā)酵過(guò)程無(wú)影響的情況下，本法改善了米醋的品質(zhì)，為該技術(shù)的擴(kuò)大應(yīng)用提供了理論支持和參考資料。