佟俊婷

【摘要】本文使用氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，對(duì)氨基酸分析儀檢出限以及分離度進(jìn)行不確定度評(píng)定。結(jié)果表明：檢出限擴(kuò)展相對(duì)不確定度為9.6%，通過不確定度分析，基線噪聲的波動(dòng)性對(duì)儀器檢出限的影響最大，降低基線噪聲可有效改善儀器檢出限；分離度的擴(kuò)展相對(duì)不確定度為6.1%，通過不確定度分析發(fā)現(xiàn)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度以及待測(cè)物濃度對(duì)分離度的影響最大，在儀器的線性范圍內(nèi)適當(dāng)增大待測(cè)物濃度可有效改善待測(cè)物的分離度。

【關(guān)鍵詞】氨基酸分析儀；不確定度評(píng)定；檢出限；分離度

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2023.02.012

【基金項(xiàng)目】遼寧省檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證中心青年人才創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目（SC20210106）。

Evaluation of Uncertainty of Detection Lmit and Resolution of Amino Acid Analyzer

TONG Junting

（Liaoning Institute of Measurement，Shenyang 110004，China）

Abstract：In this paper，the mixed standard substance of amino acid is used to evaluate the uncertainty of detection limit and resolution of amino acid analyzer. The results show that the expanded relative uncertainty of the detection limit is 9.6%. Through uncertainty analysis，the fluctuation of baseline noise has the greatest impact on the detection limit of the instrument. Reducing baseline noise can effectively improve the detection limit of the instrument. The expanded relative uncertainty of degree of separation is 6.1%. Through uncertainty analysis，the uncertainty of reference materials and concentration of the analytes has the greatest impact on the degree of separation. Appropriately increasing the concentration of the analytes within the linear range of the instrument can effectively improve the degree of separation of the instrument.

Key words：amino acid analyzer；evaluation of uncertainty；detection limit；degree of separation

氨基酸分析儀是一款廣泛應(yīng)用于食品科學(xué)、農(nóng)業(yè)環(huán)境、生物化學(xué)、醫(yī)療衛(wèi)生及化工領(lǐng)域的分析儀器[1-2]。氨基酸分析儀的基本原理為：試樣經(jīng)過前處理去蛋白之后，樣液經(jīng)離子交換柱層析分離，被分離出的氨基酸通過柱后衍生與茚三酮溶液反應(yīng)顯色，用紫外檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量[3-4]。檢出限是評(píng)價(jià)分析方法的重要指標(biāo)，一般分為儀器檢出限、分析方法檢出限。儀器檢出限是指分析儀器能區(qū)分噪聲的最低檢出濃度的能力，而方法檢出限不但與儀器噪聲有關(guān)，還與方法全部流程的各個(gè)環(huán)節(jié)相關(guān)。目前，研究方法檢出限的較多，但較少有針對(duì)儀器檢出限不確定度進(jìn)行評(píng)定的方法。為正確評(píng)估儀器檢出限，本文將針對(duì)氨基酸分析儀進(jìn)行儀器檢出限不確定度的評(píng)定，為檢出限不確定度評(píng)定提供解決方案。分離度是氨基酸分析儀判斷待測(cè)物質(zhì)在色譜柱中分離情況的另一個(gè)重要指標(biāo)。氨基酸分析儀的分離度是指峰高分離度。本文通過結(jié)合分離度和儀器檢出限的不確定度分析，對(duì)氨基酸分析儀的性能水平作出準(zhǔn)確評(píng)價(jià)。

1材料與方法

1.1材料與儀器

17種氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：濃度約為1 mmol/L，擴(kuò)展不確定度為0.02～0.04 mmol/L（k=2），中國計(jì)量科學(xué)研究院生產(chǎn)；電子天平：Ⅰ級(jí)，感量為0.1 mg，METTLER TOLEDO公司；L-8900型氨基酸分析儀：日立公司；游標(biāo)卡尺：測(cè)量范圍為0～150 mm，最小分度0.02 mm，檢定的不確定度為0.04 mm，k=2，桂林廣陸數(shù)字測(cè)控股份有限公司；容量瓶：100 mL/250 mL/1000 mL，A級(jí)。

1.2方法

1.2.1樣品

取適量濃度、適量體積氨基酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)注入儀器，準(zhǔn)備檢出限以及分離度的測(cè)定。

1.2.2測(cè)定方法

本次使用的氨基酸分析儀采用衍生化間接分析方法，原理是基于陽離子交換樹脂分離-柱后茚三酮衍生化分光光度檢測(cè)方法。本方法使用陽離子交換樹脂柱為固定相，酸性緩沖液為流動(dòng)相，經(jīng)過離子交換柱樣品中不同種類的氨基酸分離流出后，與茚三酮進(jìn)行衍生反應(yīng)，生成具有可見光吸收的衍生物，進(jìn)入檢測(cè)器，選用570 nm進(jìn)行定量檢測(cè)。

2氨基酸分析儀檢出限不確定度評(píng)定

2.1數(shù)學(xué)模型的建立