陳淑芳 賈惠言 戴久麗 宋佳巍 周 瀟

（1．寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 寧波 315040；2．象山縣畜牧獸醫(yī)總站，浙江 寧波 315700）

乳酸菌素是以鮮牛奶為原料經(jīng)乳酸菌發(fā)酵后制備成的微生態(tài)制劑。乳酸菌在增殖過程中會(huì)合成一些用于抑菌和殺菌的蛋白質(zhì)或多肽類物質(zhì)，與抗生素有類似的作用機(jī)制，可有效抑制病原菌生長(zhǎng)，提高飼料轉(zhuǎn)化率，保持畜禽健康生長(zhǎng)[1-3]。乳酸菌素可在畜禽腸胃道黏膜上定植，形成一層有效的防御屏障[4-5]，增強(qiáng)乳酸菌與病原微生物的競(jìng)爭(zhēng)能力，減少病原微生物[6-7]，增強(qiáng)機(jī)體免疫力[8]。日糧中添加重金屬耐受的乳酸菌可降低動(dòng)物體內(nèi)重金屬沉積。Wang 等[9]研究表明，嗜酸乳桿菌可降低蛋雞酮體和脂肪的含量，減少肝臟和蛋黃膽固醇含量，增加高密度脂蛋白膽固醇含量。乳酸菌的微生物制劑可降低育成雞的料重比，提高生產(chǎn)性能[10-11]?？琢钗涞萚12]研究表明，在雞飼糧中添加耐鎘乳桿菌能夠改善鎘引起的蛋白高度下降的狀況，提高雞蛋分級(jí)，改善蛋品質(zhì)。吉米斯等[13]研究表明，乳酸菌可改善禽類腹瀉癥狀，顯著提高脾臟指數(shù)。張彩鳳等[7]研究表明，乳酸菌可有效調(diào)節(jié)禽類的血清免疫功能指標(biāo)，緩解由致病菌所引起的氧化損傷。同時(shí)，乳酸菌對(duì)改善禽類畜舍環(huán)境也具有積極作用[14]。此外還有其他關(guān)于乳酸菌素飼喂肉雞的報(bào)道[15-16]，但尚無乳酸菌素在浙東白鵝母鵝生產(chǎn)上應(yīng)用的報(bào)道。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部194號(hào)公告[17]公布后，使用微生態(tài)制劑調(diào)節(jié)畜禽腸道健康受到越來越多的關(guān)注。本試驗(yàn)旨在探討日糧中添加不同水平的乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝繁殖性能、蛋品質(zhì)及血清生化免疫指標(biāo)的影響，為乳酸菌素作為飼料添加劑在浙東白鵝母鵝飼喂過程中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在象山文杰大白鵝養(yǎng)殖有限公司進(jìn)行。選擇體形勻稱且身體健康的浙東白鵝種母鵝（約19～20 月齡）共2 000只，按照體重相近的原則隨機(jī)分為對(duì)照組、試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2 和試驗(yàn)組3，每組5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100只鵝。

試驗(yàn)從2022 年2 月14 日開始，預(yù)試期15 d，正式試驗(yàn)期150 d，分2 個(gè)產(chǎn)蛋周期，第1 產(chǎn)蛋周期從2022 年3月1日至2022年5月14日，第2產(chǎn)蛋周期從2022年5月15日到2022年7月28日。對(duì)照組鵝飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2、試驗(yàn)組3 分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.01%、0.02%、0.04%乳酸菌素（益華河北生物有限公司），乳酸菌素的活力值為1 500 AU/mL?；A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2 飼養(yǎng)管理

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1 繁殖性能

試驗(yàn)期間記錄已編號(hào)的種鵝每天產(chǎn)蛋數(shù)和蛋重，計(jì)算平均產(chǎn)蛋數(shù)和平均蛋重。采用“泄殖腔托蛋”方法[18]測(cè)定鵝產(chǎn)蛋枚數(shù)。

種蛋進(jìn)入孵化箱后第6 d，用頭照的方法挑出無精蛋和死精蛋；種蛋進(jìn)入孵化箱后第12 d，用二照的方法挑出死胎蛋。記錄無精蛋、死精蛋的數(shù)量和死胎蛋的數(shù)量，計(jì)算受精率和孵化率。

受精率=受精蛋數(shù)/入孵化箱的蛋數(shù)×100%(1)

孵化率=出雛鵝數(shù)量/受精蛋數(shù)×100%(2)

1.3.2 蛋品質(zhì)

第2 產(chǎn)蛋周期結(jié)束當(dāng)天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取10 枚鵝蛋，5 個(gè)重復(fù)共50 枚鵝蛋。游標(biāo)卡尺測(cè)量鵝蛋長(zhǎng)徑、短徑，計(jì)算蛋形指數(shù)；分別在鵝蛋殼的大頭、小頭和中間部位用游標(biāo)卡尺測(cè)量蛋殼厚度，統(tǒng)計(jì)平均值。鵝蛋稱重，取出鵝蛋內(nèi)完整蛋黃并稱重，蛋白盡量倒出，蛋殼破碎后擦干蛋殼內(nèi)容物，將全部的蛋殼碎片稱重，得出蛋殼重量蛋重減去蛋殼重和蛋黃重，即為蛋白重量。根據(jù)蛋黃重和完整蛋重計(jì)算蛋黃比例。

蛋黃比例=完整蛋黃重/全蛋重×100%(3)

1.3.3 血清生化、免疫指標(biāo)

調(diào)查結(jié)果顯示，所有的學(xué)生都表示學(xué)校要求師生員工遵守法律和誠實(shí)守信，但是只有34.67%的學(xué)生反映了學(xué)校要求師生員工、管理人員互相監(jiān)督，認(rèn)為學(xué)校制度要求師生員工合理利用學(xué)校設(shè)施設(shè)備、促進(jìn)師生努力學(xué)習(xí)刻苦鉆研的學(xué)生各占98.67%和96.67%?？傮w來說，某大學(xué)的內(nèi)部控制制度比較全面。

每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)選取5只浙東白鵝母鵝，在第2個(gè)產(chǎn)蛋周期內(nèi)選擇產(chǎn)蛋期的第2枚、第4枚和第6枚，選擇就巢期的第1、10、20 d 及恢復(fù)期的第8 d 為采血時(shí)間。每只母鵝從翅靜脈采血5 mL，加入帶有0.2 mL 0.02 mol/L EDTA抗凝劑的采血管內(nèi)，3 000 r/min離心10 min，收集上清液保存于-20 ℃冰箱。

膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）采用東芝120FR型全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定；總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）用放射免疫分析方法測(cè)定。使用試劑盒測(cè)定白細(xì)胞介素-1（IL-1）、白細(xì)胞介素-2（IL-2）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）含量。生化指標(biāo)與免疫指標(biāo)按照試劑盒（南京建成生物工程研究所）說明書進(jìn)行測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析，Duncan's 進(jìn)行多重比較。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.01表示差異極顯著，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝繁殖性能的影響（見表2）

表2 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝繁殖性能的影響

由表2 可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組2、試驗(yàn)組3 白鵝母鵝兩個(gè)產(chǎn)蛋周期內(nèi)的產(chǎn)蛋數(shù)、受精率顯著提高（P＜0.05），第2 產(chǎn)蛋周期的孵化率顯著提高（P＜0.05）。

2.2 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝產(chǎn)蛋品質(zhì)的影響（見表3）

表3 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝產(chǎn)蛋品質(zhì)的影響

由表3 可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組2、試驗(yàn)組3 鵝蛋的蛋形指數(shù)顯著提高（P＜0.05），試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2、試驗(yàn)組3的蛋黃比例顯著提高（P＜0.05）。

2.3 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝血清生化指標(biāo)的影響（見表4）

由表4 可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2、試驗(yàn)組3白鵝血清TG含量極顯著降低（P＜0.01），HDL-C含量極顯著提高（P＜0.01）；各組白鵝血清LDL-C含量有下降趨勢(shì)（P＞0.05）。

2.4 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝血清免疫指標(biāo)的影響（見表5）

表5 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝血清免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，日糧中添加乳酸菌素對(duì)浙東白鵝血清TP、ALB、GLB、IgA、IgG、IgM、IL-1、IL-2、IL-6免疫指標(biāo)均無顯著影響（P＞0.05）。

3 討論

乳酸菌素是一些乳酸菌在生長(zhǎng)與代謝過程中合成并分泌到環(huán)境中的活性物質(zhì)，包括細(xì)菌素、活性多肽、核苷酸、多酚、寡糖、有機(jī)酸等，可以抑制一些廣譜的革蘭氏陽性菌，自然改善和維護(hù)消化道內(nèi)的微生態(tài)平衡和代謝平衡[19-20]。近年來，乳酸菌素等替抗飼料添加劑在肉禽中的研究較多。張亞雄等[15]研究表明，乳酸菌素對(duì)肉雞日增重和飼料轉(zhuǎn)化率具有明顯的改善作用。王全溪等[16]發(fā)現(xiàn)，日糧中添加乳酸菌素可以提高肉雞的生長(zhǎng)性能，可以改善機(jī)體抗氧化功能。但目前尚無關(guān)于浙東白鵝母鵝的報(bào)道。

3.1 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝繁殖性能的影響

乳酸菌素在動(dòng)物腸道中定植，可分解腸黏膜上皮細(xì)胞上的多糖物質(zhì)，產(chǎn)生促消化酶增強(qiáng)對(duì)碳水化合物的降解，產(chǎn)生蛋白酶促進(jìn)飼料中蛋白質(zhì)的利用和吸收，從而提升動(dòng)物的生產(chǎn)性能。馬曉婷等[21]研究發(fā)現(xiàn)，蛋雞產(chǎn)蛋后期飼糧中添喂乳酸菌能夠明顯提高蛋雞的生產(chǎn)性能，改善蛋品質(zhì)。孫汝江等[22]研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加0.2%的乳酸菌素均能夠提高蛋雞的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)。但乳酸菌素對(duì)母鵝生產(chǎn)性能的影響的相關(guān)報(bào)道較少。本研究中，與對(duì)照組相比，添加乳酸菌素可以提高浙東白鵝母鵝的產(chǎn)蛋數(shù)、受精率與孵化率，改善蛋品質(zhì)。

3.2 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝血清生化指標(biāo)的影響

微生態(tài)制劑會(huì)在很大程度上影響動(dòng)物體內(nèi)糖類、脂類與蛋白質(zhì)的代謝，這些影響均可通過血清生化指標(biāo)反映。胡蘭等[23]研究表明，添加微生物添加劑可提高大骨雞血清TP 含量，降低血清TC 含量。本研究發(fā)現(xiàn)，飼喂乳酸菌素后，浙東白鵝母鵝血清TG 含量極顯著下降，HDL-C含量極顯著升高，表明乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝體內(nèi)的脂質(zhì)代謝具有明顯的正向調(diào)控作用。

3.3 乳酸菌素對(duì)浙東白鵝母鵝血清免疫指標(biāo)的影響

TP、ALB、GLB、免疫球蛋白抗體和細(xì)胞因子等指標(biāo)均能夠反映機(jī)體的免疫情狀。孫汝江等[22]研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加乳酸菌素對(duì)血漿TP、ALB、GLB含量無顯著影響。本研究發(fā)現(xiàn)，各組浙東白鵝血清TP、ALB、GLB及3 種免疫球蛋白、3 種細(xì)胞因子的含量均無顯著差異，可能與使用劑量有關(guān)，具體原因還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，日糧中添加乳酸菌素可明顯提高浙東白鵝母鵝的產(chǎn)蛋數(shù)、受精率和孵化率，對(duì)鵝蛋品質(zhì)與血清生化代謝指標(biāo)，尤其是脂質(zhì)代謝具有積極的影響。綜合試驗(yàn)效果與成本的考慮，乳酸菌素的適宜使用量為0.02%。