高 婕 趙曉靜 張義奇 顧憲銳 馬可為

（保定職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河北 保定 071051）

霉菌毒素是由真菌產(chǎn)生的小分子次生代謝產(chǎn)物，是非蛋白有毒化學(xué)成分[1]，在自然界中廣泛存在。飼料在生產(chǎn)和儲存過程中也可被霉菌毒素污染[2]。我國霉菌毒素污染最普遍且毒性較嚴(yán)重的毒素主要有黃曲霉毒素B1（AFB1）、伏馬毒素B1（FB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）及脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）等[3]。調(diào)查顯示，F(xiàn)B1和DON 在玉米中檢出率為100%，高達(dá)4 500 μg/kg[3]。小麥及麩皮中毒素陽性檢出率超過90%，豆粕中4種霉菌毒素陽性均值和檢出率超過70%[4]。全國約99%飼料和原料均在不同程度上受到霉菌毒素污染[5]。霉菌毒素超標(biāo)或體內(nèi)蓄積會嚴(yán)重危害動物健康，降低生產(chǎn)性能。哺乳母豬的飼糧中黃曲霉毒素超標(biāo)，會造成其哺乳仔豬生長遲緩和死亡[6]。伏馬毒素會嚴(yán)重?fù)p傷呼吸道，破壞免疫系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)，從而導(dǎo)致母豬發(fā)情不規(guī)律、妊娠母豬流產(chǎn)等[7]。玉米赤霉烯酮毒性作用主要是影響動物的繁殖性能[8]。豬是對玉米赤霉烯酮最敏感的動物，低含量即可造成后備母豬假發(fā)情、陰道脫垂或脫肛；初生仔豬的存活率較差、出現(xiàn)八字腿及外陰部腫脹[7]。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）又稱嘔吐毒素，中毒豬會出現(xiàn)腸炎、結(jié)膜炎、腹瀉，嘔吐等癥狀。Chang等[9]報(bào)道，多種霉菌毒素累加協(xié)同作用對動物健康和生產(chǎn)性能的危害更大。毒素會引起腸道上皮細(xì)胞受損，降低吸收和消化功能、免疫力，增加傳染病的感染概率[10]，進(jìn)而造成養(yǎng)殖場經(jīng)濟(jì)損失。

有關(guān)霉菌毒素脫毒降解酶對母豬生產(chǎn)性能方面的研究報(bào)道較少，本試驗(yàn)結(jié)合產(chǎn)品說明的添加劑量，通過在母豬日糧中添加霉菌毒素脫毒降解酶，評價(jià)其降解霉菌毒素的效果，為提高母豬生產(chǎn)性能、解決霉菌毒素問題提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

霉菌毒素脫毒降解酶由八達(dá)博士科技有限公司生產(chǎn)。研發(fā)者從野公豬胃中提取一株釀酒酵母，釀酒酵母產(chǎn)生能夠代謝霉菌毒素的酶，經(jīng)過在胃腸液環(huán)境處理，該酶制劑具有較好的降解活性。產(chǎn)品主要成分為霉菌毒素降解酶、釀酒酵母細(xì)胞壁、釀酒酵母粉等。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)于2021年6 月至12月在易縣農(nóng)牧發(fā)展有限公司規(guī)模種豬場進(jìn)行。選取同批次、遺傳背景、妊娠胎次、預(yù)產(chǎn)期和健康狀況相近的母豬300頭，隨機(jī)分為2組，即試驗(yàn)組和對照組，每組5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30 頭母豬，試驗(yàn)期150 d。生產(chǎn)母豬配種前10 d開始進(jìn)入試驗(yàn)期并記錄數(shù)據(jù)，配種后進(jìn)入妊娠舍，妊娠期平均114 d，哺乳期平均28 d 斷奶。兩組試驗(yàn)豬的保健、疫苗等飼養(yǎng)管理均按豬場常規(guī)程序進(jìn)行。試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與處理

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 測定指標(biāo)及方法

1.3.1 生產(chǎn)性能

跟蹤記錄試驗(yàn)期內(nèi)試驗(yàn)?zāi)肛i的配種、分娩情況，計(jì)算情期受胎率和配種分娩率。

受胎率=妊娠母豬頭數(shù)/參與配種的母畜數(shù)×100% (1)

配種分娩率=分娩母豬數(shù)/配種母豬數(shù)×100%(2)

記錄母豬產(chǎn)健仔數(shù)（1 kg 以上）、弱仔數(shù)、畸形數(shù)、死胎數(shù)、木乃伊數(shù)、總仔數(shù)；仔豬出生重、斷奶重、個(gè)體增重。

個(gè)體增重=斷奶重-出生重(3)

1.3.2 日糧霉菌毒素含量

試驗(yàn)期內(nèi)對照組和試驗(yàn)組使用同一廠家同批次母豬基礎(chǔ)日糧，每批次均抽取樣品送第三方檢測機(jī)構(gòu)進(jìn)行霉菌毒素含量檢測。霉菌毒素含量參照《飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB 13078—2017）進(jìn)行。

1.3.3 母豬血清指標(biāo)

試驗(yàn)?zāi)┢?，母豬早上空腹采血5 mL，3 000 r/min 離心3 min，取血清。采用SMT-120VP 全自動動物生化分析儀測定總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）、葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、堿性磷酸酶（ALP）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽固醇（TC）等。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2013進(jìn)行初步整理，SPSS 21進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 霉菌毒素脫毒降解酶對母豬受胎率、配種分娩率的影響（見表3）

表3 霉菌毒素脫毒降解酶對母豬受胎率、配種分娩率的影響 單位：%

由表3 可知，與對照組相比，試驗(yàn)組母豬情期受胎率、配種分娩率差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)組母豬的配種受胎率和分娩率分別比對照組提高了4.13%、4.13%。

2.2 霉菌毒素脫毒降解酶對繁殖母豬產(chǎn)仔情況的影響（見表4）

表4 霉菌毒素脫毒降解酶對母豬產(chǎn)仔情況的影響 單位：頭

由表4 可知，與對照組相比，試驗(yàn)組母豬的產(chǎn)仔數(shù)差異不顯著（P＞0.05），母豬的產(chǎn)健仔數(shù)比對照組提高了4.52%。

2.3 霉菌毒素脫毒降解酶對哺乳仔豬生長性能的影響（見表5）

表5 霉菌毒素脫毒降解酶對哺乳仔豬生長性能的影響 單位：kg

由表5 可知，與對照組相比，試驗(yàn)組仔豬的出生窩重均差異不顯著，但仔豬的出生均重、斷奶窩重、斷奶均重、窩增重、個(gè)體增重均明顯優(yōu)于對照組（P＜0.05）。與對照組相比，試驗(yàn)組哺乳仔豬出生均重提高了0.07 kg，斷奶均重提高了0.37 kg，個(gè)體增重提高了0.3 kg。

2.4 霉菌毒素脫毒降解酶對母豬血清生化指標(biāo)的影響（見表6）

表6 霉菌毒素脫毒降解酶對母豬血清生化液指標(biāo)的影響

由表6 可知，與對照組相比，試驗(yàn)組母豬血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶活性顯著降低（P＜0.05）；總蛋白、白蛋白、球蛋白含量顯著升高（P＜0.05）。結(jié)果表明，霉菌毒素長期在體內(nèi)蓄積會造成母豬肝功能的異常，影響機(jī)體代謝功能。

2.5 母豬日糧中霉菌毒素檢測結(jié)果（見表7）

表7 母豬基礎(chǔ)日糧隨機(jī)多點(diǎn)采樣霉菌毒素檢測結(jié)果 單位：μg/kg

由表7 可知，除嘔吐霉素含量相對偏高外，整體各項(xiàng)霉菌毒素含量均低于限量標(biāo)準(zhǔn)。

3 討論

3.1 霉菌毒素脫毒降解酶對母豬情期受胎率、配種分娩率的影響

試驗(yàn)所用霉菌毒素脫毒降解酶通過降解黃曲霉毒素有毒基團(tuán)烯醚鏈、玉米赤霉烯酮毒性結(jié)構(gòu)內(nèi)酯鍵、嘔吐毒素有毒基團(tuán)位置異構(gòu)化，使這些霉菌毒素成為無毒物質(zhì)。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組母豬情期受胎率、配種分娩率分別提高4.13%和4.13%。孫德[11]發(fā)現(xiàn)，玉米赤霉烯酮中毒對豬具有促黃體作用，可引起不發(fā)情，最明顯的癥狀是母豬外陰持續(xù)性紅腫，出現(xiàn)假發(fā)情和假孕；懷孕母豬流產(chǎn)，產(chǎn)死胎、弱仔。Obremski 等[12]試驗(yàn)按母豬每千克體重飼喂ZEN 0.2、0.4 mg，連續(xù)7 d，結(jié)果導(dǎo)致母豬卵泡閉鎖，顆粒細(xì)胞凋亡。Malekinejad 等[13]研究發(fā)現(xiàn)，脫氧雪腐鐮刀菌烯醇具有生殖毒性，可抑制豬卵母細(xì)胞的成熟，長期飼喂會引起卵巢萎縮、發(fā)情停止或周期延長。韋富康等[14]研究表明，母豬情期受胎率比對照組提高16.14%。霉菌毒素影響母豬生殖器官和卵泡發(fā)育，出現(xiàn)不發(fā)情或假發(fā)情癥狀，從而降低了繁殖母豬情期受胎率、配種分娩率。

3.2 霉菌毒素脫毒降解酶對母豬產(chǎn)仔情況的影響

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組母豬產(chǎn)健仔數(shù)提高4.52%。韋富康等[14]試驗(yàn)健仔率比對照組高2.73%，與本試驗(yàn)結(jié)果基本一致。ZEN和DON均具有生殖胚胎毒性、免疫毒性和一定致畸作用，可出現(xiàn)死胎、弱胎、畸形胎等現(xiàn)象，二者還會發(fā)生協(xié)同作用[15]，造成母畜陰道脫落、不育、流產(chǎn)、死胎、弱胎等。在母豬日糧中添加霉菌毒素降解酶能減少霉菌毒素的危害，提高仔豬初生活力，出生重、健仔數(shù)等方面均具有明顯的益處。

3.3 霉菌毒素脫毒降解酶對哺乳仔豬生長性能的影響

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組仔豬出生均重、斷奶窩重、斷奶均重、窩增重以及個(gè)體增重上均明顯優(yōu)于對照組，出生均重提高0.07 kg，斷奶均重提高0.37 kg，個(gè)體增重提高了0.3 kg。哺乳仔豬增重存在顯著差異的原因主要是母豬健康度提高，泌乳質(zhì)量和能力提高，保證了哺乳仔豬健康和正常生長發(fā)育，提高了仔豬日增重。

3.4 霉菌毒素脫毒降解酶對母豬血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)可直接反映動物機(jī)體的新陳代謝、功能調(diào)節(jié)及內(nèi)外環(huán)境是否平衡，能夠體現(xiàn)動物機(jī)體健康狀況或疾病狀況。本試驗(yàn)中，對照組母豬血清中ALT、AST、ALP 活性明顯升高，TP、ALB、GLOB 含量有所降低，表明日糧中霉菌毒素含量雖然沒達(dá)到中毒含量，但長期飼喂，會導(dǎo)致毒素在體內(nèi)蓄積，從而造成母豬肝細(xì)胞受到損傷，影響機(jī)體代謝功能。郭銳等[16]研究發(fā)現(xiàn)，羊飼喂劣質(zhì)花生藤出現(xiàn)了嚴(yán)重的肝功能不全，ALT、AST 活性升高。黃曲霉毒素B1主要作用的靶器官是肝臟[17]，其含量超標(biāo)20 μg/kg會嚴(yán)重?fù)p傷肝臟細(xì)胞[6]，在低含量時(shí)，會降低肝臟的解毒能力。DON可以增加肝酶活性，誘導(dǎo)肝組織發(fā)生組織學(xué)損傷[18]。低劑量的DON 和ZEN 會破壞豬肝細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，DON、ZEN 和伏馬菌素B1（FB1）聯(lián)合作用可造成DNA 損傷[19]。在繁殖母豬日糧中添加霉菌毒素降解酶，有效降解霉菌毒素，保護(hù)母豬肝功能，減少遷移毒素進(jìn)乳汁，從而減少哺乳仔豬初期器臟損傷，保證哺乳仔豬健康和正常生長發(fā)育。

3.5 日糧中霉菌毒素檢測結(jié)果分析

本試驗(yàn)日糧霉菌毒素檢測結(jié)果顯示，各霉菌毒素含量均未超過限量標(biāo)準(zhǔn)。雖然母豬日糧中的霉菌毒素含量未超標(biāo)，但嘔吐霉菌和玉米赤霉烯酮均是屬于不易代謝的脂溶性霉菌毒素，長期飼喂含有微量霉菌毒素的日糧會有慢性中毒的現(xiàn)象。本試驗(yàn)結(jié)果是在霉菌毒素未造成嚴(yán)重污染的情況下得出，在霉菌毒素污染嚴(yán)重的情況下，其效果可能會更為凸顯。

霉菌毒素吸附劑是一種硅鋁酸鹽衍生物[20-21]，但有吸附礦物質(zhì)、維生素等營養(yǎng)的缺點(diǎn)；利用化學(xué)物質(zhì)作用改變霉菌毒素結(jié)構(gòu)，會影響飼料的營養(yǎng)品質(zhì)和適口性，存在安全隱患。而霉菌毒素脫毒降解酶屬于微生物降解法[22]，具有特異性強(qiáng)、高效、污染小的特點(diǎn)。霉菌毒素脫毒降解酶是針對霉菌毒素的毒性基因，通過酶解法改變霉菌毒素分子結(jié)構(gòu)[23]，將霉菌毒素降解為無毒無害的代謝產(chǎn)物，有效解除霉菌毒素對動物機(jī)體的危害。霉菌毒素脫毒降解酶針對性強(qiáng)，效果穩(wěn)定，飼料營養(yǎng)成分不受損失，而且降解產(chǎn)物無污染，排出體外不會造成二次污染，具有很好的應(yīng)用前景。

4 結(jié)論

在母豬日糧中添加霉菌毒素脫毒降解酶，能夠降低霉菌毒素對繁殖母豬的危害，減少飼料中霉菌毒素在母豬體內(nèi)蓄積，保證母豬健康，提高母豬繁殖性能及哺乳仔豬的生長性能。