佟垚毅 郭文偉 楊志敏 高 勇 孫茂紅 岳春旺

（1．河北北方學(xué)院，河北 張家口 075051；2．張家口市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，河北 張家口 075000；3．三步育肥（北京）飼料研發(fā)中心，北京 102206）

精氨酸在動物體內(nèi)參與蛋白質(zhì)、尿素、肌酸、一氧化氮、谷氨酰胺等物質(zhì)的合成，還能夠促進動物體內(nèi)氮的沉積，以此提高動物機體免疫力。Wakabayashi 等[1]試驗表明，大鼠缺乏精氨酸會出現(xiàn)體內(nèi)氮負平衡問題，并且出現(xiàn)失重表現(xiàn)。Michael 等[2]發(fā)現(xiàn)，在仔豬日糧中加入精氨酸，其血漿和肌肉中精氨酸濃度均明顯升高。谷氨酰胺是動物體內(nèi)含量較豐富的游離氨基酸，能夠促進動物的健康發(fā)育并具有抗應(yīng)激的作用[3]。谷氨酰胺具有免疫調(diào)節(jié)的功能，能夠為淋巴細胞的增殖提供必要能量，對免疫球蛋白的分泌和腸道免疫機能起到調(diào)控作用。劉玉潔等[4]在飼喂奶山羊高精料日糧情況下添加過瘤胃谷氨酰胺可降低瘤胃上皮的炎癥反應(yīng)，改善上皮緊密連接，從而維護瘤胃上皮屏障的正常功能。周玉香等[5]研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶犢牛頸靜脈灌注谷氨酰胺可有效提高骨骼肌蛋白質(zhì)水平。維生素對反芻動物免疫功能也具有重要作用，維生素A 具有抗應(yīng)激和提高免疫力的功能[6]；維生素D3的代謝產(chǎn)物能夠增強免疫系統(tǒng)（先天免疫）的早期應(yīng)答反應(yīng)[7]；維生素E可增強機體的體液免疫反應(yīng)，還能夠提高細胞免疫功能[8]。本試驗探討飼喂谷草日糧添加復(fù)合氨基酸維生素添加劑對育肥肉牛血清生化及免疫球蛋白的影響，為提高育肥肉牛生理功能和免疫力提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

谷草、玉米秸稈和精飼料等飼料均來自河北張家口谷潤天養(yǎng)牛專業(yè)合作社深井肉牛養(yǎng)殖基地；復(fù)合氨基酸維生素添加劑產(chǎn)品由河北科恒生物科技有限公司定制，添加劑產(chǎn)品分為3 種，第一種添加5 g/kg 精氨酸+15 g/kg谷氨酰胺；第二種添加5 g/kg精氨酸+70 mg/kg復(fù)合維生素A、D、E；第三種添加15 g/kg 谷氨酰胺+70 mg/kg 復(fù)合維生素A、D、E。復(fù)合維生素成分含量為：VA 23 000 IU/kg、VD 3 000 IU/kg、VE 300 IU/kg。

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗動物為谷潤天肉牛養(yǎng)殖合作社肉牛場的健康無病育肥公牛，試驗共選取體重（485.82 kg±12.50 kg）日齡相近的西門塔爾雜交公牛12頭。采用完全隨機設(shè)計分為4組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)1頭牛。各組飼喂統(tǒng)一精飼料，粗飼料由30%谷草+70%玉米秸稈組成。對照組飼牛喂基礎(chǔ)日糧；試驗A 組、試驗B 組、試驗C 組分別在基礎(chǔ)日糧中添加3種復(fù)合添加劑。預(yù)試期15 d，正式試驗期45 d?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

日糧參照《肉牛飼養(yǎng)標準》（NY/T 815—2004）配制，按照體重475 kg，日增重0.9 kg設(shè)計。每日飼喂兩次（7：00 和17：00），肉牛自由采食、飲水。添加劑組飼喂方式：首先取2 kg全混合日糧與添加劑均勻混合飼喂，完全采食完后，再飼喂剩余日糧，上午、下午各一次。各試驗組與對照組牛舍環(huán)境條件控制相對一致，日常管理相同。

1.3 測定指標及方法

在試驗正式試驗期第45 d 晨飼前，用一次性注射器于每頭試驗牛頸靜脈采血15 mL，置于不含抗凝劑的真空采血管中，-4 ℃靜置 30 min，1 500 r/min 離心 10 min分離血清，-20 ℃保存。

1.3.1 血清生化指標

血清生化指標中總蛋白、白蛋白和球蛋白使用雙縮脲法測定；谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、肌酸激酶、淀粉酶的活性采用比色法測定；葡萄糖、甘油三酯和膽固醇使用酶聯(lián)法測定，尿素氮使用尿素酶法測定。上述各項指標均采用Celercare V5全自動生化儀測定（微納芯MNCHIP公司）。

1.3.2 免疫球蛋白指標

血清中免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M （IgM） 指標均采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法測定，測定試劑盒購自北京華悅昌生物科技有限公司，操作方法及步驟嚴格按照產(chǎn)品說明書進行。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

數(shù)據(jù)采用Excel 2016 軟件進行初步處理，SPSS 26.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，Duncan's 法多重比較。結(jié)果以“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合氨基酸維生素添加劑對育肥肉牛血清生化指標的影響（見表2）

表2 復(fù)合氨基酸維生素添加劑對育肥肉牛血清生化指標的影響

由表2可知，試驗A組肉牛血清總蛋白、球蛋白、總膽紅素、總膽汁酸、甘油三酯、肌酐、尿素氮、鎂含量及谷草轉(zhuǎn)氨酶、γ-谷氨?；D(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、肌酸激酶活性均顯著高于對照組（P＜0.05）；試驗B組肉牛血清總蛋白、球蛋白、甘油三酯、尿素氮、無機磷含量及谷草轉(zhuǎn)氨酶、γ-谷氨?；D(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、總膽汁酸、肌酸激酶、淀粉酶活性顯著高于對照組（P＜0.05）；試驗C組肉牛血清總蛋白、球蛋白、總膽紅素、尿素氮、鎂含量及γ-谷氨?；D(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、總膽汁酸、肌酸激酶、淀粉酶活性顯著高于對照組（P＜0.05）；各試驗組肉牛血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性及膽固醇、葡萄糖含量均顯著低于對照組（P＜0.05）。

2.2 復(fù)合氨基酸維生素添加劑對育肥肉牛血清免疫指標的影響（見表3）

表3 復(fù)合氨基酸維生素添加劑對育肥肉牛血清免疫指標的影響 單位：mg/L

由表3可知，試驗A組肉牛血清IgM和IgA含量顯著高于其他組（P＜0.05），其他組間各項指標差異均不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 復(fù)合氨基酸維生素添加劑對育肥肉牛血清生化指標的影響

血液生化指標能夠反映動物機體的生理代謝和身體健康狀況。本試驗結(jié)果表明，與對照組相比，復(fù)合氨基酸維生素添加劑對血液生化指標均具有不同程度的影響，血清總蛋白、球蛋白含量顯著提高，表明動物體內(nèi)蛋白質(zhì)的吸收和代謝情況有所提高[9]；同時谷草轉(zhuǎn)氨酶、γ-谷氨?；D(zhuǎn)氨酶等參與機體內(nèi)轉(zhuǎn)氨基作用，其活性升高也能夠反映機體蛋白質(zhì)合成和分解代謝的情況改善。這些指標顯著提高能夠表明氨基酸維生素復(fù)合添加劑對動物機體蛋白質(zhì)合成代謝具有正向作用，以此發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)的作用。各試驗組肉牛血清堿性磷酸酶的活性與膽汁酸含量顯著高于對照組，說明復(fù)合氨基酸維生素添加劑能夠改善動物肝臟代謝功能。堿性磷酸酶在機體代謝過程中起到非常重要的作用，能夠催化水解磷酸單酯、磷酸核苷以及6-磷酸糖等類似化合物[10]，其活性較高也能夠表明日糧中磷酸酯類物質(zhì)利用程度加強。

甘油三酯和總膽固醇含量能夠反映脂類物質(zhì)在動物體內(nèi)的吸收和代謝情況。本研究發(fā)現(xiàn)，試驗A 組、試驗B組肉牛血清甘油三酯含量顯著高于對照組、試驗C組；各試驗組血清膽固醇含量顯著低于對照組。膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸經(jīng)腸道排出體外是體內(nèi)膽固醇代謝的主要途徑[11]，本試驗結(jié)果與上述結(jié)論相同，說明復(fù)合氨基酸維生素添加劑能夠使血液中的膽固醇向膽汁酸轉(zhuǎn)化的速度加快。甘油三酯含量的變化情況與膽固醇表現(xiàn)不同，可能與添加精氨酸和谷氨酰胺對血液產(chǎn)生和分泌NO的功能機制影響有關(guān)[12]。Si 等[13]指出，添加精氨酸可以提高血液中甘油三酯的含量，與本試驗結(jié)果基本一致。試驗各組及對照組血清鈣、磷、鎂的含量均正常，表明日糧能夠滿足動物生長發(fā)育對鈣、磷的需要；試驗A 組和試驗C 組中鎂含量顯著升高，表明谷氨酰胺能夠提高血液中鎂的含量。綜上所述，在日糧中添加復(fù)合氨基酸維生素添加劑可起到改善血液生化指標的作用，不同組合的添加劑種類得到的試驗結(jié)果也存在差異性。

3.2 復(fù)合氨基酸維生素添加劑對育肥肉牛血清免疫指標的影響

免疫球蛋白可從機體免疫學(xué)方面評估動物自身的免疫力狀況，其濃度變化也可體現(xiàn)動物對疫病抵抗能力的高低。IgM 是在機體免疫力中產(chǎn)生最早的抗體，具有強大的殺菌作用；IgA主要參加黏膜免疫過程，在局部的抗感染過程中起到關(guān)鍵作用；而IgG 則為機體體液免疫過程中最主要的抗體，具有抵抗細菌病毒并中和毒素的免疫功能[14]。本試驗結(jié)果表明，精氨酸與谷氨酰胺的組合添加劑顯著提高肉牛血清IgM 和IgA 的含量，與李成賢等[15]、麻名文[16]的研究結(jié)果一致。精氨酸與谷氨酰胺組合添加劑在免疫方面表現(xiàn)出了組合正向效應(yīng)，而其他兩組免疫指標未發(fā)生顯著變化，分析原因可能因為氨基酸與維生素組合未能在免疫球蛋白指標上產(chǎn)生顯著影響，可能對其他免疫指標產(chǎn)生影響，也可能與添加劑的量有關(guān)，具體原因有待進一步探究。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，復(fù)合氨基酸維生素添加劑能夠?qū)τ嗜馀Ｑ迳笜思按x產(chǎn)生影響，其中精氨酸+谷氨酰胺組合能夠提高育肥牛血清IgM和IgA的含量。