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        綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯品質(zhì)和γ-氨基丁酸積累的影響

        2023-07-11 07:50:58王春飛陳逸婷孟憲偉鄭永華
        核農(nóng)學(xué)報(bào) 2023年8期
        關(guān)鍵詞:酸處理谷氨酸綠原

        王春飛 湯 靜 陳逸婷 孟憲偉 金 鵬 鄭永華

        (南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,江蘇 南京 210095)

        馬鈴薯(SolanumtuberosumL.)塊莖含有豐富的淀粉,同時(shí)還含有膳食纖維、維生素及其他活性成分,能給人體提供豐富的熱量,有“地下蘋果”的美稱[1]。隨著鮮切果蔬市場(chǎng)的不斷擴(kuò)大,鮮切馬鈴薯因新鮮、衛(wèi)生、方便等優(yōu)點(diǎn)廣受消費(fèi)者歡迎。然而馬鈴薯經(jīng)削皮、切分等機(jī)械損傷后易發(fā)生表面褐變[2-3]、營養(yǎng)物質(zhì)損失[4-5]及微生物侵染[6-7]等問題,繼而引起感官品質(zhì)及商品性的降低,限制其產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。因此尋找合適的保鮮方法,以減輕鮮切馬鈴薯貯藏期間品質(zhì)劣變現(xiàn)象和延長(zhǎng)貨架期,是鮮切馬鈴薯產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的核心。已有研究表明,包括綠原酸(chlorogenic acid,CGA)在內(nèi)的許多酚類物質(zhì)可以抑制鮮切果蔬褐變[8-10]、營養(yǎng)物質(zhì)損失[9-10]和微生物生長(zhǎng)[11],從而延長(zhǎng)鮮切產(chǎn)品的貨架期。因而綠原酸等酚類物質(zhì)處理在鮮切果蔬保鮮中具有較好的應(yīng)用前景。

        γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)作為一種四碳、非蛋白質(zhì)氨基酸,在動(dòng)植物、微生物體內(nèi)廣泛存在,能幫助人們減輕壓力,起到降低血壓、緩解焦慮和促進(jìn)睡眠的作用[12]。植物體內(nèi)GABA 的形成包括GABA支路和多胺降解兩條途徑,前者是由谷氨酸(glutamic acid,Glu)經(jīng)谷氨酸脫羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)催化形成GABA;后者是二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)或多胺氧化酶(polyamine oxidase,PAO)催化降解多胺生成4-氨基丁醛,然后通過4-氨基丁醛脫氫酶(4-amino aldehyde dehydrogenase,AMADH)催化進(jìn)一步生成GABA[13-14]。研究表明,植物在遭遇低溫、干旱、低氧及機(jī)械損傷等逆境脅迫時(shí),體內(nèi)會(huì)積累大量的GABA,從而提高自身抗逆性[15-16]。研究發(fā)現(xiàn),果蔬經(jīng)切分處理后也會(huì)積累大量的GABA,從而提高自身的營養(yǎng)價(jià)值。如侯瑩等[17]和游萬里等[18]研究發(fā)現(xiàn),鮮切加工可以促進(jìn)鮮切獼猴桃和鮮切哈密瓜GABA 的合成積累,且切分強(qiáng)度越大,合成積累效果越明顯。鮮切加工也可促進(jìn)鮮切火龍果和鮮切萵苣中GABA的積累,且外源氯化鈣處理可進(jìn)一步促進(jìn)GABA含量的增加[19-20]。因此,鮮切加工和采后處理有望成為提高鮮切果蔬GABA 含量和營養(yǎng)價(jià)值的有效方式。但綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯貯藏期間GABA 含量的影響仍鮮見報(bào)道。因此,本試驗(yàn)首先依據(jù)鮮切馬鈴薯貯藏品質(zhì)及GABA含量變化篩選最優(yōu)綠原酸處理濃度,然后探討綠原酸促進(jìn)GABA 積累的可能機(jī)制,以期為鮮切馬鈴薯的保鮮和營養(yǎng)價(jià)值的提升提供依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        以V7 品種馬鈴薯為試驗(yàn)材料,選擇大小均一、表皮完整、無機(jī)械損傷和病蟲害的新鮮馬鈴薯。

        綠原酸(98%)、辣根過氧化物酶,上海阿拉丁生物試劑有限公司;福林酚(分析純)、乙醇(分析純)、4-氨基丁醛、氯化鑭、L-谷氨酸,南京丁貝生物科技有限公司;硼酸、硼砂、磷酸鉀,南京安卓生物科技有限公司;二硫蘇糖醇、乙二胺四乙酸、磷酸吡哆醛、L-苯丙氨酸、苯甲基磺酰氟,南京邁博昊成生物科技有限公司;GABA轉(zhuǎn)氨酶(GABA aminotransferase,GABA-T)ELISA試劑盒,江蘇酶免實(shí)業(yè)有限公司。

        1.2 主要儀器與設(shè)備

        CS-200型精密色差儀,南京沃拓實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司;UV-1900型紫外可見分光光度計(jì),上海精其儀器有限公司;ZQTY-50S 振蕩器,上海知楚儀器有限公司;TGRL-16型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī),上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司;LC-20A高效液相色譜儀,日本島津公司。

        1.3 試驗(yàn)方法

        濃度篩選試驗(yàn):馬鈴薯經(jīng)消毒、晾干和去皮后切成3 mm厚的片狀,分別用蒸餾水及10、30、50和70 mg·L-1綠原酸溶液浸泡10 min。處理結(jié)束取出置于潔凈紗布上,待表面無多余水分后,放入長(zhǎng)15 cm、寬10 cm、高6 cm的塑料盒中,在4 ℃下貯藏72 h。分別于貯藏6、12、24、48和72 h取樣,取樣時(shí)每一處理均隨機(jī)選取4盒樣品,一部分用于品質(zhì)指標(biāo)測(cè)定,另一部分經(jīng)液氮速凍后測(cè)定GABA含量。

        機(jī)制探究試驗(yàn):將鮮切馬鈴薯片隨機(jī)分成兩組,分別用蒸餾水和適宜濃度綠原酸溶液浸泡處理10 min,取出置于潔凈紗布上,待表面無多余水分后,放入長(zhǎng)15 cm、寬10 cm、高6 cm 的塑料盒中,在4 ℃下貯藏72 h。分別于貯藏6、12、24、48 和72 h 取樣,取樣時(shí)每一處理均隨機(jī)選取4 盒樣品,一部分用于品質(zhì)指標(biāo)測(cè)定,另一部分經(jīng)液氮速凍后測(cè)定GABA 含量及代謝相關(guān)酶活性。

        1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

        1.4.1 色澤 采用色差儀測(cè)定L*值。

        1.4.2 菌落總數(shù) 按照《GB 4789.2-2016 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》[21]的方法,檢測(cè)鮮切馬鈴薯中菌落總數(shù),單位為lg(CFU·g-1)。

        1.4.3 淀粉含量 參照曹建康等[22]的碘-淀粉比色法并加以修改。稱取1 g樣品并加入3 mL乙醚研磨,然后加入5 mL 80%乙醇混勻,于4 ℃、12 000 r·min-1離心10 min后保留濾渣并用去離子水定容至5 mL,沸水浴30 min后繼續(xù)離心。反應(yīng)體系為0.1 mL上清液、4.88 mL去離子水和0.02 mL 碘液,混勻并穩(wěn)定5~10 min,測(cè)定660 nm波長(zhǎng)下的吸光度值,單位為mg·g-1FW。

        1.4.4 GABA 含量 參考Wang等[23]的方法并加以修改。在研缽內(nèi),用5 mL 0.1 mol·L-1氯化鑭提取液冰浴研磨0.5 g冷凍樣品,置于離心管后搖床充分震蕩10 min,低溫離心吸取上清備用。準(zhǔn)確吸取200 μL 2 mol·L-1氫氧化鉀溶液加入1.5 mL上清液中,震蕩5 min后繼續(xù)離心。取400 μL上清,依次加入100 μL 2 mol·L-1氫氧化鉀溶液,50 μL 0.5 mol·L-1pH值9.0的硼酸-硼砂緩沖液,600 μL 6%苯酚溶液和300 μL有效氯濃度≥5.5%的次氯酸鈉溶液,5 min 沸水浴后插入冰盒降溫,然后加入500 μL 70%乙醇,30 min內(nèi)測(cè)定645 nm處的吸光值。

        1.4.5 谷氨酸含量 參考Wang 等[23]和Al-Quraan等[24]的方法并稍加修改。稱取0.5 g 樣品并加入3 mL 0.05 mol·L-1氯化鑭冰浴研磨,于4 ℃、12 000 r·min-1離心10 min,在玻璃試管內(nèi)加入0.05 mL 上清液和3 mL反應(yīng)液,于30 ℃孵育60 min,測(cè)定340 nm 波長(zhǎng)下吸光度值的變化,并以還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)標(biāo)準(zhǔn)曲線為基礎(chǔ)衡量谷氨酸水平,最終結(jié)果以mg·g-1FW表示。

        1.4.6 GAD活性 參考Liao等[25]的方法稍加修改。稱取0.5 g樣品,用3 mL 0.1 mol·L-1pH值6.5的磷酸鉀緩沖液[內(nèi)含5 mmol·L-1β-巰基乙醇、0.5 mmol·L-1磷酸吡哆醛(pyridoxal phosphate,PLP)、2 mmol·L-1乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)、10%(v/v)甘油]低溫研磨后離心收集上清。吸取1 mL 0.2 mol·L-1pH 值5.8 的磷酸鉀緩沖液(內(nèi)含40 μmol·L-1PLP、3 mmol·L-1Glu),加入1.5 mL 上清,該反應(yīng)以0.5 mL 1 mol·L-1三氯乙酸終止。GAD 活性用每小時(shí)生成0.01 μmol的GABA表示。

        1.4.7 GABA 轉(zhuǎn)氨酸(GABA aminotransferase,GABAT)活性 利用ELISA試劑盒雙抗體夾心法測(cè)定。

        1.4.8 腐胺、亞精胺和精胺含量 參考Li 等[26]的方法并加以修改。準(zhǔn)確稱取2 g樣品,用3 mL 5%預(yù)冷高氯酸研磨均質(zhì),4 ℃孵育1 h。于4 ℃、12 000 r·min-1離心10 min 后取2 mL 上清,加入0.01 mL 苯甲酰氯和2 mL 2 mol·L-1NaOH,充分混合。置于35 ℃水浴鍋內(nèi)20 min,加入2 mL 冰凍無水乙醚和飽和NaCl 后低速(4 ℃、4 000 r·min-1)離心5 min。取1 mL 醚相氮吹,用400 μL純甲醇溶解氮吹殘留物,最后用0.22 μm有機(jī)濾膜過濾至液相小瓶?jī)?nèi)備用。色譜條件:柱溫28 ℃,進(jìn)樣量20 μL,流速0.8 mL·min-1,流動(dòng)相為35%水(A)和65%甲醇(B),多胺含量依據(jù)相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線得出。

        1.4.9 DAO、PAO 和AMADH 活性 DAO、PAO 活性測(cè)定參考Wang等[27]和Gao等[28]的方法并稍加修改。取1 g 樣品,用2 mL 0.1 mol·L-1pH 值6.6 的磷酸鉀緩沖液冰浴研磨,于4 ℃、12 000 r·min-1離心10 min 后取0.5 mL上清,加入0.2 mL辣根過氧化物酶(250 U·mL-1),1.5 mL 0.1 mol·L-1pH 值6.6的磷酸鉀緩沖液,0.3 mL 4-氨基安替比林(100 mg·L-1)/N,N-二甲基苯胺顯色液(200 μL·L-1)。DAO 加入0.4 mL 腐胺溶液?jiǎn)?dòng)反應(yīng),PAO加入0.4 mL 亞精胺+精胺混合液?jiǎn)?dòng)反應(yīng),分別測(cè)定555 nm 處初始值和反應(yīng)30 min 后末值,以吸光度值每分鐘變化0.01為一個(gè)酶活單位。

        AMADH 活性測(cè)定參考Wang 等[23]的方法稍加修改。測(cè)定樣品在340 nm處吸光值的變化。

        1.5 數(shù)據(jù)處理

        上述指標(biāo)均取3 個(gè)平行樣作3 次重復(fù)測(cè)定。數(shù)據(jù)和圖像分別采用SAS 2020 和Origin 2020 軟件分析和繪制,以鄧肯氏多重比較檢驗(yàn)數(shù)據(jù)間差異顯著性,以P<0.05表示差異達(dá)到顯著水平。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同濃度綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯色澤和菌落總數(shù)的影響

        色澤和菌落總數(shù)是反映鮮切馬鈴薯品質(zhì)的重要指標(biāo)。新鮮馬鈴薯切分后呈淡黃色,隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng),切片表面容易發(fā)生褐變,引起感官品質(zhì)和商品價(jià)值的降低。L*值表示明亮程度,是反映馬鈴薯褐變程度的主要指標(biāo),L*值越大表示褐變程度越小。如圖1-A 所示,貯藏期間各組L*值均不斷降低,說明鮮切馬鈴薯的色澤逐漸變暗,發(fā)生了褐變。綠原酸處理組L*值始終高于對(duì)照組,說明不同濃度綠原酸均可以延緩鮮切馬鈴薯的褐變,以30 mg·L-1綠原酸處理抑制褐變效果最好。

        圖1 不同濃度綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯L*值(A)和菌落總數(shù)(B)的影響Fig.1 Effects of chlorogenic acid treatment with different concentrations on L* value (A),and total bacterial count (B)of fresh-cut potatoes

        馬鈴薯經(jīng)切分后,營養(yǎng)物質(zhì)外滲使其更易遭受微生物侵染,導(dǎo)致品質(zhì)降低甚至腐爛不可食用。鮮切馬鈴薯新鮮程度和食用安全性與菌落總數(shù)密切相關(guān),菌落總數(shù)越高,新鮮度和食用安全性越低。如圖1-B 所示,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),各組菌落總數(shù)均不斷上升,且前48 h 增長(zhǎng)速度快,后期增長(zhǎng)緩慢。這反映出貯藏前期,微生物依靠充足營養(yǎng)物質(zhì)大量繁殖,后期可能進(jìn)入增長(zhǎng)平臺(tái)期。綠原酸處理組菌落總數(shù)始終低于對(duì)照組,且呈現(xiàn)明顯的濃度效應(yīng),處理濃度越高,抑菌效果越好,經(jīng)過72 h 貯藏后,70 mg·L-1濃度綠原酸處理組菌落總數(shù)比對(duì)照組減少近1 lg(CFU·g-1)。

        2.2 不同濃度綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯淀粉和GABA含量的影響

        馬鈴薯中含有豐富的淀粉,是評(píng)價(jià)馬鈴薯營養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo)。如圖2-A所示,鮮切馬鈴薯貯藏期間,淀粉含量逐漸下降,不同濃度綠原酸均可抑制其降低,其中30 mg·L-1濃度綠原酸效果最佳。貯藏72 h后,30 mg·L-1濃度處理組淀粉含量比對(duì)照組高8%,具有顯著差異。

        圖2 不同濃度綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯淀粉(A)和GABA(B)含量的影響Fig.2 Effects of chlorogenic acid treatment with different concentrations on starch (A) and GABA(B) contents of fresh-cut potatoes

        如圖2-B 所示,鮮切馬鈴薯貯藏期間,GABA 含量呈前期升高后期降低的趨勢(shì)。綠原酸處理均提高了鮮切馬鈴薯中GABA含量,其中30 mg·L-1綠原酸處理效果最顯著,貯藏12 h 時(shí)其GABA 含量是對(duì)照組的1.5 倍,是初始值的1.8倍,GABA積累效果顯著。

        以上結(jié)果表明,30 mg·L-1濃度綠原酸在保持鮮切馬鈴薯貯藏品質(zhì)和促進(jìn)GABA 積累方面效果最佳,因此后續(xù)試驗(yàn)研究了該濃度綠原酸處理對(duì)GABA 代謝相關(guān)酶活性的影響,以探究綠原酸處理促進(jìn)鮮切馬鈴薯GABA積累的機(jī)理。

        2.3 30 mg·L-1濃度綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯GABA支路途徑的影響

        谷氨酸是GABA 合成的重要底物,在GAD 的作用下分解形成GABA,而GABA-T 則是分解GABA 的關(guān)鍵酶,能夠降低GABA 含量。如圖3-A 所示,鮮切馬鈴薯在貯藏期間谷氨酸含量先降低后趨于穩(wěn)定,說明谷氨酸分解和GABA 的合成集中在貯藏前期。綠原酸處理組的谷氨酸含量在前48 h 始終低于對(duì)照組,說明綠原酸處理促進(jìn)了支路途徑中谷氨酸向GABA 的轉(zhuǎn)化。如圖3-B 所示,GAD 活性先升高后波動(dòng)降低,且綠原酸處理組始終高于對(duì)照組,說明處理組GAD 活性增強(qiáng)是谷氨酸分解的原因。如圖3-C 所示,GABA 含量變化與GAD 變化相似,前12 h 迅速上升,后期波動(dòng)下降;貯藏12 h時(shí),處理組和對(duì)照組GABA 含量均達(dá)到高峰,處理組比對(duì)照組顯著提高了27%。如圖3-D 所示,對(duì)照組GABA-T活性在貯藏前24 h呈上升趨勢(shì),后期降低;處理組GABA-T 活性在貯藏期間緩慢降低且始終低于對(duì)照組,說明綠原酸處理可以抑制GABA-T活性,從而抑制GABA 的分解。這些結(jié)果說明,綠原酸調(diào)控了GABA 支路關(guān)鍵酶活性,通過提高GAD 活性促進(jìn)了GABA 合成,通過降低GABA-T 活性抑制了GABA分解,從而促進(jìn)了鮮切馬鈴薯中GABA的積累。

        圖3 綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯Glu含量(A)、GAD活性(B)、GABA含量(C)和GABA-T活性(D)的影響Fig.3 Effects of chlorogenic acid treatment on glutamic acid content (A),GAD activity (B),GABA content(C) and GABA-T activity (D) of fresh-cut potatoes

        2.4 30 mg·L-1濃度綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯多胺降解途徑的影響

        多胺降解是GABA 合成的另一重要途徑。多胺在DAO或PAO作用下先生成4-氨基丁醛,然后在AMADH的作用下分解生成GABA。由圖4可知,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),3 種多胺含量整體均呈降低趨勢(shì),且處理組的多胺含量低于對(duì)照組,說明綠原酸處理能夠促進(jìn)多胺分解生成GABA。由圖5可知,DAO和PAO活性在貯藏期間的變化趨勢(shì)一致,即先升高后降低,均在貯藏6 h達(dá)到最高值且處理組顯著高于對(duì)照組,這與GABA 合成變化趨勢(shì)一致。AMADH 活性在貯藏期間呈下降趨勢(shì),處理組AMADH 活性在前48 h 高于對(duì)照組。以上結(jié)果表明,綠原酸處理提高了多胺降解途徑中關(guān)鍵酶活性,從而促進(jìn)了多胺的降解及GABA的合成。

        圖4 綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯腐胺(A)、亞精胺(B)和精胺含量(C)的影響Fig.4 Effects of chlorogenic acid treatment on putrescine (A),spermidine (B) and spermine contents (C) of fresh-cut potatoes

        圖5 綠原酸處理對(duì)鮮切馬鈴薯DAO活性(A)、PAO活性(B)和AMADH活性(C)的影響Fig.5 Effects of chlorogenic acid treatment on DAO (A),PAO (B),and AMADH (C) activities of fresh-cut potatoes

        3 討論

        鮮切果蔬是新鮮蔬菜和水果經(jīng)清洗消毒、去皮切分和包裝等操作制成的產(chǎn)品,因具有安全、衛(wèi)生、方便的優(yōu)點(diǎn),成為果蔬產(chǎn)業(yè)發(fā)展的熱點(diǎn)。然而鮮切果蔬在貯藏期間易出現(xiàn)褐變、微生物生長(zhǎng)繁殖、營養(yǎng)物質(zhì)損失甚至腐爛等問題,造成品質(zhì)降低。酚類物質(zhì)是果蔬中重要的次生代謝產(chǎn)物,能夠減少和降低各種脅迫對(duì)果蔬造成的損害。已有研究表明,外源酚類物質(zhì)可以延緩鮮切果蔬品質(zhì)下降,從而起到保鮮的作用。楊明陽等[29]發(fā)現(xiàn)綠原酸處理可以減輕鮮切貢梨和鮮切蘋果切片的褐變和異味產(chǎn)生,保持更好的感官品質(zhì);阿魏酸處理可以通過抑制多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)和過氧化物酶(peroxidase,POD)活性,顯著減輕鮮切荸薺表面黃變的現(xiàn)象[30];槲皮素處理降低了鮮切馬鈴薯中酚類物質(zhì)的積累和丙二醛的生成,防止了鮮切馬鈴薯的褐變,延長(zhǎng)了貨架期[31]。本研究中,30 mg·L-1綠原酸處理可顯著抑制鮮切馬鈴薯褐變和微生物生長(zhǎng),同時(shí)保持較高的淀粉含量,并促進(jìn)GABA 的合成積累,在維持鮮切馬鈴薯感官和營養(yǎng)品質(zhì)上發(fā)揮著積極作用,因而在鮮切馬鈴薯保鮮中具較好的應(yīng)用前景。

        GABA 合成積累是植物遭受逆境脅迫時(shí)迅速做出的反應(yīng),這種改變能使植物產(chǎn)生更高的抗逆性,以減輕逆境脅迫對(duì)植物造成的損害。GABA 有GABA 支路和多胺降解兩條合成途徑。無論通過哪條途徑,GABA合成積累均與相關(guān)酶活性密切相關(guān),很多逆境脅迫都是通過調(diào)節(jié)相關(guān)酶活性來促進(jìn)GABA 積累的[14,32]。如鮮切加工造成的機(jī)械損傷通過提高GABA 支路中合成關(guān)鍵酶GAD 活性促進(jìn)鮮切獼猴桃和哈密瓜中谷氨酸向GABA 的轉(zhuǎn)化合成[17-18];采用CaCl2處理顯著提高了GAD 活性,加速了谷氨酸分解,從而促進(jìn)了鮮切火龍果[19]、萵苣[20]、梨[33]和馬鈴薯[34]GABA 的合成積累;Deewatthanawong 等[35]研究發(fā)現(xiàn)高濃度CO2處理可促進(jìn)番茄果實(shí)中GABA 的積累,同時(shí)抑制GABA 分解關(guān)鍵酶GABA-T 的活性,而對(duì)GAD 活性影響不大,說明該處理?xiàng)l件下番茄中GABA 的積累可能主要得益于較低的GABA 分解速度;Yan 等[36]研究發(fā)現(xiàn)短波紫外線處理促進(jìn)番茄果實(shí)貯藏期間GABA 積累,這是GAD 活性增高和GABA-T活性降低共同作用的結(jié)果。本研究中,綠原酸處理顯著促進(jìn)了鮮切馬鈴薯中GABA 的積累,同時(shí)提高了GABA 支路途徑中GAD 活性而抑制了GABA-T活性,表明GABA含量得到積累與綠原酸促進(jìn)GABA合成和抑制GABA分解有關(guān)。谷氨酸作為GABA合成的重要底物,其含量在貯藏前期明顯降低且處理組低于對(duì)照組,表明處理組GAD 活性升高促進(jìn)了谷氨酸向GABA 的分解轉(zhuǎn)化。GAD 活性受到pH 和Ca2+的影響[37-38],本研究中綠原酸處理提高GAD 活性可能是其提供了弱酸性環(huán)境,也有可能是綠原酸通過調(diào)節(jié)Ca2+濃度提高GAD 活性,進(jìn)而調(diào)控GABA 合成,但具體機(jī)理有待進(jìn)一步研究。多胺降解是GABA 合成的另一主要途徑。已有研究表明鮮切加工和CaCl2處理可提高該途經(jīng)關(guān)鍵酶DAO、PAO 及AMADH 活性,促進(jìn)鮮切鮮火龍果[19]、萵苣[20]、胡蘿卜[23]和梨[33]GABA 的積累。本研究中,綠原酸處理也提高了鮮切馬鈴薯DAO、PAO及AMADH活性,從而促進(jìn)了多胺向GABA的分解轉(zhuǎn)化??傊?,綠原酸處理通過提高GABA支路和多胺降解途徑中GABA合成關(guān)鍵酶GAD、DAO、PAO和AMADH活性,可促進(jìn)GABA合成,并抑制GABA分解酶GABA-T活性以減少其分解,從而促進(jìn)鮮切馬鈴薯中GABA的積累。

        4 結(jié)論

        本研究結(jié)果表明,外源綠原酸處理可以顯著抑制鮮切馬鈴薯L*值的降低,減輕褐變程度,減少微生物侵染,并保持較高的淀粉含量,維持鮮切馬鈴薯較好的品質(zhì)。同時(shí),綠原酸處理通過提高GABA 合成關(guān)鍵酶GAD、DAO、PAO、AMADH 活性和抑制GABA 分解酶GABA-T 活性,促進(jìn)了谷氨酸和多胺分解生成GABA,同時(shí)減少了GABA 的分解消耗,從而促進(jìn)了GABA 的積累,提高了鮮切馬鈴薯抗氧化活性與營養(yǎng)品質(zhì)。

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