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        不同施肥處理對當(dāng)歸酚類化合物含量的影響

        2023-07-11 00:50:10張丹董妙音崔秀文李金娟馮玉喜丁耀錄栗孟飛干旱生境作物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室甘肅蘭州70070甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院甘肅蘭州70070甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜草與綠色農(nóng)業(yè)研究所農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所甘肅蘭州70070甘南藏族自治州農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣站甘肅合作77000
        中藥新藥與臨床藥理 2023年4期
        關(guān)鍵詞:肉桂酸菌肥兒茶素

        張丹,董妙音,崔秀文,李金娟,馮玉喜,丁耀錄,栗孟飛, (.干旱生境作物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,甘肅 蘭州 70070;.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院,甘肅 蘭州 70070;.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜草與綠色農(nóng)業(yè)研究所/農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所,甘肅 蘭州 70070;.甘南藏族自治州農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣站,甘肅 合作 77000)

        當(dāng)歸來源于傘形科植物當(dāng)歸Angelicasinensis(Oliv.)Diels 的干燥根,具有補(bǔ)血活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤腸通便的功效[1],臨床上常用于治療血虛萎黃、眩暈心悸、月經(jīng)不調(diào)、虛寒腹痛、腸燥便秘等癥[2]。當(dāng)歸含有多種類型化合物,主要包括多糖、揮發(fā)油和酚類等化合物[3]。目前,當(dāng)歸在我國甘肅、云南和青海等省區(qū)大面積種植,占地面積約65 萬畝,年需求量約3 萬噸[4-5]。

        研究[6]表明,當(dāng)歸是一種喜肥的藥用植物,通過合理配施無機(jī)肥、有機(jī)肥、微生物肥或新型肥料等可促進(jìn)植株生長、減少病蟲害、提高產(chǎn)量和品質(zhì)(如提高阿魏酸、藁本內(nèi)酯和揮發(fā)油含量)[7-10]。近年來,中藥材安全性和有效性問題已成為產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展所關(guān)注的焦點(diǎn),因此,實(shí)施中藥生態(tài)農(nóng)業(yè)模式是中藥農(nóng)業(yè)發(fā)展的必由之路[11-12]。為了提高當(dāng)歸綜合質(zhì)量和可持續(xù)利用土壤,課題組前期在化肥、生物菌肥和有機(jī)肥的基礎(chǔ)上設(shè)置7 個(gè)不同處理[磷酸二銨750 kg·ha-1(T1)、生物菌肥2 250 kg·ha-1(T2)、生物菌肥2 250 kg·ha-1+有機(jī)肥6 000 kg·ha-1(T3)、有機(jī)肥12 000 kg·ha-1(T4)、有機(jī)肥18 000 kg·ha-1(T5)、有機(jī)肥24 000 kg·ha-1(T6)和有機(jī)肥30 000 kg·ha-1(T7)],通過對產(chǎn)量(如根長、根數(shù)和干質(zhì)量等)和品質(zhì)(如阿魏酸、藁本內(nèi)酯和抗氧化能力等)形成因素、以及土壤養(yǎng)分變化和吸收進(jìn)行了綜合分析,發(fā)現(xiàn)生物菌肥+有機(jī)肥處理不僅可顯著提高當(dāng)歸的產(chǎn)量和品質(zhì),而且有利于土壤養(yǎng)分的吸收利用。

        多酚類化合物是一類復(fù)雜的具有多個(gè)酚羥基的次生代謝產(chǎn)物,在整個(gè)植物界,含有多酚或酚類的化合物及其衍生物達(dá)6 500 種以上[13]。多酚可分為兩大類:一類是多酚單體,即非聚合物,包括各種黃酮類化合物、綠原酸類、沒食子酸、鞣花酸等;另一類則是由單體聚合而成的低聚或多聚體,統(tǒng)稱單寧類物質(zhì)[14]。酚類化合物不僅有良好的抗氧化功能,還具有強(qiáng)化血管壁、促進(jìn)腸胃消化、降血脂、增強(qiáng)人體免疫力、防動脈硬化和血栓形成,及利尿、降血壓、抑制細(xì)菌與癌細(xì)胞生長等作用[15]。當(dāng)歸中含有較為豐富的酚類化合物,包括阿魏酸、木犀草素-7-O-蘆丁糖苷、查爾酮衍生物等[16]。盡管前人就不同施肥處理影響當(dāng)歸活性物質(zhì)積累進(jìn)行了大量研究,但對酚類化合物的測定與分析較少[7,10,14]。因此,本研究在前期不同肥料(化肥、生物菌肥和有機(jī)肥)處理對當(dāng)歸產(chǎn)量和品質(zhì)影響分析的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步對當(dāng)歸中9 個(gè)酚類化合物進(jìn)行高效液相色譜(HPLC)測定與主成分分析(principal component analysis,PCA),建立同時(shí)檢測當(dāng)歸中9 個(gè)酚類化合物的HPLC 方法,探究不同施肥處理對當(dāng)歸中酚類化合物積累的影響,為當(dāng)歸品質(zhì)提升和合理施肥提供理論支撐和科學(xué)依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 儀器Waters 2998 高效液相色譜儀(美國Waters公司);SB-5200 DTD 型超聲波清洗儀(寧波新芝生物科技有限公司);BT125D 電子天平(十萬分之一,北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司);BS110S 電子天平(萬分之一,北京賽多利斯儀器有限公司);Milli-Q超純水機(jī)(美國Millipore 公司)。

        1.2 試劑與材料甲醇、無水乙醇(色譜純,美國Sigma 公司);冰乙酸(色譜純,天津市大茂化學(xué)試劑廠);熊果苷(Arbutin)、兒茶素(Catechin)、表兒茶素(Epicatechin)、綠原酸(Chlorogenic acid)、咖啡酸(Caffeic acid)、芥子酸(Sinapic acid)、阿魏酸(Ferulic acid)、香豆酸(Coumaric acid)、肉桂酸(Cinnamic acid)(純度均≥98%,上海源葉生物科技有限公司)。

        1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)、施肥試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)地點(diǎn)位于甘南藏族自治州臨潭縣長川鄉(xiāng)千家寨村(海拔2 870 m;N34°69′10"、E103°41′47"),年均降水量約650 mm,年均日照時(shí)數(shù)約2 200 h,年均氣溫約5.6 ℃;試驗(yàn)點(diǎn)以砂壤土為主。2021 年4 月9 日,深翻25~30 cm,使耙耱與土壤充分均勻混合,起壟覆1 m 寬膜,每個(gè)處理設(shè)置3 個(gè)小區(qū)重復(fù)(長25 m×寬8 m),將7 個(gè)處理一次性做基肥施用(表1),以岷歸1 號正常種苗(根直徑0.45~0.55 cm)為材料,于2021 年4 月11 日,采用三角形穴栽法栽種(每壟4 行,株行距20~25 cm,每穴1 株)。植株生長期不再施用追肥,田間統(tǒng)一管理。2021 年10 月25 日,采用5 點(diǎn)取樣法采挖成藥根(n= 20),流水沖洗干凈后,室溫陰干后備用。

        表1 當(dāng)歸不同的施肥處理Table 1 Different fertiliation treatments on Angelica sinensis

        1.4 提取方法選取陰干的當(dāng)歸成藥根,粉碎后過0.18 mm 篩,準(zhǔn)確稱取2.0 g 粉末置于50 mL 無水乙醇中,恒溫震蕩(22 ℃、120 r·min-1)提取24 h,低溫高速(4 ℃、8 000 r·min-1)離心10 min,離心半徑為8 cm,收集上清液,連續(xù)提取3 次。合并3 次提取液,經(jīng)減壓濃縮(500 mbar、70 ℃、150 r·min-1)至小體積,用無水乙醇定容至5 mL,0.22 μm 微孔濾膜過濾后,4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.5 色譜條件Waters Symmetry C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色譜柱;流速:0.8 mL·min-1;進(jìn)樣體積:10 μL;柱溫:30 ℃;檢測器:二級陣列管(DAD);檢測波長:282 nm;流動相:甲醇(A)-0.5%乙酸水溶液(B),梯度洗脫程序?yàn)椋?~5 min,40%~40%A;5~10 min,40%~50% A;10~13 min,50%~65% A;13~16 min,65%~80% A;16~18 min,80%~40% A;18~20 min,40%~40% A。

        1.6 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備分別精確稱取9 個(gè)酚類化合物(熊果苷、兒茶素、表兒茶素、綠原酸、咖啡酸、芥子酸、阿魏酸、香豆酸和肉桂酸)標(biāo)準(zhǔn)品各10.0 mg,用甲醇溶解并定容至10 mL,配制成質(zhì)量濃度為1 000 μg·mL-1的單標(biāo)儲備液。按照實(shí)際檢測要求,將9 個(gè)酚類化合物單標(biāo)各吸取400 μL,定容為1 mL 備用,濃度為400 μg·mL-1。再分別取各單標(biāo)200 μL 配制混標(biāo),定容為2 mL,得各標(biāo)準(zhǔn)濃度均為40 μg·mL-1,用甲醇將混標(biāo)稀釋成質(zhì)量濃度為20、10、5、2.5、1.25、0.625 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)工作液,4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.7 統(tǒng)計(jì)與分析每個(gè)樣品測定3 次,使用Microsoft Office Excel 2010 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和制圖,并用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析和主成分分析。

        2 結(jié)果

        2.1 線性關(guān)系及檢出限對9 個(gè)酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)品的7 個(gè)梯度濃度進(jìn)行測定,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),峰面積為縱坐標(biāo)(Y),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,所得線性回歸方程相關(guān)系數(shù)(r)均大于0.999 5,檢出限為S/N=3 時(shí)的濃度值。見表2。40 μg·mL-1混合標(biāo)準(zhǔn)品的代表性色譜圖見圖1。

        圖1 當(dāng)歸9 個(gè)酚類化合物混合標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖Figure 1 Chromatogram of mixed standards of 9 phenols

        表2 當(dāng)歸9 個(gè)酚類化合物標(biāo)準(zhǔn)品的線性關(guān)系及檢出限Table 2 Linear relationship and detection limit of standards of 9 phenols standards

        2.2 精密度試驗(yàn)精密稱取1 份CK 樣品,按照“1.4”項(xiàng)下酚類提取方法提取,在“1.5”項(xiàng)下色譜條件下連續(xù)進(jìn)樣6 次,計(jì)算6 次進(jìn)樣的峰面積和保留時(shí)間的RSD 值。結(jié)果表明9 個(gè)酚類化合物的保留時(shí)間的RSD<0.92%,各峰相對峰面積的RSD<3.16%,表明儀器精密度良好。

        2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)精密稱取1 份CK 樣品,按照“1.4”項(xiàng)下酚類化合物提取方法提取,按“1.5”項(xiàng)下色譜條件,于0、2、4、8、12、24 h 測定。結(jié)果熊果苷、兒茶素、表兒茶素、綠原酸、咖啡酸、芥子酸、阿魏酸、香豆酸、肉桂酸峰面積的RSD<3.92%,表明樣品在24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

        (4)精益服務(wù)理論的研究邏輯和研究過程為旅游服務(wù)研究提供了一個(gè)新的思路?;诶碚?、顧客和企業(yè)三維視角的理論研究技術(shù)路線能夠復(fù)制到其他相關(guān)問題的研究中,如旅游服務(wù)企業(yè)的員工管理問題、旅游服務(wù)企業(yè)協(xié)同創(chuàng)新的動力機(jī)制與協(xié)同模式問題等。

        2.4 重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取6 份相同樣品,按照“1.4”項(xiàng)下方法提取,按“1.5”項(xiàng)下色譜條件測定。計(jì)算每份樣品之間的峰面積和保留時(shí)間的RSD,結(jié)果9 個(gè)酚類化合物保留時(shí)間的RSD<1.31%,各峰相對峰面積的RSD<4.90%,表明該實(shí)驗(yàn)方法重復(fù)性良好。

        2.5 加樣回收率試驗(yàn)精密稱取6 份相同樣品,加入酚類化合物的標(biāo)準(zhǔn)品,按照“1.4”項(xiàng)下方法提取,精密吸取10 μL,按“1.5”項(xiàng)下色譜條件測定。計(jì)算6 份樣品中9 個(gè)酚類化合物的加樣回收率,結(jié)果表明9 個(gè)酚類化合物的平均加樣回收率為86.2%~103.6%。

        2.6 不同施肥對當(dāng)歸酚類化合物含量的影響不同施肥處理的當(dāng)歸樣品中9 個(gè)酚類化合物含量的測定結(jié)果見表3。T3 處理的當(dāng)歸樣品中阿魏酸和香豆酸含量都顯著高于對照組和其他處理組,分別達(dá)到了3.56 mg·g-1和16.75 μg·g-1;T4 處理的當(dāng)歸樣品中表兒茶素(174.87 μg·g-1)、咖啡酸(7.82 μg·g-1)和肉桂酸(15.98 μg·g-1)含量都顯著高于對照組和其他處理組,T6 處理的當(dāng)歸樣品中綠原酸(149.03 μg·g-1)含量顯著高于對照組和其他處理組。此外,除了在T4和T5 處理的當(dāng)歸樣品中未檢測到兒茶素外,其他各組樣品中都檢測到了9 個(gè)酚類化合物。當(dāng)歸樣品中大多數(shù)酚類化合物的含量在不同的施肥處理間存在顯著性差異(P<0.05)。各當(dāng)歸樣品中酚類化合物的含量比較顯示,阿魏酸含量最高,在2.09~3.56 mg·g-1之間;其次是熊果苷,含量在0.75~1.06 mg·g-1之間;而其他7 個(gè)酚類化合物含量在0.00~189.22 μg·g-1之間。

        表3 不同肥料處理的當(dāng)歸中9 個(gè)酚類化合物含量Table 3 Contents of 9 phenols in Angelica sinensis under different fertilization treatments(±s)

        表3 不同肥料處理的當(dāng)歸中9 個(gè)酚類化合物含量Table 3 Contents of 9 phenols in Angelica sinensis under different fertilization treatments(±s)

        注:同一化合物不同小寫字母表示差異有顯著性(P<0.05)?!?”表示未檢出

        肉桂酸/(μg·g-1)3.52±0.07d 10.27±0.22b 4.37±0.01c 0.89±0.07f 15.98±0.74a 2.06±0.12e 0.91±0.16f 10.12±0.49b處理方法CK T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7阿魏酸/(mg·g-1)2.70±0.03d 2.09±0.01f 2.72±0.02f 3.56±0.06a 2.94±0.04c 3.06±0.04b 2.43±0.04e 2.73±0.05d熊果苷/(mg·g-1)1.06±0.04a 0.97±0.03b 0.75±0.02d 0.83±0.01c 0.83±0.06c 0.94±0.04b 0.97±0.04b 0.92±0.05b表兒茶素/(μg·g-1)3.83±0.17g 100.11±3.64e 29.62±1.77f 106.59±0.60e 174.87±6.54a 131.18±4.00c 117.69±0.71d 155.20±0.86b兒茶素/(μg·g-1)189.22±4.14a 41.40±4.00f 102.98±6.57c 51.93±2.02e--158.72±3.36b 68.37±1.16g綠原酸/(μg·g-1)135.05±4.76b 85.42±1.54e 92.30±3.25e 85.47±5.61e 102.45±2.99d 128.65±2.85b 149.03±3.48a 110.78±3.58c芥子酸/(μg·g-1)16.62±1.51b 19.91±0.38a 15.67±0.73bc 19.52±0.77a 14.38±1.52c 10.26±0.16d 17.25±0.86b 17.40±0.66b香豆酸/(μg·g-1)12.78±0.35b 12.52±0.76b 7.38±0.41de 16.75±0.84a 6.30±0.17e 8.04±0.58d 10.37±0.39c 10.14±1.00c咖啡酸/(μg·g-1)5.67±0.52b 5.58±0.76b 6.37±0.15b 5.89±0.14b 7.82±0.24a 3.61±0.03d 4.75±0.25c 5.64±0.32b

        2.7 主成分分析及綜合評價(jià)

        2.7.1酚類化合物主成分分析 通過對不同肥料處理的當(dāng)歸中9 個(gè)酚類化合物進(jìn)行主成分分析,得到主成分的特征值、方差貢獻(xiàn)率和方差累積貢獻(xiàn)率。見表4。以特征值大于1,累計(jì)方差貢獻(xiàn)率大于85%為提取標(biāo)準(zhǔn),第一主成分特征值為4.38,代表施肥處理后9 個(gè)酚類化合物含量48.64%的信息;第二主成分特征值為2.35,代表施肥處理后9 個(gè)酚類化合物含26.16%的信息;第三主成分特征值為1.10,代表施肥處理后9 個(gè)酚類化合物含量10.92%的信息。前3 個(gè)主成分的累積方差貢獻(xiàn)率達(dá)到85.72%,表明前3 個(gè)主成分可以代表當(dāng)歸中的大部分信息。因此,提取前3 個(gè)主成分代替當(dāng)歸中9 個(gè)酚類化合物,可達(dá)到酚類化合物分析時(shí)降維的目的?;诔煞志仃囈蜃痈咏?,得到的主成分能夠更好地解釋變量。由表5 可知,主成分1 中兒茶素、咖啡酸、介子酸和肉桂酸成分矩陣因子分別為0.87、0.94、0.88 和0.92,均接近于1,表明代表主成分1 的信息主要由兒茶素、咖啡酸、介子酸和肉桂酸組成。主成分2 中綠原酸、表兒茶素和阿魏酸成分矩陣因子分別為0.82、0.96 和0.67,表明代表主成分2 的信息主要由綠原酸、表兒茶素和阿魏酸組成。主成分3 中香豆酸成分矩陣因子為0.61,表明代表主成分3 的信息主要由香豆酸組成。

        表4 當(dāng)歸9 個(gè)酚類化合物成分特征值及方差貢獻(xiàn)率Table 4 Eigenvalues and variance contribution rate of 9 phenols in Angelica sinensis

        表5 當(dāng)歸9 個(gè)酚類化合物成分矩陣Table 5 Component matrix of 9 phenols in Angelica sinensis

        2.7.2不同肥料處理的當(dāng)歸品質(zhì)綜合評價(jià) 根據(jù)當(dāng)歸的主成分矩陣因子除以相對應(yīng)主成分特征值的開平方根,得到9 個(gè)酚類化合物成分得分。見表6。以各成分得分系數(shù)矩陣構(gòu)建3 個(gè)主成分的表達(dá)函數(shù)式:

        表6 當(dāng)歸9 個(gè)酚類化合物主成分得分系數(shù)矩陣Table 6 Principal component score coefficient matrix of 9 phenols in Angelica sinensis

        F1=-0.173ZX1+0.198ZX2-0.046ZX3-0.013ZX4+0.214ZX5+0.202ZX6-0.075ZX7-0.145ZX8+0.209ZX9

        F2=0.095ZX1+0.109ZX2+0.370ZX3+0.436ZX4+0.050ZX5+0.038ZX6+0.304ZX7-0.023ZX8+0.090ZX9

        F3=-0.453ZX1+0.376ZX2-0.131ZX3-0.129ZX4-0.001ZX5-0.168ZX6+0.435ZX7+0.550ZX8-0.069ZX9

        以上3 個(gè)表達(dá)式中ZX為各成分的含量,ZX1、ZX2、ZX3、ZX4、ZX5、ZX6、ZX7、ZX8、ZX9分別為標(biāo)準(zhǔn)化的熊果苷、兒茶素、表兒茶素、綠原酸、咖啡酸、芥子酸、阿魏酸、香豆酸、肉桂酸的含量。用各成分的方差貢獻(xiàn)率為權(quán)重,以3 個(gè)主成分對當(dāng)歸藥材進(jìn)行綜合評價(jià)并對結(jié)果進(jìn)行排序,計(jì)算其綜合評價(jià)的函數(shù)為:

        F=0.486F1+0.262F2+0.109F3。

        根據(jù)綜合評價(jià)函數(shù),可計(jì)算出8 個(gè)不同肥料處理的當(dāng)歸中9 個(gè)酚類化合物的排序。見表7。由排序可以看出,生物菌肥2 250 kg·ha-1+有機(jī)肥6 000 kg·ha-1(T3)處理的當(dāng)歸酚類化合物含量排第1 位,其次是有機(jī)肥18 000 kg·ha-1(T5)處理,不施肥(CK)處理含量排位最后。

        表7 不同施肥處理的當(dāng)歸9 個(gè)酚類化合物主成分值、綜合得分和排序Table 7 The values of principal component value,comprehensive score and ranking of 9 phenols in Angelica sinensis under different fertilization treatments

        3 討論

        當(dāng)歸是我國一味大宗藥材,在我國有著悠久的栽培歷史。當(dāng)歸中含有豐富的揮發(fā)油、有機(jī)酸類、多酚類、多糖類及氨基酸等多種生物活性成分[17],這些成分含量的變化在當(dāng)歸品質(zhì)評價(jià)中具有重要的意義。其中酚類化合物由于具有抗氧化、預(yù)防心血管病、抗癌以及抗衰老等作用在當(dāng)歸藥物研發(fā)中備受青睞[18-20]。本研究建立HPLC 同時(shí)測定不同施肥處理的當(dāng)歸中9 個(gè)酚類化合物的方法,能夠?qū)崿F(xiàn)樣品中9 個(gè)酚類化合物的快速準(zhǔn)確測定。該檢測方法檢測的各酚類化合物線性相關(guān)系數(shù)均大于0.999 5,線性范圍為0.625~40 μg·mL-1,檢出限為0.02~0.41 μg·mL-1,RSD 為0.79%~7.69%,回收率為86.20%~103.60%,表明該方法分析準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好。

        在當(dāng)歸的種植過程中,合理的施肥是保證當(dāng)歸產(chǎn)量和品質(zhì)的重要舉措。有效的施肥模式不僅可以促進(jìn)當(dāng)歸生長,而且還能夠增加有效活性成分的合成和積累,有利于當(dāng)歸成藥品質(zhì)的提升[6]。當(dāng)歸中阿魏酸是評價(jià)當(dāng)歸品質(zhì)的重要指標(biāo)之一[21]。本研究顯示,在生物菌肥2 250 kg·ha-1+有機(jī)肥6 000 kg·ha-1(T3)處理的當(dāng)歸中阿魏酸(3.56 mg·g-1)和香豆酸(16.75 μg·g-1)含量顯著高于其他處理組,可能原因是生物菌肥和有機(jī)肥的混合施肥模式不僅給種植土壤補(bǔ)充了一定量的有機(jī)質(zhì)[22],并且通過添加外源微生物改善了土壤微生態(tài)環(huán)境[23-25],使得生物菌肥+有機(jī)肥處理(T3)處理的當(dāng)歸較其他施肥處理更有利于阿魏酸和香豆酸的合成和積累,但其具體影響機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。研究[23]表明,當(dāng)歸種植過程中施用生物有機(jī)肥顯著改善當(dāng)歸根際土壤環(huán)境和細(xì)菌群落結(jié)構(gòu),可有效提高產(chǎn)量;施用中藥渣堆肥,不僅可以提高當(dāng)歸中阿魏酸和藁本內(nèi)酯的含量,而且還能減少當(dāng)歸抽薹,提高產(chǎn)量[7];施用高效生物有機(jī)肥,能夠適當(dāng)提高土壤中有機(jī)質(zhì)和有益活性菌的含量,降低當(dāng)歸麻口病的發(fā)病率,提高當(dāng)歸品質(zhì)[25]。但是,如果施肥不當(dāng),則會破壞當(dāng)歸中各元素及產(chǎn)物的代謝平衡,抑制植物生長和產(chǎn)物合成[6]。例如,施用過多或過少的鉀肥均不利于株高和根長等外部形態(tài)的發(fā)育,也不利于當(dāng)歸光合作用和酚類等活性成分的積累[26]。因此,選擇合理有效的施肥模式對于增加當(dāng)歸中酚類化合物的含量、提高當(dāng)歸品質(zhì)顯得尤為重要。

        主成分分析法是將多個(gè)原始變量通過線性變換分析出相互獨(dú)立的少數(shù)幾個(gè)主成分的一種多元統(tǒng)計(jì)方法,即在保留原有數(shù)據(jù)信息的基礎(chǔ)上利用相互獨(dú)立的少數(shù)指標(biāo)表示多個(gè)指標(biāo)的方法[27-28]。本研究釆用主成分分析法對不同施肥處理的當(dāng)歸中9 個(gè)酚類化合物進(jìn)行了分析,共提取出特征值大于1 的3 個(gè)主成分,從3 個(gè)主成分中反映出當(dāng)歸中的兒茶素、咖啡酸、介子酸、肉桂酸、綠原酸、表兒茶素、阿魏酸和香豆酸是評價(jià)當(dāng)歸品質(zhì)中酚類化合物的重要指標(biāo)。通過3 個(gè)主成分的方差貢獻(xiàn)率構(gòu)建了不同肥料處理下當(dāng)歸品質(zhì)的綜合評價(jià)模型,并利用該模型分析得出不同施肥處理對當(dāng)歸中酚類化合物的綜合評價(jià)。本研究結(jié)果將有助于優(yōu)化當(dāng)歸種植的施肥模式,為確定最佳施肥方案和提高品質(zhì)提供科學(xué)依據(jù)。

        本研究建立了HPLC 法同時(shí)檢測當(dāng)歸中熊果苷、兒茶素、表兒茶素、綠原酸、咖啡酸、芥子酸、阿魏酸、香豆酸和肉桂酸9 個(gè)酚類化合物的方法。本方法中各組分分離度良好,檢測快速準(zhǔn)確,重復(fù)性好,可為當(dāng)歸藥材的質(zhì)量評價(jià)提供依據(jù)。同時(shí),不同施肥處理對當(dāng)歸中酚類化合物的積累存在較大差異。主成分分析發(fā)現(xiàn),生物菌肥2 250 kg·ha-1+有機(jī)肥6 000 kg·ha-1施肥處理增加了當(dāng)歸中酚類化合物的積累,有機(jī)肥18 000 kg·ha-1處理次之。因此,在當(dāng)歸的大規(guī)模種植中應(yīng)推薦使用生物菌肥+有機(jī)肥的混合施肥模式。

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