劉海濤,侯金鳳,寇晉萍,劉琦,齊麟

（北京市藥品檢驗(yàn)研究院 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局仿制藥研究與評(píng)價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中藥成分分析與生物評(píng)價(jià)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 102206）

藥用輔料（excipient）是指制劑中除藥物外一切物質(zhì)的總稱，亦稱賦形劑（adjuvant）。性質(zhì)優(yōu)良的藥用輔料可以給患者帶來高效安全的藥品[1]。輔料雖然是非治療活性物質(zhì)，但對(duì)藥物作用的出現(xiàn)、強(qiáng)度、速度和時(shí)間都有作用，直接影響藥品的療效[2]。

甘油作為一種非常常見的添加劑，在工業(yè)和日常生活中應(yīng)用廣泛。食品級(jí)和藥用輔料級(jí)甘油除含有丙三醇外，還有酯類、葡萄糖等還原糖，屬于多元醇類甘油。除具有保濕、保潤(rùn)功能外，還具有高活性、抗氧化、促醇化等特殊功效，臨床還可用作潤(rùn)滑性瀉藥，作為藥用輔料時(shí)通常作為甜味劑、保濕劑和粘合劑使用。甘油可與任意比例水混合，常作為皮膚科制劑的保濕劑。甘油對(duì)某些藥物的刺激性有緩和作用，如口腔科的2%碘甘油，其中的甘油能減輕碘對(duì)口腔黏膜的刺激[3]。

藥品溶液的顏色與藥品本身的性質(zhì)、純度、雜質(zhì)的含量有著密切的關(guān)系[4]，藥品溶液顏色的檢查是藥品內(nèi)在質(zhì)量的外部監(jiān)測(cè)，具有簡(jiǎn)易、直觀、切實(shí)有效等優(yōu)點(diǎn)[5]。為了使檢查結(jié)果相對(duì)準(zhǔn)確且易于表述，長(zhǎng)久以來，各國(guó)藥典檢查藥品溶液顏色時(shí)都使用了標(biāo)準(zhǔn)比色液，在檢查時(shí)將藥品溶液與標(biāo)準(zhǔn)比色液在一定的條件下進(jìn)行比較，以此來降低一些主客觀因素的誤差，同時(shí)檢查結(jié)果也用相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)比色液何種色調(diào)、何種色號(hào)來表述[6-7]。目前藥品溶液顏色檢查大多采用目視法，即將供試品溶液與相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行同條件下的目視比較[4]。目視法是一種經(jīng)典的顏色檢查方法[8]，其以直觀、簡(jiǎn)捷的特性一直為各國(guó)藥典藥品溶液顏色檢查的首選方法且仍將被繼續(xù)廣泛使用[9]。但因其僅能對(duì)顏色進(jìn)行主觀粗略的描述，不能進(jìn)行精確量化的測(cè)定和變化趨勢(shì)的細(xì)致研究，一旦遇到色調(diào)與標(biāo)準(zhǔn)比色液不匹配，或顏色深度達(dá)到限度邊緣時(shí)，目視檢查難以避免主觀因素的影響。因此，使用儀器對(duì)顏色進(jìn)行測(cè)定就顯得非常必要。

藥品溶液的顏色千差萬別，可標(biāo)準(zhǔn)比色液的數(shù)目卻是有限的[10]。中國(guó)藥典2020年版要求檢查溶液顏色的樣品中，有21個(gè)使用非標(biāo)準(zhǔn)比色液的品種，這些非標(biāo)準(zhǔn)比色液配制較為繁瑣，且沒有相應(yīng)的標(biāo)定方法。甘油就是其中的一種[11]。因此，筆者使用色差計(jì)對(duì)方法進(jìn)行了修訂，把測(cè)得非標(biāo)準(zhǔn)比色液的色差值作為標(biāo)準(zhǔn)色差值，供試品的色差值與該標(biāo)準(zhǔn)色差值進(jìn)行比較，即可準(zhǔn)確得到供試品顏色的結(jié)果，具體內(nèi)容如下。

1 儀器與試藥

SY-1藥物溶液顏色測(cè)定儀（天大天發(fā)科技有限公司提供，共三臺(tái)）；Xrite color i5紫外分光光度計(jì)；重鉻酸鉀為分析純，水為超純水。

經(jīng)檢索國(guó)家局網(wǎng)站，向目前有批準(zhǔn)文號(hào)的生產(chǎn)企業(yè)發(fā)出了樣品征集函，收到的樣品信息詳見表1。

表1 品種收集樣品信息

2 方法與結(jié)果

2.1 非標(biāo)準(zhǔn)比色液色差值測(cè)定 中國(guó)藥典2020年版甘油各論項(xiàng)下，顏色檢查項(xiàng)規(guī)定為“取本品50ml，置50ml納氏比色管中，與對(duì)照液（取比色用重鉻酸鉀液0.2ml，加水稀釋至50ml制成）比較，不得更深”。參考《中國(guó)藥典》2020年版四部通則“0902溶液顏色檢查法”配制比色用重鉻酸鉀液，按照甘油各論項(xiàng)下的顏色檢查項(xiàng)配制非標(biāo)準(zhǔn)比色液，按照《中國(guó)藥典》2020年版四部通則“0902溶液顏色檢查法”中第三法（色差計(jì)法），使用四臺(tái)儀器對(duì)所配制的非標(biāo)準(zhǔn)比色液進(jìn)行測(cè)定：以水為空白，測(cè)定非標(biāo)準(zhǔn)比色液與水的色差值ΔE*，每臺(tái)儀器重復(fù)測(cè)定三次，計(jì)算四臺(tái)儀器測(cè)定結(jié)果的平均值，結(jié)果見表2。

表2 非標(biāo)準(zhǔn)比色液測(cè)定結(jié)果表

2.2 樣品色差值測(cè)定 參考藥典甘油各論項(xiàng)下溶液的顏色檢查項(xiàng)，制備供試品溶液，按照通則方法，使用四臺(tái)儀器對(duì)所配制的溶液進(jìn)行測(cè)定：以水為空白，測(cè)定各溶液與水的色差值ΔE*，結(jié)果見表3。

表3 甘油色差值測(cè)定結(jié)果

2.3 測(cè)定法修訂 根據(jù)測(cè)定結(jié)果，對(duì)甘油各論項(xiàng)下顏色檢查項(xiàng)進(jìn)行修訂，具體內(nèi)容為顏色：取本品，照《中國(guó)藥典》2020年版四部通則“0902 溶液顏色檢查法”第三法（色差計(jì)法）測(cè)定，溶液與水的色差值ΔE*不得過0.66。

3 討論

3.1 本研究中筆者共使用了兩個(gè)不同品牌不同型號(hào)的儀器共四臺(tái)，基本上涵蓋了目前市面上主流的生產(chǎn)企業(yè)和儀器型號(hào)，儀器代表性較好。

3.2 使用目視法同時(shí)測(cè)定上述樣品，供試品溶液顏色均淺于相應(yīng)的對(duì)照液顏色，色差計(jì)測(cè)定結(jié)果表明供試品溶液與水的色差值均小于對(duì)照液與水的色差值，與目視法結(jié)果一致，多種樣品測(cè)定結(jié)果表明，擬定方法可行。

3.3 目視法檢查溶液的顏色有著不可克服的先天缺陷：①靈敏度低和精密度差，表現(xiàn)在測(cè)定和表達(dá)兩個(gè)方面。在藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，溶液的顏色檢查項(xiàng)是對(duì)藥品內(nèi)在質(zhì)量的間接檢測(cè)，其檢測(cè)結(jié)果和限度規(guī)定應(yīng)與藥品內(nèi)在質(zhì)量相結(jié)合，但目視法的粗略會(huì)使結(jié)合的緊密性、科學(xué)性受到限制。②主客觀影響因素多：如視覺差異、照明條件乃至心理因素等，使得檢查結(jié)果重現(xiàn)性差。③偏色調(diào)樣品和合格邊緣樣品難于判斷。即便是相同品種的藥品，有時(shí)也會(huì)因?yàn)楦魃a(chǎn)廠家工藝的不同、雜質(zhì)種類不同等原因引起色調(diào)的不同，常常出現(xiàn)藥品的色調(diào)介于兩種標(biāo)準(zhǔn)比色液之間，甚至不在6種標(biāo)準(zhǔn)比色液色調(diào)范圍，使得目視無法判斷，也沒有量化的客觀指標(biāo)。限度邊緣樣品也存在同樣問題，合格與否完全憑借經(jīng)驗(yàn)主觀判定，極易引起檢驗(yàn)結(jié)果的差異或糾紛。利用本實(shí)驗(yàn)建立的方法能夠很好地克服目視法的上述缺陷，較為精密準(zhǔn)確地測(cè)定甘油的溶液顏色，為更好地研究與控制藥品質(zhì)量提供了數(shù)據(jù)支持。因此，可在需要精細(xì)研究和精準(zhǔn)判斷方面取代目視法在實(shí)際中的應(yīng)用。

3.4 色差計(jì)法對(duì)顏色可以進(jìn)行精確、數(shù)字化的測(cè)定和表述，結(jié)果更為客觀準(zhǔn)確。但是現(xiàn)行方法每次試驗(yàn)需同時(shí)測(cè)定非標(biāo)準(zhǔn)比色液和供試品液計(jì)算色差值，眾所周知，配制非標(biāo)準(zhǔn)比色液首先需要配制標(biāo)準(zhǔn)比色液，而標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制極為繁瑣，且不能長(zhǎng)期儲(chǔ)存來使用，目前目視比色基本上都是使用市售的標(biāo)準(zhǔn)比色液，密封安瓿包裝，如果開瓶用于上機(jī)測(cè)定，成本較高。因此，修訂過的方法只需測(cè)定供試品溶液與水的色差值，再與非標(biāo)準(zhǔn)比色液固化色差值來比較進(jìn)行判斷，則大大節(jié)約了成本，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟，并且避免了配制比色液帶來的誤差。

3.5 與發(fā)達(dá)國(guó)家相比，我國(guó)的制藥工業(yè)無論是規(guī)模還是藥品研發(fā)能力均存在較大差距，特別是藥用輔料的生產(chǎn)管理一直處于較低水平。這不僅影響制藥工業(yè)的發(fā)展，同時(shí)也直接影響藥品的質(zhì)量，因此，藥用輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高刻不容緩。

3.6 展望 中國(guó)藥典2020年版要求檢查溶液顏色的樣品中有21個(gè)使用非標(biāo)準(zhǔn)比色液的品種，這些非標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制同樣也非常繁瑣，因此，我們會(huì)進(jìn)一步對(duì)這些品種進(jìn)行考察，修訂為與固化的非標(biāo)準(zhǔn)比色液色差值比較的方法。