夏錦 謝豪杰 蘇孝楠

（1.開(kāi)封市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 開(kāi)封 475000；2.開(kāi)封市人民醫(yī)院腎病風(fēng)濕科，河南 開(kāi)封 475000；3.開(kāi)封市人民醫(yī)院骨科，河南 開(kāi)封 475000）

再生障礙性貧血（Aplastic Anemia，AA）屬于一種骨髓造血功能衰竭性疾病，主要以全血細(xì)胞減少、骨髓造血功能障礙為典型特征。據(jù)劉文等學(xué)者[1]研究表明，低增生骨髓異常綜合征、骨髓纖維化、AA 等疾病具有相似的臨床表現(xiàn)，且均可導(dǎo)致全血細(xì)胞減少等情況發(fā)生。但各種疾病的發(fā)病機(jī)制及治療目標(biāo)不同，因此，準(zhǔn)確鑒別AA 對(duì)患者預(yù)后具有重要意義。

目前，骨髓細(xì)胞學(xué)檢查通過(guò)觀察骨髓細(xì)胞的病理學(xué)改變，特異性反映患者血液系統(tǒng)功能情況。以往多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)顯示，白細(xì)胞水平異常與腫瘤、感染、貧血等疾病的發(fā)生、發(fā)展息息相關(guān)[2]。而鐵蛋白（Serum Ferritin，SF）屬于鐵儲(chǔ)存蛋白，對(duì)改善人體免疫、造血功能產(chǎn)生積極影響，能直觀反映出體內(nèi)鐵貯存情況。近年來(lái)，外周血常規(guī)和骨髓細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)于AA 的診斷作用日益受到關(guān)注，且有部分學(xué)者對(duì)其展開(kāi)研究[3]。而將白細(xì)胞計(jì)數(shù)（White Blood cell Count，WBC）與SF 檢測(cè)作為AA 的輔助性檢查手段，與骨髓細(xì)胞學(xué)檢查進(jìn)行聯(lián)合應(yīng)用仍存在諸多探討空間。

因此，本研究旨在分析骨髓細(xì)胞學(xué)與WBC、SF 聯(lián)合診斷AA 的應(yīng)用效果。從而為提高臨床診斷效率提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)。選取2017 年5 月-2022 年5 月本院收治的202 例AA 患者，納入觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合美國(guó)血液學(xué)協(xié)會(huì)（2018 年）制定的關(guān)于AA 的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；依從性好，配合研究者；病歷資料完整；排除標(biāo)準(zhǔn)：研究前接受抗貧血用藥物治療；合并感染性疾病者；存在惡性腫瘤的患者。

另選取同期體檢的198 例健康志愿者納入對(duì)照組。觀察組男性132 例，女性70 例；年齡：26～55 歲，平均年齡（38.67±4.57）歲；BMI：16.4～21.3 kg?m-2，平均（18.57±1.41）kg?m-2。對(duì)照組男性138 例，女性60 例；年齡：24～52 歲，平均年齡（37.57±5.12）歲。

1.2 方法

1.2.1 骨髓細(xì)胞學(xué)檢查

常規(guī)消毒處理，局部麻醉生效后，在患者髂前、后骨及胸骨處進(jìn)行穿刺處理，將取出的骨髓制成骨髓涂片，隨后進(jìn)行骨髓染色操作。染色材料使用20%的酸性亞鐵氰化鉀，等待30 min，隨后將涂片進(jìn)行反復(fù)沖洗，顯微鏡下觀察。通過(guò)記錄細(xì)胞質(zhì)中呈現(xiàn)出藍(lán)色鐵粒的細(xì)胞個(gè)數(shù)，計(jì)算該細(xì)胞所占百分比，分析細(xì)胞內(nèi)鐵情況。細(xì)胞外鐵評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：存在大量藍(lán)色鐵粒為“++++”、較多藍(lán)色鐵粒為“+++”、部分藍(lán)色鐵粒為“++”、少量藍(lán)色鐵?！?”、無(wú)藍(lán)色鐵?！?”。

1.2.2 WBC 檢查

抽取患者空腹靜脈血2 mL，EDTA K2 抗凝血，采用全自動(dòng)血液分析儀（日本希森美康公司，國(guó)械注進(jìn)20172227279，型號(hào)：Sysmex XN2000）測(cè)定WBC 水平。

1.2.3 SF 檢測(cè)

抽取患者空腹靜脈血3 mL，進(jìn)行離心處理（3000 r?min-1，15 min），使用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司，粵械注準(zhǔn)20172401486，型號(hào)：MAGLUMI 4000）檢測(cè)SF 水平。

1.2.4 陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)WBC、SF、細(xì)胞內(nèi)鐵的平均值作為臨界值，WBC＜5.21×109L-1為陽(yáng)性，SF 水平＜65.64 μg?L-1為陽(yáng)性，細(xì)胞內(nèi)鐵＜ 28.14% 判定為陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）比較兩組WBC、SF 及骨髓細(xì)胞鐵測(cè)定結(jié)果；（2）比較骨髓細(xì)胞學(xué)、WBC、SF 單獨(dú)及聯(lián)合運(yùn)用的診斷結(jié)果。（3）分析骨髓細(xì)胞學(xué)、WBC、SF 聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值。診斷準(zhǔn)確率=（真陽(yáng)性人數(shù)+真陰性人數(shù)）÷總?cè)藬?shù)×100%，特異度=（真陰性人數(shù)÷金標(biāo)準(zhǔn)陰性人數(shù)）×100%，靈敏度=（真陽(yáng)性人數(shù)÷金標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性人數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 WBC、SF 及骨髓細(xì)胞鐵測(cè)定結(jié)果

觀察組WBC、SF 水平分別為3.37±1.49（×109L-1）、25.15±6.34（μg?L-1），對(duì)照組WBC、SF 水平分別為7.14±1.76（×109L-1）、107.43±28.61（μg?L-1）。觀察組WBC、SF 水平及細(xì)胞內(nèi)鐵含量明顯低于對(duì)照組，而細(xì)胞外鐵明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組WBC、SF 水平及骨髓細(xì)胞鐵測(cè)定結(jié)果比較[（)，n(%)]

表1 兩組WBC、SF 水平及骨髓細(xì)胞鐵測(cè)定結(jié)果比較[（)，n(%)]

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05。

2.2 骨髓細(xì)胞學(xué)、WBC、SF 單獨(dú)及聯(lián)合運(yùn)用的診斷結(jié)果

202 例AA 患者進(jìn)行WBC、SF、細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)檢查后，結(jié)果分別為179 例陽(yáng)性患者、23 例陰性患者；182 陽(yáng)性患者、20 例陰性患者；181 例陽(yáng)性患者、21 例陰性患者。198 例健康志愿者進(jìn)行WBC、SF、細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)檢查后，結(jié)果分別為23例陽(yáng)性患者、175 例陰性患者；26 例陽(yáng)性患者、172 例陰性患者；22 例陽(yáng)性患者、176 例陰性患者。202 例AA 患者均進(jìn)行WBC、SF、細(xì)胞內(nèi)鐵聯(lián)合檢查后，結(jié)果顯示有193 例陽(yáng)性患者、9 例陰性患者，198 例健康志愿者進(jìn)行WBC、SF、細(xì)胞內(nèi)鐵聯(lián)合檢查后，結(jié)果顯示有11 例陽(yáng)性患者、187 例陰性患者，見(jiàn)表2。

表2 三者單獨(dú)及聯(lián)合運(yùn)用的診斷結(jié)果（例）

2.3 診斷價(jià)值

WBC 單獨(dú)檢測(cè)后診斷準(zhǔn)確率為 88.50%（354/400），特異度為88.38%（175/198），靈敏度為88.61%（179/202）。SF 單獨(dú)檢測(cè)后診斷準(zhǔn)確率為88.50%（354/400），特異度為86.87%（172/198），靈敏度為90.10%（182/202）。細(xì)胞內(nèi)鐵單獨(dú)檢測(cè)后診斷準(zhǔn)確率為89.25%（357/400），特異度為88.89%（176/198），靈敏度為89.60%（181/202）。三者聯(lián)合檢測(cè)后診斷準(zhǔn)確率為95.00%（380/400），特異度為94.44%（187/198），靈敏度為95.54%（193/202）。三者聯(lián)合檢測(cè)的診斷準(zhǔn)確率、特異度、靈敏度均高于三者單獨(dú)檢測(cè)（P＜0.05）。

3 討論

研究表明，AA 的發(fā)病機(jī)制主要包括骨髓微環(huán)境紊亂及造血干細(xì)胞缺乏等，而立新等[5]研究提出，遺傳、免疫功能異常等因素也與AA 的發(fā)病息息相關(guān)。

目前，免疫抑制、粒細(xì)胞輸注及促造血治療作為臨床用于治療AA 的主要手段，其對(duì)于早期AA 患者的治療效果較為理想，但難以滿(mǎn)足重型AA 患者的治療需求[6]。因此，探究AA 發(fā)病的最新生物學(xué)機(jī)制及相關(guān)生理生化指標(biāo)，為AA 的臨床診療打開(kāi)新思路。

本研究結(jié)果顯示，AA 患者的WBC 低于健康人群，表明WBC 的明顯降低與AA 的發(fā)生存在一定聯(lián)系。這可能與AA 患者體內(nèi)WBC、造血干細(xì)胞的大量凋亡有關(guān)。Chao 等[7]的研究證實(shí)，AA患者的骨髓間充質(zhì)細(xì)胞、中性粒細(xì)胞的細(xì)胞分裂間期停滯為G1 期，易出現(xiàn)WBC 明顯下降的情況，與本研究結(jié)果一致。同時(shí)，Melguizo 等學(xué)者[8]發(fā)現(xiàn)，骨髓組細(xì)胞的端粒長(zhǎng)度明顯下降，且分化能力存在一定缺陷。而本次研究通過(guò)骨髓細(xì)胞鐵測(cè)定發(fā)現(xiàn)，觀察組SF 水平及細(xì)胞內(nèi)鐵含量明顯低于對(duì)照組，而細(xì)胞外鐵明顯高于對(duì)照組，與蘇永娟等學(xué)者[9]研究結(jié)果一致。推測(cè)原因在于血清SF作為鐵元素的主要貯存方式，而鐵元素是氧氣運(yùn)輸?shù)闹饕d體，當(dāng)血清SF 明顯下降時(shí)易導(dǎo)致血液系統(tǒng)功能紊亂，造成貧血。同時(shí)，細(xì)胞內(nèi)鐵多數(shù)存在于紅細(xì)胞中，細(xì)胞外鐵分布于骨髓小粒中，細(xì)胞內(nèi)、外鐵水平異常狀態(tài)提示貧血的發(fā)生，但具體分子機(jī)制仍需進(jìn)一步討論。

本研究在骨髓細(xì)胞學(xué)、WBC、SF 聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值分析中發(fā)現(xiàn)，三者聯(lián)合檢測(cè)的診斷準(zhǔn)確率、特異度、靈敏度均高于三者單獨(dú)檢測(cè)，提示將三者聯(lián)合運(yùn)用于AA 的診斷中，具有更高的應(yīng)用價(jià)值。而余祖輝等學(xué)者[10]的研究表明，骨髓細(xì)胞學(xué)、WBC、SF 聯(lián)合診斷的符合率為93.41%、特異度與靈敏度分別為92.31%、93.41%，與本次研究結(jié)果基本相符。推測(cè)原因在于，單獨(dú)運(yùn)用WBC 檢測(cè)在感染性、過(guò)敏性疾病與AA 的鑒別中缺乏特異性診斷。單一使用細(xì)胞內(nèi)鐵測(cè)定、血清SF 檢查，難以區(qū)分AA 與其他類(lèi)型貧血疾病，而三者聯(lián)合檢測(cè)在降低誤診率的同時(shí)，有效提高診斷的特異度和靈敏度，在一定程度上彌補(bǔ)單獨(dú)檢測(cè)的不足。

綜上所述，骨髓細(xì)胞學(xué)、WBC、SF 聯(lián)合檢測(cè)在AA 的診斷中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，能顯著提高診斷準(zhǔn)確率，為臨床診療提供可靠依據(jù)。