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        新型膀胱癌尿細胞學檢測系統(tǒng)的臨床應用

        2023-06-28 08:37:34沈文浩黃翼然
        現(xiàn)代泌尿外科雜志 2023年6期
        關鍵詞:細胞學尿路膀胱癌

        王 暉,沈文浩,王 正,黃翼然,2

        (1.上海國際醫(yī)學中心泌尿外科,上海 200120;2.上海交通大學醫(yī)學院附屬仁濟醫(yī)院泌尿科,上海 200127)

        膀胱癌(bladder cancer,BC)是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一。據(jù)統(tǒng)計,世界范圍內(nèi)每年新增膀胱癌573 278例。男性發(fā)生膀胱癌的概率是女性的3.5倍,膀胱癌發(fā)病率在男性惡性腫瘤中位列第7位[1]。

        膀胱癌臨床診斷和隨訪主要依靠有創(chuàng)的膀胱鏡檢查,無創(chuàng)的尿脫落細胞檢查也是重要的診斷方法,在臨床應用已有半個多世紀,主要對高級別尿路上皮癌有臨床診斷價值,對低級別尿路上皮癌則診斷率低。就膀胱癌來說,尿脫落細胞學檢查的特異性很高,可達95%~100%,在膀胱結(jié)石、多瘤病毒感染、化療、放療情況下可能出現(xiàn)假陽性[2]。除了病理醫(yī)師的診斷水平外,尿液采集標本的質(zhì)量也會嚴重影響該檢查結(jié)果的準確性[3]。為提升脫落細胞學檢查質(zhì)控水平,2021年12月-2022年3月,我們采用一種新型膀胱癌檢測試劑盒對尿液標本進行處理,并使用尿液細胞全顯染色技術進行制片、染色、讀片,驗證該技術對于尿液脫落細胞學檢查的改善效果,臨床結(jié)果報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料本研究共入組患者56例,其中男性46例(82.1%),女性10例(17.9%),年齡范圍25~91歲,平均年齡(65.0±12.9)歲。其中42例患者臨床表現(xiàn)為肉眼無痛性全程血尿而接受膀胱鏡檢查,14例患者經(jīng)病理確診為非肌層浸潤性膀胱癌并已接受膀胱腫瘤電切術、術后定期接受膀胱鏡檢查隨訪。56例患者均留取了尿液進行尿液脫落細胞學檢查,并接受膀胱鏡檢查,術中若發(fā)現(xiàn)膀胱新生物,均留取標本進行病理學檢查。

        1.2 試劑與儀器尿液細胞檢測處理試劑盒(包括泰康特制細胞保存液、尿液收集瓶和申請單)購自湖北泰康醫(yī)療設備有限公司(Hubei Taikang Medical Equipment CO.LTD),通過尿液細胞學全顯染色技術對尿液中細胞進行固定、制片、染色、閱片。

        1.3 研究方法所有患者均在膀胱鏡檢查前留取尿液標本。具體留取標本方法為:檢查當天留取晨尿后第一次排尿尿液300 mL,其中150 mL加入泰康特制細胞保存液作為實驗組,另150 mL作為對照組不做任何處理。對照組及實驗組樣本均進一步分為3個亞組、每亞組各50 mL,分別于留取樣本的當天(Day 0)、留取樣本后第3天(Day 3)和留取樣本后第7天(Day 7)進行固定、制片、染色后,由經(jīng)驗豐富的病理科專家在顯微鏡下鑒定細胞樣本(圖1)。所有樣本均在4 ℃恒溫、避光條件下保存。

        1.4 觀察指標尿液脫落細胞學檢查結(jié)果分為4類:良性、非典型尿路上皮細胞、疑似尿路上皮癌、高級別尿路上皮癌,將良性和非典型尿路上皮細胞歸為低危組,疑似尿路上皮癌和高級別尿路上皮癌歸為高危組。若膀胱鏡及病理活檢結(jié)果為惡性,尿液脫落細胞學分組為高危組,或膀胱鏡及病理活檢結(jié)果為良性、尿液脫落細胞學分組為低危組,則定義為新方法檢測結(jié)果準確,反之為不準確。

        本研究以膀胱鏡及病理活檢結(jié)果作為診斷的金標準,根據(jù)尿液脫落細胞的檢查的結(jié)果,分別計算實驗組和對照組在Day 0、Day 3、Day 7時間點上診斷敏感性、特異性和準確性,其中敏感性=真陽性/(真陽性+假陰性),特異性=真陰性/(真陰性+假陽性),準確性=(真陽性+真陰性)/總病例數(shù)。

        1.5 統(tǒng)計學方法采用SPSS 25.0 統(tǒng)計學軟件進行處理。通過χ2檢驗分析兩組間敏感性、特異性,以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

        2 結(jié) 果

        入組56名患者均接受膀胱鏡檢查,其中14名患者檢查結(jié)果無異常,42名患者膀胱鏡檢查結(jié)果示膀胱壁新生物;將膀胱壁新生物取活檢并進行病理檢查,結(jié)果示3名患者結(jié)果陰性,39名患者確診為尿路上皮癌。

        對患者尿液標本使用尿液細胞檢測處理試劑盒+全顯染色技術進行尿液脫落細胞學檢查。由于存放過程中標本被微生物污染或因細胞結(jié)構(gòu)、形態(tài)嚴重改變無法進行讀片的樣本將被剔除出本研究。因此,Day 0 實驗組56例樣本,對照組56例樣本;Day 3 實驗組54例樣本,對照組50例樣本;Day 7 實驗組53例樣本,對照組43例樣本。

        結(jié)果如表1所示,Day 3與Day 7實驗組敏感性顯著優(yōu)于對照組(P<0.05),Day 0對照組及實驗組的敏感性、特異性無顯著差異。

        表1 尿脫落細胞學檢查對兩組標本在不同時間點檢出尿路上皮癌的敏感性、特異性

        表2展示的是該研究中各時間點試驗組和對照組的診斷準確性。Day 0實驗組、對照組診斷準確率分別為83.9%和80.4%(P=0.622);Day 3實驗組、對照組診斷準確率分別為77.8%和60.0%(P=0.049);Day 7實驗組和對照組診斷準確率分別為71.7%和44.2%(P=0.006)。

        表2 尿脫落細胞學檢查對兩組標本在不同時間點檢出尿路上皮癌的準確性

        3 討 論

        目前膀胱鏡結(jié)合病理活檢是診斷初發(fā)、復發(fā)膀胱癌的金標準[4]。然而作為一種有創(chuàng)性檢查,膀胱鏡檢查有一定不適感,相當一部分患者對于膀胱鏡較為排斥,從而可能錯過得到早期診斷的機會、增加病情的風險。尿液細胞學檢查是一種高效的無創(chuàng)膀胱癌篩查手段,尤其是針對高級別尿路上皮癌具有良好的敏感性[5]。高特異性是細胞學檢查的特點,尿液細胞學檢查陽性則可有力提示尿路任何一處存在惡性腫瘤。

        在實際應用中,作為膀胱鏡的輔助檢查手段能夠有效彌補膀胱鏡檢查的不足[6]。對于T1G3高危淺表性膀胱癌,膀胱原位癌以及上尿路的尿路上皮癌,尿脫落細胞檢查陽性率高,可以為臨床診斷提供重要幫助[5,7]。對于膀胱腫瘤術后復查隨訪患者,可以將尿液細胞學檢查作為進行膀胱鏡檢查前的預篩方法,或者作為補充檢查手段,更為頻繁地進行隨訪。而對于體檢或偶發(fā)血尿患者,留取尿液進行脫落細胞檢查,能夠低成本、簡單便捷地在大規(guī)模人群中進行膀胱癌篩查。

        目前較常見的膀胱癌無創(chuàng)檢驗方法如尿脫落細胞、尿核基質(zhì)蛋白等,大多需要患者現(xiàn)場留取新鮮樣本以保證檢測的準確性,而且每例患者提供至少提供3份尿液標本。而在實際應用中,許多血尿患者或膀胱癌復診患者由于基礎情況所限以及體力狀況不佳,或是各種客觀原因,標本的質(zhì)量難以完全達到要求。相應的需求是延長尿液標本保存期限、更好保存尿液中完整細胞、在短時間內(nèi)(留取標本后24 h)提高膀胱癌檢出率,或是改善長時間(24~72 h)尿細胞學檢查的特異性和敏感性,并且實現(xiàn)尿液標本的遠程郵寄等進而提高患者對檢查的依從性。

        經(jīng)過對實際情況的考察,考慮到大多數(shù)患者標本可在1~3 d內(nèi)通過郵寄到指定醫(yī)學中心后固定、制片后接受檢查,故本研究中著重研究留取標本后當天、第3天的保存情況,并考慮到極端情況,也進行了留取標本后第7天樣本細胞的檢測。結(jié)果顯示,第1天、第3天、第7天實驗組敏感性、特異性均優(yōu)于對照組,證實加入保存液后脫落細胞診斷準確率有明顯提升。并且第3天、第7天兩組診斷準確性有明顯差異、實驗組診斷敏感性優(yōu)勢明顯,但就診斷的特異性而言,兩組之間各時間點差異不大,原因考慮如下:①腫瘤細胞形態(tài)具有較明顯的特征性,如核質(zhì)比例大、染色深,核仁增大、增多且分裂象多見等,與正常尿路上皮細胞壞死或凋亡形態(tài)截然不同;②本研究中病理學讀片專家具有豐富經(jīng)驗,故本研究總體診斷特異性較高;③兩組中影響診斷的主要因素為細胞死亡、降解、細菌污染等因素,對最終診斷真陽性率有一定影響,但通常較少出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象。

        在目前膀胱癌發(fā)病率逐年增高、新冠疫情壓力不容忽視的情況下,本膀胱癌尿細胞學檢測系統(tǒng)具有明顯診斷優(yōu)勢,可作為于膀胱鏡檢查前的輔助檢查手段對血尿患者及膀胱癌復發(fā)高危人群進行檢查,也可作為膀胱癌篩查手段對大樣本人群進行預篩,以實現(xiàn)膀胱癌早診斷、早治療,以提高膀胱癌預后,改善該人群生活質(zhì)量,減輕社會負擔的最終目的。但本研究納入研究的患者數(shù)目仍較少,未來需要大規(guī)模多中心的臨床研究來進一步確定該試劑盒在不同人群中應用的可靠性。

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