楊云彥，王文革，楊云月，盧旭俊

1 河北北方學(xué)院研究生學(xué)院，河北張家口 075000；2 空軍特色醫(yī)學(xué)中心兒科，北京 100142

濕疹是嬰兒時期最早出現(xiàn)、最常見的一種過敏性疾病，臨床具有易反復(fù)等特點，嚴(yán)重影響兒童的身心健康。濕疹的發(fā)病受環(huán)境、遺傳、免疫等多種因素的影響[1]，且發(fā)病機制尚未全面闡釋，目前認(rèn)為的免疫學(xué)發(fā)病機制為Th1/Th2 細(xì)胞免疫應(yīng)答失衡，Th2 細(xì)胞優(yōu)勢應(yīng)答是濕疹過敏性炎癥形成的關(guān)鍵因素。有研究表明，早期患有濕疹的兒童后期發(fā)生過敏性鼻炎、哮喘等其他過敏性疾病的概率顯著升高[2]。因此探索有效可靠的早期監(jiān)測指標(biāo)，盡早識別、預(yù)防濕疹的發(fā)生，對減少或避免兒童過敏性疾病的發(fā)生、發(fā)展意義重大。臍血相關(guān)指標(biāo)可以反映機體最早期的免疫狀態(tài)，一些臍血因子與過敏性疾病的發(fā)生具有相關(guān)性[3]。已有學(xué)者報道，半乳凝素-9(galectin-9，Gal-9)、白細(xì)胞介素-33(interleukin-10，IL-33)與支氣管哮喘、過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎等多種過敏性疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[4-5]。但目前少有臍血Gal-9、IL-33 水平與濕疹關(guān)系的研究。因此本研究通過檢測臍血Gal-9、IL-33 水平，探討二者與嬰兒濕疹發(fā)病的相關(guān)性及其對早期濕疹的預(yù)測意義，以期為嬰兒濕疹的早期預(yù)防和治療提供理論參考。

對象與方法

1 研究對象 選取2020 年9 月 - 2021 年5 月在空軍特色醫(yī)學(xué)中心產(chǎn)科出生的新生兒為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：健康足月新生兒。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在先天畸形；(2)出生前有宮內(nèi)窘迫史；(3)出生后有胎糞吸入、缺氧缺血性腦病、新生兒出血癥等疾??；(4)新生兒疾病篩查異常者。本次研究已通過我中心醫(yī)學(xué)倫理委員會的審核及批準(zhǔn)，所有入組的研究對象均已取得其監(jiān)護(hù)人的同意并已簽署知情同意書。

2 Gal-9、IL-33 檢測 新生兒出生時在產(chǎn)科醫(yī)師協(xié)助下采集臍血約4 mL，保存于-4℃冰箱，24 h內(nèi)取出，于空軍特色醫(yī)學(xué)中心實驗室以2 500 r/min離心10 min，使用移液槍取上層血漿約1.5 mL 于EP 管內(nèi)，編號后儲存于空軍特色醫(yī)學(xué)中心實驗室-80℃冰箱內(nèi)待測。采用ELISA 法測定臍血Gal-9、IL-33 水平。Gal-9、IL-33 試劑盒均購自美國R&D Systems 公司。Gal-9 試劑盒貨號為DGAL90，IL-33試劑盒貨號為D3300B，臍血檢測步驟嚴(yán)格遵循說明書進(jìn)行操作。

3 調(diào)查隨訪 (1)新生兒出生信息：包括出生日期、性別、體質(zhì)量、身長、胎齡、分娩方式。(2)母親情況：包括年齡、孕期身體是否健康等；新生兒父母是否存在哮喘、過敏性鼻炎、過敏性結(jié)膜炎、蕁麻疹等過敏性疾病。(3) 42 d 門診隨訪：記錄嬰兒是否發(fā)生濕疹及哺乳期母親是否進(jìn)食牛奶、雞蛋、花生、堅果、魚、貝類等食物。嬰兒濕疹診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《濕疹診療指南(2011 年)》及2005 年版《實用皮膚科學(xué)》[6]。

4 分組及分析指標(biāo) 根據(jù)42 d 隨訪是否發(fā)生濕疹分為濕疹組和無濕疹組。分析指標(biāo)：(1)兩組新生兒一般情況；(2)兩組新生兒臍血Gal-9、IL-33水平；(3)早期嬰兒濕疹發(fā)病的相關(guān)因素分析；(4)臍血IL-33 預(yù)測早期嬰兒濕疹的ROC 曲線。

5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 25.0 系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計量資料符合正態(tài)分布以±表示，不符合正態(tài)分布以Md(IQR)表示，計數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示。計量資料符合正態(tài)分布采用t檢驗進(jìn)行組間比較，不符合正態(tài)分布采用Mann-WhitneyU檢驗進(jìn)行比較；計數(shù)資料采用χ2檢驗進(jìn)行組間比較。應(yīng)用logistic 回歸分析42 d 嬰兒濕疹患病的危險因素。制作ROC 曲線評估臍血IL-33 水平對早期濕疹的預(yù)測價值。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 一般情況 共114 例嬰兒完成了42 d 隨訪，男性62 例(54.4%)，女性52 例(45.6%)，胎齡為259.0 ～ 291.0(275.82 ± 6.08) d，出生體質(zhì)量2 450 ～4 000(3 295.61 ± 351.64) g，身長43 ～ 57(50.52 ±2.03) cm。自然分娩82 例(71.9%)，剖宮產(chǎn)32 例(28.1%)，母親的年齡為22 ～ 41(32.16 ± 3.78)歲，母親孕期體檢正常53 例(46.5%)，不正常61 例(53.5%)，母乳喂養(yǎng)62 例(54.4%)，混合喂養(yǎng)52 例(45.6%)，母親哺乳期間進(jìn)食易致敏食物98 例(86.0%)，未進(jìn)食16 例(14.0%)，有家族過敏史83例(72.8%)，無家族史31 例(27.2%)。濕疹組68例，無濕疹組46 例，患病率為59.6%，兩組在母親哺乳期間是否進(jìn)食易致敏食物方面有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，在性別、胎齡、身長、出生體質(zhì)量、分娩方式、喂養(yǎng)方式、家族過敏史、母親年齡及母親孕期是否患病方面差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 兩組嬰兒一般情況比較Tab. 1 Comparison of general conditions between the two groups

2 兩組臍血Gal-9、IL-33 水平比較 濕疹組與無濕疹組的臍血Gal-9 水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而臍血IL-33 水平濕疹組高于無濕疹組(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組嬰兒臍血Gal-9、IL-33 水平的比較[Md(IQR)]Tab. 2 Comparison of the levels of Gal-9 and IL-33 in umbilical cord blood between the two groups (Md[IQR])

3 早期嬰兒濕疹發(fā)病的多因素logistic 回歸分析將患有濕疹設(shè)為因變量(回歸啞變量賦值：1=濕疹，0=否)，將過敏性疾病家族史(1=有，0=無)、母親哺乳期間是否致敏飲食(1=是，0=否)、喂養(yǎng)方式(1=混合，0=母乳)、臍血Gal-9 及IL-33 水平(連續(xù)數(shù)值原型輸入)作為自變量，進(jìn)行l(wèi)ogistic 回歸分析(全?；貧w)，結(jié)果表明母親哺乳期間進(jìn)食上述易致敏食物和臍血IL-33 高水平表達(dá)是早期濕疹發(fā)生的危險因素(P＜0.05)。見表3。

表3 42 d 嬰兒濕疹相關(guān)危險因素的logistic 回歸分析Tab. 3 Logistic regression analysis of factors associated with eczema in 42 d infants

4 臍血IL-33 對早期嬰兒濕疹的預(yù)測價值 以濕疹組患兒作為陽性樣本，以非濕疹組患兒作為陰性樣本，建立ROC 分析模型。ROC 分析結(jié)果顯示，ROC 曲線下面積AUC 為0.619，標(biāo)準(zhǔn)誤為0.053，特異度為82.6%，敏感度為41.2%，95%CI為0.516 ～ 0.722，最佳截斷值為34.63 pg/mL，表明臍血IL-33 水平對早期嬰兒濕疹發(fā)生的預(yù)測價值不大。見表4、圖1。

圖1 臍血IL-33 的ROC 曲線Fig.1 ROC curve of umbilical cord blood IL-33 level

表4 臍血IL-33 水平的ROC 曲線分析Tab. 4 ROC curve analysis of cord blood IL-33 level

討 論

濕疹是嬰兒期最常見的一種慢性、復(fù)發(fā)性、炎癥性疾病，臨床表現(xiàn)為紅斑、丘疹、糜爛滲出、皮膚紅腫、干燥、粗糙肥厚等，常伴有明顯的瘙癢，導(dǎo)致患兒出現(xiàn)不同程度的煩躁、夜間哭鬧等，嚴(yán)重影響兒童的身心健康。調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，隨著全球過敏性疾病發(fā)病率的逐年上升，濕疹的發(fā)病率也呈增高趨勢[7]。本研究僅就空軍特色醫(yī)學(xué)中心產(chǎn)科出生的新生兒進(jìn)行了調(diào)查隨訪，結(jié)果表明42 d 嬰兒濕疹的患病率為59.6%，與王召陽等[8]報道的北京市海淀區(qū)42 d 嬰兒濕疹患病率相近。本次研究結(jié)果表明，母親哺乳期間進(jìn)食易致敏食物是42 d 嬰兒出現(xiàn)濕疹的危險因素，這與之前一些研究的結(jié)果一致[9]。有研究顯示，母親規(guī)避相關(guān)致敏食物，患兒濕疹癥狀有所好轉(zhuǎn)，甚至不再發(fā)作[10]。這可能是由于回避敏感食物后，母親體內(nèi)的大分子相關(guān)免疫復(fù)合物生成減少，經(jīng)由母乳進(jìn)入嬰兒體內(nèi)的亦減少，提示哺乳期母親適當(dāng)合理的調(diào)整飲食有利于預(yù)防嬰兒濕疹的發(fā)生。由于本次調(diào)查的局限性，未深入?yún)^(qū)分不同致敏食物對嬰兒濕疹發(fā)生的影響，并且研究結(jié)果未提示不同喂養(yǎng)方式對早期濕疹患病的影響，后續(xù)將進(jìn)一步深入研究。

Gal-9 是一種串聯(lián)重復(fù)型半乳糖凝集素，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、聚集、黏附、凋亡等功能[11]。在過敏性疾病中Gal-9 對嗜酸性粒細(xì)胞具有顯著的趨化活性[12]。Gal-9 表達(dá)于Th1 細(xì)胞和Th17 細(xì)胞，不在Th2 細(xì)胞中表達(dá)[13]。T 細(xì)胞免疫球蛋白和黏蛋白分子-3(T cell immunoglobulin domain and mucin domain-3，Tim-3)是Gal-9 的天然配體，二者相互作用，在過敏反應(yīng)中通過負(fù)向調(diào)節(jié)Th1 和Th17 細(xì)胞來調(diào)節(jié)T 細(xì)胞平衡，導(dǎo)致Th2 極化，從而誘導(dǎo)炎癥因子釋放[14]。研究發(fā)現(xiàn)，變應(yīng)性鼻炎小鼠的鼻黏膜組織中Gal-9-Tim-3 表達(dá)水平升高，在給予相應(yīng)的治療后其水平顯著下降，說明Gal-9-Tim-3通路參與了過敏性疾病的炎癥調(diào)節(jié)過程[15]。Gal-9對過敏性疾病的嚴(yán)重程度亦有提示作用，特應(yīng)性皮炎患者的血清Gal-9 水平與皮炎嚴(yán)重程度指數(shù)(SCORAD 評分)呈顯著正相關(guān)，并且接受治療后患者血清Gal-9 水平下降與皮損的明顯改善亦有關(guān)，因此Gal-9 水平或許可以作為反映過敏性疾病的標(biāo)志物[16]。此次研究探討臍血Gal-9 水平與早期濕疹患病的相關(guān)性，結(jié)果未提示二者具有顯著的關(guān)聯(lián)性。這與上述學(xué)者的研究結(jié)果有所不同，由于考慮到尚不能排除因樣本量偏小及地區(qū)局限性造成結(jié)果偏倚的可能，因此期待進(jìn)一步多中心、大樣本的研究檢驗二者是否存在相關(guān)性。

IL-33 是IL-1 家族的新晉成員，主要在上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等細(xì)胞中表達(dá)，當(dāng)這些細(xì)胞受損，IL-33 可釋放入血液。腫瘤生成抑制因子2 (suppression of tumorigenicity 2，ST2)是IL-33 的特異性配體，它在肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、Th2 淋巴細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞中高度表達(dá)[17]。IL-33 是過敏性疾病的一個新興關(guān)鍵因子，國內(nèi)外學(xué)者針對其在支氣管哮喘、特應(yīng)性皮炎、過敏性鼻炎、食物過敏等疾病中的研究已取得了一定的進(jìn)展[18-20]。本次就IL-33 在嬰兒濕疹中的表達(dá)情況進(jìn)行研究，結(jié)果表明濕疹組嬰兒臍血IL-33 水平高于無濕疹組，這與之前學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)哮喘患者血清IL-33 水平高于與非哮喘患者的結(jié)果一致[21]。IL-33 及其受體ST2 均參與了過敏性疾病的發(fā)病，二者在過敏性疾病中的表達(dá)水平均升高，當(dāng)IL-33 結(jié)合并激活ST2 后，可對表達(dá)ST2 的細(xì)胞產(chǎn)生生物活性，促進(jìn)炎性細(xì)胞的成熟并誘導(dǎo)這些細(xì)胞分泌釋放IL-4、IL-5、IL-9、IL-13等下游炎性細(xì)胞因子，從而加劇過敏性炎癥。濕疹相關(guān)危險因素的logistic 逐步回歸分析顯示，臍血IL-33 高水平表達(dá)是濕疹發(fā)生的危險因素，提示臍血IL-33 表達(dá)水平較高者患濕疹的風(fēng)險可能增加，但ROC 曲線反映臍血IL-33 水平對早期嬰兒濕疹的診斷能力有限。

綜上所述，42 d 嬰兒濕疹患病率較高，母親哺乳期間進(jìn)食牛奶、雞蛋、堅果、魚等易致敏食物可能增加嬰兒患濕疹的風(fēng)險，合理調(diào)控母親飲食可能有利于預(yù)防早期濕疹的發(fā)生。臍血IL-33 水平與嬰兒濕疹的發(fā)生存在相關(guān)性，而臍血Gal-9 水平與濕疹的相關(guān)性較差，IL-33 高水平表達(dá)是濕疹發(fā)生的危險因素，但對早期嬰兒濕疹發(fā)生的預(yù)測價值較低。本次為單中心研究，存在隨訪時間短、樣本量偏少等缺陷，并且未檢測孕母親血漿Gal-9、IL-33 水平與臍血進(jìn)行對比，尚不能明確臍血Gal-9、IL-33 水平受母體免疫的影響程度，有待進(jìn)一步研究。

致謝感謝空軍特色醫(yī)學(xué)中心臨床醫(yī)學(xué)實驗室生物樣本庫對本研究標(biāo)本的存儲。

作者貢獻(xiàn)楊云彥：提出研究選題，設(shè)計方案，數(shù)據(jù)收集，數(shù)據(jù)分析，文章撰寫及修訂；王文革：指導(dǎo)研究選題，研究方案，終審論文；楊云月：收集、整理研究數(shù)據(jù)；盧旭?。菏占芯繑?shù)據(jù)。

利益沖突所有作者聲明無利益沖突。

數(shù)據(jù)共享聲明本篇論文相關(guān)數(shù)據(jù)暫不共享。