孫勤波 鄭現(xiàn)成 錢 程

原發(fā)性肝癌(primary liver cancer,PLC)是臨床常見惡性腫瘤疾病之一,具有病情進(jìn)展快、惡性程度高等特點(diǎn),多數(shù)患者就診時已處于疾病中晚期,不利于患者治療后的預(yù)后生存[1],因此探討PLC早期診斷及預(yù)后預(yù)測方法的相關(guān)研究具有極其重要的意義。人類表皮生長因子受體3(epidermal growth factor receptor 3,EGFR3/ErbB3)是酪氨酸激酶受體家族成員,與肝細(xì)胞癌的增殖、遷移及侵襲能力密切相關(guān)[2]。已有研究[3]表明,分泌型ErbB3(secreted epidermal growth factor receptor 3,sErbB3)是診斷肝癌的潛在血清標(biāo)志物。而熱休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)屬于HSP家族,可維持細(xì)胞蛋白穩(wěn)定,調(diào)控細(xì)胞增殖過程,同時對原癌基因及抑癌基因均有影響,在肝癌細(xì)胞的基因調(diào)控過程中具有重要作用[4]。本研究通過檢測PLC患者血清中sErbB3、HSP70水平,以探究其與臨床病理特征、患者預(yù)后之間的關(guān)系,并評估其在PLC患者化療后預(yù)后預(yù)測中的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析本院2015年1月至2018年1月收治的符合納入標(biāo)準(zhǔn)的62例PLC患者的臨床資料,并將其設(shè)置為觀察組(n=62),其中男性38例、女性24例;年齡38～72歲,平均(51.47±6.38)歲。另回顧性分析同期在本院體檢的50例健康受試者的臨床資料,將其設(shè)置為對照組(n=50),其中男性28例、女性22例;年齡37～70歲,平均(50.86±6.12)歲。2組基線資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 2組基線資料比較

1.2 PLC患者的納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn):①患者均符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2019版)》[5]:經(jīng)臨床、影像學(xué)、甲胎蛋白或肝穿刺病理學(xué)診斷為PLC,均行TACE治療;②臨床病歷資料齊全者;③患者及其家屬均知情同意且簽訂同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①肝腫瘤轉(zhuǎn)移者;②肝功能Child Pugh分級為C級者;③合并血液系統(tǒng)、自身免疫性疾病者;④合并臟器功能衰竭者;⑤表達(dá)障礙或無法配合研究者。

1.3 方法

血清sErbB3、HSP70水平檢測:對照組取當(dāng)日體檢外周靜脈血5 mL,觀察組取化療后清晨空腹靜脈血5 mL,離心后取上層清液,置于冰箱冷凍待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清中sErbB3、HSP70水平,試劑盒選自上海酶聯(lián)生物科技有限公司,操作步驟按照說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 2組血清中sErbB3、HSP70水平

與健康受試者比較,PLC患者血清中sErbB3,HSP70水平顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組血清中sErbB3,HSP70水平比較

2.2 PLC患者血清中sErbB3、HSP70水平與臨床病理特征的關(guān)系

PLC患者血清中sErbB3水平與年齡、性別、肝硬化、門靜脈癌栓等無關(guān),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);與腫瘤直徑、腫瘤數(shù)目、TNM分期等相關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。PLC患者血清中HSP70水平與年齡、性別、肝硬化等無關(guān),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);與腫瘤直徑、腫瘤數(shù)目、門靜脈癌栓、TNM分期等相關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 PLC患者血清中sErbB3,HSP70水平與臨床病理特征的關(guān)系

2.3 血清中sErbB3、HSP70水平與PLC患者預(yù)后的關(guān)系

以sErbB3水平均值(3165.47)為界,將PLC患者分為sErbB3高水平組(n=29)和sErbB3低水平組(n=33),sErbB3高水平組化療后平均生存時間為(28.76±4.72)個月,sErbB3低水平組化療后平均生存時間為(32.31±3.52)個月,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.382,P<0.05)。以HSP70水平均值(84.39)為界,將PLC患者分為HSP70高水平組(n=30)和HSP70低水平組(n=32),結(jié)果顯示,HSP70高水平組化療后平均生存時間(29.45±4.26)個月,HSP70低水平組化療后平均生存時間為(31.97±3.74)個月,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.479,P<0.05)。

2.4 sErbB3、HSP70水平聯(lián)合應(yīng)用對肝癌患者預(yù)后的預(yù)測價值

ROC結(jié)果顯示,sErbB3、HSP70水平聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度分別為80.00%(28/35)和74.07%(20/27)。見表4。

表4 sErbB3,HSP70水平聯(lián)合應(yīng)用對肝癌患者預(yù)后的預(yù)測價值

2.5 Cox回歸模型分析PLC患者預(yù)后的影響因素

建立Cox比例回歸模型,因變量為患者預(yù)后情況,選擇腫瘤直徑、腫瘤數(shù)目、TNM分期、sErbB3高水平、HSP70高水平等5個指標(biāo)為自變量,回歸過程采用逐步后退法,以行自變量的選擇和剔除,設(shè)定α=0.10,α入選=0.05。見表5。結(jié)果顯示,腫瘤多發(fā)、TNM高分期、sErbB3高水平、HSP70高水平是PLC患者預(yù)后的獨(dú)立危險因素,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表6。

表5 賦值

表6 PLC患者預(yù)后影響因素的分析結(jié)果

3 討論

PLC是一類進(jìn)展迅速的惡性腫瘤,在疾病早期臨床癥狀不明顯,但隨病情發(fā)展,則會并發(fā)多種感染疾病,嚴(yán)重威脅患者生命安全,部分患者經(jīng)切除術(shù)后仍具有較高的復(fù)發(fā)率,對患者預(yù)后造成不利影響[6]。sErbB3基因位于12號染色體長臂,是人類表皮生長因子受體家族成員,主要負(fù)責(zé)細(xì)胞外信號傳導(dǎo)以及細(xì)胞內(nèi)下游信號傳導(dǎo),在生理條件下是細(xì)胞生長調(diào)節(jié)因子,當(dāng)腫瘤細(xì)胞異常表達(dá)時,ErbB3異常激活參與細(xì)胞增殖、分化的調(diào)控,在惡性腫瘤疾病中起到重要作用[7-8]。ErbB3還可激活PI3K/AKT、Jak/Stat等信號通路,促進(jìn)腫瘤發(fā)生[9]。HSP70是高度保守蛋白,可在細(xì)胞凋亡及增殖過程中參與調(diào)控,通常處于低水平狀態(tài),在癌癥組織中高表達(dá)[10],丁莉利等[11]研究中高分化肝細(xì)胞癌HSP70的表達(dá)率高達(dá)83.3%。本研究中,觀察組血清中sErbB3,HSP70水平較健康人群呈上升趨勢,ROC結(jié)果顯示,血清sErbB3,HSP70單獨(dú)及聯(lián)合預(yù)測肝癌患者預(yù)后不良的AUC分別為0.779、0.725、0.812,表明聯(lián)合檢測預(yù)測預(yù)后不良的價值優(yōu)于兩者單獨(dú)檢測。

Masroor等[12-13]研究表明,ErbB3蛋白表達(dá)同時,細(xì)胞可以分泌可溶性的sErbB3,sErbB3在乳腺癌患者以及肺癌患者血清中均呈現(xiàn)高表達(dá),可用作癌癥早期診斷的標(biāo)志物。本研究結(jié)果顯示,PLC患者血清中sErbB3水平較高,且與腫瘤直徑、腫瘤數(shù)目、TNM分期等相關(guān),sErbB3高水平組化療后平均生存時間為(28.76±4.72)個月,sErbB3低水平組化療后平均生存時間為(32.31±3.52)個月,差異有統(tǒng)計學(xué)意義,證實(shí)sErbB3高水平可誘發(fā)肝癌患者預(yù)后不良,促進(jìn)腫瘤再發(fā)生[14]。且經(jīng)Cox回歸模型顯示sErbB3高水平可作為肝癌患者預(yù)后的檢測指標(biāo)。相關(guān)研究[15]表示,細(xì)胞外HSP70肽復(fù)合物能夠通過P13K/AKT調(diào)控缺氧誘導(dǎo)因子,促進(jìn)人體肝癌HepG2細(xì)胞發(fā)生上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化,從而參與腫瘤發(fā)生。本研究顯示肝癌患者HSP70水平較高,且與腫瘤直徑、腫瘤數(shù)目、門靜脈癌栓、TNM分期等相關(guān),且與HSP70低水平組相比,HSP70高水平組生存時間較短,提示HSP70可用作腫瘤標(biāo)志物,在臨床預(yù)后方面可以考慮降低HSP70表達(dá)抑制腫瘤發(fā)生,改善患者預(yù)后[16]。

綜上所述,PLC患者血清中sErbB3和HSP70表達(dá)水平顯著升高,且與預(yù)后情況以及臨床病理特征密切相關(guān),sErbB3高水平、HSP70高水平均是患者預(yù)后的獨(dú)立危險因素,檢測sErbB3和HSP70有助于PLC患者的預(yù)后預(yù)測。