孫文軍 康 媛 馬 利

喉癌主要起源于喉部鱗狀上皮,據(jù)統(tǒng)計(jì)喉癌98%以上為喉鱗狀細(xì)胞癌,為頭頸部常見的惡性腫瘤[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)資料顯示[2],發(fā)生于耳鼻咽喉部位的惡性腫瘤中約有8%～35%為喉癌,在頭頸部惡性腫瘤中位居第三。有研究者對國內(nèi)喉癌流行病學(xué)進(jìn)行分析,得出我國近幾年喉癌的發(fā)病率呈緩慢上升趨勢[3]。目前,CO2激光顯微手術(shù)是咽喉部惡性腫瘤、息肉等病變的優(yōu)選治療方法,經(jīng)臨床實(shí)踐證明,該方法有術(shù)后瘢痕粘連少、止血效果好、聲帶損傷幾率小、安全性高等優(yōu)點(diǎn),但仍避免不了術(shù)后復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)[4]。有研究發(fā)現(xiàn)[5-6],CBX7屬于多梳蛋白復(fù)合體家族,在多種癌組織中出現(xiàn)表達(dá)異常,CK18廣泛存在于人體上皮細(xì)胞中,與起源于上皮細(xì)胞的腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。本研究旨在探討CBX7、CK18與早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)治療局部復(fù)發(fā)的相關(guān)性,為臨床評估喉癌術(shù)后復(fù)發(fā)提供思路和依據(jù)。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇2018年1月至2020年12月我院收治的聲門型喉癌早期患者(均行CO2激光顯微手術(shù)治療)84例作為癌癥組,喉良性病變患者72例作為良性病變組,選擇同期來我院體檢健康者60例作為對照組。癌癥組為男性49例,女性35例,年齡46～79歲,平均年齡為(67.27±9.24)歲,體重指數(shù)20～25 kg/m2,平均體重指數(shù) (23.16±2.37)kg/m2,按照國際抗癌聯(lián)盟制訂的 TNM 分期方法,其中T1a期46 例,T1b期22例,T2期16例;良性病變組男性41例,女性31例,年齡45～78歲,平均年齡為(66.96±9.07)歲,體重指數(shù)21～26 kg/m2,平均體重指數(shù)(23.22±2.01)kg/m2;對照組男性33例,女性27例,年齡45～79歲,平均年齡為(66.45±9.87)歲,體重指數(shù)21～26 kg/m2,平均體重指數(shù)(23.34±2.14)kg/m2。三組受試者一般資料無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。收集癌癥組84例患者臨床病理資料,包括年齡、體重指數(shù)、病理分型(菜花型/結(jié)節(jié)型/浸潤型/潰瘍型)、前聯(lián)合侵犯陽性率及術(shù)后血清CBX7、CK18水平。納入標(biāo)準(zhǔn):①經(jīng)我院診斷為聲門型喉癌早期,且通過病理學(xué)組織檢查確診且無證據(jù)顯示已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[參照《NCCN頭頸癌診治指南》(2007版)[7]中關(guān)于中喉癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)];②均接受CO2激光顯微手術(shù)治療。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并其他組織臟器腫瘤者;②免疫力低下并發(fā)全身感染者。健康體檢者納入標(biāo)準(zhǔn):除正常體檢項(xiàng)目外,均經(jīng)喉部常規(guī)檢查及喉鏡檢查顯示組織正常;排除標(biāo)準(zhǔn):①喉部有囊腫、息肉等良性病變者;②有咽喉部手術(shù)史。

1.2 檢測方法

CBX7、CK18測定方法:受試者均于清晨空腹采集外周靜脈血5 ml,送至檢驗(yàn)科以3500 r·min-1進(jìn)行離心處理(離心半徑為12 cm,時(shí)間為20 min),取得血清置于-80 ℃環(huán)境保存?zhèn)錂z,且于24 h內(nèi)完成檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清CBX7、CK18濃度,試劑盒提供者為上海晶抗生物工程有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 三組受試者血清CBX7、CK18水平比較

癌癥組血清CBX7水平顯著低于良性病變組和對照組,良性病變組低于對照組(P<0.05);癌癥組血清CK18水平顯著高于良性病變組和對照組,良性病變組高于對照組(P<0.05),見表1。

表1 3組受試者血清CBX7、CK18水平比較

2.2 聲門型喉癌早期患者術(shù)后復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組臨床病理因素比較

復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組兩組患者年齡、體重指數(shù)、病理分型比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);復(fù)發(fā)組前聯(lián)合侵犯陽性率及血清CK18水平顯著高于未復(fù)發(fā)組,血清CBX7水平顯著低于未復(fù)發(fā)組(P<0.05),見表2。

表2 復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組不同臨床病理因素比較

2.3 血清CBX7、CK18及前聯(lián)合侵犯與早期聲門型喉癌術(shù)后局部復(fù)發(fā)的Logistic回歸分析

行Logstic回歸分析(因變量:以早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)后是否發(fā)生局部復(fù)發(fā),自變量:CBX7、CK183三種臨床病理因素)得出低水平CBX7和高水平CK18是早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)后局部復(fù)發(fā)的高風(fēng)險(xiǎn)因素,見表3。

表3 血清CBX7、CK18及前聯(lián)合侵犯與早期聲門型喉癌術(shù)后局部復(fù)發(fā)的Logistic回歸分析

2.4 血清CBX7、CK18水平對早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)治療局部復(fù)發(fā)的評估價(jià)值

ROC曲線結(jié)果表明,CBX7、CK18對于評估早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)治療局部復(fù)發(fā)的敏感性和特異性較好,見表4、圖1。

圖1 CBX7、CK18、兩者聯(lián)合檢測的ROC曲線

表4 血清CBX7、CK18水平評估早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)治療局部復(fù)發(fā)的價(jià)值

3 討論

喉癌的發(fā)病原因仍不十分明確,有文獻(xiàn)報(bào)道[8],吸煙人群患病率明顯高于不吸煙人群,國內(nèi)外流行病學(xué)均顯示吸煙為喉癌發(fā)生的高危因素,因此男性發(fā)病率遠(yuǎn)高于女性,其次病毒感染、酗酒、放射因素、營養(yǎng)缺乏(尤其是缺乏微量元素)、內(nèi)分泌異常等因素也與喉癌的發(fā)生存在一定關(guān)系[9]。多數(shù)患者因出現(xiàn)咽喉部癥狀而就診,當(dāng)腫瘤累及聲帶,患者可出現(xiàn)聲響沙啞,腫瘤破潰可出現(xiàn)血絲痰,絕大多數(shù)患者伴有吞咽不適、咽喉疼痛、咽部異物感,隨著病情發(fā)展,晚期患者會出現(xiàn)進(jìn)行性吞咽困難、呼吸受阻,患者承受著巨大痛苦和煎熬[10-11]。早期的聲門型喉癌,經(jīng)CO2激光顯微手術(shù)治療后,多數(shù)預(yù)后較好,但仍有部分患者發(fā)生局部復(fù)發(fā),復(fù)發(fā)患者死亡率較高,這與腫瘤有很強(qiáng)的侵襲、轉(zhuǎn)移能力相關(guān)[11,8]。因此找到與聲門型喉癌術(shù)后局部復(fù)發(fā)相關(guān)的血清指標(biāo),對復(fù)發(fā)后患者的早發(fā)現(xiàn)早治療有重要意義。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,癌癥組血清CBX7水平顯著低于良性病變組和對照組,良性病變組低于對照組(P<0.05);癌癥組血清CK18水平顯著高于良性病變組和對照組,良性病變組高于對照組(P<0.05)。結(jié)果表明,喉癌患者血清CBX7、CK18水平顯著增高,CBX7、CK18可能參與喉癌的發(fā)生發(fā)展。郭武輝等[12]研究中,以64例喉癌患者、71例喉良性改變者及50例健康者為研究對象,對三組受試者血清CBX7等指標(biāo)對進(jìn)行檢測并對比,結(jié)果癌癥組血清CBX7水平顯著低于喉良性改變組和健康組(P<0.05),得出血清 CBX7 對于喉癌的檢測有潛在的參考價(jià)值,與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。屈慧等[13]研究了93例原發(fā)性喉癌患者,檢測并對比不同臨床分期患者血清CK18水平,結(jié)果發(fā)現(xiàn)晚期喉癌患者血清CK18水平顯著高于早中期喉癌患者(P<0.05),且經(jīng) Logistic 回歸分析得出,高水平的清CK18可能為原發(fā)性喉癌持續(xù)進(jìn)展的風(fēng)險(xiǎn)因素。證實(shí)了血清CK18參與了喉癌的發(fā)展。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,復(fù)發(fā)組前聯(lián)合侵犯陽性率及血清CK18水平顯著高于未復(fù)發(fā)組,血清CBX7水平顯著低于未復(fù)發(fā)組(P<0.05)。CBX7為多梳基因家族蛋白中的一員,有研究表明[14],多梳基因家族蛋白參與DNA 損傷應(yīng)答與修復(fù)過程,可參與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡,作用于干細(xì)胞分化過程,同時(shí)在腫瘤的發(fā)生及侵襲轉(zhuǎn)移方面有著重要影響。CBX7在多種惡性腫瘤中存在異常表達(dá),其機(jī)制較復(fù)雜,其抑癌和助癌的特性在不同的癌癥中表現(xiàn)不盡一致,研究發(fā)現(xiàn)[5],在膀胱癌、肺癌等惡性腫瘤中CBX7體現(xiàn)出抑癌特性,而在淋巴瘤和胃癌等等惡性腫瘤中體現(xiàn)出助癌特性。而在本研究中,CBX7在喉癌中表達(dá)下調(diào),體現(xiàn)出了抑癌特性。CK18在上皮細(xì)胞中分布廣泛,且參與上皮細(xì)胞的骨架構(gòu)成。研究表明[15],CK18在惡性腫瘤細(xì)胞中高度表達(dá),起到保護(hù)癌癥細(xì)胞的作用,也參與調(diào)節(jié)癌癥細(xì)胞間的信號傳導(dǎo),促進(jìn)癌細(xì)胞的快速增值。同時(shí),CK18在促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化等方面起著重要作用,進(jìn)而加強(qiáng)了腫瘤的侵襲例,促進(jìn)其轉(zhuǎn)移[16]。本實(shí)研究經(jīng)Logstic回歸分析再次證實(shí)低水平CBX7和高水平CK18是早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)后局部復(fù)發(fā)的高風(fēng)險(xiǎn)因素。上述結(jié)果表明,血清CBX7、CK18與喉癌的發(fā)生,及喉癌的侵襲、轉(zhuǎn)移有著密切關(guān)系,本實(shí)驗(yàn)經(jīng)繪制ROC曲線,結(jié)果顯示,血清CBX7、CK18對于評估早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)治療局部復(fù)發(fā)的敏感性和特異性較高,提示血清CBX7、CK18可作為評估早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)治療局部復(fù)發(fā)的參考指標(biāo)。

綜上所述,血清CBX7、CK18與喉癌的發(fā)生發(fā)展有著密切相關(guān)性,可作為評估早期聲門型喉癌CO2激光顯微手術(shù)治療局部復(fù)發(fā)的參考指標(biāo),價(jià)值較高。