聶嬌嬌 彭俊森 萬璇 黃世安 羅登燦 朱守亮 董曉慶

摘 要： 為探討一氧化氮（nitric oxide，NO）處理對獼猴桃果實的保鮮效果，以‘貴長獼猴桃（Actinidia deliciosa ‘Guichang）為材料，測定了常溫貯藏條件下NO處理對獼猴桃果實生理、食用品質(zhì)和營養(yǎng)成分的影響。結(jié)果表明，NO處理不僅可以延緩果實硬度的下降，降低呼吸速率及失重率的上升，還能減緩可溶性固形物含量、固酸比、總酚含量的上升以及可滴定酸、類黃酮、花青素和Vc含量的下降，從而減緩獼猴桃果實的衰老，保持果肉組織中的水分和營養(yǎng)物質(zhì)。該研究結(jié)果可為NO應用于獼猴桃果實貯藏保鮮提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：一氧化氮；‘貴長獼猴桃；保鮮

中圖分類號：S663.4

文獻標識碼：A

文章編號：1008－0457（2023）02－0023－06

國際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2023.02.004

獼猴桃（Actinidia deliciosa），別稱奇異果，為獼猴桃科獼猴桃屬植物，因其營養(yǎng)豐富、口味獨特以及維生素C（Vc）含量較高而受到人們的青睞［1］。獼猴桃屬于呼吸躍變型漿果類果實，具有較高的呼吸高峰和乙烯釋放高峰，采后果實易出現(xiàn)品質(zhì)下降、腐爛和霉變等問題，從而影響商品價值和經(jīng)濟價值。目前‘貴長獼猴桃的貯藏保鮮還存在較多的問題，其中保鮮劑的濫用導致獼猴桃后熟品質(zhì)嚴重下降甚至不能后熟是比較突出的問題之一。因此，探究適宜的保鮮劑更好地保鮮‘貴長獼猴桃，延長貯藏期，保持較高的果實品質(zhì)，減少腐爛損耗，是‘貴長獼猴桃產(chǎn)業(yè)亟待解決的問題。

一氧化氮（nitric oxide，NO）作為具有多種功能的信號分子，在植物體內(nèi)起著重要的調(diào)控作用［2］，且廣泛存在于生物體各組織內(nèi)，可以較好地維持果蔬的采后品質(zhì)［3］。研究表明，一定濃度的NO處理對園藝產(chǎn)品有較好的保鮮作用，但是不同園藝產(chǎn)品對NO的敏感性不同［4］。NO處理對杏［5］、哈密瓜［6］、番茄［7］、蘋果［8］、‘布魯諾獼猴桃［9］、火龍果［10］、芒果［11］等果蔬均有一定的保鮮作用。目前‘貴長獼猴桃的保鮮技術(shù)有二氧化氯保鮮［12］、紫外輻照保鮮［13］、復合膜保鮮［14］、生物保鮮劑保鮮［15］和乙烯吸附劑［16］。上述保鮮技術(shù)都能延長‘貴長獼猴桃果實的貯藏保鮮期，但存在保鮮技術(shù)成本高、衛(wèi)生安全等方面的缺陷。已有較多的證據(jù)表明，NO通過延緩組織衰老進程、抑制乙烯合成來提高果蔬貯藏過程中抵御逆境的能力［17］，可以解決目前‘貴長獼猴桃因保鮮技術(shù)不足而造成的浪費。

硝普鈉（SNP）可作為NO的供體，且低濃度SNP溶液呈無色，可以延長采后園藝產(chǎn)品的保鮮期以及改善果實品質(zhì)，對果蔬產(chǎn)品無殘留毒性，使用時僅需低濃度的溶液，成本較低[18]。硝普鈉（SNP）作為一種新型果蔬保鮮劑，在部分果蔬中已有相關(guān)研究報道且效果較好[19-23]。因此，本研究采用NO供體硝普鈉（SNP）處理‘貴長獼猴桃，通過對‘貴長獼猴桃采后貯藏期間的外觀變化和品質(zhì)及生理指標的觀測，探討NO處理對‘貴長獼猴桃貯藏保鮮的效果，為獼猴桃的貯藏保鮮提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。

1 ?材料與方法

1.1 ?試驗材料

供試‘貴長獼猴桃采自貴州省修文縣龍場鎮(zhèn)干壩村修文長興種植專業(yè)合作社基地（106.33°E，26.47°N），采摘可溶性固形物為6.5%～7.5%、大小均勻、成熟度相對一致、無病蟲害和機械損傷的果實，采后2 h內(nèi)運回貴州大學園藝實驗室，擺放于空曠的桌面上，放置12 h散去田間熱，將果實分為兩組，每組60個，分別放入硝普鈉（SNP）試劑（購于貴州省賽蘭博科技有限公司）配制的溶液和清水中浸泡10 min，取出后自然晾干，貯藏于室溫（23±2）℃下。每一組分別隨機選出兩組果實（每組10個），用于呼吸速率和失重率的測定，分別在第0、5、10、15、20、25、30天于每組剩下的果實中隨機選取3個進行硬度、可溶性固形物、可滴定酸、固酸比等指標的測定。每個處理設(shè)置3個重復。

1.2 ?指標測定

1.2.1 ?硬度測定

從每組待測樣品中分別隨機抽取3個獼猴桃果實，在果實的赤道部位，間隔等距離的3個位置各削去厚度約為1 mm的果皮，使用GY-4型數(shù)顯果實硬度計（購于浙江托普云農(nóng)科技股份有限公司），用相同的力度將探頭刺入選好的點，深度到探頭的刻度線（10 mm）處即讀數(shù)并記錄。

1.2.2 ?可溶性固形物、可滴定酸、固酸比測定

取一定量（5.0 g）果實樣品放入研缽中磨碎后，經(jīng)過濾取適量汁液滴入PAL-BX/ACID 12型數(shù)顯糖酸度計的儀器棱鏡，按下START鍵，Brix（可溶性固形物）測量值即顯示出來；用移液槍將樣品稀釋50倍后，攪拌均勻。 按下START鍵，Acid酸度（可滴定酸）測量值即顯示出來；固酸比的測量顯示方法在測量值顯示（Brix測量值和酸度值）后，直接按R鍵，即顯示固酸比數(shù)值，讀數(shù)記錄，重復3次。

1.2.3 ?呼吸強度測定

參考董曉慶等［24］方法。用TEL-7001型呼吸儀測定：將干燥器放入（23±2）℃的實驗室內(nèi)，每個處理隨機取10個獼猴桃果實（單果質(zhì)量80 g左右），放入9.0 L的干燥器中，同時放入CO2分析儀，密封，每10 min記錄1次。結(jié)果以CO2計，單位mg/（kg·h）。

1.2.4 ?失重率測定

采用稱重法CP213型電子天平進行稱量。失重率（%）=（m1-m2）/m1×100，式中：m1為采收當天果實的初始重量（g）;m2為試驗當天果實的重量（g）。

1.2.5 ?總酚、類黃酮、花青素測定

參考曹建康等［25］方法。使用FA-2104型分析天平稱取2.0 g果肉組織， 加入少許經(jīng)預冷的1%HCl-甲醇溶液，在冰浴條件下研磨勻漿后，轉(zhuǎn)入20 mL刻度試管中，用1%HCl-甲醇溶液沖洗研缽，一并轉(zhuǎn)移到試管中，定容至刻度線，混勻后于4 ℃避光提取20 min，期間搖動數(shù)次，然后放入YG16W型臺式高速冷凍離心機，在4 ℃下離心15 min后收取上清液待用，以1%HCl-甲醇溶液作空白參比調(diào)零，取上清液分別于波長280、325、600和530 nm處測定溶液的吸光度值，重復3次。此方法僅能判斷測定樣品之間總酚、類黃酮和花青素的相對含量， 以每克樣品在波長280 nm處吸光度值表示總酚含量，即OD280nm/g； 以每克樣品在波長325 nm處吸光度值表示類黃酮含量，即OD325nm/g；以每克樣品在波長530 nm和600 nm處吸光度值之差表示花青素含量（U），即U= （OD530nm-OD600nm）/g，從標準曲線中得出準確含量。

1.2.6 ?Vc含量測定

參考曹建康等［25］方法。采用2，6-二氯酚靛酚滴定法測定Vc含量。稱取10.0 g果實樣品置于研缽中，加入少量20 g/L草酸溶液，在冰浴條件下研磨成漿狀，轉(zhuǎn)入到100 mL容量瓶中，用20 g/L草酸溶液沖洗研缽后，倒入容量瓶中，再用20 g/L草酸溶液定容至刻度，搖勻，提取10 min后，過濾收集溶液備用。用移液器吸取10.0 mL濾液置于100 mL的三角瓶中，用已標定的2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至出現(xiàn)微紅色、且15 s不褪色為止，記下染料的用量。同時，以10 mL 20 g/L草酸溶液作為空白，按同樣方法進行滴定。重復3次。

1.3 ?數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Excel 2013軟件處理實驗數(shù)據(jù)及制作折線圖，DPS軟件進行單因素方差分析，Duncans多重差異比較，P值表示差異顯著性。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?NO對獼猴桃果實硬度的影響

果實的硬度是指果肉抗壓能力的強弱，抗壓力越強，果實的硬度就越大［26］。從圖1可以看出，隨著貯藏時間的延長，兩組獼猴桃果實的硬度均下降，在貯藏的第30天，處理組的硬度從4.82 N下降到1.54 N，下降了68%，對照組的硬度從4.82 N降到0.98 N， 下降了79.60%，且在整個貯藏期間，NO處理組的硬度的下降幅度小于對照組，具有顯著性差異（P＜0.05）。

2.2 ?NO對獼猴桃果實可溶性固形物、可滴定酸、固酸比的影響

可溶性固形物是判定果實采收時間、 耐貯藏性能及加工制品質(zhì)量的重要指標。 由圖2-a可以 看出，整個貯藏期間對照組和NO處理組的可溶性 固形物均呈上升趨勢，到第30天時，對照組的可溶性固形物上升了60.66%，處理組上升了55.55%，在貯藏期的第25天，處理組的可溶性固形物含量顯著低于對照組（P＜0.05），且對照組的含量上升趨勢較平穩(wěn)?？梢奛O處理可以延緩獼猴桃果實可溶性固形物的上升。果實的可滴定酸是由蘋果酸、琥珀酸、檸檬酸等組成，在后熟過程中逐漸下降，是影響果實風味的重要指標之一［27］。從圖2-b可知，整個貯藏期間，兩組獼猴桃果實的可滴定酸含量均下降，但處理組的獼猴桃果實較對照組下降較慢，在貯藏第30天，處理組的可滴定酸為1.04%，比對照組高0.13%，從第5天開始，處理組的可滴定酸含量下降趨勢趨于平緩，且顯著高于對照組（P＜0.05）。固酸比是評價水果果實風味和成熟程度的重要指標，固酸比越大，果實風味越濃［28］。由圖2-c所示，隨著貯藏期的延遲，獼猴桃果實的固酸比逐漸上升，到第30天，處理組的固酸比為17.63，而對照組的固酸比為18.93，從第5天開始，處理組的固酸比相較于對照組低，上升趨勢也較對照組平緩。貯藏的第10～25天處理組的固酸比顯著低于對照組（P＜0.05）。

2.3 ?NO對獼猴桃果實呼吸強度的影響

呼吸作用是生物體進行生命活動的基本代謝過程，也是采收后果蔬進行的最重要的生理活動之一，在果蔬呼吸過程中，所釋放的呼吸熱是影響果蔬貯運性的重要因素［25］。獼猴桃屬于呼吸躍變型果實，如圖3所示，在貯藏的第10天出現(xiàn)了呼吸高峰，處理組和對照組的獼猴桃果實的呼吸高峰值分別為4.40 mg/（kg·h）和5.47 mg/（kg·h），處理組比對照組降低了19.51%，且兩組之間具有顯著性差異（P＜0.05）。

2.4 ?NO對獼猴桃果實失重率的影響

當失水率達到一定程度后果實便會產(chǎn)生嚴重的皺縮，失去商品價值。由圖4可知，隨著貯藏時間的延長，處理組和對照組的失重率均呈上升趨勢。在貯藏末期，處理組果實和對照組果實的失重率分別為5.22%和7.54%，處理組果實的失重率極顯著低于對照組（P＜0.01）。

2.5 ?NO對獼猴桃果實總酚物質(zhì)、類黃酮、花青素含量的影響

總酚類物質(zhì)為植物次生代謝產(chǎn)物，與果蔬成熟、衰老、抗逆、抗病性代謝密切相 關(guān)［29］。由圖5-a ??可以看出貯藏過程中，兩組獼猴桃果實的總酚均在下降，貯藏第30天，處理組果實的總酚為0.36 mg/g， 對照組的總酚為0.44 mg/g，在整個過程中處理組的總酚下降速度速率低于對照組，但差異不顯著（P＞0.05）。類黃酮是植物體內(nèi)重要的植保素類物質(zhì)，具有抗病性［30］。由圖5-b可知，貯藏過程中獼猴桃果實的類黃酮含量在不斷下降，在貯藏的第30天，對照組獼猴桃果實的類黃酮下降了91.11%，而處理組果實的類黃酮下降了77.54%，相比對照組低了13.58%，在貯藏的第0天到第15天，處理組的類黃酮下降趨勢大于對照組，但在第15天到第30天，處理組的類黃酮下降趨勢顯著低于對照組（P＜0.05）?；ㄇ嗨厥谴蟛糠种参镒陨砗铣傻奶烊簧?，在植物生長發(fā)育中具有重要作用［31］，也是一種植物次生代謝產(chǎn)物，大量存在于果蔬組織中，與果蔬的色澤發(fā)育、品質(zhì)和風味形成、成熟衰老過程等作用密切相關(guān)，對果蔬的貯藏具有重要的影響［25］。從圖5-c可以看出，在貯藏的30天內(nèi)，兩組獼猴桃果實的花青素含量均逐步降低，貯藏30天，對照組果實和處理組果實的花青素含量分別下降了83.72%和66.67%，處理組相比對照組低了17.05%，且處理組果實花青素含量下降趨勢較平緩，兩組之間具有顯著性（P＜0.05）。

2.6 ?NO對獼猴桃果實Vc含量的影響

在貯藏過程中，果實的Vc極易分解，因此，Vc含量是評價獼猴桃營養(yǎng)和商品價值的一個重要指標［32］。由圖6可知，隨著貯藏時間的延長，處理組與對照組果實的Vc含量均呈下降趨勢，第30天時， 處理組果實的Vc含量從169.07 mg/100 g下降到 114.30 mg/100 g，下降了32.34%， 對照組果實的Vc 含量則從175.85 mg/100 g下降到112.42 mg/100 g， 下降了36.07%，處理組下降速率較為平緩，但在貯藏第30天兩者差異不顯著（P＞0.05）。

3 ?結(jié)論與討論

本研究表明，0.25 mmol/L NO供體硝普鈉（SNP）處理延緩了‘貴長獼猴桃果實軟化速率，顯著抑制了失重率的上升，有效保持獼猴桃果實果肉組織中的水分，這一結(jié)論與NO處理延緩了李［33］、芒果［34］、番茄［35］和馬鈴薯［36］的硬度下降以及抑制失重率上升的結(jié)論相一致。侯曉東等［37］研究表明芒果的失重是由于果皮水分的散失而不是果肉，NO處理也有可能通過抑制獼猴桃果實果皮的水分散失從而抑制果實失重率的上升，這種推斷有待進一步證實，也有可能是降低了獼猴桃果實的呼吸速率、蒸騰作用，減少了果實營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，從而減緩了獼猴桃果實重量的損失。

呼吸作用是生物體進行生命活動的基本代謝過程，也是采收后果蔬進行的最重要的生理活動之一，在果蔬呼吸過程中， 所釋放的呼吸熱是影響果蔬耐貯性的重要因素，NO處理顯著降低了獼猴桃果實的呼吸速率，進而減少貯藏期間獼猴桃果實營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，達到保鮮的作用，與NO處理降低臍橙［38］和‘布魯諾獼猴桃［9］呼吸速率的結(jié)果相一致。

可溶性固形物、可滴定酸和固酸比是決定果實品質(zhì)的重要因子，NO處理抑制果肉中淀粉的代謝，從而使果實的可溶性固形物含量上升幅度降低，同時減緩可滴定酸的下降以及固酸比的上升，保持了獼猴桃果實良好的口感和風味，與馬海燕等［4］研究的NO處理降低碭山酥梨的可溶性固形物含量的上升幅度這一結(jié)論相一致。

酚類物質(zhì)、類黃酮類和花青素是果蔬組織中大量存在的植物次生代謝產(chǎn)物，與果蔬的色澤發(fā)育、風味形成、成熟衰老和組織褐變等作用密切相關(guān)。在該研究的貯藏過程中，獼猴桃果實中的總酚物質(zhì)、類黃酮含量和花青素含量均下降，但NO處理的果實中這3類物質(zhì)的下降趨勢較為平緩，說明NO處理能夠延緩獼猴桃果實的總酚物質(zhì)、類黃酮含量和花青素含量的下降，有助于獼猴桃果實的保鮮；王欣等［39］和周春麗等［40］的研究表明，NO處理可有效抑制雙孢蘑菇和韭菜中Vc含量的下降，但本研究結(jié)果表明，NO處理對降低獼猴桃果實中的Vc含量下降速率沒有起到顯著的作用，其具體原因，有待進一步研究。

本研究表明，0.25 mmol/L NO供體硝普鈉（SNP）處理‘貴長獼猴桃果實可以起到良好的保鮮效果，有效保持果實中的水分，抑制失重率和硬度的下降，同時降低呼吸速率，減少營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，減緩可溶性固形物含量的上升、可滴定酸的下降以及固酸比的上升，且延緩獼猴桃果實的總酚物質(zhì)、類黃酮、花青素和Vc含量的下降，有助于獼猴桃果實的貯藏保鮮?？梢娺m當濃度的NO處理可以延長‘貴長獼猴桃的貯藏期，維持較好的果實品質(zhì)。從生理生化、分子生物學以及組學角度等進一步探索NO延緩‘貴長獼猴桃衰老的機制是我們今后研究的方向。

（責任編輯：胡吉鳳）

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Effect of Nitric Oxide on Preservation of Actinidia deliciosa ‘Guichang Fruit

Nie Jiaojiao1，Peng Junsen1，Wan Xuan1，Huang Shian1，Luo Dengcan1，Zhu Shouliang2，Dong Xiaoqing1*

（1.College of Agriculture，Guizhou University，Guiyang，Guizhou 550025，China; 2.Fruit and Vegetable Work Station of Guizhou Province，Guiyang，Guizhou 550025，China）

Abstract：

In order to explore the effect of nitric oxide（NO） on the preservation of kiwifruit，Actinidia deliciosa ‘Guichang，and the physiology，edible quality and nutritional composition of kiwifruit treated by NO were determined under room temperature.The results showed that NO treatment could not only delay the decrease of fruit firmness of ‘Guichang kiwifruit，reduce the respiration rate and increase of weight loss rate，but also slow down the increase of ?soluble solid content（SSC），SSC/TA，total phenolic content and the decline of titratable acids（TA），flavonoids，anthocyanin and Vc contents.Thus，the senescence of kiwifruit was inhibited，and the water and nutrients in the pulp tissue were maintained.The results of this study could provide a theoretical basis for the application of NO in the storage and preservation of kiwifruit.

Keywords：

nitric oxide; Actinidia deliciosa ‘Guichang; preservation