薛漓，丁好，石婧奇

非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）一般是由肺泡上皮或支氣管黏膜上皮細(xì)胞異常增殖后誘發(fā)的惡性癌變，在肺癌中占比超過80%，嚴(yán)重威脅患者的生命安全［1-2］。目前臨床治療NSCLC 早期患者可通過手術(shù)切除病灶，有效延長其生存周期，甚至治愈［3-4］。但由于NSCLC 早期并不具備特有的臨床典型特征，且NSCLC 早期誘發(fā)的呼吸系統(tǒng)癥狀極易與肺結(jié)核、肺纖維瘤等良性病變混淆，因此提高NSCLC 早期篩選率成為目前改善患者預(yù)后的重要研究方向［5-6］。相關(guān)研究表明，異常糖鏈糖蛋白（TAP）可在一定程度上反映腫瘤細(xì)胞新陳代謝水平［7］。神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、細(xì)胞角蛋白19 片段（CYFRA21-1）、癌胚抗原（CEA）、糖類抗原125（CA125）等血清腫瘤標(biāo)志物均在NSCLC 患者中檢測異常［8-9］?；诖?，為進(jìn)一步提高NSCLC 患者的早期檢出率，筆者選取NSCLC 患者進(jìn)行研究，以分析TAP 聯(lián)合血清腫瘤標(biāo)志物對NSCLC 的早期診斷價(jià)值，為后續(xù)研究提供數(shù)據(jù)參考。

1 資料與方法

1.1 研究資料

回顧性分析南通市中醫(yī)院2019 年1 月至2021 年10 月收治的80 例NSCLC 患者的病歷資料，為NSCLC 組，年齡48～79 歲［（61.54 ± 3.09）歲］；女34 例，男46 例；病理組織分型中鱗癌33 例，腺癌42 例，鱗腺癌及其他5 例；TNM［T（腫瘤原發(fā)灶的情況，tumor），N（區(qū)域淋巴結(jié)受累情況，node），M（遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，metastasis）］分期中Ⅰ期7 例，Ⅱ期26 例，Ⅲ期34 例，Ⅳ期13 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均符合《中華醫(yī)學(xué)會(huì)肺癌臨床診療指南（2019 版）》［10］中NSCLC 的臨床診斷，且經(jīng)病理學(xué)及影像學(xué)等檢查確診；（2）均為首次確診；（3）卡氏評分（KPS）＞60 分；（4）年齡≥18 歲；（5）臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并其他組織或器官惡性癌變；（2）合并心腦血管疾?。唬?）肝腎功能嚴(yán)重?fù)p傷；（4）精神病或嚴(yán)重意識障礙；（5）哺乳或妊娠期女性；（6）預(yù)計(jì)生存期＜6 個(gè)月。另選取與NSCLC 組性別、年齡匹配的同期住院的80 例肺部良性病變患者的病歷資料進(jìn)行對照，年齡18～79 歲［（61.79 ± 3.14）歲］，女31 例，男49 例，均為肺部炎癥患者?；颊呒捌浼覍俸炇鹬橥鈺狙芯拷?jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批（20220328）。

1.2 方法

1.2.1 病例資料 收集并整理所有受試者的臨床基礎(chǔ)資料，包括性別、年齡、體重指數(shù)（BMI）、文化程度、飲酒史、吸煙史、基礎(chǔ)疾?。ㄌ悄虿　⒏哐?、高血壓等）、職業(yè)。

1.2.2 血清腫瘤標(biāo)志物檢測方法 于患者入院第2 天清晨采集其空腹外周靜脈血3～4 ml，離心3 000 r/min（離心半徑13.5 cm）10 min 后取上清，分別采用酶聯(lián)免疫法檢測血清NSE（正常值參考范圍：0～17.5 μg/L）、CYFRA21-1（正常值參考范圍：0～3.3 μg/L），雙圄體墉心法檢測CEA（正常值參考范圍：0～5.0 μg/L），酶聯(lián)免疫法檢測CA125（正常值參考范圍：0～35.0 μg/L）水平。NSE、CYFRA21-1 試劑盒購自廣州奧瑞達(dá)生物科技有限公司，CEA試劑盒購自上海一研生物科技有限公司，CA125 試劑盒購自艾美捷科技有限公司。

1.2.3 TAP 檢測方法 于患者入院第2 天清晨采血，取采集的血液樣本涂片、風(fēng)干，滴加TAP 檢測試劑后干燥，制得TAP 血液標(biāo)本，顯微鏡下觀察TAP凝聚物變化，并通過捷達(dá)科技病理信息管理系統(tǒng)檢測凝聚物生長面積。

1.2.4 其他實(shí)驗(yàn)室常規(guī)指標(biāo)檢測方法 于患者入院第2 天清晨采血，邁瑞B(yǎng)C-5390CRP 檢測WBC，離子選擇電極法檢測K+、Ca2+、肌氨酸氧化酶法檢測Scr 水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。Logistic 多因素回歸分析NSCLC 發(fā)病的影響因素，受試者操作特征（ROC）曲線判定血清腫瘤標(biāo)志物及TAP 對NSCLC 的單一及聯(lián)合診斷效能。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 NSCLC 組與良性病變組患者的血清腫瘤標(biāo)志物及TAP 水平比較

NSCLC 組患者TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 水平均高于良性病變組（P＜0.05）。見表1。

表1 NSCLC 組與良性病變組患者的血清腫瘤標(biāo)志物及TAP 水平比較（± s，每組n=80）

表1 NSCLC 組與良性病變組患者的血清腫瘤標(biāo)志物及TAP 水平比較（± s，每組n=80）

注：NSCLC 為非小細(xì)胞肺癌，TAP 為異常糖鏈糖蛋白，NSE 為神經(jīng)元特異性烯醇化酶，CYFRA21-1 為細(xì)胞角蛋白19 片段，CEA 為癌胚抗原，CA125 為糖類抗原125

組別NSCLC 組良性病變組t 值P 值TAP（μm2）182.53 ± 31.02 80.49 ± 16.34 26.031＜0.001 NSE（μg/L）27.13 ± 2.95 14.24 ± 1.18 36.287＜0.001 CYFRA21-1（μg/L）14.21 ± 2.73 3.27 ± 1.94 29.297＜0.001 CEA（μg/L）17.01 ± 3.49 4.04 ± 2.59 26.693＜0.001 CA125（μg/L）36.29 ± 17.24 17.79 ± 5.03 9.214＜0.001

2.2 影響NSCLC 發(fā)病的單因素分析

NSCLC 組與良性病變組患者性別、年齡、BMI、糖尿病史、高血脂史、高血壓史、文化程度、飲酒史及血液WBC、Scr、Ca2+、K+水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。NSCLC 組吸煙史及從事高油煙或高密度粉塵等相關(guān)工作職業(yè)所占比例均高于良性病變組（P＜0.05）。見表2。

表2 影響NSCLC 發(fā)病的單因素分析（每組n=80）

2.3 影響NSCLC 發(fā)病的多因素分析

以發(fā)生NSCLC 為因變量（是=1，否=0），2 組存在差異的相關(guān)因素為自變量進(jìn)行賦值，賦值內(nèi)容見表3。Logistic 多因素回歸分析結(jié)果顯示，吸煙史、從事高油煙或高密度粉塵等相關(guān)工作及血液TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 水 平 升 高 均 為NSCLC 發(fā)病的影響因素（P＜0.05）。見表4。

表3 自變量賦值

表4 影響NSCLC 發(fā)病的多因素分析

2.4 血清腫瘤標(biāo)志物及TAP 對NSCLC 的診斷效能

ROC 分析顯示，TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 單一診斷NSCLC Ⅰ～Ⅳ期患者的靈敏度中TAP、NSE 診斷效能較高。見表5。TAP 聯(lián)合NSE診斷NSCLC I～Ⅳ期患者的AUC 分別為0.642、0.679、0.774、0.791，4 項(xiàng)血清標(biāo)志物及TAP 聯(lián)合診斷NSCLC 的AUC 分別為0.649、0.683、0.785、0.794。見表6。

表5 血清腫瘤標(biāo)志物及TAP 對NSCLC 的ROC 診斷

表6 血清腫瘤標(biāo)志物及TAP 對NSCLC 的聯(lián)合診斷分析

3 討論

NSCLC 作為臨床中常見的呼吸系統(tǒng)惡性病變，誘發(fā)因素較多，且致病機(jī)制復(fù)雜，目前臨床中缺乏對NSCLC 中晚期治愈方案，因此提高NSCLC 的早期篩選并且通過手術(shù)切除癌變病灶成為有效延長NSCLC 患者生存期的主要研究方向［11-12］。目前，NSCLC 的臨床檢查方法主要包括支氣管鏡檢查、CT或核磁共振（MRI）影像檢查、基因檢測、腫瘤標(biāo)志物檢測及病理學(xué)檢查等多種篩查方案。其中多數(shù)學(xué)者均認(rèn)同，病理學(xué)檢查是NSCLC 臨床診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。但由于病理活檢對患者機(jī)體創(chuàng)傷性較高，以致于部分患者配合積極性低，且病理組織活檢培養(yǎng)耗時(shí)較長，從而導(dǎo)致部分患者病情持續(xù)進(jìn)展，預(yù)后不良［13-14］。而腫瘤標(biāo)志物檢測作為腫瘤醫(yī)學(xué)不斷發(fā)展的產(chǎn)物，可通過對患者特異性血液指標(biāo)檢測，提高組織或細(xì)胞惡性病變的早期篩查，具有優(yōu)越的臨床應(yīng)用效果［15-16］。

本研究中NSCLC 組TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 水平均高于良性病變組，表明NSCLC患者中TAP、NSE 及CYFRA21-1 表達(dá)水平較高。其中TAP 主要是糖基化不完全或由新的糖基轉(zhuǎn)移酶被激活后誘導(dǎo)生成糖基化。當(dāng)腫瘤細(xì)胞侵襲正常細(xì)胞時(shí)，可介導(dǎo)機(jī)體甲胎蛋白、堿性磷酸酶等蛋白多種糖鏈結(jié)構(gòu)改變，且伴隨腫瘤影響新陳代謝程度的加快，此類物質(zhì)被過度排放至血液并儲(chǔ)存于外周血液［17-18］。劉哲等［19］研究分析表明，檢測腫瘤細(xì)胞代謝過程中，排放至外周血中的糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)異常水平，對提高腫瘤細(xì)胞的陽性檢出率具有積極意義。因此本研究分析TAP 可用于提高NSCLC的診斷效能。NSE 是一類參與糖酵解途徑的烯醇化酶，主要存在于神經(jīng)內(nèi)分泌或神經(jīng)組織中，血清中含量甚微［20］。但相關(guān)研究學(xué)者發(fā)現(xiàn)［21］，NSCLC 患者血清中NSE 表達(dá)異常，且對患者的預(yù)后表現(xiàn)出較高的預(yù)測效能。CYFRA21-1 是形成上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)蛋白之一，在惡性上皮細(xì)胞中激活的蛋白酶加速了細(xì)胞的降解，使得大量細(xì)胞角蛋白釋放入血，其中可溶性片段可與BM19.21 及KS19.1 等單克隆抗體特異性結(jié)合，從而生成CYFRA21-1［22］。既往研究顯示，CYFRA21-1 在肺鱗癌中存在高表達(dá)［23］。因此，本研究認(rèn)為CYFRA21-1 可用于輔助診斷NSCLC。CEA 是一種酸性糖蛋白，在胚胎時(shí)由胃腸道、肝、胰腺分泌，成年后血清含量極低，在多種惡性腫瘤中均有升高[24]。CA125 高度糖基化，為上皮細(xì)胞頂膜上的外來顆粒和感染因子的潤滑屏障，在卵巢癌、消化道惡性腫瘤中表達(dá)增加[25]。CEA 和CA125 在既往研究中常為消化道腫瘤的檢測標(biāo)志物，但研究顯示在早期肺癌患者中二者同樣存在高表達(dá)現(xiàn)象［26］，因此本研究認(rèn)為CEA 和CA125 可用于輔助診斷早期NSCLC。本研究通過Logistic 多因素回歸分析結(jié)果顯示，吸煙史、從事高油煙或高密度粉塵等相關(guān)工作及血液TAP、NSE 和CYFRA21-1水平升高均為NSCLC 發(fā)病的影響因素。研究表明血液TAP、NSE 及CYFRA21-1 水平與NSCLC 關(guān)系密切。此外，煙草也是NSCLC 發(fā)病的影響因素，有研究分析煙草點(diǎn)燃后可釋放大量亞硝胺及焦油等致癌物，且伴隨煙齡的增加，可導(dǎo)致肺部對亞硝胺及焦油等致癌物的濾過率降低，從而導(dǎo)致肺癌發(fā)生率增高［27］。而從事高油煙或高密度粉塵等相關(guān)工作的人群，煤炭、油脂等燃燒產(chǎn)生苯并芘等致癌物，并隨著8 μm 以下的微塵被吸入其肺部，提高了肺癌發(fā)病率［28］。本研究ROC 分析顯示，TAP 聯(lián)合NSE 診斷NSCLC Ⅰ～Ⅳ期患者和TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 聯(lián)合診斷效能相近，臨床實(shí)踐中可優(yōu)先根據(jù)TAP、NSE 聯(lián)合診斷結(jié)果初步判定NSCLC，并根據(jù)診斷結(jié)果評估后續(xù)臨床診斷中是否進(jìn)行病理取樣，提高臨床診斷效能且節(jié)約經(jīng)濟(jì)成本。

綜上所述，TAP 聯(lián)合NSE 診斷Ⅰ～Ⅳ期NSCLC 的診斷效能較高，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。但介于本研究樣本量受限，后續(xù)臨床仍需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量證實(shí)本研究結(jié)論，以推動(dòng)NSCLC 的臨床診斷研究。