閆瀟涵，張文通，孫萌莉，翁 寧，何麗萍

（河南中測技術(shù)檢測服務(wù)有限公司，河南鄭州 450000）

農(nóng)藥廣義上是指用于預(yù)防、消滅或控制危害農(nóng)業(yè)、林業(yè)的病、蟲、草和其他有害生物以及有目的地調(diào)節(jié)、控制、影響植物和有害生物代謝、生長、發(fā)育、繁殖過程的化學(xué)合成或來源于生物、其他天然產(chǎn)物及應(yīng)用生物技術(shù)產(chǎn)生的一種物質(zhì)或幾種物質(zhì)的混合物及其制劑。狹義上是指在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，為保障、促進(jìn)植物和農(nóng)作物的成長，所施用的殺蟲、殺菌、殺滅有害動(dòng)物(或雜草)的一類藥物統(tǒng)稱。特指在農(nóng)業(yè)上用于防治病蟲以及調(diào)節(jié)植物生長、除草等的藥劑[1]。

農(nóng)藥殘留問題是由農(nóng)藥的廣泛使用導(dǎo)致的，殘留農(nóng)藥通過食物鏈進(jìn)入人體內(nèi)，危害人們的身體健康[2-4]。因此，加強(qiáng)對農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的檢測，保障農(nóng)產(chǎn)品食用安全非常重要。目前，食品中檢測農(nóng)藥殘留的常用方法有色譜法和色譜質(zhì)譜聯(lián)用法，其中串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性較好[5-6]。本次能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行檢測，參考GB 23200.113——2018[7]中的基本檢測方法，根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化前處理方法，以適用本次能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

能力驗(yàn)證樣品為3個(gè)（其中1個(gè)為考核樣品，2個(gè)為干擾樣品），編號(hào)分別為A147、A153、A165，基質(zhì)為豇豆，采用塑料離心管封裝，均已通過穩(wěn)定性檢測，質(zhì)量為25 g。樣品均來自本次能力驗(yàn)證技術(shù)支持單位河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與監(jiān)測技術(shù)研究所。實(shí)驗(yàn)室自備豇豆空白樣品基質(zhì)。

乙腈、丙酮，色譜純，500 mL/瓶；氯化鈉，分析純，500 g/瓶；PSA色譜填料，100 g/瓶；GCB色譜填料，100 g/瓶；無水硫酸鎂，分析純，500 g/瓶；0.22 μm有機(jī)濾膜，默克公司；乙酸乙酯中25種農(nóng)藥混標(biāo)、乙酸乙酯中24種農(nóng)藥混標(biāo)、丙酮中甲基對硫磷，詳細(xì)信息見表1。

表1 標(biāo)準(zhǔn)品信息表

1.2 儀器與設(shè)備

島津GC-MSMS TQ8050NX氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀，島津中國公司；電子天平，上?？苿?chuàng)色譜科技有限公司；超聲提取器；渦旋混合器；冷凍離心機(jī)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別準(zhǔn)確移取乙酸乙酯中25種農(nóng)藥混標(biāo)、乙酸乙酯中24種農(nóng)藥混標(biāo)、丙酮中甲基對硫磷100 μL于1.0 mL容量瓶，用丙酮定容至刻度線，配制成濃度為10.0 μg·mL-1的混合標(biāo)準(zhǔn)中間工作液，避光-18 ℃左右保存。將混合標(biāo)準(zhǔn)中間工作液用空白樣品基質(zhì)配制成濃度為0.01 μg·mL-1、0.02 μg·mL-1、0.05 μg·mL-1、0.08 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1和0.20 μg·mL-1的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.3.2 樣品前處理

稱取豇豆空白樣品基質(zhì)25.0 g于50 mL離心管中，與驗(yàn)證樣品質(zhì)量保持一致，加入20 mL乙腈，渦旋混勻1 min，超聲提取30 min，8 000 r·min-1離心5 min，移取上清液于100 mL具塞比色管中備用。殘?jiān)謩e再用20 mL、10 mL乙腈重復(fù)提取兩次，合并上清液，渦旋混勻。加入5 g氯化鈉于上清液中，渦旋混勻1 min，室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。取15 mL乙腈層于50 mL離心管中，加入900 mg硫酸鎂、150 mg PSA及15 mg GCB，渦旋混勻1 min，8 000 r·min-1離心5 min，吸取1 mL上清液用0.22 μm有機(jī)濾膜過濾，用于測定，外標(biāo)法定量。

1.3.3 儀器分析條件

色譜柱：SH-Rtx-5MS色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；柱溫箱溫度：60 ℃保持1 min，以40 ℃·min-1的速率升到180 ℃，再以10 ℃·min-1的速率升到300 ℃，保持5 min；載氣：氦氣，純度≥99.999%，流速1.0 mL·min-1；碰撞氣：氬氣，純度≥99.999%；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；進(jìn)樣量：1.0 μL；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；電子轟擊源：70 eV；離子源溫度：230 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；溶劑延遲：4 min；掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

將系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液按照1.3.3條件進(jìn)樣分析，根據(jù)溶液濃度和峰面積繪制線性回歸方程，線性方程及相關(guān)系數(shù)見表2。線性方程相關(guān)系數(shù)R均大于0.995，滿足相關(guān)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制要求[8-9]。

表2 考核農(nóng)藥殘留保留時(shí)間、線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)表

2.2 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)

在豇豆空白基質(zhì)中加入濃度均為0.04 mg·kg-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.3.2方法進(jìn)行前處理，重復(fù)測定3次，加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。腐霉利、聯(lián)苯菊酯、氧樂果、甲胺磷、乙酰甲胺磷、毒死蜱、甲基對硫磷和水胺硫磷的平均加標(biāo)回收率為99.8%～109.0%，RSD均小于10%，回收率符合相關(guān)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)[8]。

表3 加標(biāo)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表

2.3 考核樣品結(jié)果分析

根據(jù)1.3.2中樣品前處理步驟對編號(hào)A147、A153、A165考核樣進(jìn)行提取檢測，其中A147中檢出甲基對硫磷、腐霉利、聯(lián)苯菊酯和水胺硫磷4種農(nóng)藥殘留；A153中檢出氧樂果、毒死蜱2種農(nóng)藥殘留；A165中檢出乙酰甲胺磷、甲胺磷2種農(nóng)藥殘留，結(jié)果見表4。依據(jù)能力驗(yàn)證作業(yè)指導(dǎo)書要求，僅上報(bào)檢測值大于0.025 mg·kg-1的結(jié)果。

表4 考核樣品結(jié)果表

3 結(jié)論

本次能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)參考GB 23200.113——2018中蔬菜農(nóng)殘檢測方法，以實(shí)際情況優(yōu)化前處理方法，對考核樣品進(jìn)行多次充分提取以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確穩(wěn)定性。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及作業(yè)指導(dǎo)書要求最終報(bào)出結(jié)果為豇豆基質(zhì)能力驗(yàn)證樣品A147中甲基對硫磷含量為0.047 8 mg·kg-1，腐霉利含量為0.244 mg·kg-1，聯(lián)苯菊酯含量為0.046 2 mg·kg-1；樣品A153中氧樂果含量為0.035 0 mg·kg-1，毒死蜱含量為0.043 5 mg·kg-1；樣品A165中乙酰甲胺磷含量為0.125 0 mg·kg-1，甲胺磷含量為0.051 7 mg·kg-1。實(shí)驗(yàn)后期未收到復(fù)測樣品，能力驗(yàn)證取得“滿意”結(jié)果，驗(yàn)證了本檢測機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室農(nóng)藥殘留的檢測能力，確保了數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，為政府監(jiān)督部門提供了有力的技術(shù)支持。