王世成，余進(jìn)松，李忠

1南陽(yáng)市第一人民醫(yī)院西區(qū)醫(yī)院普外科，河南 南陽(yáng) 473000

2南陽(yáng)市第一人民醫(yī)院普外科，河南 南陽(yáng) 473000

胃癌是常見(jiàn)的、高發(fā)病率、高病死率的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，起源于胃黏膜上皮，具有早期診斷難、晚期治療難的特征[1-2]。有研究稱，胃癌患者的預(yù)后與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM 分期、病理類型、腫瘤浸潤(rùn)深度等有關(guān)[3-4]，但是無(wú)法在疾病早期輕松獲取此類信息，因此需要尋找對(duì)腫瘤患者預(yù)后進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估的新型生物標(biāo)志物。鉀電壓門控通道亞 家 族C 成 員3（potassium voltage-gated channel subfamily C member 3，KCNC3）屬于通道蛋白的延遲整流子類別，也是介導(dǎo)可刺激膜的電壓依賴性鉀離子滲透性的完整膜蛋白，目前關(guān)于其在腫瘤中作用的研究報(bào)道較少[5-7]。本研究檢測(cè)KCNC3 在腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者胃癌組織中的表達(dá)，并分析其與胃癌患者臨床特征及預(yù)后的關(guān)系，為胃癌患者預(yù)后的預(yù)測(cè)提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年2月至2019年6月南陽(yáng)市第一人民醫(yī)院西區(qū)醫(yī)院、南陽(yáng)市第一人民醫(yī)院收治的行腹腔鏡根治術(shù)的胃癌患者的病歷資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《胃癌規(guī)范化診療指南（試行）》[8]中關(guān)于胃癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)胃鏡以及組織病理學(xué)檢查確診為胃癌；②接受腹腔鏡胃癌根治術(shù)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①精神疾?。虎诤喜⑵渌麗盒阅[瘤；③合并其他器官嚴(yán)重病變；④臨床及隨訪資料不完整。根據(jù)納入、排除標(biāo)準(zhǔn)，共納入60 例胃癌患者，其中，男性36 例，女性24 例；年齡21～75 歲，平均（53.38±8.23）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，所有患者均知情同意。

1.2 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)KCNC3 水平

取胃癌組織，用4%多聚甲醛固定、脫水、包埋成石蠟標(biāo)本，切成約4 μm 的切片，經(jīng)常規(guī)烤片、脫蠟、水化，微波爐抗原修復(fù)15 min，山羊血清白蛋白孵育30 min。分別滴加KCNC3 一抗，4 ℃孵育過(guò)夜，次日孵育二抗，二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色，蘇木精復(fù)染，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹(shù)脂封片。結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：①以切片中細(xì)胞染色強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)分，細(xì)胞無(wú)著色為0 分，淺黃色為1 分，棕黃色為2 分，棕褐色為3 分；②以陽(yáng)性細(xì)胞百分比進(jìn)行評(píng)分，無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為0 分，陽(yáng)性細(xì)胞百分比﹤10%為1 分，10%～50%為2 分，﹥50%為3 分。兩項(xiàng)評(píng)分的乘積為最終得分，總分≥3 分為陽(yáng)性，﹤3 分為陰性。

1.3 隨訪

收集患者年齡、性別、分化程度、腫瘤最大直徑等臨床資料。采用電話、門診及住院復(fù)查等方式隨訪2年，隨訪間隔3 個(gè)月，了解患者生存情況。隨訪時(shí)間截至2021年6月，根據(jù)隨訪結(jié)果將患者分為死亡組（n=23）和生存組（n=37）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；多因素分析采用Logistic 回歸模型；以P﹤0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同臨床特征胃癌患者的胃癌組織中KCNC3表達(dá)情況的比較

不同年齡、性別、腫瘤最大直徑、分化程度胃癌患者的胃癌組織中KCNC3 表達(dá)情況比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹥0.05）；腫瘤分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的胃癌患者的胃癌組織中KCNC3 陽(yáng)性表達(dá)率分別明顯高于腫瘤分期為Ⅰ～Ⅱ期、無(wú)淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的胃癌患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）。（表1）

表1 不同臨床特征胃癌患者的胃癌組織中KCNC3 表達(dá)情況的比較

2.2 腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者預(yù)后影響因素的單因素分析

單因素分析結(jié)果顯示，分化程度、淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況、KCNC3 表達(dá)均可能是腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者預(yù)后的影響因素（P﹤0.01）。（表2）

表2 腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者預(yù)后影響因素的單因素分析

2.3 腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者預(yù)后影響因素的多因素分析

將腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者是否死亡作為因變量，分化程度、淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況和KCNC3 表達(dá)情況作為自變量進(jìn)行多因素分析，結(jié)果顯示，分化程度為低分化、有淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、KCNC3 表達(dá)陽(yáng)性均是腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P﹤0.01）。（表3）

表3 腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者預(yù)后影響因素的多因素分析

3 討論

胃癌是常見(jiàn)的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病率與病死率分別居全球第5 位與第3 位[9]。中國(guó)胃癌發(fā)病率與病死率僅次于肺癌，居第2位，是造成嚴(yán)重社會(huì)負(fù)擔(dān)的重要因素，多數(shù)患者因中晚期胃癌就診[10-11]。胃癌主要類型為胃腺癌，是指源于胃黏膜上皮細(xì)胞的惡性腫瘤[12]。早期胃癌無(wú)明顯癥狀，患者會(huì)隨著病情進(jìn)展逐漸出現(xiàn)消化不良等胃部不適癥狀[13]。晚期胃癌主要表現(xiàn)為疼痛、嘔吐，甚至嘔血、黑便，也可能會(huì)出現(xiàn)腹部腫塊、上腹壓痛、脾腫大和黃疸，以及遠(yuǎn)處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、盆腔轉(zhuǎn)移等體征，患者具有臨床治療效果差、生存期短、易復(fù)發(fā)、易轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)[14-16]。腹腔鏡胃癌根治術(shù)相比傳統(tǒng)開(kāi)腹手術(shù)，具有創(chuàng)傷小、術(shù)后恢復(fù)快等優(yōu)勢(shì)[17]。盡管近年來(lái)晚期胃癌手術(shù)及放化療方案不斷發(fā)展，但是患者5年生存率仍然較低[18]。因此針對(duì)胃癌尋找新的預(yù)后預(yù)測(cè)指標(biāo)是目前臨床研究亟待解決的問(wèn)題。

KCNC3 最直接的下游信號(hào)通路可能是電壓門控鉀離子通道，該通道的開(kāi)合受控于細(xì)胞膜內(nèi)外的電位改變，在多種惡性腫瘤細(xì)胞中有不同程度的失調(diào)，例如在頭頸部癌、乳腺癌、腸癌中表達(dá)異常，且與患者臨床特征和腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為有關(guān)[19-20]?；蚣患治觯╣ene set enrichment analysis，GSEA）顯示，KCNC3 可能通過(guò)多個(gè)信號(hào)通路促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展，包括Notch 信號(hào)通路、氧化磷酸化通路、γ氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)或電子運(yùn)輸鏈通路，不同程度地促進(jìn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[21-22]。同時(shí)，KCNC3 參與細(xì)胞增殖，影響細(xì)胞周期變化、細(xì)胞凋亡和腫瘤進(jìn)展，可作為腫瘤診療的標(biāo)志物以及腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移的潛在靶標(biāo)[23-24]。本研究中，胃癌組織中KCNC3的表達(dá)與腫瘤分期、淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況有關(guān)，提示KCNC3 與胃癌臨床特征有關(guān)，參與胃癌的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程。本研究結(jié)果顯示，分化程度為低分化、有淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、KCNC3 陽(yáng)性表達(dá)均是腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示KCNC3 可作為預(yù)測(cè)腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者預(yù)后的生物標(biāo)志物。

綜上所述，胃癌組織中KCNC3 表達(dá)與臨床特征有關(guān)，KCNC3 表達(dá)可作為預(yù)測(cè)腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者預(yù)后的生物標(biāo)志物。但本研究納入的樣本量較小，未進(jìn)行深入研究，KCNC3 是否能成為胃癌預(yù)后的生物標(biāo)志物，還需要在今后的研究中擴(kuò)大樣本量以及研究范圍，完善研究結(jié)果，確保其準(zhǔn)確性，為新的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用于臨床提供參考依據(jù)。