葉梅芳,魏怡林,劉媛媛,江露娟,蒙雪雁,丘琴,2,甄漢深,黃鳳音,甄丹丹

(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué),南寧 530200;2.廣西優(yōu)勢(shì)中成藥與民族藥開(kāi)發(fā)工程技術(shù)研究中心,南寧 530200)

凹葉景天(SedumemarginatumMigo.)為景天科景天屬多年生肉質(zhì)草本植物,別名馬牙半支、石板菜、打不死等。其始載于《本草綱目拾遺》[1],在《全國(guó)中草藥匯編》《湖南藥物志》《中國(guó)民族藥志要》《中華本草》《中藥大辭典》《四川中藥志》等也有記載。全草均可藥用,味苦、酸,性涼,歸心、肝經(jīng),具有清熱解毒、止血和平肝的作用,可用于治蛇咬傷、黃疸、跌打損傷等病癥?，F(xiàn)代研究表明凹葉景天具有抗腫瘤[2-3]、抗氧化[4]、鎮(zhèn)靜催眠[5]、止血止痛[6]等藥理作用。目前,對(duì)凹葉景天的性狀鑒別、薄層鑒別[7-8]、紫外光譜鑒別[9-10]、化學(xué)成分預(yù)實(shí)驗(yàn)[11]以及槲皮素、山奈素、異鼠李素、甘草苷等成分的含量測(cè)定[12-15]已有報(bào)道,但其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚未完善。中藥指紋圖譜作為中藥應(yīng)用較為廣泛的質(zhì)量評(píng)價(jià)模式之一,因其能夠體現(xiàn)中藥成分的整體性,所以在評(píng)價(jià)中藥材的質(zhì)量時(shí)應(yīng)用廣泛[16-17]。本課題組對(duì)凹葉景天乙酸乙酯部位進(jìn)行了指紋圖譜與多成分含量測(cè)定研究[18],關(guān)于凹葉景天正丁醇部位的指紋圖譜和含量測(cè)定研究筆者尚未見(jiàn)報(bào)道。劉昌孝等[19]首次提出中藥質(zhì)量標(biāo)志物(Q-Marker)概念,Q-marker是與中藥的功能屬性密切相關(guān),有明確的化學(xué)結(jié)構(gòu),是可以進(jìn)行定性鑒別和定量測(cè)定的物質(zhì)。沒(méi)食子酸具有抗腫瘤[20]、抗炎[21]、抗氧化[22]作用;原兒茶酸具有抗氧化[23]、抗菌[24]、保護(hù)急性肺損傷[25]、保護(hù)心肌缺血-再灌注損傷[26]等藥理作用;異槲皮苷具有抗氧化作用[27]。以上3種成分均與凹葉景天的功效和藥理作用相關(guān),將其作為含量測(cè)定指標(biāo)成分科學(xué)且合理,與中藥Q-marker的原則相符。為了科學(xué)評(píng)價(jià)凹葉景天,筆者在本研究采用指紋圖譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué),建立凹葉景天正丁醇部位的高效液相色譜(HPLC)指紋圖譜,并進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)、聚類(lèi)分析、主成分分析研究,對(duì)凹葉景天正丁醇部位中的沒(méi)食子酸、原兒茶酸和異槲皮苷3個(gè)成分進(jìn)行含量測(cè)定。報(bào)道如下。

1 材料與儀器

1.1材料 對(duì)照品:沒(méi)食子酸(中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào):110831-201204,含量≥99%);原兒茶酸(中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào):110809-200604,含量≥99%);異槲皮苷(成都曼斯特生物科技有限公司,批號(hào):MUST-18051005,含量≥98%)。正丁醇(天津市大茂化學(xué)試劑廠(chǎng),批號(hào):20180401,AR);95%乙醇 (成都市科龍化工試劑廠(chǎng),批號(hào):20170901,AR);甲醇(成都市科隆化學(xué)科技有限公司,批號(hào):2018082702,AR);色譜乙腈 (美國(guó)TEDIA公司,批號(hào):18035148);色譜甲醇 (美國(guó)TEDIA公司,批號(hào):17095090);磷酸為分析純;超純水。10個(gè)不同產(chǎn)地凹葉景天主要來(lái)源于廣西壯族自治區(qū)、浙江省和湖北省,經(jīng)廣西一心醫(yī)藥有限責(zé)任公司馬利飛副主任中藥師鑒定為景天科景天屬植物凹葉景天(SedumemarginatumMigo.)的地上部分。藥材來(lái)源見(jiàn)表1。

表1 10個(gè)產(chǎn)地凹葉景天藥材來(lái)源

1.2儀器 KQ500DE超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);HWS-26電熱恒溫水浴鍋(上海齊欣科學(xué)儀器有限公司);DHG-9203A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海齊欣科學(xué)儀器有限公司);Waters e2695高效液相色譜儀,W2998PDA檢測(cè)器(美國(guó)Waters公司);Waters e2695型高效液相色譜儀,2489UV檢測(cè)器(美國(guó)Waters公司);Simplicity超純水系統(tǒng)(密理博中國(guó)有限公司);TGL-16G高速臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng));SQP電子天平[賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司,感量:0.1 mg]。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件 色譜柱:Thermo ODS-2 HYPERSIL色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流動(dòng)相為乙腈(D)-0.12%磷酸溶液(B);梯度洗脫(0～10 min,3%→4%D;10～22 min,4%→6%D;22～55 min,6%→12%D;55～95 min,12%→13.5%D;95～125 min,13.5%→22%D;125～130 min,22%→3%D);流速:0.8 mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng):260 nm;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣量:5 μL。

2.2樣品的制備 取凹葉景天藥材粗粉150 g,用10倍量的70%乙醇浸泡30 min,回流提取3次,分別回流提取2,1.5,1 h,紗布過(guò)濾,合并提取液,于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮,得到70%乙醇提取物濃縮液,再用正丁醇分別萃取6或7次,減壓濃縮后置于水浴鍋(<60 ℃)揮成浸膏,減壓干燥,制得正丁醇部位干浸膏樣品,置于干燥器中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.3溶液的制備

2.3.1對(duì)照品溶液的制備 稱(chēng)取沒(méi)食子酸、原兒茶酸和異槲皮苷對(duì)照品適量,精密稱(chēng)定,加甲醇溶解并定容,分別制成單一的對(duì)照品儲(chǔ)備液;精密吸取上述3個(gè)對(duì)照品儲(chǔ)備液制成濃度分別為沒(méi)食子酸0.092 0 mg·mL-1、原兒茶酸0.018 5 mg·mL-1、異槲皮苷0.275 8 mg·mL-1的混合對(duì)照品溶液。

2.3.2供試品溶液的制備 取凹葉景天藥材正丁醇部位樣品0.1 g,精密稱(chēng)定,置于2 mL離心管中,加甲醇超聲溶解,分別轉(zhuǎn)移到2 mL量瓶中并定容,轉(zhuǎn)移至2 mL離心管,于13 000 r·min-1下離心10 min(r=4 cm),經(jīng)微孔濾膜(孔徑0.45 μm)濾過(guò),即得。

2.4指紋圖譜的建立

2.4.1精密度實(shí)驗(yàn) 取S1產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品0.1 g,精密稱(chēng)定,按“2.3”項(xiàng)方法制備供試品溶液,按“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣于高效液相色譜儀,連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6次,以12號(hào)峰異槲皮苷為參照峰(S),計(jì)算得到各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD值為0.02%～0.35%,相對(duì)峰面積的RSD值為0.30%～1.81%,表明儀器的精密度良好。

2.4.2重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 稱(chēng)取S1產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品共6份,每份0.1 g,精密稱(chēng)定,按“2.3”項(xiàng)方法制備供試品溶液,按“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣,以12號(hào)峰異槲皮苷為參照峰,計(jì)算得到各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD值為0.01%～0.61%,相對(duì)峰面積的RSD值為0.10%～3.04%,表明該方法的重復(fù)性良好。

2.4.3穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取S1產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品0.1 g,精密稱(chēng)定,按“2.3”項(xiàng)方法制備供試品溶液,按“2.1”項(xiàng)色譜條件分別于0,2,4,9,20,22,24 h進(jìn)樣7次,以12號(hào)峰異槲皮苷為參照峰(S),計(jì)算得到各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD值為0.02%～0.28%,相對(duì)峰面積的RSD值為0.69%～2.90%,表明供試品溶液的穩(wěn)定性良好,實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。

2.4.4凹葉景天正丁醇部位指紋圖譜的建立及相似度評(píng)價(jià) 將S1～S10產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品,按“2.3”項(xiàng)方法制備供試品溶液,按“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣,得到10個(gè)不同產(chǎn)地樣品的HPLC指紋圖譜數(shù)據(jù)。將所得圖譜數(shù)據(jù)自動(dòng)積分后導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)2012.1版軟件” ,設(shè)S1為參照?qǐng)D譜,經(jīng)過(guò)多點(diǎn)校正,自動(dòng)匹配,采取Mark峰匹配色譜峰,以中位數(shù)法生成疊加圖和共有模式圖,共標(biāo)定18個(gè)峰,通過(guò)與對(duì)照品對(duì)比,指認(rèn)其中3個(gè)成分,分別是1號(hào)峰沒(méi)食子酸、2號(hào)峰原兒茶酸、12號(hào)峰異槲皮苷,結(jié)果見(jiàn)圖1、圖2。12號(hào)峰(異槲皮苷)分離度較好,保留時(shí)間適宜,可確定其為參照峰(S)。計(jì)算各共有峰相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積,結(jié)果見(jiàn)表2、表3。各共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD值為0.10%～0.53%,表明各產(chǎn)地間樣品共有峰出峰時(shí)間較穩(wěn)定,而相對(duì)峰面積的RSD值為35.08%～124.75%,說(shuō)明不同產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位指紋圖譜中的色譜峰之間的相對(duì)峰面積不同,各化學(xué)成分含量差異較大。相似度評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表4,各產(chǎn)地樣品的相似度在0.702～0.974,表明各產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品的質(zhì)量相對(duì)穩(wěn)定,其化學(xué)成分基本一致,各成分含量差異較大。其中浙江寧海(S1)、浙江麗水(S2)與湖北巴東縣(S10)產(chǎn)地相似度相對(duì)較低,而其他產(chǎn)地樣品相似度相對(duì)較高,均>0.837。

圖1 凹葉景天色譜峰圖

1.沒(méi)食子酸;2.原兒茶酸;12.異槲皮苷。

表2 10個(gè)產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品共有峰相對(duì)保留時(shí)間

表3 10個(gè)產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品共有峰相對(duì)峰面積

表4 10個(gè)產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位指紋相似度結(jié)果

2.5統(tǒng)計(jì)分析

2.5.1聚類(lèi)分析 運(yùn)用SPSS 21.0版統(tǒng)計(jì)軟件將10個(gè)不同產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位的樣品原始數(shù)據(jù),采用組間聯(lián)接聚類(lèi)方法,進(jìn)行SPSS聚類(lèi)分析,聚類(lèi)結(jié)果見(jiàn)圖3。當(dāng)判別距離為5時(shí),藥材聚為3類(lèi),S1、S2為一類(lèi),S6、S7為一類(lèi),剩余的S3、S4、S5、S8、S9、S10為一類(lèi)。聚類(lèi)分析發(fā)現(xiàn),10個(gè)不同產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品存在一定的差異,該差異可能與采收的季節(jié)、氣候、土壤等外界因素有關(guān)。

圖3 10個(gè)產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品聚類(lèi)分析圖

2.5.2主成分分析 將10個(gè)不同產(chǎn)地的凹葉景天正丁醇部位的18個(gè)共有峰的峰面積導(dǎo)入SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件,進(jìn)行主成分分析。計(jì)算特征值及貢獻(xiàn)率,結(jié)果見(jiàn)表5,以特征值>1為提取原則,特征值>1的主成分有4個(gè),方差貢獻(xiàn)率分別為54.449%,18.142%,11.002%,9.884%,累計(jì)的總方差貢獻(xiàn)率為93.447%,較全面地體現(xiàn)出凹葉景天正丁醇部位化學(xué)成分的基本特征。主成分分析得分圖見(jiàn)圖4,10個(gè)不同產(chǎn)地的凹葉景天正丁醇部位樣品分為3類(lèi),S1為一類(lèi),S2、S3、S4、S5、S6、S7為一類(lèi),S8、S9、S10為一類(lèi),其結(jié)果與聚類(lèi)分析結(jié)果存在差異。載荷矩陣結(jié)果見(jiàn)表6,主成分的貢獻(xiàn)大小取決于載荷的絕對(duì)值大小。由表6可知,峰3,5,11,12在主成分1有較高的載荷,峰2,12在主成分2有較高的載荷,峰8在主成分3有最高的載荷,峰7,14在主成分4有最高的載荷,說(shuō)明峰2,3,5,7,8,11,12,14對(duì)凹葉景天的質(zhì)量貢獻(xiàn)較大。峰2、峰12分別指認(rèn)出為原兒茶酸和異槲皮苷,提示可將其作為凹葉景天的質(zhì)量控制指標(biāo)。推測(cè)使凹葉景天質(zhì)量產(chǎn)生差異的不是單一的成分,可能是多個(gè)成分協(xié)同作用的結(jié)果。

圖4 10個(gè)產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品主成分分析得分圖

表5 凹葉景天正丁醇部位主成分分析的特征值與貢獻(xiàn)率結(jié)果

表6 凹葉景天正丁醇部位主成分分析成分旋轉(zhuǎn)矩陣

2.6樣品含量測(cè)定

2.6.1專(zhuān)屬性實(shí)驗(yàn) 為排除空白試劑干擾,以甲醇為供試品溶液,按“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣,結(jié)果表明甲醇溶劑對(duì)色譜峰的出峰情況沒(méi)有干擾。

2.6.2線(xiàn)性關(guān)系考察 稱(chēng)取沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷對(duì)照品適量,精密稱(chēng)定,制成濃度分別為沒(méi)食子酸1.061 mg·mL-1、原兒茶酸0.226 81 mg·mL-1、異槲皮苷0.342 81 mg·mL-1的混合對(duì)照溶液,用甲醇逐級(jí)稀釋成一系列不同濃度的混合對(duì)照品溶液,按“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣測(cè)定。以進(jìn)樣濃度(X)為橫坐標(biāo),峰面積(Y)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 凹葉景天中3個(gè)成分線(xiàn)性關(guān)系考察結(jié)果

2.6.3精密度實(shí)驗(yàn) 精密吸取同一混合對(duì)照品溶液,按“2.1”項(xiàng)色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次,依法測(cè)定沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷的色譜峰峰面積,計(jì)算得RSD分別為1.37%,1.41%,1.43%,表明儀器精密度良好。

2.6.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取S1產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品0.1 g,精密稱(chēng)定,按“2.3”項(xiàng)下的方法制備供試品溶液,按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件分別于供試品溶液制備后 0,2,4,9,20,22,24 h進(jìn)樣,依法測(cè)定各色譜峰峰面積,計(jì)算得沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷RSD分別為0.90%,2.49%,0.66%,表明供試品溶液穩(wěn)定性良好。

2.6.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 稱(chēng)取S1產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品共6份,每份0.1 g,精密稱(chēng)定,按“2.3”項(xiàng)下的方法制備供試品溶液,以“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定,依法測(cè)定各色譜峰峰面積,計(jì)算含量,計(jì)算得沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷的RSD值分別為1.97%,1.82%,2.01%,表明該方法的重復(fù)性良好。

2.6.6沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷加樣回收實(shí)驗(yàn) 取已知含量的S1產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品共6份,每份0.05 g,精密稱(chēng)定,按“2.3”項(xiàng)方法制備對(duì)照品溶液及供試品溶液,每份加入適量混合對(duì)照品溶液,以“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定,計(jì)算得平均回收率分別為97.43%,97.38%,100.25%,RSD分別為3.02%,1.38%,2.59%。

2.6.7沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷樣品含量測(cè)定 取10個(gè)不同產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品0.1 g,按“2.3”項(xiàng)方法制備對(duì)照品溶液及供試品溶液,按“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣,依法測(cè)定各樣品峰面積,根據(jù)外標(biāo)法計(jì)算10個(gè)不同產(chǎn)地中沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷的含量,結(jié)果見(jiàn)表8。

表8 10個(gè)不同產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品中3種成分的含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1指紋圖譜結(jié)果分析 本研究采用HPLC法建立10批凹葉景天正丁醇部位的指紋圖譜,標(biāo)定18個(gè)共有峰,指認(rèn)其中3個(gè)成分,分別為沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷。除了浙江寧海(S1)、浙江麗水(S2)與湖北巴東縣(S10)產(chǎn)地外,其他產(chǎn)地樣品相似度均>0.837,表明樣品中的化學(xué)成分一致性較好。聚類(lèi)分析與主成分分析都將樣品分為3類(lèi),兩者的分類(lèi)結(jié)果卻不盡相同,有差異,這可能是由于主成分分析所提取出的主成分還沒(méi)能完全反映藥材的全部信息有關(guān)[28-29]。同時(shí),主成分分析載荷圖提示特征性成分沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷在區(qū)分凹葉景天正丁醇部位指紋圖譜中占有重要地位。沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷幾個(gè)成分都具有一定藥理活性,且其藥理活性與凹葉景天的功效相關(guān),為進(jìn)一步研究凹葉景天藥材中化學(xué)成分與藥效的相關(guān)性以及藥材資源開(kāi)發(fā)和質(zhì)量控制提供研究基礎(chǔ)。凹葉景天藥材分布于全國(guó)大部分地區(qū),本研究由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間限制等因素影響,未能采集和購(gòu)買(mǎi)到更多其他省份和產(chǎn)地的凹葉景天藥材,在今后的研究中可增加更多全國(guó)其他地區(qū)的藥材進(jìn)行研究,增加凹葉景天質(zhì)量控制與評(píng)價(jià)的可靠性,確保其建立指紋圖譜的廣泛性,使研究結(jié)果更具有代表性。

3.2含量測(cè)定結(jié)果分析 本研究所測(cè)得10個(gè)不同產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品中的3種成分的含量存在一定的差異,且10個(gè)不同產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位樣品中沒(méi)食子酸、原兒茶酸、異槲皮苷含量的高低順序大體上呈現(xiàn)出:異槲皮苷>沒(méi)食子酸>原兒茶酸,且3種成分中原兒茶酸、異槲皮苷含量最高產(chǎn)地為浙江寧海,沒(méi)食子酸含量最高的產(chǎn)地為廣西隆安縣。廣西龍勝產(chǎn)地沒(méi)食子酸含量最低,為0.275 4 mg·mL-1。湖北巴東縣產(chǎn)地的原兒茶酸含量最低,為0.0320 mg·mL-1。廣西武鳴產(chǎn)地的異槲皮苷含量最低,為0.647 7 mg·mL-1。

中藥指紋圖譜具有整體性和模糊性?xún)纱筇卣?中藥材組成成分復(fù)雜,具有多樣性和可變性,且成分間相互作用具有難以預(yù)測(cè)性。凹葉景天正丁醇部位指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)是對(duì)不同產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位質(zhì)量整體性和一致性的評(píng)價(jià),相似度結(jié)果體現(xiàn)的是凹葉景天藥材正丁醇部位各方面的平均水平,相似度低說(shuō)明該產(chǎn)地的凹葉景天與其他產(chǎn)地的凹葉景天存在較大差異,但差異的產(chǎn)生因素不一定是含量的差異,可能是多方面的影響。如本實(shí)驗(yàn)相似度評(píng)價(jià)結(jié)果與含量測(cè)定評(píng)價(jià)結(jié)果中顯示S1產(chǎn)地相似度低,但指標(biāo)成分含量高。同時(shí)凹葉景天含量存在差異也受多種因素影響,生境因子(經(jīng)緯度和海拔)、生長(zhǎng)性狀等因素與指標(biāo)成分含量積累關(guān)系密切[30],產(chǎn)地、氣候條件、采收時(shí)間和季節(jié)等各種因素影響,也會(huì)造成不同產(chǎn)地間藥材含量差異大。

綜上所述,合適的生境因子(經(jīng)緯度和海拔)及生長(zhǎng)性狀、合適的產(chǎn)地、采收時(shí)間和氣候條件等對(duì)獲得較高質(zhì)量的藥材有重要意義。本研究中不同產(chǎn)地凹葉景天正丁醇部位質(zhì)量差異大,說(shuō)明了對(duì)凹葉景天藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法不能從某一個(gè)指標(biāo)或幾個(gè)指標(biāo)對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制,且凹葉景天用藥多以整體入藥,為保證其用藥療效及能整體表征凹葉景天的成分和質(zhì)量差異,在今后的研究中應(yīng)尋找更多遵循中藥質(zhì)量標(biāo)志物原則的指標(biāo)成分進(jìn)行同時(shí)測(cè)定,提高凹葉景天質(zhì)量的一致性與可控性。

本研究以10個(gè)不同產(chǎn)地的凹葉景天為研究對(duì)象,通過(guò)HPLC法建立凹葉景天正丁醇部位的指紋圖譜模式并結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)對(duì)凹葉景天進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)分析,建立HPLC法同時(shí)測(cè)定凹葉景天正丁醇部位中沒(méi)食子酸、原兒茶酸和異槲皮苷3個(gè)成分的含量。該研究方法操作簡(jiǎn)便,結(jié)果可靠,精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性較好,為凹葉景天活性成分的研究奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),為進(jìn)一步研究該藥材成分與藥效的相關(guān)性,以及為凹葉景天的開(kāi)發(fā)利用和質(zhì)量評(píng)價(jià)奠定基礎(chǔ)。