劉易偉，陳萍，卿云光，耿寧，黃興

摘 要：利用紫外可見光分光光度計(jì)對(duì)不同貯藏溫度下刺梨原汁的總黃酮含量進(jìn)行測定和分析。結(jié)果表明，刺梨原汁在冷凍條件下總黃酮含量相對(duì)穩(wěn)定，隨著貯藏溫度的升高，總黃酮含量降低速率逐漸增加。家用冰箱的儲(chǔ)存溫度通常為4 ℃，在此溫度下，總黃酮含量比較穩(wěn)定，可以作為日常保存溫度，對(duì)刺梨原汁總黃酮的營養(yǎng)價(jià)值影響較小。

關(guān)鍵詞：刺梨；總黃酮；貯藏溫度

The Effects of Total Flavonodis in Rosa roxburghii Juice in Different Storage Temperature

LIU Yiwei， CHEN Ping， QING Yunguang， GENG Ning， HUANG Xing

（Qiannan Inspection and Testing Institute， Duyun 558000， China）

Abstract： The content of total flavonoids in Rosa roxburghii juice was determined and analyzed by spectrophotometer at different storage temperatures. The results showed that the content of total flavonoids in Rosa roxburghii juice was relatively stable under freezing condition， and the decreasing rate of total flavonoids content increased in higher storage temperature. The storage temperature by domestic refrigerator usually use in 4 ℃， under this temperature， which the content of total flavonoids is relatively stable. So the temperature can be used as the daily storage temperature， which has little influence on the nutritional value of total flavonoids in Rosa roxburghii juice.

Keywords： Rosa roxburghii; total flavonoids; storage temperature

刺梨（Rosa roxburghii）屬薔薇科，又名山王果、刺玫果、刺菠蘿、文先果等。刺梨味酸甜、肉質(zhì)肥厚，果實(shí)富含黃酮類化合物、多糖、多種維生素、胡蘿卜素、多種氨基酸和礦物質(zhì)元素等[1-4]。刺梨具有抗氧化、抗衰老；抗腫瘤、抗癌；解毒、護(hù)肝、抑菌、降血糖作用[5-7]。刺梨原汁是用新鮮刺梨果實(shí)壓榨而得的漿汁，刺梨原汁能促進(jìn)胃液分泌，對(duì)平滑肌收縮運(yùn)動(dòng)具有明顯的抑制作用，對(duì)免疫功能有增強(qiáng)作用[8]。有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，刺梨原汁對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化有降低作用[9]?，F(xiàn)如今，人們對(duì)食品的要求越來越高，更加考慮食品的營養(yǎng)價(jià)值。刺梨因其豐富的營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值，在全國范圍內(nèi)成為研究的焦點(diǎn)，更是貴州省重點(diǎn)發(fā)展的農(nóng)產(chǎn)品，榨汁不僅濃縮了刺梨的營養(yǎng)，豐富了口感，還能作為刺梨產(chǎn)品深加工的原材料，同時(shí)能避免由于刺梨鮮果的保存不易帶來的營養(yǎng)流失和浪費(fèi)。

黃酮類化合物是刺梨原汁中一種重要的營養(yǎng)物質(zhì)，常用于測定總黃酮的方法有分光光度法[10-12]、液相色譜法[13-14]、熒光法[15]等。測定總黃酮的方法常用分光光度法和液相色譜法，液相色譜法主要應(yīng)用于單一黃酮化合物的測定[16]。分光光度法操作簡單，測定成本較低，可直接吸取樣液進(jìn)行試驗(yàn)，大大簡化了提取步驟，節(jié)省了樣品處理的時(shí)間，平均回收率達(dá)到100.3%[17]。刺梨原汁中總黃酮的含量相對(duì)較高，超過了茶葉[10]、洋蔥[18-19]等，刺梨原汁為刺梨鮮果榨汁所得，總黃酮含量高于刺梨鮮果，但活性物質(zhì)易受溫度影響，因此采用分光光度計(jì)檢測不同溫度下刺梨原汁的總黃酮含量變化，研究溫度以及貯藏時(shí)間對(duì)刺梨原汁的總黃酮含量的具體影響，為今后研究刺梨原汁及其他刺梨產(chǎn)品的總黃酮檢測提供理論基礎(chǔ)，也為刺梨產(chǎn)品后續(xù)的開發(fā)研究提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

刺梨原汁（包裝方式：棕色玻璃瓶灌裝），龍里產(chǎn)區(qū)（樣品1）；刺梨原汁，貴定產(chǎn)區(qū)（樣品2）；刺梨原汁，獨(dú)山產(chǎn)區(qū)（樣品3）；甲醇，分析純；乙醇，分析純；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品（含量為92.4%）購于中國食品藥品檢定研究院。

TU-1901紫外可見分風(fēng)光光度計(jì)，北京普析通用儀器有限公司；BS224S電子天平，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；SC-66HL冰箱，海爾；SPX-250BⅢ恒溫培養(yǎng)箱，天津市泰斯特儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理

將樣品分別放置于-24 ℃、-14 ℃、-7 ℃、4 ℃、20 ℃、30 ℃下儲(chǔ)存，放置前測定一次，之后每月進(jìn)行一次總黃酮的測定，共測定7次。檢測方法參考耿寧[17]、T/GZSX 081—2021[20]中的測定方法，以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液為對(duì)照，甲醇溶液調(diào)零，1 cm比色皿，360 nm處進(jìn)行吸光度的測定。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

精確稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品108.4 mg于100 mL容量瓶內(nèi)，用甲醇定容至刻度，得到蘆丁儲(chǔ)備液1.002 mg·mL-1的蘆丁儲(chǔ)備溶液，分別稀釋至1.00 μg·mL-1、2.00 μg·mL-1、3.00 μg·mL-1、4.00 μg·mL-1、5.00 μg·mL-1和6.00 μg·mL-1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液，以甲醇溶液為零點(diǎn)。

1.2.3 總黃酮的測定

稱取1 g（精確至0.01 g）的樣品（若為冷凍樣品需提前解凍），用乙醇定容至25 mL，搖勻后，超聲提取20 min，室溫靜置30 min，吸取1 mL上清液于25 mL比色管中，用甲醇定容后，用進(jìn)行分光光度計(jì)測定。每個(gè)樣品做3個(gè)平行樣，求平均值。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

將配制好的不同濃度的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，并制得標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，見表1。

2.2 刺梨原汁中總黃酮含量測定結(jié)果

應(yīng)用分光光度法檢測，并對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線，按2.1所述公式計(jì)算可得到各個(gè)月不同溫度下刺梨原汁總黃酮的含量，結(jié)果見圖1～3。

由圖1～圖3可看出，在貯藏過程中總黃酮的變化趨勢一致，隨著貯藏時(shí)間的增加，總黃酮含量都呈下降趨勢，且貯藏溫度不同，下降速度也不同。隨著貯藏溫度的升高，總黃酮含量降低程度更加明顯，可以看出貯藏溫度對(duì)刺梨原汁的總黃酮存在一定的影響。以較低的溫度貯藏，能夠更好地保持刺梨原汁中的總黃酮的含量。以樣品1為例，-24 ℃下貯藏時(shí)間為6個(gè)月時(shí)的總黃酮含量與4 ℃下貯藏時(shí)間為4個(gè)月時(shí)的含量基本接近；以樣品2為例，4 ℃貯藏6個(gè)月和20 ℃、30 ℃貯藏3個(gè)月時(shí)的總黃酮含量相近，說明在低溫的條件下，總黃酮的降解速率更低。貯藏溫度在-24 ℃、-14 ℃和-7 ℃時(shí)，總黃酮含量的降低速率相對(duì)緩慢，4 ℃居中，20 ℃和30 ℃條件下，總黃酮含量下降較快。隨著貯藏時(shí)間的增加，總黃酮含量逐漸降低，特別是在較高溫度的情況下，總黃酮含量降低更加明顯。在半年的儲(chǔ)存過程中，總黃酮都有一定程度的降解，貯藏溫度越低，總黃酮含量相對(duì)越穩(wěn)定，更有利于刺梨原汁中黃酮類化合物的活性保持。

3 結(jié)論

刺梨原汁中含有豐富的黃酮類化合物，黃酮類化合物具有良好的清除自由基、抗氧化、抗衰老作用[21]，總黃酮含量受溫度影響較大，在較高貯藏溫度下，總黃酮含量降低較快，只有在較低的溫度條件下，總黃酮的含量下降較為緩慢。家庭冰箱常用4 ℃保存食物，4 ℃下刺梨原汁的總黃酮含量在短時(shí)間內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定，可以作為家庭保存刺梨原汁的推薦溫度，而企業(yè)在大量儲(chǔ)存刺梨原汁時(shí)，可以冷凍保存，且儲(chǔ)存時(shí)間不宜過長。本實(shí)驗(yàn)采用分光光度法對(duì)刺梨原汁中總黃酮含量進(jìn)行測定，簡化了操作步驟，減少耗材的使用，無需大型檢驗(yàn)設(shè)備即可完成檢測，具有更高的可行性，更適合微小企業(yè)進(jìn)行品質(zhì)分析。刺梨原汁因其豐富的營養(yǎng)價(jià)值，正越來越受到人們的關(guān)注，通過研究其總黃酮含量在不同溫度和貯藏條件下的變化，為刺梨原汁的銷售和儲(chǔ)運(yùn)提供理論依據(jù)。

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