黃秋蘭,劉春強(qiáng),林斯燕

1.福建省南安市婦幼保健院檢驗(yàn)科,福建南安 362300;2.福建省泉州市婦幼保健院·兒童醫(yī)院產(chǎn)前診斷中心,福建泉州 362000;3.福建省泉州市第一醫(yī)院病理科,福建泉州 362002

產(chǎn)前篩查是檢出胎兒是否患21-三體綜合征、18-三體綜合征、開放性神經(jīng)管畸形(ONTD)等疾病風(fēng)險(xiǎn)的一種簡(jiǎn)便、可行、無(wú)創(chuàng)的方法。近年來(lái),隨著產(chǎn)前篩查的廣泛開展,需要接受產(chǎn)前診斷的孕婦越來(lái)越多,羊膜腔穿刺術(shù)已經(jīng)成為應(yīng)用時(shí)間最長(zhǎng)、最廣泛、最安全的侵入性產(chǎn)前診斷技術(shù)[1]。現(xiàn)對(duì)福建省南安市婦幼保健院、福建省泉州市婦幼保健院·兒童醫(yī)院產(chǎn)前診斷中心2019-2021年經(jīng)產(chǎn)前篩查為高風(fēng)險(xiǎn)且進(jìn)行羊膜腔穿刺術(shù)確診為胎兒染色體異常的患者進(jìn)行分析,并分析其篩查指標(biāo)中位數(shù)倍數(shù)(MOM)值的變化趨向,為臨床遺傳咨詢積累經(jīng)驗(yàn)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019-2021年于福建省南安市婦幼保健院、福建省泉州市婦幼保健院·兒童醫(yī)院產(chǎn)前診斷中心進(jìn)行中孕期產(chǎn)前篩查且結(jié)果為高風(fēng)險(xiǎn),自愿接受羊膜腔穿刺術(shù)的1 956例孕婦中確診為染色體異常的60例患者納入核型異常組,年齡19～34歲,單胎妊娠,孕周15～20+6周。健康人群組為同期在福建省南安市婦幼保健院、福建省泉州市婦幼保健院·兒童醫(yī)院產(chǎn)前診斷中心進(jìn)行中孕期產(chǎn)前篩查,后經(jīng)產(chǎn)后隨訪確定為分娩健康新生兒的孕婦1 956例,年齡19～34歲,單胎妊娠,孕周15～20+6周。

1.2方法 對(duì)孕15～20+6周的孕婦依據(jù)自愿原則,采用甲胎蛋白(AFP)、游離人絨毛膜促性腺激素(β-HCG)和游離雌三醇(uE3)三聯(lián)的方法進(jìn)行產(chǎn)前篩查。儀器采用美國(guó)Perkin Elmer公司1235-AUTODELFIA全自動(dòng)免疫熒光分析儀,試劑盒為該公司配套產(chǎn)品,檢測(cè)方法為時(shí)間分辨熒光免疫方法,并結(jié)合孕婦的孕周、體質(zhì)量、年齡、是否合并胰島素依賴性糖尿病等因素,通過(guò) lifecycle3.0風(fēng)險(xiǎn)分析統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算其 MOM值,評(píng)估胎兒罹患21-三體綜合征、18-三體綜合征、ONTD 3種先天缺陷疾病的風(fēng)險(xiǎn)值。21-三體綜合征和18-三體綜合征分別以1/270和1/350為高風(fēng)險(xiǎn)截?cái)嘀? ONTD以甲胎蛋白(AFP)MOM值≥2.5為高風(fēng)險(xiǎn)截?cái)嘀怠?/p>

高風(fēng)險(xiǎn)孕婦經(jīng)遺傳咨詢,根據(jù)產(chǎn)前診斷管理辦法建議進(jìn)行羊膜腔穿刺術(shù)做胎兒染色體核型分析。于孕18～23周在超聲引導(dǎo)下穿刺取羊水20 mL,經(jīng)離心后取細(xì)胞懸液接種至含培養(yǎng)基的2個(gè)培養(yǎng)瓶中,37 ℃、5%CO2中雙線培養(yǎng)8～10 d,收獲細(xì)胞,胰酶消化法制片,經(jīng)G顯帶染色,GLS120染色體自動(dòng)掃描系統(tǒng)進(jìn)行圖像采集,分析核型,并按照《人類細(xì)胞基因組學(xué)國(guó)際命名體系(ISCN2020)》進(jìn)行核型結(jié)果描述。

對(duì)核型異常組進(jìn)行分析,與健康人群組對(duì)比,查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料,研究其篩查指標(biāo)MOM值的變化趨勢(shì)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Excel 2007統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,中位數(shù)比較采用非參數(shù)檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1染色體異常分類 確診的60例胎兒染色體異常核型分別為21-三體綜合征21例(35.00%),18-三體綜合征7例(11.67%),性染色體異常12例(20.00%),染色體結(jié)構(gòu)異常20例(33.33%)。見表1。同時(shí)檢出38例多態(tài)性核型,其中9號(hào)染色體的臂間倒位20例。

表1 60例羊水診斷染色體異常核型詳情

2.2兩組AFP、游離β-HCG、uE3MOM值比較 與健康人群組比較,核型異常組AFP的MOM值降低,游離β-HCG的MOM值升高, uE3的MOM值降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組AFP、游離β-HCG、uE3 MOM值比較(M)

2.3特納綜合征MOM值 在性染色體數(shù)目異常患者中發(fā)現(xiàn)9例特納綜合征患者(包含嵌合體和合并其他結(jié)構(gòu)異常),檢出數(shù)僅次于21-三體綜合征。特納綜合征患者uE3MOM值為0.65,低于健康人群組的0.99,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 9例特納綜合征患者AFP、游離β-HCG、uE3 MOM值

3 討 論

血清學(xué)產(chǎn)前篩查因經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、無(wú)創(chuàng)等特點(diǎn)被廣大孕婦所接受,研究表明高風(fēng)險(xiǎn)胎兒染色體異常核型的檢出率為3.0%～5.7%[2-5]。在本研究中1 956例篩查高危孕婦檢出染色體異?；颊?0例,檢出率為3.07%,與以往報(bào)道一致[2-5]。其中染色體數(shù)目異常占66.67%(40/60),包括21-三體綜合征21例,18-三體綜合征7例,性染色體異常12例;染色體結(jié)構(gòu)異常占33.33%(20/60),包括染色體易位、倒位、缺失等。可見孕婦血清學(xué)產(chǎn)前篩查高風(fēng)險(xiǎn)不僅提示胎兒為 21-三體綜合征、18-三體綜合征等染色體數(shù)目異常,也提示胎兒可能存在其他染色體異常[6]。

本研究發(fā)現(xiàn),核型異常組游離β-HCG MOM值較健康人群組明顯升高,達(dá)3.68;uE3MOM值明顯降低,為0.65;而AFP MOM值略有降低,幅度較小。游離β-HCG、uE3、AFP由胎兒本身或胎盤組織合成,經(jīng)胎盤屏障進(jìn)入孕婦外周血,其波動(dòng)可間接反映胎兒生長(zhǎng)發(fā)育和胎盤的功能狀態(tài)。β-HCG是由胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞合成和分泌的一種糖蛋白,其水平升高可導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局,可能的病理、生理基礎(chǔ)是某些病理因素導(dǎo)致胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞呈低氧環(huán)境,使滋養(yǎng)細(xì)胞大量反應(yīng)性增生,孕婦血清中人絨毛膜促性腺激素(HCG)水平升高。CUCKLE[7]總結(jié)了850例21-三體綜合征妊娠14周后血清HCG平均值為2.02倍MOM值。本研究發(fā)現(xiàn)游離β-HCG MOM值在3項(xiàng)指標(biāo)中升高幅度最明顯,是健康人群組的3倍,臨床上對(duì)于有該項(xiàng)指標(biāo)異常升高的孕婦應(yīng)加強(qiáng)孕期監(jiān)測(cè)。uE3是胎盤產(chǎn)生的一種雌激素,在孕婦外周血中隨孕周增加而逐漸升高。孕期血清uE3水平低與胎兒染色體異常有關(guān),還與不良妊娠結(jié)局相關(guān),尤其是其水平極低的時(shí)候[8]。本研究發(fā)現(xiàn)核型異常組uE3的MOM值明顯低于健康人群組。血清AFP水平在染色體異常胎兒母體中會(huì)降低,最早由MERKATZ等[9]于1984年提出。單獨(dú)檢測(cè)AFP對(duì)于染色體異常的篩查效果并不理想[10],結(jié)合孕齡對(duì)21-三體綜合征的檢出率只有36%(假陽(yáng)性率5%)[11],但其對(duì)ONTD是一項(xiàng)很好的篩查指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)染色體異常組AFP的MOM值為健康人群組的0.90倍,變化幅度不及游離β-HCG和uE3,在臨床工作中更應(yīng)關(guān)注其在ONTD中的篩查作用。

本研究篩查出特納綜合征9例,占總檢出異常的15.00%(9/60),僅次于21-三體綜合征。對(duì)特納綜合征患者的MOM值進(jìn)行分析,未發(fā)現(xiàn)AFP和游離β-HCG在該疾病中的變化規(guī)律,但uE3的MOM值明顯低于健康人群組。RYALL等[12]研究認(rèn)為,Turner 綜合征中的非整倍體血清生化模式有可能降低AFP和uE3,并升高游離β-HCG水平,從而改變21-三體綜合征篩查的風(fēng)險(xiǎn)值,增加21-三體綜合征篩查的風(fēng)險(xiǎn)。據(jù)此推測(cè)篩查高風(fēng)險(xiǎn)對(duì)特納綜合征有指示作用,但目前未找到相關(guān)文獻(xiàn)解釋其具體機(jī)制。

在本研究中,篩查高風(fēng)險(xiǎn)者檢出20例染色體結(jié)構(gòu)異常。關(guān)于染色體結(jié)構(gòu)異常為什么會(huì)導(dǎo)致血清篩查高風(fēng)險(xiǎn)目前尚無(wú)研究定論,戴美珍等[13]和劉彥慧等[14]對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)與其他核型異常的關(guān)系進(jìn)行了研究報(bào)道,因結(jié)構(gòu)異常核型有遺傳效應(yīng),對(duì)于胎兒檢出結(jié)構(gòu)異常時(shí),建議親代也進(jìn)行核型分析,其結(jié)果有助于確診。

綜上所述,對(duì)于中孕期產(chǎn)前篩查,當(dāng)出現(xiàn)游離β-HCG升高,uE3降低,AFP降低時(shí)應(yīng)注意染色體異常風(fēng)險(xiǎn),尤其是對(duì)于游離β-HCG異常升高和uE3降低明顯的孕婦,應(yīng)加強(qiáng)孕期監(jiān)測(cè);篩查高風(fēng)險(xiǎn)不僅可檢出目標(biāo)疾病21-三體綜合征和18-三體綜合征,對(duì)其他染色體異常也有指示作用,尤其是對(duì)于特納綜合征。