胡 佳，戴 丹，彭新紅，孫 鵬，陳緒濤，王 振，熊澤亞，劉穎聰，魏云輝**

（1.江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)應(yīng)用微生物研究所，江西 南昌 330200；2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，江西 南昌 330045）

靈芝（Ganodermaspp.）在我國(guó)民間有仙草的美稱，是歷史悠久的著名食（藥）兼用真菌。其含有多糖、萜類物質(zhì)等多種活性成分，具有抗氧化、抗癌、免疫調(diào)節(jié)、降血糖等功能，藥用價(jià)值非常高。靈芝的開(kāi)發(fā)利用早已成為備受關(guān)注的課題[1-4]。

基于形態(tài)學(xué)研究，對(duì)食用菌的農(nóng)藝性狀進(jìn)行評(píng)價(jià)具有簡(jiǎn)單、快速等優(yōu)點(diǎn)，在品種鑒定、栽培條件篩選等試驗(yàn)中被廣泛使用。蘭玉菲等[5]基于農(nóng)藝性狀對(duì)29 個(gè)靈芝屬（Ganoderma）菌株進(jìn)行了遺傳多樣性和聚類分析。李學(xué)龍等[6]對(duì)國(guó)內(nèi)8 個(gè)主栽靈芝菌株開(kāi)展了農(nóng)藝性狀評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)在相同栽培條件下，不同菌株子實(shí)體的農(nóng)藝性狀存在一定差異。金鑫等[7]對(duì)4 個(gè)靈芝菌株在不同栽培模式下的農(nóng)藝性狀進(jìn)行了比較研究，發(fā)現(xiàn)不同的靈芝品種適宜不同的栽培模式。

廣義的靈芝包括靈芝屬許多種類，如赤靈芝（Ganoderma lucidum）、紫靈芝（Ganoderma sinense）、四川靈芝（Ganoderma sichuanense）、松杉靈芝（Ganoderma tsugae）等[8]。為選育優(yōu)良靈芝品種，以赤靈芝、紫靈芝、樹(shù)靈芝（Ganoderma sessile）、南方靈芝（Ganoderma austral）等40個(gè)靈芝屬菌株為材料，開(kāi)展菌種培育和栽培出芝試驗(yàn)。觀察對(duì)比不同菌株的菌絲生長(zhǎng)形態(tài)，對(duì)其菌絲生長(zhǎng)速率進(jìn)行測(cè)定，對(duì)產(chǎn)量和農(nóng)藝性狀進(jìn)行了評(píng)價(jià)，為靈芝品種的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供了參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株

試驗(yàn)供試菌株包括采集的9 個(gè)野生靈芝屬菌株G01～G09 和收集的31 個(gè)國(guó)內(nèi)栽培靈芝菌株G10～G40，供試菌株基本信息見(jiàn)表1。

表1 供試菌株Tab.1 Tested strains

1.1.2 培養(yǎng)基

PDA 培養(yǎng)基：去皮馬鈴薯（煮汁）200 g·L-1、葡萄糖20 g·L-1、瓊脂粉20 g·L-1，pH 自然。

1.1.3 栽培料

栽培料配方：雜木屑78%、麥麩20%、石膏1%、白砂糖1%，含水量控制在60%～65%。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 菌絲生長(zhǎng)情況比較

從供試菌株母種斜面轉(zhuǎn)接一小塊菌塊至PDA平板上進(jìn)行活化。待菌絲長(zhǎng)滿平板后，使用直徑為0.5 cm 的打孔器取圓整的菌塊，轉(zhuǎn)接至新的PDA平板中央，置于25 °C 培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng)。待菌絲萌發(fā)后，采用“十”字交叉法測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速率，并記錄菌絲狀態(tài)。

1.2.2 代料栽培和管理

使用聚乙烯栽培袋（15 cm×55 cm×0.005 cm），栽培料裝袋后常壓蒸汽滅菌24 h，冷卻至室溫后于無(wú)菌室中接種。用打孔器在料袋表面均勻打3 個(gè)接種穴，接入菌種后套保水袋扎口。將菌袋移入培養(yǎng)室進(jìn)行培養(yǎng)，溫度控制在25～28 °C，相對(duì)濕度控制在60%～70%。待菌絲滿袋后移入大棚出芝，除去保水袋，溫度控制在25～30 °C，采用微噴方式補(bǔ)水，相對(duì)濕度控制在85%～90%。

1.2.3 子實(shí)體采收和農(nóng)藝性狀評(píng)價(jià)

當(dāng)靈芝子實(shí)體成熟后，進(jìn)行采收并測(cè)定產(chǎn)量。生物學(xué)效率為靈芝子實(shí)體鮮質(zhì)量與培養(yǎng)料干質(zhì)量的百分比。使用游標(biāo)卡尺測(cè)量子實(shí)體菌蓋的長(zhǎng)徑與短徑、菌蓋厚度、菌柄長(zhǎng)度、菌柄直徑等，觀察記錄菌蓋形狀、顏色等。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌絲特征

供試的40個(gè)靈芝屬菌株中，部分菌株的菌絲生長(zhǎng)形態(tài)見(jiàn)圖1。觀察統(tǒng)計(jì)得到的所有菌絲特征見(jiàn)表2（表中數(shù)值為3 組平均值±標(biāo)準(zhǔn)差），

圖1 部分靈芝屬菌株的菌落形態(tài)Fig.1 Colony morphology of some Ganoderma strains

表2 40個(gè)靈芝屬菌株菌絲特征Tab.2 Mycelial characteristic of 40 Ganoderma strains

由圖1、表2 可知，不同菌株菌絲生長(zhǎng)速率差距較大。菌株G23 菌絲的平均生長(zhǎng)速率最快，為3.11 cm·d-1；其次為菌株G06、G17、G15、G16，平均生長(zhǎng)速率為2.67～2.87 cm·d-1，菌絲萌發(fā)均較晚，但后期生長(zhǎng)較快。菌株G22 菌絲平均生長(zhǎng)速率最慢，為0.97 cm·d-1。40 個(gè)菌株菌絲體顏色均潔白，多數(shù)菌絲較濃密且均勻。

2.2 子實(shí)體產(chǎn)量和生物學(xué)效率

40 個(gè)菌株的子實(shí)體產(chǎn)量和生物學(xué)效率（表中數(shù)值為3 組平均值±標(biāo)準(zhǔn)差）統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表3。

表3 40個(gè)靈芝屬菌株產(chǎn)量和生物學(xué)效率Tab.3 Yield and biological efficiency of 40 Ganoderma strains

由表3 可知，G33 的產(chǎn)量最高，生物學(xué)效率為36.49%；其次為G32、G16 和G11，生物學(xué)效率在34.86%以上；G28 的產(chǎn)量最低，生物學(xué)效率僅為13.66%。在野生菌株中，G09 的產(chǎn)量最高，生物學(xué)效率為27.46%；G01 的產(chǎn)量最低，生物學(xué)效率僅為15.10%。

2.3 子實(shí)體農(nóng)藝性狀

40 個(gè)菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀（表中數(shù)值為3 組平均值±標(biāo)準(zhǔn)差）見(jiàn)表4，部分子實(shí)體形態(tài)見(jiàn)圖2。

圖2 部分靈芝屬菌株的子實(shí)體形態(tài)Fig.2 Fruit body morphology of some Ganoderma strains

表4 40個(gè)靈芝屬菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀Tab.4 Agronomic characters of fruit body of 40 Ganoderma strains

由表4 和圖2 可知，不同菌株子實(shí)體形態(tài)差異較大，且在不同種間差異明顯，紫芝、赤芝、樹(shù)舌亞屬之間子實(shí)體形態(tài)各有特點(diǎn)。栽培菌株中，菌蓋最大的是G31，最小的是G21；菌蓋厚度最大的是G28，最小的是G37；菌柄最長(zhǎng)的是G36，最短的是G28；菌柄直徑最大的是G13，最小的是G20。野生菌株中菌蓋最大的是G07，最小的是G04；菌蓋厚度最大的是G07，最小的是G02；菌柄最長(zhǎng)的是G09，最短的是G05；菌柄直徑最大的是G06，最小的是G01。不同菌株菌蓋顏色也有較大差異，主要有紫褐色、灰褐色、紅褐色、黃褐色、淺灰色等。菌蓋形狀主要有腎形和扇形，少數(shù)為近圓形。

3 結(jié)論與討論

以40個(gè)靈芝屬菌株為材料開(kāi)展了產(chǎn)量和農(nóng)藝性狀評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，40 個(gè)菌株菌絲生長(zhǎng)速率差異較大，野生菌株G06、G04、G03 和栽培菌株G23、G17、G15 菌絲生長(zhǎng)速率較快，菌絲密度、均勻度較理想。在栽培出芝試驗(yàn)中，結(jié)合產(chǎn)量和農(nóng)藝性狀兩方面進(jìn)行評(píng)價(jià)，野生赤芝G06 和G09 產(chǎn)量和商品性中等。目前對(duì)于觀賞用靈芝種質(zhì)資源的評(píng)價(jià)較少[9]。在本試驗(yàn)樣品中，G01 為野生紫芝，雖然產(chǎn)量不高，但是形態(tài)美觀，具有較高的觀賞價(jià)值，可作為觀賞用靈芝菌株。野生菌株G01、G06 和G09 均具有較大的馴化潛力。栽培菌株G33、G32、G11、G12、G30 的產(chǎn)量較高，商品性較好，可作為優(yōu)良品種進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用。

試驗(yàn)結(jié)果還表明，子實(shí)體產(chǎn)量、農(nóng)藝性狀與菌絲生長(zhǎng)速率并不完全正相關(guān)。有些菌株菌絲生長(zhǎng)較快，但產(chǎn)量和農(nóng)藝性狀未必表現(xiàn)優(yōu)異。因此，對(duì)靈芝種質(zhì)資源的評(píng)價(jià)應(yīng)從多方面系統(tǒng)開(kāi)展。在今后的研究中，可開(kāi)展分子水平的親緣關(guān)系評(píng)價(jià)、子實(shí)體和孢子粉的藥用成分評(píng)價(jià)，以完善靈芝種質(zhì)資源評(píng)價(jià)體系，為靈芝種質(zhì)資源開(kāi)發(fā)利用奠定基礎(chǔ)[10-12]。