曹紅利， 王浩乾， 何夢(mèng)迪， 岳川，羅理勇， 曾亮， 郝心愿

1. 西南大學(xué) 食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400715；2. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部茶樹(shù)生物學(xué)與資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，杭州 310008

中國(guó)茶文化歷史悠久, 茶的消費(fèi)量?jī)H次于純水, 與可可和咖啡并稱(chēng)為世界三大無(wú)酒精飲料[1-2]． 兒茶素、 咖啡堿和茶氨酸等是茶葉富含的特征性次生代謝產(chǎn)物, 是茶葉色、 香、 味等品質(zhì)形成和飲茶保健功效發(fā)揮的物質(zhì)基礎(chǔ)[3]． 茶樹(shù)次生代謝豐富, 目前已知的代謝物數(shù)量多達(dá)1 450種[4]; 對(duì)茶樹(shù)次生代謝物的深入研究有助于茶葉功能性成分的開(kāi)發(fā)和茶樹(shù)資源的多元化利用．

東莨菪素是香豆素類(lèi)化合物, 植物中主要以糖苷(東莨菪苷)的形式存在, 已知具有的藥理活性包括抗腫瘤、 防治高尿酸血癥、 降血壓、 降血脂、 解痙、 縮瞳和降低眼壓、 鎮(zhèn)痛等[5]． 目前已知東莨菪素在丁公藤、 枸杞、 桑樹(shù)、 華山參、 白鶴藤等傳統(tǒng)中藥植物中有較高的含量[6-11]． 其中, 丁公藤是東莨菪素的重要天然來(lái)源, 也是丁公藤發(fā)揮鎮(zhèn)痛、 抗炎、 祛痰、 平喘等藥理作用的主要生化成分[12-14]． 在煙草屬的植物葉片中, 東莨菪素和東莨菪苷還可以起到植保素的作用, 直接參與抵抗腐生性病原真菌的侵染[15]． 茶樹(shù)是包括香豆素類(lèi)化合物在內(nèi)的黃酮類(lèi)物質(zhì)積累豐富的代表物種, 但是截至目前有關(guān)茶樹(shù)中東莨菪素及其糖苷的含量和檢測(cè)方法的研究還鮮有報(bào)道．

香豆素類(lèi)化合物廣泛存在于植物中． 模式植物擬南芥中發(fā)現(xiàn)東莨菪素、 東莨菪苷等香豆素類(lèi)化合物主要在根中合成, 但是不同擬南芥材料中的含量存在顯著差異[16]． 已知東莨菪苷合成途徑是類(lèi)黃酮代謝途徑的上游分支, 主要由4-香豆酰基輔酶A經(jīng)香豆酸-3-羥化酶、 咖啡酰輔酶A-O-甲基轉(zhuǎn)移酶和阿魏酰輔酶A-6’-羥化酶等催化形成(圖1), 但其合成的準(zhǔn)確調(diào)控機(jī)制仍不清楚[17-18]． 低溫(10 ℃)條件下擬南芥的類(lèi)黃酮代謝增強(qiáng), 而在BEE1(BRASSINOSTEROID ENHANCED EXPRESSION1)和GRF(G2-LIKE FLAVONOID REGULATOR)突變體中包括東莨菪苷在內(nèi)的香豆素類(lèi)化合物合成顯著降低, 下游的花青素合成增強(qiáng)[18]． 因此BEE1和GRF基因可能是擬南芥中參與東莨菪苷生物合成的關(guān)鍵調(diào)控基因, 并受低溫影響． 倒春寒低溫條件下茶樹(shù)新梢差異基因表達(dá)譜分析表明, 東莨菪堿合成相關(guān)信號(hào)通路被顯著富集, 但茶樹(shù)中BEE1和GRF的同源基因的表達(dá)水平并無(wú)顯著差異[19]． 因此, 茶樹(shù)新梢中東莨菪苷的積累是否受低溫影響, 其積累代謝的主要影響因素和主要調(diào)控基因有待進(jìn)一步研究．

本研究建立了茶葉中東莨菪素和東莨菪苷的HPLC檢測(cè)方法, 分析了茶樹(shù)不同發(fā)育階段、 不同環(huán)境條件和不同品種/品系茶葉中東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù), 檢測(cè)了茶樹(shù)東莨菪素和東莨菪苷生物合成途徑中相關(guān)基因的表達(dá)模式, 明確了東莨菪素和東莨菪苷積累的主要影響因素和相關(guān)基因的調(diào)控作用, 為茶葉中功能性成分的開(kāi)發(fā)利用提供理論參考．

PAL: 苯丙氨酸解氨酶; C4H: 桂皮酸-4-羥化酶; C3H: 香豆酸-3-羥化酶; 4CL1: 對(duì)香豆酸輔酶A連接酶; CCoAOMT1: 咖啡酰輔酶A-O-甲基轉(zhuǎn)移酶; F6’H1: 阿魏酰輔酶A-6’-羥化酶．圖1 東莨菪苷的生物合成途徑

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及處理

以種植于中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所試驗(yàn)茶園的5年生“龍井43”盆栽茶樹(shù)為材料, 于春季萌動(dòng)期移入人工氣候室(24 h光周期: 13 h光照/11 h黑暗, 白天24 ℃/夜晚20 ℃, 濕度70%), 待新梢萌發(fā)至魚(yú)葉期、 一芽一葉期、 一芽二葉期和一芽三葉期時(shí)取新梢用于東莨菪堿、 東莨菪苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定和基因表達(dá)分析; 以選種圃種植的3～5年生的20個(gè)茶樹(shù)品種/單株為材料, 統(tǒng)一采摘秋季頂端第2～3片成熟葉進(jìn)行東莨菪堿和東莨菪苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定, 分析其在品種間的差異．

低溫脅迫試驗(yàn)以正常生長(zhǎng)條件下的“龍井43”盆栽茶樹(shù)為材料, 分別在新梢萌發(fā)至魚(yú)葉期、 一芽一葉期、 一芽二葉期和一芽三葉期時(shí)給予低溫處理(24 h光周期: 13 h光照/11 h黑暗, 白天4 ℃/夜晚2 ℃, 濕度70%), 于處理后24 h, 48 h取新梢用于質(zhì)量分?jǐn)?shù)檢測(cè)． 茶尺蠖為害試驗(yàn)同樣以“龍井43”盆栽茶樹(shù)為材料, 于秋季茶樹(shù)停止生長(zhǎng)前接種二齡茶尺蠖幼蟲(chóng), 每個(gè)處理枝條接種3頭, 于接種72 h后采集為害葉片． 所有樣品采集均設(shè)3個(gè)生物學(xué)重復(fù), 采集樣品立即投入液氮中冷凍, 在-80 ℃低溫條件下保存?zhèn)溆茫?/p>

1.2 東莨菪素與東莨菪苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)檢測(cè)

1.2.1 色譜條件

利用ACQUITY UPLC系統(tǒng)(Waters, 美國(guó))進(jìn)行檢測(cè)． 色譜條件1: X Bridge C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 流動(dòng)相為甲醇(B)-0.1%甲酸水溶液(A)梯度洗脫; 洗脫程序?yàn)?～10 min, 15%～34% B; 10 ～ 20 min, 34% B; 20～35 min, 34%～38% B; 檢測(cè)波長(zhǎng)345 nm, 流速1 mL/min, 柱溫25 ℃, 進(jìn)樣量10 μL． 色譜條件2: X Bridge C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 流動(dòng)相為甲醇(B)-0.1%甲酸水溶液(A)梯度洗脫; 洗脫程序?yàn)?～5 min, 15%～25% B; 5～10 min, 25%～30% B; 10～15 min, 30%～33% B; 15～20 min, 33%～36% B; 20～25 min, 36%～40% B; 檢測(cè)波長(zhǎng)345 nm, 流速1 mL/min, 柱溫25 ℃, 進(jìn)樣量10 μL．

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作

準(zhǔn)確稱(chēng)取東莨菪苷(CAS: 531-44-2, PhytoLab)和東莨菪素(CAS: 92-61-5, PhytoLab)標(biāo)準(zhǔn)品2.000 mg分別置于10 mL離心管中, 加入4 mL色譜純甲醇超聲溶解, 配成500 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液． 取該標(biāo)準(zhǔn)品溶液, 用色譜純甲醇稀釋成為系列梯度濃度的溶液, 上機(jī)檢測(cè), 根據(jù)峰面積大小和標(biāo)準(zhǔn)品濃度, 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)．

1.2.3 樣品溶液的制備

將茶葉樣品置于冷凍干燥機(jī)48 h凍干后, 研磨成粉末, 準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品0.200 0 g于10 mL離心管中, 加入純甲醇5 mL, 室溫浸提4 h后, 4 000 r/min離心8 min, 用注射器吸取上清液過(guò)0.45 μm有機(jī)濾膜后收集于2 mL進(jìn)樣瓶中．

1.2.4 回收率試驗(yàn)

準(zhǔn)確稱(chēng)取0.200 0 g樣品粉末于10 mL離心管中, 加入東莨菪苷50.0 μg和東莨菪素20.0 μg標(biāo)準(zhǔn)品, 按樣品溶液制備方法進(jìn)行浸提并收集于進(jìn)樣瓶中．

1.3 核酸提取及表達(dá)分析

1.3.1 總RNA的提取及cDNA的合成

茶樹(shù)總RNA按照多糖多酚植物總RNA提取試劑盒(CAT# DP441, 天根生化科技有限公司, 北京)的操作說(shuō)明進(jìn)行提取, 用NanoDrop ND2000微量核酸蛋白測(cè)定儀測(cè)定RNA濃度, 用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)總RNA質(zhì)量, RNA質(zhì)量檢測(cè)合格后, 參照PrimeScript?RT reagent Kit 反轉(zhuǎn)錄試劑盒(CAT# DRR037A, 寶生物工程有限公司, 大連)的說(shuō)明書(shū)步驟, 將RNA反轉(zhuǎn)錄合成cDNA用于基因表達(dá)分析．

1.3.2 基因表達(dá)分析

從“龍井43”茶樹(shù)基因組中篩選出東莨菪苷的生物合成途徑中的關(guān)鍵酶編碼基因CsPAL1,CsPAL2,CsC4H,Cs4CL2-1,Cs4CL2-2,Cs4CL3和CsCCoAOMT1等[20], 根據(jù)基因cDNA序列的特異性, 利用Primer-Blast軟件設(shè)計(jì)目的基因的熒光定量PCR(qRT-PCR)引物(表1)． qRT-PCR反應(yīng)體系為: SYBR Mix(Roche, Basel, Switzerland)5.0 μL, cDNA 1.0 μL, 上下游引物(10 μmol/L)各0.5 μL, 超純水3 μL, 總體系10 μL; 充分混勻, 短暫離心后, 在LightCycler 480 Ⅱ?qū)崟r(shí)熒光定量PCR儀(羅氏, 美國(guó))上進(jìn)行PCR 擴(kuò)增, 反應(yīng)程序?yàn)?5 ℃ 5 min, 95 ℃ 10 s, 56 ℃ 15 s, 12 ℃ 12 s, 45個(gè)循環(huán)后增加溶解曲線(xiàn)． 以茶樹(shù)基因CsPTB為內(nèi)參基因[21], 每個(gè)反應(yīng)3次生物學(xué)重復(fù), 2次技術(shù)重復(fù), 2-ΔCT或2-ΔΔCT法分析結(jié)果．

表1 茶樹(shù)東莨菪素和東莨菪堿合成相關(guān)基因?qū)崟r(shí)熒光定量引物

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及回收率

前人通過(guò)采用甲醇為提取溶劑, 分別用345 nm[11], 346 nm[22-23], 347 nm[24]等波長(zhǎng)來(lái)測(cè)定一匹綢、 參杞等植物中的東莨菪素和東莨菪苷． 本研究通過(guò)全波長(zhǎng)掃描顯示, 在茶樹(shù)中東莨菪素和東莨菪苷的最大紫外吸收波長(zhǎng)為345 nm, 因此把345 nm作為本研究的測(cè)定波長(zhǎng)． 將配制好的梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液按色譜條件1進(jìn)樣, 分析色譜圖并記錄峰面積, 以峰面積為縱坐標(biāo)、 以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn), 計(jì)算2種標(biāo)準(zhǔn)品的線(xiàn)性回歸方程． 東莨菪素回歸方程為y=32 520.966 20x-21 613.773 82,r=0.999 8, 在0.5～64 μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好線(xiàn)性關(guān)系; 東莨菪苷回歸方程為y=17 984.273 65x-20 044.097 60,r=0.999 9, 在1～128 μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好線(xiàn)性關(guān)系．

將配制好的梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液按色譜條件2進(jìn)樣, 分析色譜圖并記錄峰面積, 以峰面積為縱坐標(biāo)、 以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn), 計(jì)算2種對(duì)照品的線(xiàn)性回歸方程． 東莨菪素回歸方程為y=33 803.743 801x-17 723.041 828,r=0.999 821, 在0.5～ 64 μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好線(xiàn)性關(guān)系; 東莨菪苷回歸方程為y=18 669.680 731x-16 520.198 296,r=0.999 9, 在1～128 μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好線(xiàn)性關(guān)系．

東莨菪苷平均回收率為91.7%, RSD=3.32%(n=5); 東莨菪素平均回收率為93.5%, RSD=2.64%(n=5)． 該結(jié)果與已報(bào)道的檢測(cè)方法的效率基本一致, 表明2種色譜條件均具有較好的測(cè)定準(zhǔn)確度, 均能夠用于茶葉中東莨菪苷和東莨菪素的定量檢測(cè)(圖2)．

1為東莨菪苷; 2為東莨菪素．圖2 茶葉樣品的液相色譜

不同處理間小寫(xiě)字母不同表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)．圖3 不同發(fā)育階段葉片中東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)

2.2 茶樹(shù)新梢中東莨菪素和東莨菪苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定

通過(guò)比較2種色譜條件對(duì)茶樹(shù)新梢和成熟葉中東莨菪苷和東莨菪素的檢測(cè)效果, 發(fā)現(xiàn)利用色譜條件1對(duì)茶樹(shù)新梢進(jìn)行檢測(cè)得到的效果更理想, 而茶樹(shù)成熟葉檢測(cè)需對(duì)梯度洗脫條件進(jìn)行優(yōu)化, 宜采用色譜條件2進(jìn)行檢測(cè)． 本研究檢測(cè)了“龍井43”茶樹(shù)不同萌發(fā)階段新梢中的東莨菪苷和東莨菪素質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化, 結(jié)果顯示, 在茶芽萌發(fā)不同階段的新梢中, 東莨菪素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著低于東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù), 且東莨菪素質(zhì)量分?jǐn)?shù)在不同階段新梢中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, 從魚(yú)葉期到一芽三葉期的過(guò)程中, 東莨菪素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化不明顯, 均維持在相同的水平; 而東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨著新梢成熟度的增加其質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著升高, 在一芽二葉和一芽三葉期新梢中質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于魚(yú)葉期和一芽一葉期, 均達(dá)到200 μg/g以上(圖3)．

2.3 不同茶樹(shù)材料中東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)檢測(cè)

本研究選取包含中小葉種、 大葉種、 可可茶和葉色變異的茶樹(shù)品種或單株20個(gè)材料, 對(duì)這些材料中所含的東莨菪苷和東莨菪素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行檢測(cè)． 結(jié)果顯示, 不同茶樹(shù)材料中東莨菪苷和東莨菪素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)差異較大, 東莨菪苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)分布范圍為25.84～80.76 μg/g, 而東莨菪素質(zhì)量分?jǐn)?shù)分布范圍為18.34～50.88 μg/g(表2)．

表2 不同茶樹(shù)材料中東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)

報(bào)道顯示, 丁公藤中東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍分別為80～380 μg/g和150 ～ 1 040 μg/g[24], 寧夏枸杞中東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為27.5～57.3 μg/g和59.5～167.6 μg/g[10], 一匹綢中東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為38～240 μg/g和140～1 460 μg/g[22], 白花蛇舌草中東莨菪素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6.5～17.8 μg/g[25]． 可以看出茶葉中東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)較白花蛇舌草、 枸杞高或相當(dāng), 而低于一匹綢和丁公藤． 總體上茶葉中的東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于東莨菪素, 在檢測(cè)材料中僅在大葉種的2017M-49單株中東莨菪素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于東莨菪苷． 本研究還發(fā)現(xiàn)黃化變異單株CT2016-2的東莨菪苷和東莨菪素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均較低; 紫色變異品種紫鵑中二者的總質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高, 且主要是以東莨菪苷的形式存在, 其質(zhì)量分?jǐn)?shù)是東莨菪素的3.7倍; 白化品種安吉白茶中具有較高質(zhì)量分?jǐn)?shù)的東莨菪苷和相對(duì)較低的冬莨菪素．

2.4 東莨菪素和東莨菪苷在低溫脅迫和茶尺蠖為害下的質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化

為了探究生物與非生物脅迫是否對(duì)茶葉中東莨菪素和東莨菪苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)有影響, 本研究分析了其在低溫和茶尺蠖為害條件下茶樹(shù)材料中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)． 以茶樹(shù)春季萌發(fā)至魚(yú)葉、 一芽一葉、 一芽二葉和一芽三葉期的組織為材料, 分別進(jìn)行低溫脅迫處理, 并檢測(cè)處理48 h內(nèi)的物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化． 結(jié)果顯示, 在低溫脅迫下, 東莨菪素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)在各個(gè)時(shí)期的材料中變化均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; 在魚(yú)葉期低溫脅迫處理48 h時(shí), 東莨菪苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著降低, 而在一芽一葉、 一芽二葉和一芽三葉中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖4)． 在擬南芥中的研究表明, 東莨菪苷的生物合成受低溫影響[19], 這與本研究的結(jié)果不一致, 可能是由于物種間的差異以及茶葉中豐富的次生代謝物的影響． 茶尺蠖為害的樣品分析結(jié)果顯示, 茶葉在茶尺蠖為害后其體內(nèi)的東莨菪素和東莨菪苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖5)．

不同處理間小寫(xiě)字母不同表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)．圖4 新梢中東莨菪素和東莨菪苷在低溫脅迫下質(zhì)量分?jǐn)?shù)的變化

不同處理間小寫(xiě)字母不同表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)．圖5 東莨菪素和東莨菪苷在茶尺蠖為害葉片中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化

2.5 東莨菪苷合成相關(guān)基因在不同發(fā)育階段新梢中的表達(dá)模式分析

茶葉中東莨菪苷和東莨菪素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)與新梢發(fā)育程度密切相關(guān)． 本研究基于“龍井43”的基因組數(shù)據(jù), 篩選出茶葉中東莨菪苷生物合成通路中的關(guān)鍵基因CsPALs,CsC4H,Cs4CLs和CsCCoAOMT1等, 檢測(cè)這些基因在茶芽不同萌發(fā)階段新梢中的表達(dá)模式變化． 結(jié)果顯示, 這些基因在魚(yú)葉期新梢中的表達(dá)量相對(duì)較高, 隨著成熟度的增加,CsPAL1,Cs4CL2-2和Cs4CL3的表達(dá)量降低, 到一芽三葉期時(shí)如CsPAL2等基因的表達(dá)量也顯著降低, 而CsC4H,CsCCoAOMT1和Cs4CL2-1的表達(dá)在魚(yú)葉期到一芽三葉期中的變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖6)． 在新梢生長(zhǎng)過(guò)程中, 整體上基因表達(dá)豐度與黃酮類(lèi)生物合成高度相關(guān), 但在合成通路中的上游基因CsPALs,CsC4H和Cs4CLs的表達(dá)豐度與兒茶素和黃酮醇糖苷的積累量存在較低的相關(guān)關(guān)系[26]． 這可能是由于次生代謝物質(zhì)合成網(wǎng)絡(luò)復(fù)雜, 且下游產(chǎn)物合成底物可能來(lái)自多個(gè)代謝途徑, 導(dǎo)致上游基因表達(dá)水平與下游目標(biāo)代謝物質(zhì)量分?jǐn)?shù)的高低不存在顯著的相關(guān)關(guān)系．

不同處理間小寫(xiě)字母不同表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)．圖6 東莨菪素和東莨菪苷合成相關(guān)基因在不同發(fā)育階段葉片中的表達(dá)

3 結(jié)論

本研究建立了基于高效液相色譜測(cè)定茶葉中東莨菪素和東莨菪苷的方法, 并利用該方法分析了茶樹(shù)不同發(fā)育時(shí)期新梢(魚(yú)葉期到一芽三葉期)、 茶尺蠖為害和低溫等逆境脅迫處理下東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化, 結(jié)果顯示茶葉中東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于東莨菪素, 且東莨菪苷隨著成熟度的增加而顯著累積, 東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)受低溫和茶尺蠖脅迫的影響較?。?對(duì)20個(gè)不同茶樹(shù)品種/單株中的東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果顯示, 不同茶樹(shù)材料間東莨菪素和東莨菪苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)差異較大, 茶葉中東莨菪素質(zhì)量分?jǐn)?shù)為18.34～50.88 μg/g, 東莨菪苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25.84～80.76 μg/g, 與部分中藥材中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)相近． 進(jìn)一步對(duì)東莨菪苷生物合成相關(guān)的基因表達(dá)模式進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果表明, 合成通路上游基因的表達(dá)模式與東莨菪苷的積累模式間不存在顯著的相關(guān)關(guān)系． 總之, 由于茶葉中富含東莨菪素和東莨菪苷, 且具有重要的潛在保健功效, 能夠?yàn)椴枞~功能性成分開(kāi)發(fā)和茶樹(shù)資源多元化利用提供重要參考．