李向壘 許英君 張孟偉 劉燦 翟亞超

非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）為成人最常見的淋巴組織腫瘤，該病復(fù)雜多樣，可和任何惰性淋巴瘤共存，有部分病例與淋巴結(jié)反應(yīng)性增生鑒別困難［1］。NHL 患者病情發(fā)展迅速，及時準確診斷并對其預(yù)后進行判斷具有一定難度。細胞質(zhì)胸苷激酶（thymidine kinase 1，TK1）主要存在于各類增殖細胞的細胞質(zhì)中，與細胞增殖密切相關(guān)，研究發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤患者血清中TK1 濃度會明顯增高［2］。組織多肽特異性抗原（Tissue Polypeptide Specific Antigen，TPS）是臨床用于評估腫瘤細胞分裂和增殖活性的特異性指標，但TPS 用于評價NHL 預(yù)后的研究較少［3］。乳酸脫氫酶同工酶（Lactate dehydrogenase，LDH）在人體心、腎等組織中分布較為廣泛，在惡性腫瘤患者血清中呈高表達狀態(tài)，與NHL 的關(guān)系密切［4］。本研究旨在探討TK1、TPS、LDH 在NHL 患者治療前后變化情況，并分析三者與NHL 患者預(yù)后的關(guān)系?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年6 月至2019 年6 月于河南大學淮河醫(yī)院化療治療的NHL 患者作為研究對象。納入標準：①患者及家屬知曉本研究，并簽署知情同意書；②未接受過化療、手術(shù)等治療者；③預(yù)計生存期6 個月以上；④經(jīng)病理組織學明確診斷為NHL［5］。排除標準：①存在重要器官功能障礙者；②存在精神疾病者；③中途退出研究者；④納入研究前1 個月內(nèi)服用過影響激素水平藥物，或進行過相關(guān)治療者；⑤隨訪過程中失訪者。選取符合納入排除標準的113 例NHL 患者作為研究對象，選取同期本院健康體檢者118 名設(shè)為對照組。本研究經(jīng)院醫(yī)學倫理委員會批準通過。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1 兩組患者一般資料比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of general data between the two groups［（±s），n（%）］

表1 兩組患者一般資料比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of general data between the two groups［（±s），n（%）］

1.2 方法

1.2.1 化療方法

NHL 患者采用標準劑量CHOP 方案或R-CHOP 方案化療6～8 個療程，化療效果不理想患者加用依托泊苷，或改用DHAP 方案繼續(xù)化療［6］。

1.2.2 TK1、TPS、LDH 檢測方法

對照組于體檢當日，NHL 患者于入院后次日清晨8：00 空腹抽取肘靜脈5 mL，其中2 mL 用含0.109 mol/L 枸櫞酸1∶9 抗凝，3 500 r/min 離心10 min，離心半徑：8 cm，分離血漿。采用化學發(fā)光法檢測TK1，試劑盒由深圳華瑞同康生物技術(shù)有限公司提供。采用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測TPS、LDH，試劑盒由美國貝克曼庫爾特提供，檢測儀器為DXI800 美國貝克曼庫爾特全自動免疫分析儀。

1.2.3 隨訪

對NHL 患者隨訪兩年，隨訪截止時間為2021年6 月。隨訪方式以電話隨訪為主，上門復(fù)查為輔。了解NHL 患者預(yù)后情況，依據(jù)隨訪結(jié)果將患者分為生存組（2 年內(nèi)存活）和死亡組（2 年內(nèi)死亡）。

1.3 觀察指標

依據(jù)患者治療效果即：完全緩解、部分緩解、穩(wěn)定、疾病進展［7］，將觀察組分為緩解組（包括完全緩解、部分緩解）和未緩解組（包括穩(wěn)定、疾病進展）。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料采用（）描述，兩組間比較，采用t檢驗；多組間比較采用F檢驗；計數(shù)資料通過n（%）表示，采用χ2檢驗；采用受試者工作特征曲線（ROC）評估診斷價值，計算曲線下面積（AUC），AUC 值越高，診斷價值越高；以P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 對照組、NHL 患者化療前后TK1、TPS、LDH水平比較

TK1、TPS、LDH 水平分析：對照組＜觀察組化療后＜觀察組化療前，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 對照組、NHL 患者化療前后TK1、TPS、LDH 水平比較（±s）Table 2 Difference TK1，TPS and LDH levels between control group and NHL patients before and after chemotherapy（±s）

表2 對照組、NHL 患者化療前后TK1、TPS、LDH 水平比較（±s）Table 2 Difference TK1，TPS and LDH levels between control group and NHL patients before and after chemotherapy（±s）

注：與對照組比較aP＜0.05；與化療前比較，bP＜0.05。

2.2 化療結(jié)果

113 例NHL 患者化療后有67 例患者得到緩解（包括完全緩解、部分緩解）。緩解組TK1、TPS、LDH 水平低于未緩解組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 緩解組與未緩解組TK1、TPS、LDH 水平差異分析（±s）Table 3 Difference analysis of TK1，TPS，LDH levels between remission group and non-remission group（±s）

表3 緩解組與未緩解組TK1、TPS、LDH 水平差異分析（±s）Table 3 Difference analysis of TK1，TPS，LDH levels between remission group and non-remission group（±s）

2.3 不同預(yù)后的NHL 患者TK1、TPS、LDH 水平差異分析

隨訪結(jié)果顯示，2 年內(nèi)死亡患者34 例，生存患者79 例。生存組NHL 患者TK1、TPS、LDH水平低于死亡組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 不同預(yù)后的NHL 患者TK1、TPS、LDH 水平差異分析（±s）Table 4 Difference analysis of TK1，TPS and LDH levels in NHL patients with different prognosis（±s）

表4 不同預(yù)后的NHL 患者TK1、TPS、LDH 水平差異分析（±s）Table 4 Difference analysis of TK1，TPS and LDH levels in NHL patients with different prognosis（±s）

2.4 TK1、TPS、LDH 檢測及三者聯(lián)合檢測對NHL患者預(yù)后死亡的預(yù)測價值分析

TK1、TPS、LDH 三者聯(lián) 合檢測 靈敏度（0.968）、特異度（0.952）、AUC（0.988）均高于各指標單一檢測（P＜0.05）。見表5、圖1。

表5 TK1、TPS、LDH 檢測及三者聯(lián)合檢測對NHL 患者預(yù)后死亡的預(yù)測價值分析Table 5 Analysis of the predictive value of TK1，TPS，LDH and their combined detection on prognosis and death in patients with NHL

圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curve

3 討論

NHL 是淋巴細胞異常增殖性疾病，近年來發(fā)病率有所上升。隨著化療方案的不斷改進，NHL患者治療效果較以往提升明顯，但仍有部分NHL患者化療治療后因療效不理想而出現(xiàn)病情進展或復(fù)發(fā)，影響生存率［8］。因此對NHL 患者化療效果進行準確評估，有助于臨床醫(yī)生謹慎選擇合理的治療方案，加強病情監(jiān)測，改善患者預(yù)后。

以往研究發(fā)現(xiàn)，在正常人體內(nèi)的TK1 處于低水平狀態(tài)，在惡性腫瘤患者體內(nèi)的TK1 則呈現(xiàn)出異常表達趨勢，且TK1 可反映腫瘤細胞的增殖速度，因此TK1 在腫瘤早期篩查中有著不可忽視的意義［9-11］。Skopas 等［12］報道，血清TPS 水平的高低可反映腫瘤細胞分裂和增殖的活性，可依據(jù)化療前后TPS 水平變化情況對化療療效進行評定。LDH 屬于一種糖酵解酶，廣泛存在于組織細胞質(zhì)內(nèi)，正常組織發(fā)生惡變后，腫瘤細胞內(nèi)LDH 大量釋放，血清中LDH 活性相應(yīng)增高［13-15］。本研究發(fā)現(xiàn)，健康人群中TK1、TPS、LDH 表達水平均低于NHL患者，與既往文獻研究結(jié)果相符［16］。據(jù)劉文霞［17］在復(fù)發(fā)性NHL 患者的研究中發(fā)現(xiàn)，血清LDH 可間接反映出體內(nèi)腫瘤負荷情況，血清LDH 的升高與NHL 的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。結(jié)合本次研究結(jié)果，可見TK1、TPS、LDH 可用于NHL 的輔助診斷中，以提高NHL 診斷率。NHL 患者化療后TK1、TPS、LDH 水平顯著下降，分析可能為NHL 患者化療治療后，患者體內(nèi)腫瘤細胞被大量殺傷，殘余腫瘤組織受到抑制，使腫瘤增殖緩慢或者不增殖，最終導(dǎo)致三項指標表達水平下降［18］。從以上結(jié)論來看，TK1、TPS、LDH 水平與NHL 的疾病恢復(fù)、患者預(yù)后情況存在一定聯(lián)系，推測TK1、TPS、LDH 可作為判斷NHL 患者化療療效、預(yù)后的新指標。

Kenzik 等［19］報道，在未緩解的白血病患者中，TK1 水平要顯著高于部分緩解及完全緩解的患者，推測TK1 對評估血液系統(tǒng)疾病的治療效果具有一定意義。本研究結(jié)果顯示：緩解組TK1、TPS、LDH水平低于未緩解組，與Attarbaschi 等［20］報道結(jié)果一致。可見TK1、TPS、LDH 均對指導(dǎo)臨床治療方案有著重要意義，若NHL 患者在化療治療期間，TK1、TPS 及LDH 水平與化療前比較無明顯差異，可能是化療方案療效欠佳的提示，臨床可對NHL 患者進一步檢查，更換化療方案。分析NHL 患者2 年預(yù)后，發(fā)現(xiàn)生存組NHL 患者TK1、TPS、LDH 水平低于死亡組，可以看出，三項指標的表達水平直觀反映出NHL 患者的生存情況，與NHL 患者預(yù)后關(guān)系密切。

繪制ROC 曲線，TK1、TPS、LDH 三者聯(lián)合檢測靈敏度（0.968）、特異度（0.952）、AUC（0.988）均高于各指標單一檢測，表明聯(lián)合三項指標檢測對評估NHL 患者預(yù)后死亡有著較高的靈敏度、特異度。由此可知，聯(lián)合三項指標檢測為判斷NHL 患者預(yù)后提供了有效的參考依據(jù)。

綜上所述，臨床可通過聯(lián)合TK1、TPS、LDH 檢測，提高NHL 早期診斷率，三者可作為評估化療治療效果，判斷患者預(yù)后的血清標志物。