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        MACC1、c-met及ERCC1的表達(dá)在結(jié)直腸癌病理評估中的應(yīng)用價值研究

        2023-05-16 01:15:58懷建國楊小苗
        當(dāng)代醫(yī)藥論叢 2023年9期
        關(guān)鍵詞:免疫組化直腸癌病理

        曹 明,懷建國,楊小苗

        (蕪湖市第一人民醫(yī)院病理科,安徽 蕪湖 241000)

        結(jié)直腸癌現(xiàn)已成為我國常見的惡性腫瘤之一。近年來隨著國人生活水平的提高以及飲食習(xí)慣的改變,結(jié)直腸癌的發(fā)病率逐年升高?,F(xiàn)階段,結(jié)直腸癌最主要的治療方式仍然是外科根治性手術(shù)輔以術(shù)后化療。約半數(shù)的結(jié)直腸癌患者在確診時病情即已處于晚期,后期的隨訪表明有超過一半的患者因腫瘤復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處廣泛轉(zhuǎn)移而死亡[1]。結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1(MACC1)是2009 年由美國學(xué)者Stein 等研究發(fā)現(xiàn)的,該基因與結(jié)腸癌的發(fā)生及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[2]。隨后的研究發(fā)現(xiàn)MACC1 與肝細(xì)胞生長因子受體(c-met)的表達(dá)呈正相關(guān)[3],二者參與了結(jié)腸癌的發(fā)生及發(fā)展。傳統(tǒng)結(jié)直腸癌術(shù)后病理評估大多是基于病理組織學(xué),具有相對的主觀性。本研究對結(jié)直腸癌根治標(biāo)本癌組織及癌旁組織進行MACC1 和c-met 表達(dá)檢測,以了解二者在結(jié)直腸癌術(shù)后標(biāo)本病理評估中的應(yīng)用價值,進而豐富結(jié)直腸癌術(shù)后病理評估內(nèi)容,為臨床后續(xù)治療提供一定的參考。核苷酸切除修復(fù)交叉互補基因1(ERCC1)是核苷酸切除修復(fù)途徑的重要成員,抑制ERCC1 的表達(dá)可有效抑制惡性腫瘤的增殖[4]。一些研究已表明ERCC1 的表達(dá)是影響多種惡性腫瘤患者預(yù)后的重要因素[5-7]。然而,結(jié)直腸癌中ERCC1 的表達(dá)與患者預(yù)后之間的關(guān)系,學(xué)者之間尚存在爭議。有研究發(fā)現(xiàn),結(jié)直腸癌ERCC1 高表達(dá)提示患者預(yù)后較差,因其影響化療效果[8]。同時,又有一些研究認(rèn)為ERCC1 的表達(dá)情況與結(jié)直腸癌患者的預(yù)后無關(guān)[9-10]。本研究對結(jié)直腸癌根治標(biāo)本進行癌組織ERCC1 表達(dá)檢測,評估不同臨床病理特征條件下ERCC1 的表達(dá)情況,為其在化療評估中的應(yīng)用提供一定的參考。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        分析2019 年至2021 年在我院行結(jié)直腸癌根治性手術(shù)治療的103 例患者的臨床病理資料,其中男60 例,女43 例;年齡26 ~87 歲。

        1.2 方法

        1.2.1 免疫組織化學(xué)(免疫組化)法檢測癌組織中MACC1、c-met、ERCC1 及癌旁組織中MACC1、c-met的表達(dá) 103 例結(jié)直腸癌患者行根治性手術(shù)治療后,取每例患者癌組織2 塊,癌旁組織(以手術(shù)標(biāo)本吻合口為癌旁組織)1 塊。使用10% 中性福爾馬林固定標(biāo)本,隨后進行常規(guī)處理,并行免疫組化染色,染色采用二步法。MACC1 抗體、c-met 抗體由美國Bioss 公司提供,抗體稀釋濃度1:400 ;ERCC1 抗體由福建邁新公司提供,克隆號8F1,為即用型抗體;二步法Elivision Plus 免疫組化試劑盒、DBA 試劑盒均由福建邁新公司提供。

        1.2.2 MACC1、c-met、ERCC1 的免疫組化染色結(jié)果判讀 結(jié)果判讀由2 名具備高級職稱的病理科醫(yī)師進行,每張切片隨機選擇10 個視野,單個視野計數(shù)100個腫瘤細(xì)胞,計算染色陽性腫瘤細(xì)胞百分比。MACC1陽性大部分表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞質(zhì),少部分表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞核;c-met 陽性表達(dá)于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì);ERCC1 陽性則表達(dá)于細(xì)胞核。腫瘤細(xì)胞染色百分比評分:腫瘤細(xì)胞無表達(dá)為0 分,陽性腫瘤細(xì)胞百分比≤10% 為1 分,陽性腫瘤細(xì)胞百分比為11% ~50%為2 分,陽性腫瘤細(xì)胞百分比為51% ~75% 為3 分,陽性腫瘤細(xì)胞百分比>75% 為4 分。腫瘤細(xì)胞免疫組化染色強度評分:無著色為0 分,淡黃色為1 分,棕黃色為2 分,棕褐色為3 分。最后計算上述兩項評分的乘積,MACC1、c-met 免疫組化結(jié)果判讀,如乘積>3 分為陽性,乘積≤3 分則為陰性[11];ERCC1免疫組化結(jié)果判讀,乘積>2 分為陽性,乘積≤2 分則為陰性[12]。MACC1、c-met、ERCC1 染色陽性結(jié)果如圖1-3 所示。

        圖1 MACC1 陽性(×100,表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞質(zhì))

        圖2 c-met 陽性(×100,表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞質(zhì))

        圖3 ERCC1 陽性(×100,表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞核)

        1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

        選用SPSS 19.0 統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行處理,計數(shù)資料以率(%)表示,組間比較行χ2 檢驗;以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 不同組織中MACC1 及c-met 陽性表達(dá)率的比較

        結(jié)直腸癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達(dá)率均明顯高于癌旁組織,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0001)。詳見表1。

        表1 不同組織中MACC1 及c-met 陽性表達(dá)率的比較[例(%)]

        2.2 不同臨床病理特征患者結(jié)直腸癌組織中MACC1及c-met 陽性表達(dá)率的比較

        不同性別、年齡患者結(jié)直腸癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達(dá)率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);不同病理大體類型、腫瘤T 分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者結(jié)直腸癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達(dá)率比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

        表2 不同臨床病理特征患者結(jié)直腸癌組織中MACC1 及c-met 陽性表達(dá)率的比較[例(%)]

        2.3 不同臨床病理特征患者結(jié)直腸癌組織中ERCC1陽性表達(dá)率的比較

        不同性別、年齡、病理大體類型、腫瘤T 分期患者結(jié)直腸癌組織中ERCC1 的陽性表達(dá)率比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);不同分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者結(jié)直腸癌組織中ERCC1 的陽性表達(dá)率比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見表3。

        表3 不同臨床病理特征患者結(jié)直腸癌組織中ERCC1 陽性表達(dá)率的比較[例(%)]

        3 討論

        MACC1、c-met 通過參與調(diào)控肝細(xì)胞生長因子(HGF)/c-met 信號通路,促進結(jié)直腸癌等惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[13]。本研究依據(jù)上述理論基礎(chǔ),通過檢測結(jié)直腸癌患者癌組織中MACC1、c-met 的表達(dá)情況,進而分析MACC1、c-met 的表達(dá)與不同臨床病理特征之間的關(guān)系,以了解MACC1、c-met 免疫組化檢測在結(jié)直腸癌患者術(shù)后病理評估中的應(yīng)用價值。本研究發(fā)現(xiàn),癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達(dá)率遠(yuǎn)高于癌旁組織,該結(jié)果與過往其他研究[14]基本一致。MACC1 基因包含7 個外顯因子與6 個內(nèi)含因子,共有2559 個核苷酸,位于人類7 號染色體(7p21.1)內(nèi)。MACC1 的特殊功能區(qū)域中,ZU5、SH3 區(qū)域可介導(dǎo)特定蛋白質(zhì)的產(chǎn)生,另一區(qū)域則可引導(dǎo)細(xì)胞凋亡。當(dāng)MACC1 與c-met 激活HGF/c-met 信號通路后,可促進結(jié)直腸癌等惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[15]。因而,結(jié)直腸癌組織中MACC1、c-met 呈高表達(dá)狀態(tài)。腫瘤T 分期、腫瘤分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況是過往評估結(jié)直腸癌術(shù)后病理特征的核心內(nèi)容,也是傳統(tǒng)病理評估的重要組成部分。但上述病理評估均依據(jù)病理形態(tài)學(xué),具有一定的主觀性。過往大量的研究提示,腫瘤T 分期較晚、腫瘤分化程度低及出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者預(yù)后較差。HGF/c-met 信號傳導(dǎo)通路在正常情況下,參與胚胎發(fā)育以及組織修復(fù)等正常生理過程,當(dāng)MACC1 與c-met 出現(xiàn)異常結(jié)合后,可導(dǎo)致HGF/c-met信號通路激活,促進結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展[15]。本研究發(fā)現(xiàn)腫瘤T 分期為T3或T4、腫瘤分化程度低、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達(dá)率均明顯升高,提示MACC1、c-met 既參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生,又促進了結(jié)直腸癌的發(fā)展,進一步表明MACC1、c-met 在結(jié)直腸癌等惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起到了較為關(guān)鍵的作用,與先前的研究結(jié)果[16]較為一致。同時,本研究還發(fā)現(xiàn)潰瘍型結(jié)直腸癌患者癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達(dá)率高于隆起型結(jié)直腸癌患者,而過往研究未提示這一現(xiàn)象。該現(xiàn)象可能對解釋潰瘍型與隆起型結(jié)直腸癌患者的預(yù)后差異具有一定的價值,上述改變有待進一步深入研究及探討。

        現(xiàn)階段,F(xiàn)OLFOX 方案為結(jié)直腸癌術(shù)后標(biāo)準(zhǔn)的化療方案之一,有效率較高,一般超過40%[17]。鉑類藥物通過使DNA 螺旋形成交聯(lián)物,促使腫瘤細(xì)胞凋亡[18]。過往的研究顯示,ERCC1 表達(dá)在非小細(xì)胞肺癌[19]等惡性腫瘤患者中有預(yù)后評估價值,但其在結(jié)直腸癌患者預(yù)后評估中的價值仍有爭議[8-10]。進一步探尋ERCC1 在結(jié)直腸癌患者預(yù)后評估中的作用,具有一定的臨床價值。就理論而言,ERCC1 高表達(dá)患者的腫瘤細(xì)胞具有較高的DNA 修復(fù)能力,因此可使鉑類藥物的抗癌作用降低,進而導(dǎo)致ERCC1 高表達(dá)的患者預(yù)后不良。一項包含2076 例患者的研究表明,ERCC1 高表達(dá)的患者具有較短的無進展生存期和總生存期[8]。本研究發(fā)現(xiàn),腫瘤分化程度低、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者,其癌組織中ERCC1 的表達(dá)較高。在傳統(tǒng)病理評估中,腫瘤分化程度低、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等現(xiàn)象,均提示不良預(yù)后,而ERCC1 的高表達(dá)可能進一步加劇這種不良預(yù)后,這與傳統(tǒng)病理評估是相佐證的。同時,免疫組化檢測結(jié)果具有相對的客觀性,因而ERCC1 在結(jié)直腸癌的術(shù)后病理評估中具有潛在的應(yīng)用價值。由于本研究對結(jié)直腸癌患者隨訪的時間尚短,因此ERCC1 在結(jié)直腸癌化療評估中的作用有待進一步的觀察。

        綜上所述,相對于癌旁組織,結(jié)直腸癌組織中MACC1、c-met 的 表 達(dá) 明 顯 增 高,MACC1、c-met在結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。同時,MACC1、c-met 高表達(dá)與傳統(tǒng)病理評估中的不良預(yù)后因素均有一定的相關(guān)性,免疫組化檢測相對于病理組織學(xué)具有相對的客觀性,相應(yīng)的檢測可進一步完善病理評估,因而具有一定的臨床參考及應(yīng)用價值。ERCC1 檢測結(jié)果與傳統(tǒng)病理評估結(jié)果有一定的相關(guān)性,其病理評估價值有待后續(xù)工作的進一步探討及研究。

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