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        MACC1、c-met及ERCC1的表達在結直腸癌病理評估中的應用價值研究

        2023-05-16 01:15:58懷建國楊小苗
        當代醫(yī)藥論叢 2023年9期
        關鍵詞:免疫組化直腸癌病理

        曹 明,懷建國,楊小苗

        (蕪湖市第一人民醫(yī)院病理科,安徽 蕪湖 241000)

        結直腸癌現(xiàn)已成為我國常見的惡性腫瘤之一。近年來隨著國人生活水平的提高以及飲食習慣的改變,結直腸癌的發(fā)病率逐年升高?,F(xiàn)階段,結直腸癌最主要的治療方式仍然是外科根治性手術輔以術后化療。約半數(shù)的結直腸癌患者在確診時病情即已處于晚期,后期的隨訪表明有超過一半的患者因腫瘤復發(fā)或遠處廣泛轉移而死亡[1]。結腸癌轉移相關基因1(MACC1)是2009 年由美國學者Stein 等研究發(fā)現(xiàn)的,該基因與結腸癌的發(fā)生及轉移密切相關[2]。隨后的研究發(fā)現(xiàn)MACC1 與肝細胞生長因子受體(c-met)的表達呈正相關[3],二者參與了結腸癌的發(fā)生及發(fā)展。傳統(tǒng)結直腸癌術后病理評估大多是基于病理組織學,具有相對的主觀性。本研究對結直腸癌根治標本癌組織及癌旁組織進行MACC1 和c-met 表達檢測,以了解二者在結直腸癌術后標本病理評估中的應用價值,進而豐富結直腸癌術后病理評估內容,為臨床后續(xù)治療提供一定的參考。核苷酸切除修復交叉互補基因1(ERCC1)是核苷酸切除修復途徑的重要成員,抑制ERCC1 的表達可有效抑制惡性腫瘤的增殖[4]。一些研究已表明ERCC1 的表達是影響多種惡性腫瘤患者預后的重要因素[5-7]。然而,結直腸癌中ERCC1 的表達與患者預后之間的關系,學者之間尚存在爭議。有研究發(fā)現(xiàn),結直腸癌ERCC1 高表達提示患者預后較差,因其影響化療效果[8]。同時,又有一些研究認為ERCC1 的表達情況與結直腸癌患者的預后無關[9-10]。本研究對結直腸癌根治標本進行癌組織ERCC1 表達檢測,評估不同臨床病理特征條件下ERCC1 的表達情況,為其在化療評估中的應用提供一定的參考。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        分析2019 年至2021 年在我院行結直腸癌根治性手術治療的103 例患者的臨床病理資料,其中男60 例,女43 例;年齡26 ~87 歲。

        1.2 方法

        1.2.1 免疫組織化學(免疫組化)法檢測癌組織中MACC1、c-met、ERCC1 及癌旁組織中MACC1、c-met的表達 103 例結直腸癌患者行根治性手術治療后,取每例患者癌組織2 塊,癌旁組織(以手術標本吻合口為癌旁組織)1 塊。使用10% 中性福爾馬林固定標本,隨后進行常規(guī)處理,并行免疫組化染色,染色采用二步法。MACC1 抗體、c-met 抗體由美國Bioss 公司提供,抗體稀釋濃度1:400 ;ERCC1 抗體由福建邁新公司提供,克隆號8F1,為即用型抗體;二步法Elivision Plus 免疫組化試劑盒、DBA 試劑盒均由福建邁新公司提供。

        1.2.2 MACC1、c-met、ERCC1 的免疫組化染色結果判讀 結果判讀由2 名具備高級職稱的病理科醫(yī)師進行,每張切片隨機選擇10 個視野,單個視野計數(shù)100個腫瘤細胞,計算染色陽性腫瘤細胞百分比。MACC1陽性大部分表達于腫瘤細胞胞質,少部分表達于腫瘤細胞胞核;c-met 陽性表達于細胞膜、細胞質;ERCC1 陽性則表達于細胞核。腫瘤細胞染色百分比評分:腫瘤細胞無表達為0 分,陽性腫瘤細胞百分比≤10% 為1 分,陽性腫瘤細胞百分比為11% ~50%為2 分,陽性腫瘤細胞百分比為51% ~75% 為3 分,陽性腫瘤細胞百分比>75% 為4 分。腫瘤細胞免疫組化染色強度評分:無著色為0 分,淡黃色為1 分,棕黃色為2 分,棕褐色為3 分。最后計算上述兩項評分的乘積,MACC1、c-met 免疫組化結果判讀,如乘積>3 分為陽性,乘積≤3 分則為陰性[11];ERCC1免疫組化結果判讀,乘積>2 分為陽性,乘積≤2 分則為陰性[12]。MACC1、c-met、ERCC1 染色陽性結果如圖1-3 所示。

        圖1 MACC1 陽性(×100,表達于腫瘤細胞胞質)

        圖2 c-met 陽性(×100,表達于腫瘤細胞胞質)

        圖3 ERCC1 陽性(×100,表達于腫瘤細胞胞核)

        1.3 統(tǒng)計學方法

        選用SPSS 19.0 統(tǒng)計學軟件對數(shù)據進行處理,計數(shù)資料以率(%)表示,組間比較行χ2 檢驗;以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結果

        2.1 不同組織中MACC1 及c-met 陽性表達率的比較

        結直腸癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達率均明顯高于癌旁組織,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.0001)。詳見表1。

        表1 不同組織中MACC1 及c-met 陽性表達率的比較[例(%)]

        2.2 不同臨床病理特征患者結直腸癌組織中MACC1及c-met 陽性表達率的比較

        不同性別、年齡患者結直腸癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);不同病理大體類型、腫瘤T 分期、分化程度、淋巴結轉移情況患者結直腸癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達率比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。詳見表2。

        表2 不同臨床病理特征患者結直腸癌組織中MACC1 及c-met 陽性表達率的比較[例(%)]

        2.3 不同臨床病理特征患者結直腸癌組織中ERCC1陽性表達率的比較

        不同性別、年齡、病理大體類型、腫瘤T 分期患者結直腸癌組織中ERCC1 的陽性表達率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);不同分化程度、淋巴結轉移情況患者結直腸癌組織中ERCC1 的陽性表達率比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。詳見表3。

        表3 不同臨床病理特征患者結直腸癌組織中ERCC1 陽性表達率的比較[例(%)]

        3 討論

        MACC1、c-met 通過參與調控肝細胞生長因子(HGF)/c-met 信號通路,促進結直腸癌等惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[13]。本研究依據上述理論基礎,通過檢測結直腸癌患者癌組織中MACC1、c-met 的表達情況,進而分析MACC1、c-met 的表達與不同臨床病理特征之間的關系,以了解MACC1、c-met 免疫組化檢測在結直腸癌患者術后病理評估中的應用價值。本研究發(fā)現(xiàn),癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達率遠高于癌旁組織,該結果與過往其他研究[14]基本一致。MACC1 基因包含7 個外顯因子與6 個內含因子,共有2559 個核苷酸,位于人類7 號染色體(7p21.1)內。MACC1 的特殊功能區(qū)域中,ZU5、SH3 區(qū)域可介導特定蛋白質的產生,另一區(qū)域則可引導細胞凋亡。當MACC1 與c-met 激活HGF/c-met 信號通路后,可促進結直腸癌等惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[15]。因而,結直腸癌組織中MACC1、c-met 呈高表達狀態(tài)。腫瘤T 分期、腫瘤分化程度及淋巴結轉移情況是過往評估結直腸癌術后病理特征的核心內容,也是傳統(tǒng)病理評估的重要組成部分。但上述病理評估均依據病理形態(tài)學,具有一定的主觀性。過往大量的研究提示,腫瘤T 分期較晚、腫瘤分化程度低及出現(xiàn)淋巴結轉移的患者預后較差。HGF/c-met 信號傳導通路在正常情況下,參與胚胎發(fā)育以及組織修復等正常生理過程,當MACC1 與c-met 出現(xiàn)異常結合后,可導致HGF/c-met信號通路激活,促進結直腸癌的發(fā)生、發(fā)展[15]。本研究發(fā)現(xiàn)腫瘤T 分期為T3或T4、腫瘤分化程度低、出現(xiàn)淋巴結轉移的患者癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達率均明顯升高,提示MACC1、c-met 既參與了結直腸癌的發(fā)生,又促進了結直腸癌的發(fā)展,進一步表明MACC1、c-met 在結直腸癌等惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起到了較為關鍵的作用,與先前的研究結果[16]較為一致。同時,本研究還發(fā)現(xiàn)潰瘍型結直腸癌患者癌組織中MACC1、c-met 的陽性表達率高于隆起型結直腸癌患者,而過往研究未提示這一現(xiàn)象。該現(xiàn)象可能對解釋潰瘍型與隆起型結直腸癌患者的預后差異具有一定的價值,上述改變有待進一步深入研究及探討。

        現(xiàn)階段,F(xiàn)OLFOX 方案為結直腸癌術后標準的化療方案之一,有效率較高,一般超過40%[17]。鉑類藥物通過使DNA 螺旋形成交聯(lián)物,促使腫瘤細胞凋亡[18]。過往的研究顯示,ERCC1 表達在非小細胞肺癌[19]等惡性腫瘤患者中有預后評估價值,但其在結直腸癌患者預后評估中的價值仍有爭議[8-10]。進一步探尋ERCC1 在結直腸癌患者預后評估中的作用,具有一定的臨床價值。就理論而言,ERCC1 高表達患者的腫瘤細胞具有較高的DNA 修復能力,因此可使鉑類藥物的抗癌作用降低,進而導致ERCC1 高表達的患者預后不良。一項包含2076 例患者的研究表明,ERCC1 高表達的患者具有較短的無進展生存期和總生存期[8]。本研究發(fā)現(xiàn),腫瘤分化程度低、出現(xiàn)淋巴結轉移的患者,其癌組織中ERCC1 的表達較高。在傳統(tǒng)病理評估中,腫瘤分化程度低、出現(xiàn)淋巴結轉移等現(xiàn)象,均提示不良預后,而ERCC1 的高表達可能進一步加劇這種不良預后,這與傳統(tǒng)病理評估是相佐證的。同時,免疫組化檢測結果具有相對的客觀性,因而ERCC1 在結直腸癌的術后病理評估中具有潛在的應用價值。由于本研究對結直腸癌患者隨訪的時間尚短,因此ERCC1 在結直腸癌化療評估中的作用有待進一步的觀察。

        綜上所述,相對于癌旁組織,結直腸癌組織中MACC1、c-met 的 表 達 明 顯 增 高,MACC1、c-met在結直腸癌的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。同時,MACC1、c-met 高表達與傳統(tǒng)病理評估中的不良預后因素均有一定的相關性,免疫組化檢測相對于病理組織學具有相對的客觀性,相應的檢測可進一步完善病理評估,因而具有一定的臨床參考及應用價值。ERCC1 檢測結果與傳統(tǒng)病理評估結果有一定的相關性,其病理評估價值有待后續(xù)工作的進一步探討及研究。

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