鄭勇浪 李相兵

1 四川省達(dá)州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 635000; 2 眉山心腦血管病醫(yī)院檢驗(yàn)科

原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤(Primary central nervous system lymphoma,PCNSL)是指原發(fā)于顱內(nèi)、眼睛、脊髓及軟腦膜等部位, 并排除中樞神經(jīng)系統(tǒng)以外的其他淋巴結(jié)受累的非霍奇金淋巴瘤,其中大部分為彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤。PCNSL起病較急,進(jìn)展快,侵襲性大,對(duì)身體損傷較大,患者預(yù)后較差[1]。PCNSL的臨床診斷有一定的困難,誤診率較高,盡早診斷可以減少因疾病本身或者不必要的治療導(dǎo)致的其他損傷,能夠有效地改善患者的預(yù)后。腦脊液細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)是監(jiān)測(cè)腦脊液中是否存在異常細(xì)胞的常規(guī)檢測(cè)方法,流式細(xì)胞術(shù)可提高腦脊液的檢測(cè)準(zhǔn)確度。有研究表明[2],流式細(xì)胞術(shù)可以提高診斷效率和準(zhǔn)確率,可以快速準(zhǔn)確地鑒別與診斷良惡性淋巴瘤。腦脊液檢測(cè)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病的診斷中有較好的應(yīng)用,能提高中樞神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病診斷的準(zhǔn)確性[3-4],而流式細(xì)胞術(shù)用于檢測(cè)腦脊液中的腫瘤細(xì)胞可以提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文欲探討腦脊液流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)應(yīng)用于PCNSL診斷中的價(jià)值。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年2月—2019年10月達(dá)州市中心醫(yī)院收治的診斷為PCNSL的56例患者作為觀察組。2018年2月—2021年10月診斷為中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的60例患者作為對(duì)照組。觀察組患者均經(jīng)病理學(xué)檢查確診為原發(fā)性PCNSL,且既往無(wú)鞘注化學(xué)治療史。對(duì)照組患者納入標(biāo)準(zhǔn)為未合并淋巴結(jié)感染。兩組患者均排除累及其他部位淋巴瘤侵犯者及基礎(chǔ)狀況較差無(wú)法配合研究治療者。所有入組患者均對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書(shū)。本研究符合并通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。觀察組:男38例,女18例,年齡23～65歲,平均年齡(55.63±9.23)歲。對(duì)照組:男36例,女24例,年齡29～64歲,平均年齡(53.75±9.73)歲。兩組性別、年齡比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法 (1)取腦脊液:入組患者側(cè)臥于硬板床上,盡量保持背部與床面垂直,將頭彎曲于胸前,抱住雙膝使腰部弓起,從第3、4腰椎間隙穿刺進(jìn)去,垂直進(jìn)針棘間隙與脊柱取腦脊液9ml。(2)流式細(xì)胞術(shù):將3ml腦脊液離心1 500r/min,離心5min。涂片、干燥,進(jìn)行瑞氏染色,放大1 000倍觀察細(xì)胞形態(tài)。調(diào)整細(xì)胞濃度,取離心后的腦脊液標(biāo)本,加入表面標(biāo)志抗體的流式管中,混勻后靜置15min,加入1ml磷酸鹽緩沖溶液(PBS)沖洗、混勻、然后繼續(xù)離心5min,轉(zhuǎn)速1 000r/min,棄上清液,使用PBS洗滌2 次。使用 Becton-Dickinson公司 FACSDiva Version 6.1軟件進(jìn)行分析。(3)腦脊液常規(guī)檢查包括一般性狀檢查、蛋白定性、細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類。將腦脊液標(biāo)本低溫離心2 000r/min,離心10min,收集上清液保存,-80℃。腦脊液蛋白定性檢測(cè)使用苯酚,定量檢測(cè)用磺基水楊酸。使用生化分析儀直接定量測(cè)定腦脊液糖、蛋白、氯的水平,使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)腦脊液中細(xì)胞因子趨化因子配體(CXCL-13)及白細(xì)胞介素(IL)-10濃度。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo) (1)比較兩組患者的腦脊液細(xì)胞學(xué)、腦脊液有核細(xì)胞數(shù)以及腦脊液糖、蛋白、氯、CXCL-13、IL-10的水平。(2)IL-10診斷原發(fā)性PCNSL的價(jià)值分析。

2 結(jié)果

2.1 原發(fā)性PCNSL腦脊液流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果 56例原發(fā)性PCNSL患者中,腦脊液中淋巴瘤細(xì)胞占比為33.93%(19/56)。

2.2 兩組腦脊液生化檢測(cè)結(jié)果比較 觀察組腦脊液蛋白高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩組腦脊液糖、氯比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見(jiàn)表1。

表1 兩組腦脊液生化檢測(cè)結(jié)果比較

2.3 兩組細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果比較 觀察組腦脊液CXCL-13表達(dá)陽(yáng)性率及腦脊液中IL-10含量均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 兩組細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果比較

2.4 腦脊液蛋白和IL-10聯(lián)合診斷原發(fā)性PCNSL的價(jià)值分析 腦脊液蛋白和IL-10聯(lián)合診斷原發(fā)性PCNSL的ROC曲線下面積為0.845,標(biāo)準(zhǔn)誤為0.001,95%置信區(qū)間0.672～0.853,靈敏度和特異度為84.32%和92.13%。

3 討論

原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤(PCNSL)進(jìn)展迅速,病程兇險(xiǎn),而且預(yù)后很差。近年來(lái),PCNSL發(fā)病率呈增長(zhǎng)趨勢(shì),而且其治療結(jié)果依賴于診斷,早期PCNSL治療結(jié)果及預(yù)后均較好[5-6]。由于PCNSL患者的主要臨床癥狀比較隱匿,進(jìn)展到后期會(huì)表現(xiàn)為明顯的精神癥狀改變,顱內(nèi)壓增高及局部的壓迫癥狀,但是早期癥狀不明顯,導(dǎo)致大部分PCNSL患者就診時(shí)已處于晚期[7-8]。顱腦影像學(xué)檢查也無(wú)法明確診斷早期PCNSL[9-10],其他藥物的使用也會(huì)降低活檢檢出率,活檢檢測(cè)會(huì)對(duì)患者的腦組織有一定程度的創(chuàng)傷,而且還有較高的誤診率[11-13]。因此,急需輔助診斷PCNSL的診斷方法。

本文結(jié)果顯示,觀察組患者腦脊液中淋巴瘤細(xì)胞占比為33.9%,因腦脊液中直接發(fā)現(xiàn)淋巴瘤細(xì)胞是診斷PCNSL的直接依據(jù),顯示流式細(xì)胞術(shù)用于PCNSL診斷中有較好的診斷價(jià)值。本文結(jié)果還顯示,PCNSL患者腦脊液CXCL-13表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(P<0.05),且觀察組陽(yáng)性率為100.00%。CXCL-13屬于趨化因子家族成員之一,能夠輔助促進(jìn)輔助性T細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的成熟,在免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用,它能夠促進(jìn)惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移,因此在惡性腫瘤中含量較高。有研究顯示,PCNSL患者的腦脊液中CXCL-13含量為100%,與本文結(jié)果一致[14]。

本文結(jié)果顯示,觀察組腦脊液蛋白高于對(duì)照組(P<0.05)。原因?yàn)镻CNSL會(huì)引起腦脊液蛋白循環(huán)通路梗阻,然后導(dǎo)致蛋白的含量增加。本文腦脊液生化檢測(cè)顯示,兩組腦脊液糖、氯含量比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。觀察組腦脊液中IL-10含量高于對(duì)照組(P<0.05)。IL-10主要參與免疫應(yīng)答和炎癥介導(dǎo),能夠從一定程度上促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng),然后抑制腫瘤細(xì)胞凋亡。通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞與其他細(xì)胞之間的相互作用,可以為腫瘤侵襲其他組織提供有利的環(huán)境。在淋巴瘤中,腫瘤細(xì)胞的自分泌導(dǎo)致IL-10含量高,使IL-10可作為診斷PCNSL的依據(jù)[15]。

綜上所述,在PCNSL的診斷中可以通過(guò)腦脊液流式細(xì)胞術(shù)聯(lián)合腦脊液測(cè)定盡早監(jiān)測(cè)并輔助診斷,以期進(jìn)行早期干預(yù)來(lái)降低疾病的病死率,改善預(yù)后。