郭愛(ài)榮，邱瑞敏，王凱

（1.南陽(yáng)市第二人民醫(yī)院輸血檢驗(yàn)科；2.甲狀腺乳腺外科，河南 南陽(yáng) 473000）

自身免疫性甲狀腺疾病是指機(jī)體對(duì)自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)，導(dǎo)致自身甲狀腺組織受損，從而引起各類(lèi)癥狀的疾病，常見(jiàn)的疾病類(lèi)型包括橋本甲狀腺炎（Hashimoto thyroiditis，HT）、毒性彌漫性甲狀腺腫（Grave）及萎縮性甲狀腺炎（Atrophic thyroiditis，AT）等[1-2]。本病主要由于自身抗原異常、免疫調(diào)節(jié)異常、遺傳、內(nèi)源性等因素造成，臨床癥狀主要表現(xiàn)為發(fā)熱、脫發(fā)、乏力及口腔潰瘍等，常伴有輕度蛋白尿甚至是并發(fā)腎病綜合征[3]，給患者的生命安全和生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響。目前，臨床上主要通過(guò)自身免疫性甲狀腺疾病的自身抗體來(lái)診斷疾病，其中抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體（Anti-thyroid peroxidase antibody，TPOAb）[4]是本病的主要抗體，作為一種糖蛋白，其水平的變化與甲狀腺功能的損傷有關(guān)[5]，對(duì)疾病的診斷有較好的參考價(jià)值。子宮珠蛋白相關(guān)蛋白1 (Uterine globin associated protein1，UGRP1)是一種功能尚未完全明確的分泌蛋白，在正常甲狀腺組織中有少量表達(dá)[6]。既往研究顯示，UGRP1 在甲狀腺組織中有少量表達(dá)，是甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子的下游靶基因，可能參與Grave 的發(fā)病過(guò)程[7]。因此，本文旨在探討并分析UGRP1 聯(lián)合TPOAb 定量檢測(cè)在自身免疫性甲狀腺疾病診斷中的應(yīng)用?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性選取2020 年2 月至2021年2 月在本院確診的52 例自身免疫性甲狀腺疾病患者作為觀(guān)察組，根據(jù)病因不同分為毒性彌漫性甲狀腺腫（Grave）組30 例，橋本甲狀腺炎（HT）組22 例，另選同期在本院收治的42 例非自身免疫性甲狀腺疾病患者作為對(duì)照組。男20 例，女74例，年齡32～53 歲，平均（42.51±3.54）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合自身免疫性甲狀腺疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)通過(guò)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）存在其他甲狀腺疾病患者；（2）存在惡性腫瘤患者；（3）存在其他心、肺等嚴(yán)重器官疾病患者；（4）存在多種免疫性疾病患者；（5）存在精神疾病者；（6）臨床資料不完整者。Grave 組男7 例，女23 例，年齡32～53 歲，平均（42.63±3.70）歲；HT 組男5 例，女17 例，年齡32～53 歲，平均（42.44±3.31）歲；對(duì)照組男8 例，女34 例，年齡32～53 歲，平均（42.46±3.26）歲。通過(guò)電子病歷系統(tǒng)收集所有患者的資料，包括年齡、性別、學(xué)歷、甲狀腺種類(lèi)、遺傳史等。

1.2 檢測(cè)方法 提前告知所有患者在采血之前需禁食禁飲8 h 以上，在清晨空腹采集所有患者靜脈血3 mL 放入無(wú)抗凝劑的一次性真空采血管中備用，靜置30 min 后離心并分離血清（3 000 r/min，10 min），離心機(jī)購(gòu)自廣州吉迪儀器有限公司，將分離后得到的血清置入-20℃條件下保存?zhèn)溆?。采用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法檢測(cè)TPOAb，儀器為美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司的UniCel DxI800 全自動(dòng)免疫分析儀及其配套的試劑盒。UGRP1 采用酶聯(lián)免疫吸附法 （Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)，試劑和試劑盒均購(gòu)自武漢博歐特生物科技有限公司。將上層血清放入標(biāo)記試管中，采用放射免疫分析法檢查觀(guān)察組患者的總?cè)饧谞钕僭彼?（Total triiodothyronine，TT3）、血清總甲狀腺素（Serum total thyroxine，TT4）、游離三碘甲狀腺原氨酸（Free triiodothyronine，F(xiàn)T3）、游離甲狀腺素（Free thyroxine，F(xiàn)T4）和促甲狀腺激素(Thyroid-stimulating hormone，TSH)水平，儀器為HH6003 型γ 放射免疫分析儀(放射檢測(cè)儀)，購(gòu)自上海何亦儀器儀表有限公司，試劑和試劑盒來(lái)自武漢楚銳科藥業(yè)科技有限公司。所有檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，滿(mǎn)足正態(tài)分布且方差齊的計(jì)量資料采用（±s）表示，采用單因素方差分析比較組間差異，計(jì)數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗(yàn)，采用受試者工作曲線(xiàn)(Receiver operating characteristic curve，ROC)分析UGRP1、TPOAb 水平對(duì)自身免疫性甲狀腺疾病的診斷價(jià)值，采用Pearson 分析樣本間的關(guān)系，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組患者的一般資料比較 三組患者的年齡、性別、學(xué)歷水平、遺傳史、不良的生活方式等一般資料無(wú)顯著差異（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 三組患者的一般資料比較（n，%）

2.2 三組患者的TT3、TT4、FT3、FT4、TSH 比較 HT組、Grave 組患者的TT3、TT4、FT3、FT4 水平均顯著低于對(duì)照組，TSH 水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），HT 組與Grave 組的TT3、TT4、FT3、FT4 水平比較無(wú)顯著差異（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 患者的TT3、TT4、FT3、FT4、TSH 比較（±s）

表2 患者的TT3、TT4、FT3、FT4、TSH 比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05。

組別nTT3（nmol/L）TT4（nmol/L）FT3（pmol/mL）FT4（pmol/mL）TSH（mU/L）對(duì)照組Grave 組HT 組42 30 22 FP 3.46±1.31 1.24±0.35a 1.17±0.26 71.056＜0.001 76.49±4.17 60.47±5.52a 58.46±4.21 154.007＜0.001 5.81±1.29 2.48±1.03a 2.36±1.11 96.831＜0.001 14.28±2.57 8.59±1.17a 7.64±1.25 115.795＜0.001 8.46±1.60 13.41±2.05a 14.53±2.62 85.782＜0.001

2.3 三組患者的UGRP1、TPOAb 水平比較 HT 組和Grave 組的UGRP1、TPOAb 水平均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），HT 組和Grave 組的UGRP1、TPOAb水平比較無(wú)顯著差異（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表3 三組患者的UGRP1、TPOAb 水平比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05。

組別n對(duì)照組Grave 組HT 組42 30 22 FP UGRP1（g/L）2.74±0.59a 3.68±0.73 4.67±0.92 51.811＜0.001 TPOAb（IU/mL）24.35±2.37a 38.36±5.21 40.27±6.32 126.184＜0.001

2.4 UGRP1、TPOAb 水平與甲狀腺功能的相關(guān)性分析 UGRP1、TPOAb 水平與甲狀腺功能呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.377、-0.407，P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 UGRP1、TPOAb 水平與甲狀腺功能的相關(guān)性分析

2.5 UGRP1、TPOAb 水平預(yù)測(cè)自身免疫性甲狀腺疾病的ROC 曲線(xiàn) UGRP1 在預(yù)自身免疫性甲狀腺疾病患者的ROC 曲線(xiàn)下的面積 （AUC）為0.773，95%CI 為0.677 ～0.869；TPOAb 的AUC 為0.813，95%CI 為0.726～0.901，聯(lián)合檢測(cè)的AUC 為0.898，95%CI 為0.833～0.962。見(jiàn)表5、圖1。

表5 UGRP1、TPOAb 水平診斷自身免疫性甲狀腺疾病的ROC 特征

圖1 UGRP1、TPOAb 水平預(yù)測(cè)自身免疫性甲狀腺疾病的ROC 曲線(xiàn)

3 討論

自身免疫性甲狀腺疾病是一種常見(jiàn)的特異性免疫性疾病，在患者血清中可檢出針對(duì)甲狀腺抗原的自身抗體包括甲狀球蛋白抗體和甲狀腺微粒體抗體等，導(dǎo)致患者甲狀腺腺體被自身抗體破壞，從而發(fā)生甲狀腺功能亢進(jìn)或減退[9-10]。近年來(lái)，隨著環(huán)境和生活方式的改變，本病的發(fā)病率呈逐漸上升的趨勢(shì)[11]，且患者早期無(wú)特異性癥狀，到晚期會(huì)出現(xiàn)少汗、心動(dòng)過(guò)緩等，給患者的生命健康造成影響。因此，早期診斷尤為重要，可控制疾病的發(fā)展，有效改善預(yù)后。目前，對(duì)于診斷本病的方法尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。TPOAb 是甲狀腺重要的抗體之一，與甲狀腺功能密切相關(guān)[12]。UGRP1 基因區(qū)域已被證實(shí)含有自身免疫甲狀腺疾病易感基因的位點(diǎn)，對(duì)疾病診斷中發(fā)揮重要作用[13]。為此，本文主要探究?jī)煞N表達(dá)水平在自身免疫甲狀腺疾病中的診斷價(jià)值，以期為臨床選擇合適檢測(cè)指標(biāo)提供參考依據(jù)。

TPOAb 是自身免疫甲狀腺疾病發(fā)生后自身免疫反應(yīng)的標(biāo)志物之一，當(dāng)甲狀腺的結(jié)構(gòu)受到破壞后，導(dǎo)致甲狀腺過(guò)氧化物酶 （Thyroid Peroxidase，TPO）被阻隔在甲狀腺細(xì)胞的頂端，并不斷向外周血滲入，使免疫系統(tǒng)遭到刺激從而產(chǎn)生TPOAb。TPOAb 在患者體內(nèi)可對(duì)甲狀腺濾泡造成損傷，從而使甲狀腺功能減退[14-16]。而TPO 會(huì)對(duì)甲狀腺球蛋白的識(shí)別作用產(chǎn)生影響，與TPOAb 結(jié)合后會(huì)抑制甲狀腺素的合成，進(jìn)而在負(fù)反饋的作用下導(dǎo)致TSH 水平升高，TT3、TT4、FT3、FT4 水平的降低。本研究中，HT 組、Grave 組患者的TT3、TT4、FT3、FT4水平均顯著低于對(duì)照組，TSH 水平顯著高于對(duì)照組，提示自身免疫性甲狀腺疾病患者甲狀腺功能的減退可能與TPOAb 水平的異常增多有關(guān)。TSH是由腺垂體分泌的激素，主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)甲狀腺細(xì)胞的增殖、甲狀腺血液供應(yīng)以及甲狀腺激素的合成和分泌，在維持甲狀腺正常功能中發(fā)揮重要作用。當(dāng)甲狀腺功能受損后，導(dǎo)致甲狀腺激素合成分泌不足，進(jìn)而引起TSH 水平上升[17]。因HT 患者上皮細(xì)胞含有大量的甲狀腺表面抗原，經(jīng)誘導(dǎo)后形成抗甲狀腺球蛋白抗體，TPOAb 可與表面抗原結(jié)合，導(dǎo)致甲狀腺功能減退，此時(shí)UGRP1 具有高表達(dá)，說(shuō)明UGRP1、TPOAb 水平與甲狀腺功能呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，與本研究結(jié)果部分類(lèi)似，提示可從UGRP1、TPOAb 水平變化推測(cè)患者甲狀腺功能的變化。

TPOAb 可參與T 淋巴細(xì)胞的活化過(guò)程，具有細(xì)胞毒性作用，會(huì)導(dǎo)致甲狀腺素的合成減少，造成甲狀腺功能減退，且不同自身免疫甲狀腺疾病患者的TPOAb 水平存在一定差異。因此在自身免疫甲狀腺疾病的分類(lèi)中，TPOAb 水平的變化具有一定參考價(jià)值。UGRP1 基因位于Grave 的易感區(qū)域內(nèi)，且是甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 （Thyroid transcription factor，TTF1）的下游靶基因，TTF1 通過(guò)反式作用使UGRP1 啟動(dòng)子激活，而TTF1 可調(diào)控甲狀腺特異性基因[18-19]。此外，UGRP1 具有較好的抗炎作用[20]，當(dāng)甲狀腺功能減退時(shí)，TPOAb 水平顯著升高，此時(shí)TTF1 隨之升高，導(dǎo)致UGRP1 呈現(xiàn)高表達(dá)。故推測(cè)UGRP1 可能通過(guò)誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)在自身免疫性甲狀腺疾病中發(fā)揮重要作用。本研究中，Grave 組和HT組的TPOAb、UGRP1 顯著高于對(duì)照組，推測(cè)自身免疫甲狀腺疾病患者的TPOAb、UGRP1 水平存在異常升高，可能與患者機(jī)體的炎癥反應(yīng)及免疫功能有關(guān)。ROC 結(jié)果顯示，TPOAb、UGRP1 對(duì)自身免疫性甲狀腺疾病的診斷價(jià)值較高，其聯(lián)合檢測(cè)的價(jià)值更高，說(shuō)明UGRP1 聯(lián)合TPOAb 可作為自身免疫性甲狀腺疾病有效的檢測(cè)因子。

綜上所述，UGRP1 聯(lián)合TPOAb 檢測(cè)自身免疫性甲狀腺疾病的價(jià)值較高，可有效評(píng)估患者病情的發(fā)展，值得在臨床上廣泛推廣應(yīng)用。