孫 偉，王 煒

（臨沂市皮膚病醫(yī)院，山東 臨沂 276004）

生殖器皰疹是臨床上常見(jiàn)的病毒性疾病，具有病情進(jìn)展緩慢及復(fù)發(fā)率高等特點(diǎn)。現(xiàn)階段，該病已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)的性傳播疾病[1]。單純皰疹病毒屬于嗜神經(jīng)DNA 雙鏈病毒，包括1 型單純皰疹病毒及2 型單純皰疹病毒，前者經(jīng)口傳播，可誘發(fā)口唇皰疹，后者則主要通過(guò)性行為傳播，兩者均可誘發(fā)生殖器皰疹。單純皰疹病毒可導(dǎo)致人體感染梅毒螺旋體及人類(lèi)免疫缺陷病毒的風(fēng)險(xiǎn)顯著升高，同時(shí)還可與人乳頭瘤病毒協(xié)同作用導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)升高。盡早對(duì)生殖器皰疹進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷對(duì)控制單純皰疹病毒的傳播有重要意義，并且還能夠有效降低其危害性[2-3]。現(xiàn)階段，常用的生殖器皰疹實(shí)驗(yàn)室診斷方法包括血清抗體檢測(cè)、細(xì)胞培養(yǎng)、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)、抗原檢測(cè)等，這些方法均具有一定的優(yōu)缺點(diǎn)[4-5]。本文特就酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）及PCR 法在生殖器皰疹病毒抗原檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行探討和分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2017 年1 月至2022 年10 月在我院進(jìn)行診治的疑似生殖器皰疹患者87 例，包括男性47 例、女性40 例，患者年齡范圍為20 ～77 歲，年齡平均值為（45.36±3.09）歲。醫(yī)院倫理委員會(huì)審核并批準(zhǔn)了此次研究方案。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）初次發(fā)?。唬?）生殖器、外陰皮膚或?qū)m頸黏膜存在潰瘍、糜爛、水皰、紅斑等情況，局部存在刺痛或瘙癢感；（3）患者對(duì)本次研究知情且能夠積極配合各項(xiàng)檢查。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）近期服用過(guò)抗病毒藥物或抗生素者；（2）接受病損部位外用藥物治療者；（3）有溝通障礙或精神疾病者；（4）合并嚴(yán)重內(nèi)科疾病者。

1.2 方法

針對(duì)臨床癥狀不明顯或無(wú)臨床癥狀者采取以下方法進(jìn)行標(biāo)本采集：男性患者于尿道口內(nèi)1 ～3 cm 取材（確保采集前2 h 內(nèi)未排尿），女性患者于宮頸口內(nèi)1 ～3 cm 取材。有水膿皰者：將水膿皰夾破后應(yīng)用無(wú)菌拭子采集皰液，然后以拭子對(duì)潰瘍面進(jìn)行摩擦。潰瘍性皮損者：以無(wú)菌拭子對(duì)潰瘍基底面用力摩擦，以盡可能多地采集深部滲出液及潰瘍面細(xì)胞。結(jié)痂性破損者：祛痂后將滲出液擠出，然后放置于移送液中。樣本采集完成后將拭子置入蔗糖- 磷酸鹽培養(yǎng)基中，并妥善保存（4℃）。盡早實(shí)施檢測(cè)，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行各項(xiàng)檢測(cè)。單純皰疹病毒檢測(cè)試劑盒（1 型及2 型）均由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)。應(yīng)用ELISA 試劑盒（產(chǎn)自丹麥DAKO 公司）進(jìn)行生殖器皰疹病毒抗原ELISA 檢測(cè)，應(yīng)用PCR 檢測(cè)試劑盒（由廈門(mén)泰普生物科技有限公司生產(chǎn)）進(jìn)行生殖器皰疹病毒抗原PCR 檢測(cè)，檢測(cè)過(guò)程均需嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)相關(guān)步驟進(jìn)行操作。若兩種檢測(cè)方法檢測(cè)的結(jié)果存在不一致現(xiàn)象，則應(yīng)用單純皰疹病毒通用引物進(jìn)行分析。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）對(duì) 比ELISA 法 及PCR 法 對(duì)HSV-1 感 染、HSV-2 感染、混合感染的檢出情況。（2）以病毒培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，分析ELISA 法檢測(cè)及PCR法檢測(cè)對(duì)生殖器皰疹的診斷效能（靈敏度、準(zhǔn)確度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法

采用SPSS 23.0 軟件分析文中正態(tài)分布的數(shù)據(jù)資料，計(jì)量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較兩種檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果

兩種檢測(cè)方法對(duì)HSV-1 感染、HSV-2 感染、混合感染的檢出率以及總陽(yáng)性檢出率的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩種檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果的對(duì)比[例（%）]

2.2 分析對(duì)比ELISA 法檢測(cè)及PCR 法檢測(cè)對(duì)生殖器皰疹的診斷效能

以病毒培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，ELISA 法檢測(cè)與PCR 法檢測(cè)診斷生殖器皰疹靈敏度、準(zhǔn)確度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2 ～表4。

表2 分析ELISA 法檢測(cè)的價(jià)值（例）

表3 分析PCR 法檢測(cè)的價(jià)值（例）

表4 對(duì)比ELISA 法檢測(cè)及PCR 法檢測(cè)對(duì)生殖器皰疹的診斷效能[%( 例)]

3 討論

生殖器皰疹是一種常見(jiàn)的性傳播疾病，具有慢性、周期復(fù)發(fā)性以及治愈難度大等特點(diǎn)。部分此病患者無(wú)典型臨床癥狀，免疫功能低下者病情呈周期性復(fù)發(fā)，積極配合藥物治療并有效增強(qiáng)自身免疫力對(duì)于控制病情復(fù)發(fā)有重要意義[6-7]。與非生殖器皰疹病毒感染患者相比，生殖器皰疹病毒感染患者感染艾滋病病毒的風(fēng)險(xiǎn)顯著升高，故而有必要加強(qiáng)生殖器皰疹病毒感染的早期診斷，以便及時(shí)采取針對(duì)性的干預(yù)措施[8]。病毒培養(yǎng)法為生殖器皰疹診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但是該診斷方法存在用時(shí)長(zhǎng)以及病毒分離成功率低等缺點(diǎn)，不但操作復(fù)雜且對(duì)操作人員技能水平的要求較高。因此，其臨床推廣難度較高，難以滿(mǎn)足臨床需求。除此之外，該檢測(cè)方法受病毒培養(yǎng)條件以及標(biāo)本采集和保存等多種因素的影響，不具備成為常規(guī)檢驗(yàn)方法的條件。病毒抗原及抗體檢測(cè)在生殖器皰疹診斷中應(yīng)用廣泛，而病毒抗原及抗體檢測(cè)結(jié)果易受到檢測(cè)試劑穩(wěn)定性、重復(fù)性、特異性、敏感性等因素的影響。選擇合理的檢測(cè)方法對(duì)于提高疾病檢出率以及有效降低漏診率和誤診率有重要意義?；颊吒腥旧称靼捳畈《竞驣gM、IgG 抗體產(chǎn)生的時(shí)間及抗體滴度的個(gè)體關(guān)聯(lián)性較強(qiáng)，不同個(gè)體存在較大的差異，抗體檢測(cè)陽(yáng)性檢出率相對(duì)較低；因此，相關(guān)抗體檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值不高[9]。ELISA 法及PCR 法在生殖器皰疹病毒抗原檢測(cè)中均有著較為廣泛的應(yīng)用。其中，ELISA 法檢測(cè)生殖器皰疹病毒抗原能夠直接檢出泌尿生殖道及皮損部位的病原體，在生殖器皰疹篩查和診斷中的應(yīng)用價(jià)值較高。PCR 法能夠保證分型及定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性，而且操作步驟少，檢測(cè)速度較快。此次研究中，兩種檢測(cè)方法對(duì)HSV-1 感染、HSV-2 感染、混合感染的檢出率以及總陽(yáng)性檢出率的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。以病毒培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，ELISA 法檢測(cè)與PCR 法檢測(cè)診斷生殖器皰疹靈敏度、準(zhǔn)確度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。可見(jiàn)，ELISA 法及PCR 法在生殖器皰疹病毒抗原檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值均較高。但有研究指出，ELISA 法檢測(cè)成本更低，實(shí)用性更強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)快速，更加適合臨床推廣應(yīng)用。PCR 檢測(cè)法對(duì)操作者操作技術(shù)的要求較高，操作者必須經(jīng)過(guò)系統(tǒng)規(guī)范的培訓(xùn)方可上崗，而且對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求較高，存在較高的假陰性和假陽(yáng)性風(fēng)險(xiǎn)[10]。

綜上所述，ELISA 法及PCR 法在生殖器皰疹病毒抗原檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值均較高。其中，ELISA 法屬于在臨床上有著廣泛應(yīng)用的檢測(cè)方法，檢測(cè)技術(shù)成熟，而且對(duì)檢測(cè)儀器以及實(shí)驗(yàn)操作環(huán)境沒(méi)有特殊要求，操作簡(jiǎn)單且能夠迅速出具檢測(cè)結(jié)果，同時(shí)還具有經(jīng)濟(jì)、實(shí)用等特點(diǎn)，更加適合在基層醫(yī)院進(jìn)行推廣和應(yīng)用。