敦 康，付 莉，王若琳

（1.河北省藥品審評中心，河北 石家莊 050091 ；2.河北科技大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院，河北 石家莊 050018）

桂利嗪的化學(xué)分子式為C26H28N2，其分子結(jié)構(gòu)式如圖1 所示。桂利嗪片與許多藥物聯(lián)合使用時，其藥效會根據(jù)聯(lián)合用藥的不同而發(fā)生變化。例如，與催眠藥或鎮(zhèn)靜藥聯(lián)合使用時會增加鎮(zhèn)靜的作用；與苯妥英鈉、卡馬西平聯(lián)合使用時會降低桂利嗪片的血藥濃度；接受放射治療的患者聯(lián)合使用桂利嗪片會提高放射線對腫瘤細(xì)胞的殺傷力；與抗癲癇藥物聯(lián)合使用可以提高抗癲癇效果。桂利嗪片可治療多種疾病。此藥是一種鈣通道阻滯劑，可通過阻止血管平滑肌鈣內(nèi)流促使血管擴張，從而改善腦部供血，屬于周圍血管擴張藥。桂利嗪片能緩解血管痙攣，其解痙作用比罌粟堿強，但鎮(zhèn)靜作用不明顯。此藥還能改善前庭微循環(huán)，保護(hù)心肌，減輕心肌缺血性損傷。目前，臨床上多使用桂利嗪片治療腦血管疾病，如腦血栓、腦動脈硬化、血管性偏頭痛等[1-7]。最新的研究表明，桂利嗪片在抗曼氏血吸蟲[8]、治療新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）相關(guān)凍瘡樣病變[9]等領(lǐng)域也能取得一定的療效，發(fā)揮“舊藥治新病”的作用。溶出度是指片劑等口服固體制劑在規(guī)定溶劑中溶出的速度和程度，該數(shù)據(jù)可以準(zhǔn)確體現(xiàn)口服固體制劑的生物吸收性能。體外溶出試驗中通常選擇三、四種溶出介質(zhì)，并繪制溶出曲線進(jìn)行考察，以評價口服固體制劑的內(nèi)在質(zhì)量。本文按照2020 年版《中華人民共和國藥典》四部通則中的溶出度測定方法[10]進(jìn)行桂利嗪片仿制藥的溶出試驗，采用紫外- 可見分光光度法測定溶出度，并繪制溶出曲線，以期為完善該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

圖1 桂利嗪結(jié)構(gòu)式

1 儀器與試藥

1.1 儀器

TU-1901 型紫外- 可見分光光度儀（北京普析通用儀器公司）；SOTAX AT 7 smart 溶出試驗儀（美國SOTAX 公司）；XS105 型電子天平（瑞士Mettler-Toledo 公司）。

1.2 試藥

桂利嗪片仿制藥（三個廠家）；磷酸二氫鉀、氫氧化鈉、醋酸鈉、鹽酸、醋酸、乙酸銨、冰醋酸均為分析純，乙腈為色譜純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出和測定方法的選擇

參照《中華人民共和國藥典》2020 版（通則0931 溶出度與釋放度測定法 第一法）和桂利嗪片劑項下的溶出度測定方法，選擇籃法，轉(zhuǎn)速為100 r/min，介質(zhì)體積為900 mL。取不同介質(zhì)條件下的溶出液10 mL，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL，置于10 mL 量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按照紫外-可見分光光度法（通則0401），在253 nm的波長處測定吸光度，以吸收系數(shù)法計算溶出量。桂利嗪為堿性化合物，而鹽酸溶液（pH 1.0）、醋酸鹽緩沖液（pH 4.0）、磷酸鹽緩沖液（pH 6.8）、水這四種溶出介質(zhì)為堿性化合物考察溶出曲線時常規(guī)采用的溶出介質(zhì)，同時參照仿制藥質(zhì)量一致性評價- 普通固體口服制劑溶出度試驗技術(shù)指導(dǎo)原則，桂利嗪片溶出度的測定選擇這四種溶出介質(zhì)。在取樣時間上，考慮到制劑在上述四種不同介質(zhì)中的溶出速率不同，我們將這四種介質(zhì)的溶出時間均做了相同的延長以方便比對，溶出時間定為5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min。

2.2 溶出介質(zhì)的制備

鹽酸溶液（pH 1.0）的制備：取鹽酸9 mL，加水稀釋至1000 mL，即得。醋酸鹽緩沖液（pH 4.0）的制備：取醋酸鈉1.22 g，加2 mol/L 醋酸溶液20.5 mL，加水稀釋至1000 mL，即得。磷酸鹽緩沖液（pH 6.8）的制備：取0.2 mol/L 磷酸二氫鉀溶液250 mL 和0.2 mol/L 氫氧化鈉溶液112 mL，加水至1000 mL，即得。水為純化水。

2.3 供試品溶液

取樣品適量，按2.1 項下的溶出測定方法，分別以pH 1.0 鹽酸溶液、pH 4.0 醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液和水作為溶出介質(zhì)，體積為900 mL，轉(zhuǎn)速為100 r/min，溫度為37.0 ℃，分別于不同時間點各取樣10 mL，不進(jìn)行補液操作，以0.45 μm 濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.4 四條溶出曲線的測定

按照2.2 中的方法分別配置pH 1.0 的鹽酸溶液、pH 4.0 的醋酸鹽緩沖液、pH 6.8 的磷酸鹽緩沖液和水作為溶出介質(zhì)，按照2.1 中的試驗方法，取3 個廠家的樣品各12 片，依照上述方法進(jìn)行操作，分別經(jīng)5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min 取樣，按照2.1 中的檢測方法進(jìn)行檢測。

2.5 濾膜吸附試驗

分別取“2.3”項下的四種溶出介質(zhì)制備的供試品溶液適量，不濾過直接測定；再經(jīng)過0.45 μm 濾膜濾過，棄去3 mL 濾液，取續(xù)濾液，在253 nm 波長處分別測定吸光度。結(jié)果表明，四種供試品溶液經(jīng)濾膜濾過后，與濾過前測定結(jié)果相比無差異，說明0.45 μm 濾膜對桂利嗪基本沒有吸附作用。

2.6 溶出曲線的繪制

取三批桂利嗪片劑樣品，每批12 片，按“2.3”項下的方法制備供試品溶液，在253 nm 波長處測定吸光度，分別繪制溶出曲線，結(jié)果見圖2 和圖3。桂利嗪在堿性條件和水中無溶出行為。

圖2 桂利嗪片在pH 1.0 鹽酸溶液中的溶出曲線

圖3 桂利嗪片在pH 4.0 醋酸鹽緩沖液中的溶出曲線

3 討論

桂利嗪片是一種鈣通道阻滯劑，能顯著增加腦血流量，改善腦循環(huán)及冠狀動脈循環(huán)，抑制血管活性物質(zhì)，對腦動脈硬化、高血壓導(dǎo)致的腦循環(huán)障礙、蛛網(wǎng)膜下腔出血等均有較好的治療作用。此外，桂利嗪片還能改善暈動癥患者的頭暈、耳鳴等癥狀，并在不影響心率和耗氧量的情況下增加冠狀動脈血流量和心輸出量。溶出度是指片劑等口服固體制劑的溶出速度和程度，它是口服固體制劑質(zhì)量控制的一個重要指標(biāo)。分析桂利嗪片在本研究中四種溶出介質(zhì)中的溶出行為，發(fā)現(xiàn)其以水為介質(zhì)時為難溶片劑。桂利嗪片屬于pH 依賴型藥物，其溶出量會隨著pH 的升高而減少，甚至完全不溶出。本研究嘗試延長溶出時間，結(jié)果也未改變桂利嗪片的溶出行為。在醋酸鹽緩沖液中，桂利嗪片隨著溶出時間的延長，溶出量逐漸增加，但隨著時間的延長增加逐漸緩慢。

對桂利嗪溶出效果有影響的因素包括制劑的包衣成分、片劑本身的硬度、脆碎度、崩解時限、聯(lián)合用藥情況及其他輔料的影響等。輔料有時會明顯影響桂利嗪的吸收效果，如臨床上使用桂利嗪的同時聯(lián)合使用分子結(jié)構(gòu)較大的表面活性劑，就會加快桂利嗪的溶解速度。本研究中采用四種不同pH 值的溶出介質(zhì)及三批不同廠家的桂利嗪片樣品進(jìn)行溶出試驗，并分別繪制溶出曲線，試驗數(shù)據(jù)表明，三批桂利嗪片樣品在四種不同pH 值溶出介質(zhì)中的溶出曲線走形相似，說明三批樣品的生產(chǎn)工藝對質(zhì)量的控制基本無差異，三批桂利嗪片劑的制備工藝較為成熟穩(wěn)定。桂利嗪片屬于pH 依賴型片劑，在水中難溶，pH 值升高可導(dǎo)致桂利嗪片的溶出效率降低，即使延長溶出時間也不能改變?nèi)艹鲂实偷男袨?。本研究中，桂利嗪片在磷酸鹽緩沖液和水兩種溶出介質(zhì)中均無溶出，而在醋酸鹽緩沖液中很快達(dá)到了80% 的溶出量。但根據(jù)文獻(xiàn)報道的原研藥的溶出曲線，在醋酸鹽緩沖液中，桂利嗪片原研藥在溶出時間達(dá)到6 h 時仍未溶出到80%，這說明國產(chǎn)桂利嗪片與原研制劑在制備工藝上仍有一定的差異。在鹽酸溶液中，此三批桂利嗪片的溶出行為與原研藥差異同樣明顯，這提示我們國產(chǎn)制劑可能在體內(nèi)血藥濃度上與原研制劑會存在差異，因此國產(chǎn)桂利嗪片的制備工藝還有提升的空間。

綜上所述，桂利嗪片在強酸溶液中溶出更完全，溶出曲線更趨近于水平，在堿性和水介質(zhì)中無溶出。本試驗方法能夠有效測出桂利嗪片的體外溶出度，通過繪制溶出曲線能夠直觀體現(xiàn)桂利嗪片的溶出行為，為桂利嗪片廠家改進(jìn)生產(chǎn)工藝提供參考。