摘" " " 要：采用正交實驗法對廣西蘿芙木總生物堿進行了提取工藝的優(yōu)化。實驗結(jié)果表明，廣西蘿芙木總生物堿最佳提取工藝為：提取時間90 min，提取溫度45 ℃，提取溶液pH值=3。在此條件下，蘿芙木浸膏得率為12.13%，總生物堿的提取率為1.23%。該工藝穩(wěn)定可行，具有一定的現(xiàn)實意義，為廣西蘿芙木總生物堿的規(guī)?；a(chǎn)提出了借鑒意義。

關(guān)" 鍵" 詞：廣西蘿芙木；總生物堿；提取工藝

中圖分類號：R284.2" " "文獻標識碼： A" " "文章編號： 1004-0935（2023）02-0184-03

在我國蘿芙木屬植物是重要的傳統(tǒng)中藥材，為夾竹桃科蘿芙木屬［Rauvolfia verticilata（Lour） Baill］植物，又名為三叉虎、美具邊、假辣椒、辣多、麻三端。蘿芙木屬灌木，其高度可達3 m；全株較為光滑，木質(zhì)堅硬，幼枝有著稀疏的皮孔；樹皮一般呈灰棕色或淡棕色；單葉對生或輪生，其形狀為橢圓形或長圓形或稀披針形，四季常綠；果實的形狀為圓形或橢圓形，初為綠色然后變?yōu)榘导t色，最后變成紫黑色，種子具皺紋。蘿芙木屬植物主要分布在熱帶和亞熱帶，僅有少數(shù)存于在溫帶。原產(chǎn)于非洲，在1965年由我國醫(yī)學科學院藥用植物研究所云南分所將其從非洲引種，在我國多分布在兩廣、云南、海南等省區(qū)[1]。

蘿芙木具有降血壓、安定及下瀉等作用。在民間常用其根部治療失眠眩暈與感冒高熱等；用其新鮮葉子治療毒蛇咬傷與治跌打扭傷等；在臨床上常用于治療消腫與解毒，清風熱與降肝火等[2]。

人們對蘿芙木的成分及其生理活性進行研究發(fā)現(xiàn)，其成分基本為吲哚類生物堿，同時也發(fā)現(xiàn)含有少量非吲哚類成分如替巴因和罌粟堿。近年來對蘿芙木生物堿的生理活性的研究不限于降血壓、血糖與血脂及安定的傳統(tǒng)的應用，還發(fā)現(xiàn)其具有抗炎、抗腫瘤、抗氧化和抗菌等多種生理活性[3-6]。從催吐蘿芙木分離出rauvomine B（是一種新型C18正單萜吲哚生物堿）對RAW264.7小鼠巨噬細胞巨噬細胞有明顯的抑制作用[7]。從催吐蘿芙木莖中分離得到的第一個以C-16氯原子為特征的C18型非單萜吲哚生物堿Rauvomine C，對脂多糖誘導的RAW264.7小鼠巨噬細胞產(chǎn)生有明顯的抗炎作用[8]。催吐蘿芙木分離的1-甲基-β-咔啉和洛柯堿對HCT-8和LoVo兩株結(jié)腸癌細胞都有良好增殖抑制活性，其中洛柯堿對LoVo細胞作用最為顯著[9]。野生蛇根木根甲醇提取物對 DPPH·自由基清除率優(yōu)于同濃度的抗壞血酸，其IC50為0.20 μg·mL-1，表明其有較好的抗氧化活性[6]。蘿芙木乙醇提取物可以舒張異常收縮的小鼠離體氣管環(huán)，對其平滑肌的舒張作用[10]。

蘿芙木中生物堿提取工藝優(yōu)化的報道不多，多數(shù)報道在于成分的分析與檢測，現(xiàn)有的提取工藝有機溶用量較大，提取效率較低，難以滿足大量生產(chǎn)需要[11]。為了進一步改進廣蘿芙木總生物堿的提取工藝，參考了瑪咖、雞骨常山根、茶藤、曼陀羅的生物堿的提取方法以及前人對蘿芙木提取方法[12-16]。蘿芙木植物不同部位生物堿的含量是有所不同，一般而言，蘿芙木中單種生物堿以及生物總堿含量為由小到大的順序為：葉、莖、根[11]。采用正交實驗分析方法對蘿芙木根部的總生物堿的提取條件進行探索與優(yōu)化。為此，也為蘿芙木有效成分的分析以及藥理等方面的研究打下一定的基礎(chǔ)。

1" 實驗部分

1.1" 主要的試劑與儀器

1.1.1" 原料與試劑

蘿芙木干根由南寧市華泰中藥飲片有限公司公司提供，產(chǎn)地為廣西；實驗室所用試劑為鹽酸、無水乙醇、甲醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、石油醚（60-90），皆為分析純試劑，購于成都市克隆化學品有限公司；氫氧化鈉，亦分析純試劑，購于國藥集團化學試劑有限公司。

1.1.2" 主要儀器

電子天平（PL203，梅特勒-托利多儀器上海有限公司）；智能磁力攪拌器（ZNCL-TS，鞏義市予華儀器有限責任公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（RE-2000A，鄭州市煜城儀器有限公司）；電熱鼓風干燥箱（BGZ-140，上海博訊實業(yè)有限公司）；循環(huán)水式多用真空泵（SHB-Ⅲ，河南省予華儀器有限公司）。

2" 蘿芙木總生物堿的提取

2.1" 蘿芙木總生物堿的提取工藝流程

稱取50 g干燥蘿芙木藥材，在室溫下用100 mL 90% 酸性乙醇（用10%鹽酸調(diào)節(jié)酸性）浸泡提取3次，將所得提取液合并。所得的提取液由旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在50 ℃下濃縮至蒸干，可得到提取浸膏，等到冷卻至室溫后，稱重而得到浸膏質(zhì)量，進而計算蘿芙木浸膏得率。

向以上所制得的蘿芙木浸膏中加入100 mL蒸餾水進行稀釋與分散，用1％鹽酸溶液進行充分溶解，并將混合液的pH值調(diào)至2～3，經(jīng)過減壓抽濾后得到酸溶液，溶液用100 mL乙酸乙酯多次萃取，除去水溶液中脂溶性的非生物堿部分，再向剩余的水溶液部分加入適量的5%氫氧化鈉溶液，將其pH調(diào)節(jié)至中性，再用100 mL氯仿多次萃取至氯仿層無色，得到的氯仿部分主要為生物堿，將其蒸干至恒重得到總生物堿，稱重并計算蘿芙木總生物堿的得率。

2.2" 正交實驗設(shè)計

將選定的三個因素及每個因素的三個水平（見表1），選用L9（34）正交表進行正交實驗設(shè)計，蘿芙木總生物堿的提取條件參照上述的2.2，由此獲得的蘿芙木提取物的浸膏得率和總生物堿得率。對實驗進行分析，提取時間（A）、提取溫度（B）、提取溶劑pH值（C）這三個因素水平對蘿芙木提取物浸膏得率與總生物堿得率的影響。以蘿芙木總生物堿得率與浸膏得率為綜合評價指標進行考察，綜合指標＝總生物堿得率／總生物堿得率最大值＋浸膏得率／浸膏得率最大值[17]。

3" 結(jié)果與分析

3.1" 正交實驗結(jié)果和方差分析

由表2、表3可見結(jié)果可見，對蘿芙木總生物堿提取的影響因素大小順序分別為提取溫度（B）＞提取溶劑pH值（C）＞提取時間（A），提取溫度影響顯著，提取溫度和提取溶劑pH值影響均不顯著，其中A3＞A2＞A1，B2＞B3＞B1，C2＞C1＞C3。

因此，分析表明最佳的提取工藝為A3B2C2，提取時間為90 min，提取溫度為45 ℃，提取溶液pH值=3。

3.2" 最佳工藝驗證實驗

取3份10 g干燥蘿芙木藥材粉粒，按照優(yōu)化后的提取條件進行實驗，進行平行測定。實驗結(jié)果顯示浸膏平均得率為12.13%，總生物堿平均得率為1.23%，與正交實驗結(jié)果相符，表明本工藝穩(wěn)定，切實可行。

4" 結(jié)論與展望

隨著對蘿芙木成分的藥理及臨床方面的研究深入，蘿芙木的藥用價值將得到進一步的挖掘。蘿芙木中生物堿提取效率需要繼續(xù)探索與優(yōu)化，進而提升原料的利用率。本實驗采用提取時間、提取溫度、提取溶劑pH值這三個因素進行正交試驗優(yōu)化提取工藝，結(jié)果表明其最優(yōu)提取工藝為提取時間為

90 min，提取溫度為45 ℃，提取溶劑pH值=3，浸膏得率為12.13%，總生物堿得率為1.23%，該工藝穩(wěn)定可行，具有一定的現(xiàn)實意義，為廣西蘿芙木總生物堿的規(guī)模化生產(chǎn)提出了借鑒意義。

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Study on the Extraction Process of Total Alkaloids

in Rauwolfia From Guangxi

SU Shao-yang1， ZHAN Ai-ping2， WANG Xiao-ling1， XIANG Wei-hua1， LIU Zhi-ping2

（1. Guangxi Agrigcultural and Technical University， Nanning Guangxi 530007， China;

2. Nanning Normal University， Nanning Guangxi 530001， China）

Abstract：" The extraction process of vtotal alkaloids in Rauwolfiais from Guangxi was optimized by orthogonal experimental method. The results showed that the optimal extraction process of the total alkaloids obtained by the orthogonal test was as follows： the extraction time 90 min， the extraction temperature 45 ℃， and the extraction solution pH value 3. Under above condition， the yield of Rauwolfia vomitoria extract was 12.13%， and the yield of total alkaloids was 1.23%. This process is stable and feasible. It has certain practical significance and provides reference for the large-scale production of total alkaloids from Rauvolfia in Guangxi.

Key words： Rauwolfia from Guangxi; Total alkaloids; Extraction process