杜新雄

（云南省保山市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，保山 678000）

1972 年傅廷棟教授發(fā)現(xiàn)波里馬細(xì)胞質(zhì)雄性不育開啟了世界雜交油菜（Brassica napusL.）利用的先河，促進(jìn)了我國乃至全世界油菜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[1]。雄性不育主要有細(xì)胞質(zhì)不育和細(xì)胞核不育兩種類型，其中細(xì)胞核雄性不育系育性穩(wěn)定、易轉(zhuǎn)育且恢復(fù)源廣，在油菜雜種優(yōu)勢利用中被廣泛應(yīng)用。

油菜隱性細(xì)胞核雄性不育三系育種是繼隱性細(xì)胞核雄性不育兩系育種之后的又一育種新途徑。隱性細(xì)胞核雄性不育三系是指由2 對隱性重疊不育基因s1s1s2s2和1 對隱性上位抑制基因rfrf互作控制的穩(wěn)定不育兩型系、臨時保持系和恢復(fù)系。傳統(tǒng)的雙隱性核不育兩型系是由2 對隱性重疊基因控制，它是通過兄妹交后代育性1∶1 分離來保持，不育株的基因型只有1 種（s1s1s2s2）。而由2 對隱性重疊基因和1 對隱性上位抑制基因互作控制的核不育其不育株基因型有純合型（s1s1s2s2RfRf）和雜合型（s1s1s2s2Rfrf）2 種，只有純合型不育株與臨時保持系（s1s1s2s2rfrf）測交，后代表現(xiàn)為全不育（s1s1s2s2Rfrf）。該不育系具有不育性穩(wěn)定徹底、不受環(huán)境影響、恢復(fù)源廣、轉(zhuǎn)育速度快等特點，理論上能實現(xiàn)不育系的全不育，進(jìn)而克服了傳統(tǒng)隱性核不育二系法制種需人工拔除50%可育株、制種產(chǎn)量較低的缺點，在雜交油菜育種上有廣闊的應(yīng)用前景[2]。

甘藍(lán)型細(xì)胞核雄性不育的主要來源是自然突變[3]。核不育產(chǎn)生的根本原因是花藥發(fā)育異?；ǚ哿o活性，隱性核不育兩系雜交種在生產(chǎn)上的表現(xiàn)很好，但主要問題是在繁殖和制種時需要人工拔除母本中約50%的可育株，不但影響種子的純度，還增加了制種成本。通過臨時保持系把兩系不育系轉(zhuǎn)育為全不育的三系不育系，從而降低制種成本，為甘藍(lán)型油菜隱性核不育系雜種優(yōu)勢應(yīng)用提供技術(shù)支持，提高推廣速度。

1 甘藍(lán)型隱性核不育純合兩型系270AB 的選育

1998 年春季保山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所在從四川引入的優(yōu)質(zhì)油菜材料中發(fā)現(xiàn)2 株天然不育株，用10份優(yōu)質(zhì)常規(guī)組合雜交；1999 年雜交F1全部表現(xiàn)為可育，選取單株套袋自交；2000 年夏季F2均有不育株分離，選可育株套袋10 株；2000 年冬季分株系共種植200 個株行，調(diào)查育性分離比例，在20 個不同來源的株系中，有20 個株系的F3出現(xiàn)了1∶0、15∶1、3∶1 等育性分離比例，而與組合95-4 雜交的F3出 現(xiàn)1∶0、41∶3、15∶1、13∶4、3∶1 等5 種育性分離比例，在育性分離為3∶1 的株行，可育株與不育株測交8 個組合；2001 年有3 個組合為1∶1 育性分離；2002 年夏冬兩季繼續(xù)在1∶1分離株行測交，在2003 年春選育出育性分離穩(wěn)定為1∶1 的隱性核不育純合兩型系，定名為270AB（圖1）。

圖1 270AB 選育經(jīng)過

2 純合兩型系270AB 轉(zhuǎn)育為隱性核不育三系不育系270A°Bb

2003 年用純合兩型系270AB 與6 個常規(guī)材料雜交；F1植株育性包含全可育、15∶1、13∶3、3∶1、全不育5 種分離比例，其中270AB/45-3 雜交F1表現(xiàn)為全不育，用這個組合繼續(xù)與45-3 回交；2004 年種植BC1F1育性表現(xiàn)為全不育，繼續(xù)與自交材料45-3 回交；2005-2006 年繼續(xù)回交；2007 年育成穩(wěn)定的隱性核不育三系不育系270A°Bb（圖2），同時把自交材料45-3 命名為臨保系458，2016年3 月21 日通過云南省農(nóng)作物品種審定委員會辦公室組織的行內(nèi)專家組田間鑒定。實現(xiàn)了兩系向三系的轉(zhuǎn)育，說明該材料屬于隱性核不育材料，其中至少存在有3 對基因，是與原隱性核不育兩型系270AB 完全不同的一類隱性核不育新材料。該不育系株型與純合兩型系270AB 相當(dāng)，但不育株的花蕾較小，細(xì)長而松軟，剝蕾可見雄蕊完全退化，開花后，花瓣細(xì)長且分離不重疊。

圖2 270A°Bb 選育經(jīng)過

3 恢復(fù)系387 的選育

2003-2004 年度混合收獲雙低雜交種油菜皖油2 號大田優(yōu)良單株4 株，編號為2003D-4；2004-2005 年度混合種植的單株植株高度、花期、育性等性狀發(fā)生分離，選擇可育、開花早、花粉量多的5 個單株與群體中的優(yōu)良不育株雜交，編號為2003D-4-1～2003D-4-5；2005-2006 年度結(jié)合品質(zhì)、育性和抗性選擇進(jìn)行了連續(xù)測交及自交選育，2003D-4-3 表現(xiàn)可育性穩(wěn)定、花粉量大，植株性狀優(yōu)良；2007 年加代套袋自交，冬季種植性狀穩(wěn)定；2008 年定名為恢復(fù)系387。

4 隱性核不育系270A°Bb 的農(nóng)藝性狀

4.1 主要經(jīng)濟(jì)性狀在云南10 月20 日直播的中等施肥管理水平下，隱性核不育三系不育系270A°Bb株高160.5cm，有效分枝高度36.4cm，一次有效枝數(shù)6.3 個，二次有效枝數(shù)9.2 個，單株角果數(shù)342.6 個，套袋自交不結(jié)實，但不育系的天然結(jié)實性較好。

4.2 主要品質(zhì)性狀隱性核不育三系不育系270A°Bb 經(jīng)連續(xù)3 年取樣進(jìn)行品質(zhì)分析，芥酸含量0.08%～0.26%，平均為0.18%；硫苷含量22.12～30.23μmol/g（餅），平均為28.31μmol/g（餅）；含油量40.25%～42.12%，平均為41.52%。臨保系458 芥酸含量0.06%～0.36%，平均為0.19%；硫苷含量20.08～28.32μmol/g（餅），平均為24.65μmol/g（餅）；含油量41.27%～43.65%，平均為42.27%。

5 隱性核不育三系不育系270A°Bb 雜種優(yōu)勢利用

5.1 保油雜1 號的選育2008 年用隱性核不育三系不育系270A°Bb 與恢復(fù)系387 測配；2009 年種植測配組合（保油雜1 號），田間農(nóng)藝性狀表現(xiàn)好；2010 年進(jìn)行小網(wǎng)室隔離制種，同時繼續(xù)進(jìn)行品系比較試驗，表現(xiàn)較好，增產(chǎn)顯著；2011-2013 年度參加保山市兩輪油菜預(yù)備試驗，綜合產(chǎn)量居8 個參試品種之首；2013-2014 年度參加第一輪云南省油菜區(qū)域試驗，每hm2平均產(chǎn)量3654.75kg，比對照云油雜2 號增產(chǎn)9.60%；2014-2015 年度續(xù)試，平均產(chǎn)量3519.00kg，比對照云油雜2 號增產(chǎn)8.04%；2015-2016 年度參加云南省油菜生產(chǎn)試驗，平均產(chǎn)量3829.35kg，比對照云油雜2 號增產(chǎn)13.17%。在多年多點不同生態(tài)條件下的試驗示范中，產(chǎn)量均比對照增產(chǎn)顯著，遺傳性狀穩(wěn)定，形態(tài)特征和生物學(xué)特性一致，豐產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)性好，抗逆性強，適應(yīng)性廣，具有較好的推廣應(yīng)用前景，特別是在保山、曲靖（羅平）、大理、玉溪、臨滄等區(qū)域具有明顯的增產(chǎn)優(yōu)勢。2016年通過云南省農(nóng)作物品種審定委員會審定，審定編號：滇油菜2016003 號，定名為保油雜1 號。2017年通過國家非主要農(nóng)作物品種登記，登記編號：GPD 油菜（2017）530224。適宜種植區(qū)域為云南省冬油菜產(chǎn)區(qū)。

5.2 保油雜1 號的特征特性保油雜1 號屬隱性核不育三系優(yōu)質(zhì)甘藍(lán)型雜交油菜半冬性中熟品種。幼苗生長半直立，葉色淡綠。苗期長勢強，生長整齊一致，勻生分枝型，莖、葉微具蠟粉。株高167.2cm，有效分枝數(shù)10.5 個，單株有效角果數(shù)388.6 個，每角粒數(shù)22.1 粒，千粒重3.9g，單株生產(chǎn)力25.2g。種子圓形、黑色。品質(zhì)分析結(jié)果芥酸含量0.2%，硫苷含量29.283μmol/g（餅），含油量40.95%。

5.3 實現(xiàn)成果轉(zhuǎn)化及擴(kuò)大適宜區(qū)域登記2017年保山市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心（保山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所）通過科技成果轉(zhuǎn)化把保油雜1 號的生產(chǎn)經(jīng)營權(quán)轉(zhuǎn)給云南農(nóng)地樂農(nóng)業(yè)科技有限公司。同年引種到貴州省思南縣和長順縣、陜西省安康市和漢中市、重慶市北碚區(qū)和墊江縣、四川省內(nèi)江市和德陽市、甘肅省隴南市和張掖市、河南省信陽市和鄭州市、湖北省恩施州和宜昌市、湖南省衡陽市和岳陽市、江西省九江市和南昌市的冬油菜主產(chǎn)區(qū)秋播種植，18 個試驗點均表現(xiàn)增產(chǎn)，每hm2平均產(chǎn)量4049.40kg，比對照華油雜12 號增產(chǎn)33.02%，增產(chǎn)達(dá)極顯著水平；2018 年續(xù)試，18 個試驗點均增產(chǎn)，平均產(chǎn)量4333.05kg，比對照華油雜12 號增產(chǎn)20.82%，增產(chǎn)達(dá)極顯著水平。通過試驗示范證實該品種適宜種植區(qū)域廣，2020 年對保油雜1號變更適宜種植區(qū)域及季節(jié)登記，適宜區(qū)域由云南省冬油菜產(chǎn)區(qū)擴(kuò)大為長江上游及中游的云南省、貴州省、陜西省、重慶市、四川省、甘肅省、河南省、湖北省、湖南省和江西省的冬油菜主產(chǎn)區(qū)秋播種植。

5.4 推廣應(yīng)用

5.4.1 產(chǎn)量典型2016 年在騰沖市中和鎮(zhèn)新街社區(qū)和和順鎮(zhèn)和順社區(qū)實施的保油雜1 號煙后半免耕育苗移栽示范樣板23.33hm2，推廣“半免耕育苗移栽+配方施肥+綠色病蟲害綜合防控”技術(shù)。由保山市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局主持邀請專家組實產(chǎn)驗收，每hm2平均產(chǎn)量4343.85kg，較非示范區(qū)增產(chǎn)809.55kg，增幅22.91%。

2021 年云南農(nóng)地樂農(nóng)業(yè)科技有限公司和四川仁禾農(nóng)業(yè)科技有限公司聯(lián)合在重慶北碚區(qū)示范保油雜1 號10.2hm2，每hm2平均產(chǎn)量4417.95kg，比同田其他品種增產(chǎn)778.35kg，增幅21.39%。

5.4.2 應(yīng)用結(jié)果2018 年保油雜1 號被評選為云南省雜交油菜主導(dǎo)品種。通過推廣科技成果轉(zhuǎn)化，在保山市依托部級油菜高產(chǎn)創(chuàng)建、省級油菜高產(chǎn)創(chuàng)建和冬季農(nóng)業(yè)開發(fā)等項目，2016 年推廣應(yīng)用1766.67hm2，2017年推廣應(yīng)用3626.67hm2，2018年推廣應(yīng)用4286.67hm2，2019年推廣應(yīng)用4746.67hm2，2020年推廣應(yīng)用5546.67hm2，2021 年推廣應(yīng)用8380.00hm2。在保山市累計推廣應(yīng)用28353.35hm2，每hm2平均產(chǎn)量3590.40kg，與對照相比平均增產(chǎn)661.80kg，增幅22.60%，新增總產(chǎn)量1876.42 萬kg，新增總產(chǎn)值11258.54 萬元。

保油雜1 號豐產(chǎn)、廣適、抗病，在云南農(nóng)地樂農(nóng)業(yè)科技有限公司和四川仁禾農(nóng)業(yè)科技有限公司的大力推廣下，得到廣泛推廣應(yīng)用，截至2021 年在保山市以外適宜區(qū)域累計推廣應(yīng)用面積6 萬hm2以上，對油菜產(chǎn)業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展發(fā)揮了重要作用。

5.5 主要栽培技術(shù)

5.5.1 播種期冬油菜區(qū)育苗移栽的適宜播種期為9 月中旬至10 月上旬，苗齡25～30d 移栽；直播種植的適宜播種期為9 月下旬至10 月下旬。春油菜區(qū)在4 月下旬至5 月中旬播種。

5.5.2 栽培密度冬油菜平壩地區(qū)和土壤肥力較高的田塊移栽7.5 萬～9.0 萬株/hm2，丘陵地移栽10.5 萬～12.0萬株/hm2，直播田移栽15萬～18萬株/hm2。春油菜區(qū)適宜種植密度30 萬株/hm2左右。

5.5.3 施肥管理每hm2施尿素600～750kg、普通過磷酸鈣450～675kg、農(nóng)用硫酸鉀225～300kg、硼肥30kg，或施用40%～45%油菜專用配方肥900kg。在施肥方法上增施有機(jī)肥，重施底肥，早施提苗肥，及時施蕾薹肥。干旱地區(qū)或干旱年份初花期每hm2葉面噴施硼肥4.5～7.5kg。

5.5.4 病蟲草害防治油菜主要病害為根腫病、菌核病等。根腫病主要以預(yù)防為主，在苗期用68%金雷（精甲霜靈+代森錳鋅）500 倍液灌根。菌核病選用40%菌核凈可濕性粉劑1000 倍液噴霧防治。主要的蟲害為跳甲蟲、蚜蟲和菜青蟲，可選用25%噻蟲嗪水分散粒劑或20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑1000 倍液噴霧防控。播后芽前每hm2用50%乙草胺1050mL 兌水600kg 噴霧封殺雜草，油菜5 葉期后用26%雙支蓋720mL+專用展著劑780mL 兌水675kg 莖葉噴霧除草。

5.5.5 適時收獲“八成熟十成收，十成熟對半丟”，一般以全田有2/3 的角果呈黃綠色，主軸中部角果呈枇杷色，籽粒呈固有顏色時收獲為宜。晴天早、晚空氣濕度大，角果不易爆裂時收割最好，鋪曬5～7d后，選晴天采用機(jī)械二次收獲。

6 結(jié)語

隱性核不育三系不育系270A°Bb 的選育，實現(xiàn)了三系配套，該技術(shù)處于云南省隱性核不育三系配套雜交油菜育種先進(jìn)水平，是油菜雜種優(yōu)勢利用上應(yīng)用最廣泛的隱性核不育三系雜交種。因此，通過把兩系核不育系轉(zhuǎn)育為三系不育系，可有效解決兩系核不育系在繁殖和制種中要拔除50%可育株的問題，有效降低雜交種生產(chǎn)成本，使油菜隱性核不育三系雜種優(yōu)勢利用更加完善。配套品種保油雜1 號集優(yōu)質(zhì)、豐產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、耐旱、抗病、廣適于一體，是保山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所選育的第1 個具有較大推廣潛力的雜交油菜新品種。