張 榮
(新疆第二醫(yī)學(xué)院,新疆 克拉瑪依 834000)
谷子(Setaria italica)又稱粟,脫殼后為小米,屬于“五谷”之一,為中國傳統(tǒng)糧食作物,已有4000 多年的栽培史[1],在中國的“三北”地區(qū)廣為種植,是主要糧食作物[2]。小米的營養(yǎng)豐富、齊全,包括碳水化合物、蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、維生素、礦物質(zhì)等,營養(yǎng)比例適宜,而且消化率高,可作為很好的營養(yǎng)源[3,4],也可以用于開發(fā)安全保健食品。關(guān)于小米的保健功效,古人在《別錄》《滇南本草》《本草綱目》等都有記載。
用小米加紅糖熬煮,具有安身和滋陰養(yǎng)血的功能,被譽(yù)為“代參湯”,可用做產(chǎn)婦、幼兒及老人的滋補(bǔ)佳品[5]。小米作為一種高營養(yǎng)價(jià)值的天然功能性食品,其開發(fā)利用具有先天優(yōu)勢(shì)[1]。鮮見關(guān)于小米粥組分中營養(yǎng)成分的研究報(bào)道,本研究旨在通過常見營養(yǎng)成分的測(cè)定,分析小米粥各組分中成分含量及特點(diǎn),為小米的加工利用及功能研究提供理論依據(jù)。
小米,河北省張家口市農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供;α-淀粉酶、直鏈淀粉和支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品,購于美國Sigma公司;葡萄糖、3,5-二硝基水楊酸、酒石酸鉀鈉、亞硫酸鈉、碘、碘化鉀、乙醚、鹽酸、無水乙醇、濃硫酸、石油醚、氫氧化鈉、苯酚等其他試劑均為分析純。
Allegra 64r 型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(美國Beckman 公司);T6 型紫外可見光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限公司);索氏抽提器;PHS-3D 型數(shù)字酸度計(jì)(上海三信儀表廠);Kjeltec 8400 型凱氏定氮儀(美國FOSS 公司);ALPHA 1-2LD Plus 型真空冷凍干燥機(jī)(德國Christ 集團(tuán));JJ-1 型精密定時(shí)電動(dòng)攪拌器、高速萬能粉碎機(jī)(北京市中興偉業(yè)儀器有限公司);DHG-9030A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精密實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司);RE-52AA 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠);感量為0.001 g 的電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。
1.3.1 原料的制備方法 小米經(jīng)淘洗,加水熬制成小米粥后冷卻,自然結(jié)成油皮,挑取分離得到米油皮,剩下的部分命名為米湯,并取其中一部分米湯過濾得到米粒和米汁,取新小米重新熬粥,得到全營養(yǎng)小米粥,將5 種原料分別冷凍干燥后粉碎過篩,制成米油皮、米湯、米粒、米汁和米粥5種原料干粉,儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>
1.3.2 水分含量的測(cè)定 采用直接干燥法[6]。
1.3.3 還原糖和總糖含量的測(cè)定 采用苯酚硫酸法[6]。
1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作。分別取1 mg∕mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 于試管中,分別加去離子水至體積為2 mL,加入DNS 試劑1.5 mL,充分混勻。將各管在沸水浴中加熱5 min 后取出,冷卻至室溫,用去離子水定容至25 mL,混合均勻。以空白為對(duì)照,在波長540 nm 處測(cè)定吸光度[6]。
2)供試液的制備與樣品還原糖含量測(cè)定。準(zhǔn)確稱取3.00 g 米油皮、米湯、米粒、米汁和米粥5 種原料干粉,放入三角瓶,先用少量去離子水調(diào)成糊狀,然后補(bǔ)足至50 mL,攪勻,置于50 ℃恒溫水浴20 min。將浸出液 轉(zhuǎn) 移到50 mL 離 心管,5000 r∕min 離心10 min,沉淀洗一次,再離心,將2 次離心的上清液收集在100 mL 容量瓶,定容、混勻,作為待測(cè)液。后續(xù)步驟同標(biāo)準(zhǔn)曲線,最后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出5 種原料還原糖的含量。計(jì)算公式如下。
3)供試液的制備與樣品總糖含量測(cè)定。準(zhǔn)確稱取5 種原料干粉各1.00 g ,放入三角瓶,加15 mL 去離子水及10 mL 6 mol∕L HCl,沸水浴30 min,冷卻,調(diào)pH 至中性,過濾,再?zèng)_洗燒瓶及濾紙,收集濾液至100 mL 容量瓶,定容,混勻,作為總糖待測(cè)液。后續(xù)步驟同標(biāo)準(zhǔn)曲線,最后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出5 種原料總糖的含量。計(jì)算公式如下。
1.3.4 淀粉含量的測(cè)定 參考文獻(xiàn)[7]測(cè)定淀粉含量,采用雙波長法[8]測(cè)定直鏈淀粉和支鏈淀粉含量。
式中,X為查雙波長直鏈淀粉(支鏈淀粉)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的樣品液中直(支)鏈淀粉含量(mg);V為待測(cè)液體積(mL),m為樣品質(zhì)量(g)。
1.3.5 脂肪、蛋白質(zhì)、粗纖維、灰分含量的測(cè)定 脂肪含量測(cè)定采用索氏提取法[9],蛋白質(zhì)含量的測(cè)定采用凱氏定氮法[10],粗纖維含量的測(cè)定采用酸性洗滌劑法[11],灰分含量的測(cè)定采用GB 5009.4—2016食品中灰分的測(cè)定方法[12]。
式中,m1為玻璃濾器質(zhì)量(g);m2為玻璃濾器加殘?jiān)|(zhì)量(g)。
1.3.6 體外消化法測(cè)定小米粥不同組分在胃腸道中的消化率 采用胃蛋白酶-胰酶兩步法評(píng)定小米粥不同組分的消化率[13]。
1)胃蛋白酶消化階段,5 種原料干粉分別稱取1 g于250 mL錐形瓶,每個(gè)樣品3個(gè)重復(fù)。加入25 mL磷酸緩沖液(pH=6.0,0.1 mol∕L),攪拌,加入10 mL 0.2 mol∕L 鹽酸,1 mL 新鮮的胃蛋白酶溶液,調(diào)pH 至2.0,加入0.5 mL 0.5%的氯霉素溶液,置于40 ℃的恒溫水浴搖床中(120 次∕min),計(jì)時(shí)消化4 h。
2)加入10 mL 磷酸緩沖液(pH=6.8,0.2 mol∕L),再加入5 mL 0.6 mol∕L 的NaOH 溶液,加入1 mL 新鮮胰酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶)溶液,調(diào)pH 至7.0,置于40 ℃恒溫水浴搖床繼續(xù)消化4 h。
3)消化結(jié)束,在錐形瓶中加入5 mL 20%的磺基水楊酸溶液,置于室溫30 min,過濾,將殘?jiān)瑹o氮濾紙置于105 ℃烘箱中烘至恒重,測(cè)定殘?jiān)亓?。?jì)算小米粥不同組分的干物質(zhì)消化率。
4)采用國標(biāo)法測(cè)定消化后干物質(zhì)中各營養(yǎng)成分含量,從而與消化前物質(zhì)比較,計(jì)算各種營養(yǎng)物質(zhì)的消化情況。
采用直接干燥法測(cè)得小米粥各組分水分含量,結(jié)果如表1 所示。從表1 可以看出,幾種原料中水分含量值都不高,其中小米中水分含量最高,米粒中水分含量最低,而其他幾種組分中水分含量相差不大。由于樣品預(yù)處理方式全部相同,經(jīng)過分析,水分含量高低可能與樣品自身水分含量、疏松度與吸水性等有關(guān)。
表1 小米粥各組分中的水分含量 (單位:%)
2.2.1 還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 圖1 為葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為y=0.6633x-0.0256,R2為0.9972。其中,y為吸光度,x為溶液中葡萄糖含量。
圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.2.2 小米粥各組分還原糖和總糖含量的測(cè)定 采用苯酚硫酸法測(cè)得小米粥各組分還原糖和總糖含量,結(jié)果如表2 所示。從表2 可以看出,小米及米粥各組分中還原糖的含量普遍很低,其中米粒中含量最低,幾乎檢測(cè)不出,而米汁中含量最高(除小米外)??梢酝浦?,小米經(jīng)過熬煮,還原糖大部分溶解到了水中??偺呛吭谛∶准懊字喔鹘M分中普遍較高,其中米湯中含量最高,米汁中最低,分析可能與淀粉和粗纖維的分配有關(guān)。
表2 小米粥各組分中的還原糖、總糖含量 (單位:%)
2.3.1 小米粥各組分淀粉含量的測(cè)定 采用GB∕T 5514—2008 的方法測(cè)定淀粉含量,結(jié)果如表3 所示。從表3 可以看出,小米粥各組分中,米皮油中淀粉含量最高,達(dá)到62.84%,米湯中則最低。分析可能是在熬煮過程中,淀粉發(fā)生糊化,物理性質(zhì)改變而膨脹上浮,冷卻后凝結(jié)在表面的油皮中。因此,較大的淀粉含量決定了米皮油較為光滑、細(xì)膩的物理特性。
表3 小米粥各組分中的淀粉含量 (單位:%)
2.3.2 直鏈淀粉和支鏈淀粉含量測(cè)定波長的確定 采用雙波長法確定了小米粥各組分中直鏈淀粉、支鏈淀粉的測(cè)定波長和參比波長,結(jié)果如圖2 所示,λ1(514 nm)和λ2(565 nm)是用于直鏈淀粉測(cè)定的測(cè)定波長和參比波長,λ3(545 nm)和λ4(730 nm)用于支鏈淀粉含量測(cè)定的測(cè)定波長和參比波長。
圖2 直鏈淀粉/支鏈淀粉檢測(cè)波長
2.3.3 直鏈淀粉和支鏈淀粉檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作分別以直鏈淀粉、支鏈淀粉含量為橫坐標(biāo),ΔA直和ΔA支為縱坐標(biāo)繪制的直鏈淀粉和支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖3、圖4),回歸方程分別為y=0.2602x+0.0003,R2=0.9965 和y=0.1075x-0.0007,R2=0.9997。
圖3 直鏈淀粉檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線
圖4 支鏈淀粉檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.3.4 小米粥各組分中直鏈淀粉和支鏈淀粉含量的測(cè)定 原料經(jīng)洗滌干燥脫脂等一系列處理后,采用雙波長法測(cè)定其中直鏈淀粉和支鏈淀粉含量,結(jié)果如表4 所示。由表4 可以看出,米皮油中直鏈淀粉含量最高而支鏈淀粉含量最低,米粒中直鏈淀粉含量最低,而支鏈淀粉含量則較高。米粒中支鏈淀粉和直鏈淀粉的比值最大,米皮油中最少。結(jié)合各組分中總淀粉的含量分析,導(dǎo)致該結(jié)果的原因可能是小米熬煮后,直鏈淀粉糊化上升形成油皮的比例比支鏈淀粉大,但總量還是不及支鏈淀粉多。
表4 小米粥各組分中的直鏈淀粉和支鏈淀粉含量
采用索氏抽提法測(cè)定粗脂肪含量,結(jié)果如表5所示。由表5 可知,米粒中所含粗脂肪最多,米汁中含量最低,米皮油中粗脂肪含量也較少。可能是小米經(jīng)過熬煮后,絕大部分粗脂肪仍停留在米粒內(nèi)部,沒有被較多地提取出來。
表5 小米粥各組分中的脂肪、粗纖維、灰分含量 (單位:%)
采用酸性洗滌劑法測(cè)定小米粥各組分中粗纖維含量,結(jié)果如表5 所示。由表5 可知,米皮油中粗纖維含量最高,米汁中粗纖維含量最低。分析可能是纖維溶脹以后上浮,凝結(jié)在米粥表皮的油皮中,從而導(dǎo)致米皮油中含量大大高于其他組分。
小米粥各組分中灰分含量測(cè)定結(jié)果如表5 所示。從表5 可以看出,米汁中灰分含量較大,其他組分中灰分含量均較低?;曳质侵复郎y(cè)物灼燒后殘留的物質(zhì),主要內(nèi)容為礦質(zhì)元素等,可知小米經(jīng)過熬煮,其中的無機(jī)物、礦物質(zhì)很多都溶解到水中,成為米汁的成分。
采用凱氏定氮法測(cè)定小米粥各組分中蛋白質(zhì)含量,結(jié)果如表6 所示。由表6 可知,米粒中蛋白質(zhì)含量最高,米汁中含量最低,米皮油中也較少。推測(cè)可能是蛋白質(zhì)在水中溶解度較低,經(jīng)過熬煮后在米湯中溶解不多,大部分仍存留在米粒中。
表6 小米粥各組分中的蛋白質(zhì)含量 (單位:%)
通過采取相應(yīng)方法測(cè)定小米粥各組分中主要營養(yǎng)成分,小米中總糖含量最大,其次是淀粉和蛋白質(zhì),還原糖和灰分的含量都很少;特別分析米皮油中各物質(zhì)的比例,總糖、淀粉和粗纖維的含量很高,其余成分都不突出。此外,經(jīng)計(jì)算,所測(cè)定各組分中水分、還原糖、淀粉、粗脂肪、粗纖維、蛋白質(zhì)和灰分的含量總和接近100%,其余物質(zhì)含量仍待進(jìn)一步研究測(cè)定。
小米及小米粥不同組分的體外消化率有一定的差別,小米、米粥、米皮油、米湯、米粒、米汁的消化率分 別 為38.54%±3.01%、50.93%±8.07%、45.73%±3.06%、55.51%±5.02%、53.43%±6.7%、54.23%±6.06%。
除了生小米外,其中消化率最低的為米皮油成分,由此可見,其他物質(zhì)中含有的蛋白質(zhì)、粗脂肪和淀粉容易被動(dòng)物的消化道所利用,而米皮油的利用度比較低,可能是由于其中含有較高的粗纖維,不易被消化道所消化,而是進(jìn)入大腸,被大腸內(nèi)微生物所分解,從而促進(jìn)腸道蠕動(dòng),調(diào)節(jié)腸道菌群,促進(jìn)腸道吸收。
通過對(duì)小米粥各組分的主要營養(yǎng)成分進(jìn)行測(cè)定分析,小米在熬煮處理以后,主要成分是碳水化合物類,其他成分含量都不是很高,而其中絕大部分脂肪和蛋白質(zhì)仍停留在米粒內(nèi)部,還原糖和無機(jī)物大部分溶解到了水中。此外,在熬煮過程中,淀粉發(fā)生糊化,物理性質(zhì)改變而膨脹上浮,冷卻后凝結(jié)在表面的油皮中,其中直鏈淀粉糊化上升形成油皮的比例比支鏈淀粉大,但總量小于支鏈淀粉。由于纖維溶脹以后上浮,導(dǎo)致米皮油中纖維素含量最高,米汁纖維素含量最低。小米經(jīng)過熬煮,其中的無機(jī)物、礦物質(zhì)大部分溶解到水中,使得米汁中的灰分含量較高。