龐春秀 丁桂玲 國占寶 黃家興

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部授粉昆蟲生物學(xué)重點(diǎn)實驗室，北京 100093）

1 前言

米團(tuán)花（Leucosceptrum canumSmith）是唇形科米團(tuán)花屬的一種大灌木至小喬木，高1.5～7 m，生于海拔400～1900 m 的林緣、水邊和路邊草地，在我國主要分布在滇中至滇南及西藏、四川等地，在國外主要分布在不丹、尼泊爾、印度東北部、緬甸、老撾和越南等地。米團(tuán)花也叫漬糖花、漬糖樹、羊巴巴、蜜蜂樹花等，是一種蜜粉源植物，其根和葉都具有藥用價值。米團(tuán)花的花序是由輪傘花序排列成圓柱狀的假穗狀花序，具有白色或粉紅色的筒狀花冠，花期為11月至翌年3月[1-3]。米團(tuán)花的花蜜呈棕黑色，蜜蜂采集米團(tuán)花花蜜釀造后形成具有黑色蜜色的蜂蜜，俗稱“黑蜜”，黑蜜是我國云南具有特色的一種蜂蜜，由于產(chǎn)量稀少而在蜂蜜市場上的價格較高。

蜜蜂對米團(tuán)花花蜜的采集與米團(tuán)花的開花泌蜜習(xí)性密切相關(guān)。目前對于米團(tuán)花花蜜的研究主要集中在其色素的提取、化學(xué)成分及生物活性的分析方面[2-5]，對于米團(tuán)花開花與泌蜜習(xí)性的研究較少。本研究觀察了花序開花動態(tài)以及單花的花期；測量了單花泌蜜量和花蜜糖濃度的日變化規(guī)律以及單花泌蜜量和花蜜糖濃度在盛花期中每日的變化規(guī)律；同時分別測量了花序頂部、中部和底部三個區(qū)域內(nèi)單花泌蜜量和花蜜糖濃度的日變化規(guī)律和不同區(qū)域的單花泌蜜量和花蜜糖濃度在盛花期中每日的變化規(guī)律。此外，還分析了花蜜顏色與花蜜糖濃度之間的聯(lián)系。本研究結(jié)果有助于更好了解米團(tuán)花的開花與泌蜜習(xí)性，從而為管理蜂群提高對米團(tuán)花花蜜的采集提供一定的理論依據(jù)。

2 材料與方法

2.1 試驗地點(diǎn)與材料

云南省臨滄市滄源縣曼來村，長勢良好的米團(tuán)花大灌木或喬木，觀測時間2022年2～3月。

2.2 試驗器材

毛細(xì)玻璃管（華西醫(yī)科大學(xué)，0.1mm×100mm），手持糖量計（ATAGO，MASTER-50H），吸耳球。

2.3 試驗方法

2.3.1 花序開花動態(tài)

在直徑為1 km 的米團(tuán)花大灌木及喬木區(qū)域內(nèi)隨機(jī)從30 個植株上選取30 個未開的米團(tuán)花花序，在花序開花前使用防蟲網(wǎng)袋對整個花序進(jìn)行套袋處理，以防昆蟲和鳥類對米團(tuán)花花蜜的采集。參照已有的研究方法，以花序中第1 朵單花盛開時為開花的起始階段，所有單花盛開后作為花序開花期的結(jié)束，同時統(tǒng)計花序上單花的花蕾期、初花期、盛花期和末花期的時長[6,7]；統(tǒng)計不同花序的長度以及花序上的單花數(shù)量。

2.3.2 花蜜采集及花蜜糖濃度測定

在套袋的30 個花序中隨機(jī)選取花序頂部、中部和底部同時有單花盛開的20 個花序，在花序頂部、中部和底部區(qū)域內(nèi)各隨機(jī)標(biāo)記1 朵處于花蕾期的單花，共標(biāo)記60 朵單花。在單花盛花期內(nèi)，每日選取9∶30～10∶30、12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 三個時間段，使用毛細(xì)玻璃管小心地吸取每朵單花所分泌的花蜜并使用手持糖量計測量花蜜的糖濃度。同時，對盛花期內(nèi)及盛花期后收集到的每朵單花的花蜜顏色進(jìn)行分類。

2.4 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行表示，使用GraphPad Prism 8.0.2 進(jìn)行分析和繪圖。

3 試驗結(jié)果

3.1 米團(tuán)花花序的開花動態(tài)

試驗中觀察到米團(tuán)花花序上單花盛開的順序不相同：部分花序的單花從花序下部逐漸往花序頂部盛開；部分花序的單花由整個花序的單側(cè)開始圍繞整個花序隨機(jī)盛開?；ㄐ驈某霈F(xiàn)花苞直至全部開放5～7 天，花序從出現(xiàn)花苞至所有單花全部脫落約30 天。試驗中隨機(jī)選擇的米團(tuán)花花序的長度6～16 cm；花序上的單花數(shù)量隨花序的長度不同而具有差異，約為194～575朵單花。

單花的整個花期約10 天，根據(jù)已有的研究將單花分為花蕾期、初花期、盛花期和末花期[7]。單花的花蕾期、初花期、盛花期和末花期如圖1所示?；ɡ倨?圖1(A))：花序上的單花從綠色的骨朵開始至出現(xiàn)筒狀花冠的白色為止，約3 天；初花期(圖1(B))：單花的白色筒狀花冠剛露開至整朵單花完全舒展打開，小于或等于1 天；盛花期(圖1(C))：單花完全打開并開始泌蜜時進(jìn)入盛花期，約為3 天；末花期(圖1(D))：單花的花冠邊緣開始變蔫枯萎時進(jìn)入末花期，末花期持續(xù)約3 天，末花期時單花的筒狀花冠和花絲、花藥逐漸萎縮；單花從花序上脫落后如圖1(E)所示。單花所分泌的花蜜被鳥類及昆蟲取食后會更容易從花序上脫落。

圖1 米團(tuán)花花序中單花的花期

3.2 單花泌蜜量和花蜜糖濃度的變化規(guī)律

單花泌蜜量和花蜜糖濃度的日變化規(guī)律如圖2(A)所示。米團(tuán)花單花泌蜜量呈現(xiàn)先下降，再稍微上升的變化趨勢。在9∶30～10∶30 時間段檢測到的泌蜜量最大(12.18±7.33μL)，在12∶30～13∶30 時間段的泌蜜量最小(1.95±1.09μL)。在一天的3 個檢測時間段中，米團(tuán)花單花泌蜜量存在極顯著差異(p＜0.01)。9∶30～10∶30 時間段的泌蜜量極顯著高于12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 時間段的泌蜜量(p＜0.01)，12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 時間段的單花泌蜜量之間沒有顯著差異(p＞0.05)。單花的花蜜糖濃度呈現(xiàn)由低到高的變化趨勢。15∶30～16∶30 時間段的花蜜糖濃度最高(19.21±1.76%)，9∶30～10∶30時間段的花蜜糖濃度最低(13.92±2.77%)。在一天的3個檢測時間段中，米團(tuán)花單花的花蜜糖濃度存在極顯著差異(p＜0.01)。9∶30～10∶30 時間段的花蜜糖濃度極顯著低于12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30時間段的花蜜糖濃度(p＜0.01)，12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 時間段的花蜜糖濃度之間沒有顯著差異(p＞0.05)。

圖2 單花泌蜜量和花蜜糖濃度的變化規(guī)律

單花泌蜜量和花蜜糖濃度在盛花期內(nèi)每天的變化規(guī)律如圖2(B)所示。根據(jù)實驗結(jié)果，單花在盛花期第三天的15∶30～16∶30 時間段內(nèi)已經(jīng)采集不到花蜜，因此對單花在盛花期3 天的變化規(guī)律進(jìn)行分析。單花在盛花期內(nèi)每天的泌蜜量存在極顯著差異(p＜0.01)。單花在盛花期第3 天的泌蜜量極顯著低于第1 天和第2 天(p＜0.01)，而第1 天和第2 天的單花泌蜜量間沒有差異(p＞0.05)。單花泌蜜量在盛花期內(nèi)呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢。在盛花期第2 天檢測到的泌蜜量最高(9.43±8.88μL)，在第3 天的泌蜜量最低(1.76±1.85μL)。單花的花蜜糖濃度在盛花期內(nèi)沒有差異(p＞0.05)?；厶菨舛仍谑⒒ㄆ诘? 天最高(17.68±1.02%)，在第1 天最低(16.34±4.61%)。

3.3 花序內(nèi)不同區(qū)域單花泌蜜量和花蜜糖濃度的變化規(guī)律

在花序的三個區(qū)域中，中部區(qū)域單花的泌蜜量最高，其次是底部區(qū)域，頂部區(qū)域單花的泌蜜量最低（圖3(A)(C)）。頂部區(qū)域單花的花蜜糖濃度最高，其次是中部區(qū)域，底部區(qū)域單花的花蜜糖濃度最低（圖3(B)(D)）。

花序中不同區(qū)域的單花泌蜜量在一天中的不同時間段之間存在極顯著差異(p＜0.01)，花序頂部、中部及底部的單花在9∶30～10∶30 的泌蜜量都極顯著高于12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30(p＜ 0.01)；不同區(qū)域的單花的泌蜜量之間在3 個時間段內(nèi)均沒有明顯差異(p＞0.05)；中部區(qū)域的單花在9∶30～10∶30時間段的泌蜜量達(dá)到最高(13.86±8.34μL)，頂部區(qū)域的單花在12∶30～13∶30 的泌蜜量最低(1.75±1.11μL)（圖3(A)）。

圖3 不同區(qū)域內(nèi)的單花泌蜜量和花蜜糖濃度的變化規(guī)律

花序中不同區(qū)域內(nèi)單花的花蜜糖濃度在一天中的不同時間段之間也存在極顯著差異(p ＜0.01)，花序頂部、中部和底部的單花在9∶30～10∶30的花蜜糖濃度都極顯著低于12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30(p＜0.01)，3 個區(qū)域內(nèi)單花的花蜜糖濃度在12∶30～13∶30 和15∶30～16∶30 之間均沒有顯著差異(p＞0.05)；不同區(qū)域的單花花蜜糖濃度之間在3 個時間段內(nèi)均無顯著差異(p＞0.05)，頂部區(qū)域單花的花蜜糖濃度在15∶30～16∶30 最高(20.63±3.34%)，底部區(qū)域單花花蜜糖濃度在9∶30～10∶30 最低(13.23±2.17%)（圖3(B)）。

頂部、中部和底部區(qū)域內(nèi)的單花泌蜜量在盛花期內(nèi)具有極顯著變化(p＜0.01)，三個區(qū)域的單花在盛花期第3 天的泌蜜量極顯著低于盛花期第1 天和第2 天(p＜0.01)，在盛花期第1 天和第2 天的單花泌蜜量之間沒有明顯差異(p＞0.05)；不同區(qū)域之間的單花泌蜜量均無差異(p＞0.05)，中部區(qū)域內(nèi)單花在盛花期第2 天泌蜜量最高(10.77±9.96μL)，頂部區(qū)域的單花在盛花期第3 天泌蜜量最低(1.54±1.86μL)（圖3(C)）。

花序中不同區(qū)域的單花花蜜糖濃度在盛花期內(nèi)沒有差異(p＞0.05)，花序底部、中部和頂部之間的單花花蜜糖濃度亦無差異(p＞0.05)，頂部區(qū)域單花的花蜜糖濃度在盛花期第3 天最高(18.13±0.88%)，底部區(qū)域單花花蜜糖濃度在盛花期第2天最低(14.55±0.99%)（圖3(D)）。

3.4 花蜜顏色與花蜜糖濃度

盛花期內(nèi)收集到的單花花蜜呈現(xiàn)出不同的顏色，大致可以分為：淺紅色(圖4：A)、紅色(圖4：B)和深紅色(圖4：C)。盛花期之后的花蜜呈現(xiàn)紫黑色(圖4：D)。通過分類統(tǒng)計，淺紅色花蜜的糖濃度范圍為8%～15%，紅色花蜜的糖濃度范圍為13%～20%，深紅色花蜜的糖濃度范圍為15%～25%，而紫黑色花蜜的糖濃度則大于50%。

圖4 花蜜的顏色

4 討論

米團(tuán)花花序上的單花泌蜜量在9∶30～10∶30最高，可能是由于單花在夜間也進(jìn)行泌蜜以及早上空氣濕度較大造成的。在12∶30～13∶30 以及15∶30～16∶30 檢測到的單花泌蜜量較低、花蜜糖濃度升高，則可能是由于中午氣溫上升而導(dǎo)致花蜜內(nèi)水分蒸發(fā)，從而造成花蜜泌蜜量下降、花蜜糖濃度增加。在盛花期的第1天至第2天，單花泌蜜量逐漸增高，但在盛花期第3 天出現(xiàn)顯著降低，猜測盛花期的前兩天是單花進(jìn)行泌蜜的主要時期。

將花序的頂部、中部和底部三個區(qū)域內(nèi)的單花單獨(dú)進(jìn)行統(tǒng)計分析后發(fā)現(xiàn)，在每日的不同時間段以及盛花期不同時間內(nèi)，中部區(qū)域的單花泌蜜量最高，其次是底部區(qū)域，頂部區(qū)域的單花泌蜜量最低。這可能是由于頂部區(qū)域單花盛開的方向偏上，花蜜受到太陽的照射面積更大，其中的水分更容易蒸發(fā)，從而造成頂部區(qū)域的單花泌蜜量最低而花蜜糖濃度最高。底部區(qū)域單花盛開方向偏下，整個花序中較長的花藥和花絲的遮擋作用減少了大部分陽光對底部區(qū)域單花的照射，降低了該區(qū)域單花花蜜水分的蒸發(fā)，因此造成底部區(qū)域花蜜糖濃度最低。

研究發(fā)現(xiàn)，花蜜的糖濃度會影響蜜蜂的采集，當(dāng)花蜜含糖量低于8%時，蜜蜂對花蜜不進(jìn)行采集或者采集的積極性較低；當(dāng)花蜜含糖量大于8% 時，蜜蜂才開始采集。外界蜜粉源比較豐富時，花蜜的含糖量達(dá)到 15%～20%以上時蜜蜂才對花蜜進(jìn)行采集[8]。因此，可以根據(jù)米團(tuán)花花蜜的糖濃度變化合理安排蜂群采集花蜜的時間，有利于提高蜂群的采集積極性。研究發(fā)現(xiàn)，花蜜的粘度也會影響傳粉者對花蜜的采集[9]，今后可進(jìn)一步分析米團(tuán)花花蜜的各種理化指標(biāo)對蜜蜂采集行為的影響。

試驗發(fā)現(xiàn)，米團(tuán)花的花蜜糖濃度隨著花蜜的顏色加深而增高，說明花蜜的糖濃度與調(diào)控花蜜顏色的物質(zhì)含量具有一定的相關(guān)性?；壑械姆宇愇镔|(zhì)可以使花蜜呈現(xiàn)出紅色、黃色、琥珀色、棕色、黑色等顏色。深色的花蜜可能是由于花蜜中酚類物質(zhì)的積累，同時其可能會形成苦味，導(dǎo)致部分傳粉者拒絕采集[10-12]。已有研究證明米團(tuán)花蜜中三個呈色化合物單體與米團(tuán)花花蜜呈現(xiàn)棕黑色有關(guān)，這三個呈色化合物單體均為氨基酸-對苯醌類化合物，其中的兩個呈色化合物單體1-[4-(3-羧基丙氨基)-3,6-二氧代環(huán)己基-1,4-二烯基]-吡咯烷-2-羧酸(GAPBQ)和1-[4-(3-氨甲?；?1-羧基丙氨基)-3,6-二氧代-環(huán)己-1,4-二烯基]-吡咯烷-2-羧酸(GPBQ)被推測在米團(tuán)花蜜釀造的過程中形成，而另外一個呈色化合物單體脯氨酸-對苯二醌共軛體(DPBQ)則被報道為米團(tuán)花蜜的主要色素物質(zhì)[13,14]。

5 結(jié)論

米團(tuán)花的一個花序在盛花期內(nèi)總的泌蜜量為5～15 mL。在一天的三個檢測時間段中，單花的泌蜜量在9∶30～10∶30 最大，單花的花蜜糖濃度在15∶30～16∶30 最高。在盛花期中，花序上的單花在盛花期第2 天的泌蜜量最大，在盛花期第3 天花蜜糖濃度最高。在花序不同的區(qū)域中，花序中部區(qū)域的單花泌蜜量最大，頂部區(qū)域單花的花蜜糖濃度最高。此外，花蜜的糖濃度和花蜜的顏色具有一定的關(guān)聯(lián)，花蜜的糖濃度可能影響蜂群對米團(tuán)花花蜜的采集。