農(nóng) 汝，吳俊儀，黃 寧，曹佳媛，楊 露，黃澤琳，陸兵兵，王 松

（ 南寧市動(dòng)物園，廣西 南寧 530003 ）

肝炎病毒有甲型肝炎病毒（HAV）、乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、丁型肝炎病毒（HDV）、戊型肝炎病毒（HEV）、庚型肝炎病毒（HGV）等6 型[1-2]，其傳播途徑各不相同。HAV 和HEV 主要通過腸道途徑傳播[3-4]，食入被污染的水和食物是HAV 暴發(fā)性流行最主要的傳播途徑，人與動(dòng)物可發(fā)生交叉感染[5]。戊型肝炎是一種人畜共患病，也是我國乃至全球關(guān)注的公共衛(wèi)生問題[6-7]。HCV主要通過血液、性接觸傳播，如輸血時(shí)共用注射器和在醫(yī)療過程中重復(fù)使用注射器均可傳播，可感染黑猩猩和人。HBV 和HDV 通過血液和其他體液傳播[3,8]，黑猩猩和土撥鼠是HDV的易感動(dòng)物[1]。

南寧動(dòng)物園在對(duì)其他類長臂猿[包括黃頰長臂猿（Nomascus gabriellae） 、北 白 長 臂 猿（Nomascusleucogenys）、黃頰長臂猿與北白長臂猿雜交猿；因長臂猿個(gè)體的物種鑒定近期才完成，故在本次調(diào)查中除白掌長臂猿（Hylobates lar）和戴帽長臂猿（Hylobates pileatus）外，其余猿均以其他類長臂猿表示。]及戴帽長臂猿體檢中發(fā)現(xiàn)存在HBV 抗原陽性或抗體陽性結(jié)果，因此也對(duì)個(gè)別其他類長臂猿、戴帽長臂猿、廣西獼猴（Macaca mulatta）等動(dòng)物進(jìn)行過重組乙肝基因工程苗的免疫研究，結(jié)果顯示，在受試動(dòng)物體內(nèi)均產(chǎn)生相應(yīng)的免疫應(yīng)答。南寧動(dòng)物園目前飼養(yǎng)的非人靈長類動(dòng)物中，一級(jí)保護(hù)動(dòng)物11 種258 頭（只），二級(jí)保護(hù)動(dòng)物15種251頭（只），本文通過調(diào)查南寧動(dòng)物園內(nèi)部分靈長類動(dòng)物肝炎病毒血清抗體情況，為靈長類動(dòng)物保育員、獸醫(yī)在臨床工作中防范該種疫病提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

本次調(diào)查收集了南寧市動(dòng)物園內(nèi)戴帽長臂猿、其他類長臂猿、白掌長臂猿、黑葉猴（Trachypithecus francoisi）、廣西 獼 猴、熊 猴（Macaca assamensis）、山 魈（Mandrillus sphinx）等17 種靈長類動(dòng)物，因動(dòng)物交流入園、園內(nèi)轉(zhuǎn)移、疾病治療等因素時(shí)，隨機(jī)進(jìn)行前肢淺靜脈紅頭采血管采血2管或1管，每管2 mL，進(jìn)行HBV血清標(biāo)志物檢測或HAV、HBV、HCV、HDV、HEV等血清標(biāo)志物檢測的結(jié)果。

1.2 測定指標(biāo)及方法

樣本均委托廣西民族醫(yī)院檢測，使用商品化試劑盒：HAV IgM抗體檢測試劑（鄭州安圖生物工程股份有限公司等）、HBV表面抗原等測定試劑盒（邁克生物股份有限公司等）、HCV抗體檢測試劑（北京科美生物技術(shù)有限公司等）、HDV抗體檢測試劑盒（京貝爾生物工程股份有限公司等）、HEV IgM抗體檢測試劑盒（鄭州安圖生物工程股份有限公司等）。樣本檢測方法及檢測試劑因醫(yī)院儀器設(shè)備更新、試劑購買等因素而不同，均在72 h內(nèi)送檢。

1.2.1 HBV血清標(biāo)志物檢測

HBV抗體采用macchiato1300發(fā)光免疫法[9]（乙肝兩對(duì)半檢測方法）檢測。1,3,5 陽性表示乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝核心抗體（HBcAb）項(xiàng)陽性（+）；2,4,5陽性表示乙肝表面抗體（HBsAb）、乙肝e抗體（HBeAb）、HBcAb項(xiàng)陽性（+）；2陽性表示HBsAb項(xiàng)陽性（+）；全陰性表示HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb項(xiàng)均為陰性（-）。

1.2.2 HAV、HCV、HDV、HEV血清標(biāo)志物檢測

HAV、HCV、HDV、HEV抗體采用酶聯(lián)免疫法[9]進(jìn)行檢測，檢測項(xiàng)目包括：HAV-IgM、HCV 抗體、HDV-IgM、HEV-IgM。

2 結(jié)果與分析

2.1 靈長類動(dòng)物HBV血清標(biāo)志物檢測結(jié)果（見表1）

由表1可知，本調(diào)查共收集到戴帽長臂猿、紅毛猩猩、黑葉猴、熊猴、平頂猴等17 種動(dòng)物共169 份血清樣本。乙肝兩對(duì)半檢測結(jié)果顯示，1,3,5項(xiàng)陽性的11例，占總樣本數(shù)的6.51%，其中戴帽長臂猿10例，占該物種的37.04%；其他類長臂猿1例，占該物種的2.33%。2,4,5項(xiàng)陽性的6例，占總樣本數(shù)的3.55%，其中戴帽長臂猿4 例，占該物種的14.81%；其他類長臂猿2 例，占該物種的4.65%，HBsAb 陽性的5例，占總樣本數(shù)的2.96%，其中其他類長臂猿4例，占該物種的9.30%；戴帽長臂猿1例，占該物種的3.70%。

2.2 靈長類動(dòng)物HAV、HCV、HDV、HEV血清標(biāo)志物檢測結(jié)果（見表2）

由表2可知，本次調(diào)查共收集到12種74份靈長類動(dòng)物血清樣本，HAV-IgM、HCV抗體、HDV-IgM、HEV-IgM的檢測結(jié)果均為陰性，陽性率為0。

表2 靈長類動(dòng)物HAV、HCV、HDV、HEV血清標(biāo)志物檢測結(jié)果Tab.2 Detection results of serum markers of HAV, HCV, HDV and HEV in primates

3 討論

本研究結(jié)果顯示，南寧動(dòng)物園內(nèi)17種非人靈長類動(dòng)物的乙肝病毒血清流行病學(xué)調(diào)查對(duì)象中只有長臂猿類動(dòng)物感染或攜帶HBV，其余物種亦均未檢測出陽性個(gè)體。戴帽長臂猿HBsAg 陽性率為18.2%，HBsAb 陽性率為9.1%，其他種類長臂猿HBsAg 陽性率為5.6%，HBsAb 陽性率為5.6%（有人工接種重組酵母乙肝疫苗史）。在馬來西亞長臂猿康復(fù)中心，研究人員在長臂猿身上分離出HBV，與人類HBV病毒相似性為85.5%～89.6%[10]。

目前已有研究報(bào)道人類HBV病毒可橫向傳播給非人靈長類動(dòng)物[11-12]。因此，動(dòng)物保育員、獸醫(yī)等工作人員在入職前應(yīng)進(jìn)行相關(guān)體檢，接種乙肝疫苗；同時(shí)加強(qiáng)工作人員對(duì)HBV感染風(fēng)險(xiǎn)意識(shí)，加強(qiáng)對(duì)保育員、獸醫(yī)等工作人員職業(yè)暴露防護(hù)、銳器損傷預(yù)防及處理等知識(shí)的培訓(xùn)和教育，提高工作人員的自我保護(hù)和防范意識(shí)，合格的員工是確保游客安全的關(guān)鍵。

雖然HAV 可成功感染非人靈長類動(dòng)物，但該病毒的宿主范圍相對(duì)有限。對(duì)HAV最為敏感的非人靈長類動(dòng)物主要是狨猴和黑猩猩，此外，HAV 也能感染食蟹猴、恒河猴、松鼠猴等其他種類非人靈長類動(dòng)物[13]。有研究對(duì)中國試驗(yàn)動(dòng)物云南靈長類中心525只獼猴進(jìn)行HAV-IgG、乙肝兩對(duì)半、HCV-IgG、HDV-IgG、HEV-IgG 檢測，結(jié)果顯示，在相同的人工飼養(yǎng)條件下，除HAV以外，獼猴其他肝炎病毒抗體均為陰性。有研究對(duì)中國試驗(yàn)動(dòng)物云南靈長類中心525 只獼猴（恒河猴216 只，食蟹猴309 只）進(jìn)行HAVIgG、乙肝兩對(duì)半、HCV-IgG、HDV-IgG、HEV-IgG 檢測，結(jié)果顯示，在相同的人工飼養(yǎng)條件下，除HAV 以外，獼猴其他肝炎病毒抗體均為陰性，恒河猴與食蟹猴HAV-IgG陽性率分別為81.9%、91.9%[14]。本研究中，南寧動(dòng)物園12 種靈長類動(dòng)物HAV、HCV、HDV、HEV 抗體陽性率為均為0。

管理、控制傳染源，切斷傳播途徑，保護(hù)易感人群、畜禽是控制和消滅疫病的三大要素。為保證游客、動(dòng)物以及工作人員的公共衛(wèi)生安全，工作人員入職前要做好相關(guān)疫苗接種，定期體檢，上崗前做好疫病防控知識(shí)培訓(xùn)，提高對(duì)風(fēng)險(xiǎn)的認(rèn)識(shí)，同時(shí)必須遵守、遵照相關(guān)的疫病防控操作指南下開展工作。臨床工作中可采用商品化試劑盒，對(duì)非人靈長類動(dòng)物肝炎病毒抗體進(jìn)行檢測、篩查，對(duì)陽性個(gè)體做進(jìn)一步的檢測及研究，對(duì)相關(guān)動(dòng)物個(gè)體定期體檢，并根據(jù)檢測結(jié)果做好疫病防范措施。此外，還可通過不同形式對(duì)游客開展相關(guān)的科普宣傳活動(dòng)，提高民眾對(duì)人類肝炎病毒的認(rèn)知水平。

4 結(jié)論

本研究使用商品化試劑盒及相關(guān)檢測方法對(duì)南寧動(dòng)物園內(nèi)靈長類動(dòng)物進(jìn)行乙肝病毒抗體檢測和篩查，結(jié)果表明，長臂猿動(dòng)物可感染或攜帶HBV，但未檢出HAV、HCV、HDV、HEV陽性個(gè)體。