張麗麗，徐曉芳，劉 君，孔桂之，曹 磊，梅俊紅，吳進龍

(1.山東威瑞信試驗檢測有限公司，山東 濟南 250119；2.農業(yè)農村部農藥檢定所，北京 100125)

1 前言

戊菌唑英文名稱：penconazole，CAS號：66246-88-6，分子式：C13H15Cl2N3，化學名稱：2-(2,4-二氯苯基戊基)-1H-1,2,4-三唑。戊菌唑是一種兼具保護、治療和鏟除作用的內吸性三唑類殺菌劑，是甾醇脫甲基化抑制劑，可由作物根、莖、葉等組織吸收，并向上傳導?？捎糜诜乐文瞎?、葡萄、仁果、觀賞植物和蔬菜上的白粉菌科、黑星菌屬、子囊菌綱、擔子菌綱和半知菌類病原菌引起的病害有特效。

目前國內有關戊菌唑乳油的分析方法未見公開報道。本文采用高效液相色譜法對10%戊菌唑乳油進行定量分析，該方法操作簡便快捷，分離效果好，精密度和準確度均能達到定量分析的要求。

2 試驗部分

2.1 試劑和溶液 甲醇(色譜純)；超純水(電阻率18.2MΩ·cm，25℃)；戊菌唑標樣，已知質量分數98.2%；10%戊唑醇乳油。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：日立Primaide，具有可變波長紫外檢測器和自動進樣器；日立色譜工作站；色譜柱：250mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內裝ZORBAX SB-C18、5μm填充物。

2.3 液相色譜操作條件 流動相：Ψ(甲醇：水)=75：25；流速：1.0mL/min；柱溫：25±2℃；檢測波長：220nm；進樣體積：10μL；保留時間：戊菌唑約8.9min。典型的戊菌唑標樣和10%戊菌唑乳油的高效液相色譜圖(圖1、2)

圖1 戊菌唑標樣高效液相色譜圖

圖2 10%戊菌唑乳油高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 標樣溶液的配制 稱取0.05g(精確至0.000 1g)戊菌唑標樣，置于50mL容量瓶中，加入20mL甲醇，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取含0.05g(精確至0.000 1g)戊菌唑的試樣，置于50mL容量瓶中，加入20mL甲醇，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，過濾。

2.4.3 測定 在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數針標樣溶液，直至相鄰2針標樣溶液的響應值相對變化<1.2%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

2.4.4 計算 將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標樣溶液中戊菌唑峰面積分別進行平均。試樣中戊菌唑的質量分數ω(%)，按式(1)計算：

(1)

式中：

A1──標樣溶液中戊菌唑峰面積的平均值；

A2──試樣溶液中戊菌唑峰面積的平均值；

m1──標樣的質量，g；

m2──試樣的質量，g；

P──標樣中戊菌唑的質量分數，%。

3 結果與討論

3.1 色譜條件的選擇 通過日立Primaide高效液相色譜儀的光譜數據采集功能，獲得戊菌唑的紫外波長掃描圖(圖3)。從圖中可以看到戊菌唑在波長220nm處有較大吸收，在該波長處靈敏度較高，干擾較少，能夠滿足分析的要求，故將檢測波長確定為220nm。

圖3 戊菌唑的紫外光譜圖

色譜柱選擇常用的ZORBAX SB-C18反相柱。根據戊菌唑物化性質和溶劑的紫外吸收波長，選擇甲醇作為溶劑溶解樣品，并以甲醇和水作為流動相。將流動相按不同比例在色譜柱上進行試驗，隨著甲醇比例的增加，保留時間減小，當甲醇與水比例達到80 ：20時，有雜質峰干擾戊菌唑，峰純度達不到試驗要求，最終選擇Ψ(甲醇：水)=75：25作為流動相，流速1.0mL/min。該條件下，戊菌唑色譜峰峰形較好，與雜質能完全分離，具有良好的精密度和準確度，并且分析時間較短，提高了工作效率。

3.2 分析方法的特異性鑒定 按照2.4.1和2.4.2中方法分別配制標準溶液和樣品溶液，按標準中方法對戊菌唑進行全波段掃描、峰純度分析。從譜圖可知戊菌唑在該分析方法下峰純度均>990，有效成分出峰處無其他物質干擾，符合定量分析要求。

3.3 分析方法的線性相關性試驗 稱取0.05g(精確至0.000 1g)戊菌唑標樣，置于50mL容量瓶中，加入20mL甲醇，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取3、4、5、6、7mL上述溶液，分別置于50mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，配制5個不同濃度的有效成分線性相關溶液。在上述色譜操作條件下進行分析，以戊菌唑濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標作標準曲線(圖4)，得到戊菌唑線性回歸方程為y = 82 834x +104 775，線性相關系數為0.999 8。

圖4 戊菌唑線性關系圖

3.4 分析方法的精密度試驗 從同一產品中準確稱取5個試樣，在上述色譜操作條件下進行分析，測得戊菌唑的標準偏差為0.061，變異系數為0.60%(表1)。

表1 分析方法的精密度試驗結果

3.5 分析方法的準確度試驗 從已知質量分數的戊菌唑乳油(10.21%)中稱取5個試樣，分別加入一定量的戊菌唑標樣(98.2%)，在上述色譜操作條件下進行分析，測得戊菌唑的平均回收率為100.03%(表2)。

表2 分析方法的準確度試驗結果

4 結論

試驗建立了戊菌唑乳油有效成分含量測定的高效液相色譜分析方法，試驗結果表明，本方法分離效果好、線性關系良好，具有較高的精密度和準確度，分析操作簡便快捷，是戊菌唑乳油產品質量控制較為理想的分析方法。