■安 靖馬政發(fā)韓 娥楊 藝吳文旋*陳鑫珠

（1.貴州大學(xué)高原山地動(dòng)物遺傳育種與繁殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)研究所，新農(nóng)村發(fā)展研究院，貴州省山地畜禽養(yǎng)殖污染控制與資源化技術(shù)工程實(shí)驗(yàn)室，貴州貴陽 550025；2.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，福建省畜禽遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建福州 350013）

隨著畜禽養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，導(dǎo)致蛋白質(zhì)飼料資源匱乏日益加劇，如何提高機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的利用效率、減少環(huán)境的污染已成為科學(xué)研究和實(shí)際生產(chǎn)中更加重視的問題，深受學(xué)界和養(yǎng)殖界的關(guān)注。氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的原料，合理的氨基酸水平及各氨基酸之間的平衡性極大程度地影響飼料的蛋白質(zhì)利用率?；诘鞍踪|(zhì)和氨基酸營(yíng)養(yǎng)平衡提出的低蛋白質(zhì)氨基酸飼糧，能夠在飼糧粗蛋白（CP）水平降低的同時(shí)含有最佳的氨基酸組合，節(jié)約飼料蛋白質(zhì)資源，提高畜禽對(duì)蛋白質(zhì)的吸收利用效率，已在科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中取得良好的反饋；低蛋白日糧為低于參照《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 816—2004）中生長(zhǎng)育肥山羊的營(yíng)養(yǎng)需要配制的基礎(chǔ)日糧。文獻(xiàn)報(bào)道，在低蛋白質(zhì)飼糧中補(bǔ)充氨基酸可以提高雞的生長(zhǎng)性能和抗氧化能力[1-2]；同時(shí)也可提高豬的蛋白質(zhì)利用率、改善肉品質(zhì)，還不影響生長(zhǎng)性能[3-4]。

賴氨酸（Lys）和蛋氨酸（Met）作為第一、二限制性氨基酸，是氨基酸和低蛋白質(zhì)研究上優(yōu)先考慮的高位限制性氨基酸，對(duì)反芻動(dòng)物的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控具有重要作用。由于單胃動(dòng)物和反芻動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收方式存在著明顯區(qū)別，游離氨基酸（小肽）經(jīng)小腸吸收之前會(huì)被瘤胃微生物降解，導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)損失，因此生產(chǎn)上常使用過瘤胃技術(shù)來保護(hù)這兩種必需氨基酸，以取得更好的營(yíng)養(yǎng)效果。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，向荷斯坦公牛日糧中添加過瘤胃賴氨酸（RPLys）15 g/d與過瘤胃蛋氨酸（RPMet）30 g/d可在一定程度上提高其生長(zhǎng)性能，增加機(jī)體蛋白質(zhì)的合成和氨基酸沉積，表明添加RPLys和RPMet能夠在一定程度上替代部分飼糧粗蛋白[5]。當(dāng)荷斯坦公牛飼糧蛋白質(zhì)水平從13%降低至11%時(shí)，向飼糧中補(bǔ)充55 g/（d·頭）RPLys+9 g/（d·頭）RPMet 不影響生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率、屠宰性能及肉品質(zhì)，并可改善肌肉中氮代謝相關(guān)基因的表達(dá)[6]。就目前研究看，在牛的低蛋白日糧中添加過瘤胃賴氨酸（RPLys）與過瘤胃蛋氨酸（RPMet）的適宜添加量報(bào)道較多，在羊的研究上鮮有報(bào)道。

作為貴州獨(dú)有的三大優(yōu)良地方山羊品種之一，黔北麻羊主產(chǎn)于我國(guó)赤水河流域習(xí)水縣境內(nèi)，品種特征明顯，2009 年被認(rèn)定為新的山羊遺傳資源品種，學(xué)術(shù)研究?jī)r(jià)值獨(dú)特，貴州省還單獨(dú)成立了黔北麻羊產(chǎn)業(yè)園區(qū)。但目前而言，有關(guān)黔北麻羊資源調(diào)查、遺傳育種、基因測(cè)序、繁殖率等方面的研究報(bào)道較多，而針對(duì)低蛋白日糧的文獻(xiàn)較少，不利于提升黔北麻羊養(yǎng)殖技術(shù)水平和產(chǎn)業(yè)化開發(fā)。據(jù)此，本課題組前期完成了在飼糧中單一添加RPMet[7-8]、RPLys[9]的研究，目前鮮見二者同時(shí)添加是否會(huì)產(chǎn)生協(xié)同作用效果的研究報(bào)道。本試驗(yàn)探討在低蛋白質(zhì)飼糧中同時(shí)添加RPLys、RPMet 對(duì)黔北麻羊的生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)和瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響，為推行低蛋白質(zhì)飼糧在黔北麻羊的生產(chǎn)中使用提供數(shù)據(jù)支持和參考價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用18只年齡相近、初始體重為（41.15±2.27）kg的健康黔北麻羊（貴州地方品種山羊）羯羊?yàn)樵囼?yàn)動(dòng)物，分為3個(gè)處理組：對(duì)照組、處理Ⅰ組、處理Ⅱ組，每個(gè)組6只羊（n=6）。對(duì)照組山羊飼喂基礎(chǔ)飼糧（CP=12.49%），不添加過瘤胃氨基酸（RPAA）；處理Ⅰ組CP水平在基礎(chǔ)飼糧上降低2%，CP 為10.25%，添加0.5%的RPLys 和0.2%的RPMet；處理Ⅱ組CP 水平與處理Ⅰ組一致，添加1.0%的RPLys 和0.4%的RPMet。RPLys 和RPMet 的過瘤胃率均為85%（杭州康德權(quán)飼料有限公司），其中賴氨酸和蛋氨酸的有效含量分別為50%和75%。RPLys 與RPMet 的添加比例參照課題組前期研究[7-9]加以探討，通過調(diào)配豆粕水平來調(diào)節(jié)日糧CP水平。

1.2 試驗(yàn)飼糧與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧參照《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 816—2004）中生長(zhǎng)育肥山羊的營(yíng)養(yǎng)需要配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1，實(shí)測(cè)值略高于設(shè)計(jì)值。試驗(yàn)羊按重復(fù)單籠飼養(yǎng)，依照羊舍常規(guī)程序進(jìn)行定期消毒與驅(qū)蟲，保證圈舍干凈衛(wèi)生整潔及良好通風(fēng)環(huán)境。整個(gè)試驗(yàn)期持續(xù)21 d，包含預(yù)試期14 d，采樣期7 d。試驗(yàn)羊飼喂方式為將RPLys、RPMet 與精料混合均勻后依照先精后粗的原則飼喂，試驗(yàn)期間每日09：00 和18：00 飼喂兩次，隨時(shí)觀察試驗(yàn)羊采食情況，以剩料不低于5%的原則適當(dāng)增減料，自由采食，自由飲水。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生長(zhǎng)性能

在試驗(yàn)開始第1天和試驗(yàn)最后1天對(duì)晨飼前的試驗(yàn)羊空腹稱重，記錄為始重（IBW）和末重（FBW），試驗(yàn)期間飼喂前稱每只羊的剩余料，試驗(yàn)結(jié)束后統(tǒng)計(jì)并計(jì)算每只試驗(yàn)羊的干物質(zhì)采食量（DMI）、平均凈增重（ANG）、平均日增重（ADG）。

1.3.2 飼糧營(yíng)養(yǎng)成分

試驗(yàn)開始后，每3 d 采用四分法采集所飼喂的飼糧樣品，將收集的飼糧樣于（65±2）℃烘箱中烘干，粉碎過1 mm篩制成分析試樣，裝入自封袋保存，用于后續(xù)測(cè)定試樣的總能（GE）、粗蛋白（CP）、有機(jī)物（OM）、中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）含量，參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》測(cè)定[10]。

1.3.3 血液生化指標(biāo)

試驗(yàn)在正試期第6 天晨飼前空腹條件下對(duì)所有試驗(yàn)羊頸靜脈采血，805 r/min 離心15 min，將離心后的血漿分裝至1.5 mL EP 管中，-20 ℃條件下保存待測(cè)。采用全自動(dòng)生化分析儀（BS-360S，Mindray）測(cè)定血漿總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總氨基酸（TAA）、尿素氮（PUN）、尿酸（UA）、肌酐（Cr）、堿性磷酸酶（AKP）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）含量，所用試劑盒購(gòu)于深圳邁瑞科技有限公司。根據(jù)試劑盒操作步驟測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化氫酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）含量，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所有限公司，檢測(cè)儀器為Thermo 酶標(biāo)儀（賽默飛世爾科技有限公司）。

1.3.4 瘤胃發(fā)酵參數(shù)

正試期第7 天，試驗(yàn)羊飼喂后，通過胃管式瘤胃液采樣器（VP 30，北京萊伯泰科）間隔4 h經(jīng)由試驗(yàn)羊口腔抽取3次瘤胃液（采集時(shí)間分別為09：00、13：00、17：00），分別測(cè)定瘤胃液pH（PHS-3C便攜式pH計(jì)），然后用4層無菌紗布過濾，并在4 000 r/min條件下常溫離心10 min后分裝于10 mL離心管中，-20 ℃冰箱中低溫保存，后續(xù)測(cè)定氨態(tài)氮（NH3-N）濃度[11]、纖維素酶活性、揮發(fā)性脂肪酸（VFA）濃度[12-14]。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。采用SAS 9.4統(tǒng)計(jì)軟件的ANOVA過程對(duì)3組試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，運(yùn)用Duncan’s 法多重比較檢驗(yàn)差異的顯著性，P＜0.05表示數(shù)據(jù)差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys 與RPMet對(duì)山羊生長(zhǎng)性能的影響

如表2 所示，低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys 與RPMet 均不影響山羊的生長(zhǎng)性能，各組間各項(xiàng)指標(biāo)均無顯著差異（P＞0.05）。

表2 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys與RPMet對(duì)山羊生長(zhǎng)性能的影響

2.2 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys 與RPMet對(duì)山羊血液生化指標(biāo)的影響

由表3 可見，處理Ⅰ組和處理Ⅱ組PUN 水平接近，分別較對(duì)照組低24.77%和24.95%，均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys與RPMet 對(duì)其余生化指標(biāo)影響較小，各組之間TP、ALB、TAA、UA、Cr、AKP、AST、ALT、SOD、GSH-PX、MDA、CAT均無顯著差異（P＞0.05）。

表3 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys與RPMet對(duì)山羊血液生化指標(biāo)的影響

2.3 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys 與RPMet對(duì)山羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響

由表4、表5可知，低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys 與RPMet 對(duì)山羊的瘤胃發(fā)酵參數(shù)無影響，各組之間瘤胃pH、NH3-N 濃度、纖維素酶活性、VFA 濃度均無顯著差異（P＞0.05）。

表4 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys與RPMet對(duì)山羊瘤胃pH、NH3-N濃度及纖維素酶活性的影響

表5 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys與RPMet對(duì)山羊瘤胃揮發(fā)性脂肪酸的影響

3 討論

3.1 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys 與RPMet對(duì)山羊生長(zhǎng)性能的影響

動(dòng)物的生長(zhǎng)和生產(chǎn)主要依賴飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要供給和吸收情況，而蛋白質(zhì)是反芻動(dòng)物生命活動(dòng)中最重要的承擔(dān)者之一，蛋白質(zhì)水平和各種氨基酸平衡都是影響生產(chǎn)性能的關(guān)鍵因素[15]。單獨(dú)降低飼糧的CP 水平必然會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)與氨基酸的供應(yīng)量減少，而營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的攝取不足將直接降低動(dòng)物的生長(zhǎng)和生產(chǎn)性能[16]。因此在對(duì)反芻動(dòng)物研究和使用低蛋白質(zhì)飼糧時(shí)，需要額外添加一定的必需氨基酸，用以維持氨基酸的平衡以及促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成。由于飼糧中精料主要原料組成的不同，Lys 和Met 均可能是反芻動(dòng)物的第一或第二限制性氨基酸，都影響著機(jī)體其他氨基酸的利用效率和平衡情況。有研究指出，在正常飼糧中補(bǔ)充RPLys 和RPMet 能夠提高動(dòng)物的生長(zhǎng)效率[17]。而高巖等[18]在荷斯坦公?；A(chǔ)和低蛋白質(zhì)飼糧上補(bǔ)充RPLys 和RPMet 發(fā)現(xiàn)，ADG 和F/G 不受影響，具有良好的飼養(yǎng)成本和經(jīng)濟(jì)效益，生產(chǎn)上添加RPLys 和RPMet 來代替一定量的蛋白質(zhì)飼料具有可行性。韓云勝等[5]研究發(fā)現(xiàn)，在不含RPAA 的基礎(chǔ)飼糧中添加RPLys 和RPMet 可提高荷斯坦奶公牛的FWB 和ADG，降低F/G，其中以添加RPLys 30 g/d 和RPMet 15 g/d的效果最好。但本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在低蛋白質(zhì)飼糧中補(bǔ)加RPLys 和RPMet 并不會(huì)影響山羊的生長(zhǎng)性能，添加兩者產(chǎn)生的協(xié)同效應(yīng)僅可獲得與基礎(chǔ)飼糧相似的生長(zhǎng)性能，無法產(chǎn)生更理想的效果。猜測(cè)是由于本試驗(yàn)的試驗(yàn)動(dòng)物為地方品種，所選的生長(zhǎng)階段和體重對(duì)于生長(zhǎng)發(fā)育而言已經(jīng)相對(duì)穩(wěn)定，受RPAA的影響較小。

3.2 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys 與RPMet對(duì)山羊血液生化指標(biāo)的影響

3.2.1 血漿代謝指標(biāo)

血液是動(dòng)物體內(nèi)各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的關(guān)鍵運(yùn)輸載體，通過測(cè)定血液的各項(xiàng)指標(biāo)能夠反映出飼糧在體內(nèi)的利用情況以及營(yíng)養(yǎng)需要量，在價(jià)值評(píng)定和營(yíng)養(yǎng)調(diào)控動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和健康狀況上有著重要的作用。TP和ALB具有調(diào)節(jié)血漿滲透壓和pH變化、提供機(jī)體所需要的蛋白質(zhì)、運(yùn)輸體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)代謝物質(zhì)的重要功能，是監(jiān)測(cè)機(jī)體氨基酸攝入和蛋白質(zhì)合成代謝狀態(tài)優(yōu)先考慮的主要指標(biāo)參數(shù)；TAA是血液中氨基酸含量的總和，可以用來評(píng)價(jià)飼料蛋白質(zhì)在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的分解和代謝吸收情況；Cr水平的高低能夠反映出動(dòng)物肌肉組織的代謝情況，若Cr水平明顯高于正常值，則表明動(dòng)物腎臟組織受到一定的損傷，需要及時(shí)地進(jìn)行調(diào)控治療；PUN 是蛋白質(zhì)分解代謝的產(chǎn)物，與蛋白質(zhì)合成代謝和氨基酸之間平衡有關(guān)[19]，PUN可衡量動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)代謝水平和飼糧氨基酸平衡狀況，與動(dòng)物機(jī)體氮沉積相關(guān)[20]。本試驗(yàn)中，兩個(gè)處理組血漿PUN水平顯著低于對(duì)照組，提示低蛋白質(zhì)飼糧飼喂RPLys和RPMet能提高飼糧蛋白質(zhì)利用率。UA作為動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)、氨基酸和核酸的代謝產(chǎn)物，能夠清晰地反映出蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)水平和分解代謝能力，而提高體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成量會(huì)引起UA水平的下降。Rajwade等[21]在犢牛基礎(chǔ)飼糧中添加RPLys 和RPMet，發(fā)現(xiàn)TP、ALB 含量不受影響，PUN 含量顯著降低。有研究指出，低蛋白質(zhì)飼糧添加RPLys和RPMet會(huì)引起梅花鹿幼鹿血清PUN、UA 水平明顯下降，但TP、ALB 濃度不受影響[22]。本試驗(yàn)中，UA、TAA、ALB、Cr 水平差異不顯著，與上述研究類似。這充分表明低蛋白質(zhì)飼糧添加RPLys 和RPMet 能促進(jìn)蛋白質(zhì)和其余氨基酸的合成利用，達(dá)到和基礎(chǔ)飼糧一樣的代謝效果。

AST、ALT 和AKP是機(jī)體氨基酸代謝過程中的關(guān)鍵酶，有助于反映動(dòng)物的生長(zhǎng)和發(fā)育狀況，是研究中用來評(píng)價(jià)肝功能的首選指標(biāo)。其中ALT 和AST 主要在氨基酸和糖代謝過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，當(dāng)肝臟組織器官出現(xiàn)病變或受損的現(xiàn)象時(shí)，兩種酶的濃度會(huì)偏高[23]；AKP 廣泛存在于生物界和動(dòng)物臟器中，在生物磷代謝過程中具有重要作用，有益于皮膚細(xì)胞的新陳代謝及再生[24]。正常條件下，降低飼糧的CP 水平必然會(huì)引起氨基酸和蛋白質(zhì)分解代謝和合成作用減弱，ALT、AST 和AKP 水平也會(huì)隨之出現(xiàn)變化，最終會(huì)加重動(dòng)物肝臟的負(fù)擔(dān)。低蛋白質(zhì)飼糧中補(bǔ)充一定含量的Lys 和Met 能夠提高氨基酸的組成比例和數(shù)量，促進(jìn)體內(nèi)的氨基酸平衡，減少不必要的氨基酸轉(zhuǎn)氨基代謝，提高氨基酸的利用效率，很大程度上能夠改善蛋白質(zhì)的合成代謝和機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)缺陷。本試驗(yàn)在降低飼糧CP 水平的同時(shí)添加一定水平的RPLys 和RPMet不會(huì)引起ALT、AST 和AKP 水平的改變，不影響山羊的肝臟功能，這與其他研究結(jié)果相一致[25-26]。

3.2.2 血漿抗氧化應(yīng)激能力

當(dāng)動(dòng)物受到刺激時(shí)，細(xì)胞的抗氧化防御和促氧化反應(yīng)就會(huì)處于代謝紊亂狀態(tài)，機(jī)體本身清除體內(nèi)氧自由基的能力極度不足，引起機(jī)體組織代謝產(chǎn)生與沉積大量的氧自由基，使細(xì)胞和組織受到不同程度的損傷，這種非正常的生理現(xiàn)象被稱為氧化應(yīng)激反應(yīng)，容易對(duì)動(dòng)物的生理機(jī)能和生產(chǎn)性能造成嚴(yán)重的危害。SOD、GSH-PX、CAT、MDA 是評(píng)價(jià)機(jī)體抗氧化系統(tǒng)動(dòng)態(tài)平衡情況的主要參數(shù)，能夠反映出動(dòng)物的健康狀況。SOD是機(jī)體主要清除超氧陰離子自由基并防止細(xì)胞遭到損傷的關(guān)鍵抗氧化酶；CAT則是細(xì)胞催化過氧化氫分解成氧和水的工具酶。通過提高二者在動(dòng)物體內(nèi)的水平可以防止發(fā)生過氧化反應(yīng)和生成不受控的自由基，有利于機(jī)體抗氧化。GSH-Px具有清除機(jī)體內(nèi)的脂質(zhì)過氧化物的作用，是保護(hù)機(jī)體組織重要的抗氧化酶。MDA 是動(dòng)物組織細(xì)胞脂質(zhì)經(jīng)過氧化反應(yīng)生成的主要產(chǎn)物，它的水平能夠判斷脂質(zhì)的過氧化程度以及細(xì)胞受損情況。目前關(guān)于氨基酸代謝對(duì)機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)的影響研究各存差異。有研究指出，圍產(chǎn)期飼喂RPLys 可降低奶牛的血漿MDA 水平，對(duì)增強(qiáng)GSH-Px的活性有積極作用[27]。奶牛在熱應(yīng)激條件下添加蛋氨酸羥基類似物異丙酯[2-hydroxy-4-（methylthio）butanoic acid isopropyl ester, HMBi]降低了血漿中MDA的水平，提高了SOD 和GSH-Px 的含量[28]。但王群[29]發(fā)現(xiàn)，不同CP水平的飼糧添加HMBi均不會(huì)引起奶牛血清中SOD、GSH-Px活性和MDA含量的變化，在肉羊上添加不同的蛋氨酸產(chǎn)品也得出類似結(jié)論[30]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，各組試驗(yàn)羊之間血漿SOD、GSH-Px、MDA 和CAT沒有差異，表明低蛋白質(zhì)飼糧添加RPLys和RPMet時(shí)，對(duì)機(jī)體的抗氧化性能沒有顯著影響。

3.3 低蛋白質(zhì)飼糧添加不同水平的RPLys 與RPMet對(duì)山羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響

瘤胃發(fā)酵是瘤胃微生物降解飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和合成反芻動(dòng)物所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)這一過程的總稱，飼糧中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入體內(nèi)主要是供給瘤胃微生物吸收利用，而反芻動(dòng)物最主要和最高效益的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用主要依托于瘤胃微生物的菌體蛋白質(zhì)、糖類和脂類。研究中常用瘤胃pH、NH3-N 濃度、纖維素酶活性、VFA濃度等參數(shù)來反映飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化程度和動(dòng)物的健康情況。

飼糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平是影響瘤胃pH 的關(guān)鍵因素，瘤胃pH 的高低對(duì)瘤胃微生物繁殖和瘤胃發(fā)酵有著主導(dǎo)作用，制約著飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用和反芻動(dòng)物的反芻行為和生長(zhǎng)功能，較為正常的pH 范圍一般為5.7～7.5。瘤胃NH3-N 是飼糧中蛋白質(zhì)、氨基酸及其他非蛋白氮受瘤胃微生物分解的產(chǎn)物，也是微生物蛋白合成的必需物，NH3-N濃度過高會(huì)以尿素的形式代謝排出，過低則不宜于瘤胃微生物蛋白的合成。Abbasi 等[31]研究表明，低蛋白質(zhì)飼糧補(bǔ)充RPMet 不會(huì)影響山羊的瘤胃pH。Tamura 等[32]研究發(fā)現(xiàn)，早期泌乳母牛的基礎(chǔ)飼糧上補(bǔ)飼8 g/d的RPMet并不會(huì)引起瘤胃pH和NH3-N濃度的顯著變化。王劍飛等[33]在奶牛瘤胃的體外發(fā)酵試驗(yàn)上也發(fā)現(xiàn)類似結(jié)果。本試驗(yàn)研究結(jié)果與上述報(bào)道一致，各組的瘤胃pH 均處在正常范圍內(nèi)變化（6.88～7.07），瘤胃NH3-N濃度也無顯著差異，表明降低飼糧的CP 水平并添加RPLys 和RPMet，山羊的瘤胃發(fā)酵與基礎(chǔ)飼糧的作用效果一致，瘤胃內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)和蛋白質(zhì)的分解吸收不受影響。

反芻動(dòng)物能夠消化粗飼料中約50%的纖維物質(zhì)，這主要是由于瘤胃內(nèi)微晶纖維素酶、羥甲基纖維素酶、木聚糖酶和纖維二糖酶等多種纖維素分解酶種的存在，因此常把它們作為活性參數(shù)來反映飼糧中纖維物質(zhì)的降解程度。吳文旋課題組前期發(fā)現(xiàn)，低蛋白質(zhì)飼糧中添加RPLys 或RPMet 對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)的瘤胃纖維素酶活性都沒有明顯影響，不會(huì)引起瘤胃微晶纖維素酶、木聚糖酶、纖維二糖酶及羧甲基纖維素酶活發(fā)生顯著變化[7-9]。本試驗(yàn)結(jié)果與以上研究類似，可能是由于少量的Lys和Met即使影響瘤胃纖維降解菌的活性，但影響甚微并不能達(dá)到顯著水平。

VFA是飼糧中纖維、淀粉等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在瘤胃微生物消化分解作用下的產(chǎn)物，具有給反芻動(dòng)物提供能量和維持正常的瘤胃內(nèi)環(huán)境的功能，它的濃度能夠較為準(zhǔn)確地反映出瘤胃發(fā)酵模式和微生物活性的變化情況[34]。Lee 等[35]在泌乳奶牛飼糧中補(bǔ)飼蛋氨酸羥基類似物，發(fā)現(xiàn)丙酸、丁酸及戊酸濃度下降，乙丙比有所提高，TVFA濃度沒有變化。吳文旋課題組前期在基礎(chǔ)飼糧中補(bǔ)充RPMet發(fā)現(xiàn)，山羊的VFA沒有顯著變化，瘤胃微生物對(duì)蛋白質(zhì)、碳水化合物的發(fā)酵不會(huì)受影響[7-8]。牛驍麟[36]在CP水平為14.0%的基礎(chǔ)飼糧中添加RPLys和RPMet，發(fā)現(xiàn)對(duì)TVFA、乙酸、丙酸、丁酸、乙丙比均無顯著影響。本試驗(yàn)中，低蛋白質(zhì)飼糧組合添加RPLys和RPMet不影響瘤胃的VFA濃度，與前人研究一致。其原因可能是：①瘤胃中VFA的產(chǎn)生量與采食量有直接的關(guān)系，當(dāng)以飼喂粗飼料為主時(shí)，采食量對(duì)VFA 產(chǎn)生的摩爾比例影響較小，當(dāng)飼喂精料條件下，采食量的增加會(huì)引起乙酸比例的下降，丙酸的比例增加，本試驗(yàn)中3組飼糧的精粗比例一致，且各組采食量之間差異不顯著，因此VFA 不受RPAA 的影響；②同時(shí)VFA 主要是通過瘤胃微生物降解飼糧中纖維素及半纖維素產(chǎn)生的，RPAA由于經(jīng)過包被處理，即使少量的RPAA流入瘤胃內(nèi)也不會(huì)引起纖維素及半纖維素降解活動(dòng)發(fā)生實(shí)質(zhì)性改變，因此不會(huì)引起VFA 發(fā)生變化。

4 結(jié)論

在山羊的飼糧CP水平從12%降低至10%的條件下，補(bǔ)充RPLys 和RPMet 可降低血漿PUN 水平，不會(huì)對(duì)其他血液生化指標(biāo)、抗氧化應(yīng)激能力、瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生負(fù)面影響。在本試驗(yàn)條件下，向低蛋白質(zhì)飼糧中添加RPLys和RPMet的適宜量為0.5%和0.2%。