王燕春

（寧波三生生物科技股份有限公司，浙江 寧波 315012）

1 意義

初產(chǎn)母豬的繁殖性能決定了整個母豬群的終身生產(chǎn)性能和經(jīng)濟效益。定時人工授精是批次生產(chǎn)中較為簡單的繁殖技術(shù)，在批次生產(chǎn)管理中發(fā)現(xiàn)兩種改進的定時人工授精方案可以提高初產(chǎn)母豬的發(fā)情率和產(chǎn)仔率，這一項新的技術(shù)應(yīng)用可能會提高養(yǎng)豬場的經(jīng)濟效益。

2 背景

近年來，控制發(fā)情和排卵變得越來越重要，由于批次流程管理的轉(zhuǎn)變，需要有一群可以隨時進行人工授精的母豬。初產(chǎn)母豬的繁殖性能決定了整個母豬群的終身生產(chǎn)性能和經(jīng)濟效益 。大多數(shù)母豬在斷奶后4～6 d內(nèi)恢復(fù)發(fā)情，但初產(chǎn)母豬的發(fā)情率較低是一個嚴(yán)重的問題。初產(chǎn)母豬推遲發(fā)情可能導(dǎo)致批次生產(chǎn)中斷。有趣的是，定時人工受精（FTAI）的優(yōu)勢在于它不需要檢測發(fā)情，同時誘導(dǎo)母豬同步發(fā)情后的FTAI可作為提高產(chǎn)仔率的重要手段。

但在生產(chǎn)豬場中，母豬在FTAI后排卵的同步性較差，而且經(jīng)FTAI后初產(chǎn)母豬產(chǎn)仔率降低。本研究旨在評價初產(chǎn)母豬經(jīng)兩種定時人工授精（TAI）處理后的繁殖性能，一種是在發(fā)情時使用促性腺激素釋放激素（GnRH），另一種是用馬絨毛膜促性腺激素（eCG）和GnRH提高固定時間授精母豬的產(chǎn)仔率，從而幫助母豬提高產(chǎn)仔率。

3 材料和方法

這項研究是2019年12月在北京養(yǎng)豬育種中心的一個大型養(yǎng)豬場進行的（大約2 000頭母豬）。北京市農(nóng)林科學(xué)院動物護理和使用委員會批準(zhǔn)了本研究中使用的所有程序。

3.1 試驗動物以及管理

養(yǎng)豬場遵循4周批次生產(chǎn)管理系統(tǒng)。初產(chǎn)母豬品系為長白豬×大白母豬（n=332）。用自動喂料機喂母豬，喂養(yǎng)方案為：斷奶至妊娠第30天1.8～2.4 kg/d，第31～90天2.5 kg/d，第91～110天3.0～4.0 kg/d，從妊娠110 d至分娩不超過2 kg/d。母豬在分娩前7 天被轉(zhuǎn)移到帶有單獨板條箱和板條地板的產(chǎn)房。將母豬置于光照/黑暗條件下各12 h，并于室溫（20℃）下飼養(yǎng)。整個試驗期間，初產(chǎn)母豬可以自由飲水。

3.2 試驗設(shè)計

初產(chǎn)斷奶母豬被隨機分為3組，每組的產(chǎn)仔數(shù)（7～16頭仔豬）與前一組相同，斷奶時的身體狀況評分為5分。在斷奶后的7 d內(nèi)，每天進行兩次（8:00和16:00）發(fā)情檢測，技術(shù)人員采用圍欄接觸法和反壓力測試法，并觀察當(dāng)公豬經(jīng)過附近時雌性豬的“站立反射”。對照組母豬（n=110）不接受激素治療，在斷奶后的發(fā)情期每天授精。eG-TAI組母豬（n=112）斷奶24 h后接受1 000 IU馬絨毛膜促性腺激素和發(fā)情期接受100 ug促性腺激素釋放激素。如果在8:00測出發(fā)情，則在發(fā)情8 h和32 h進行人工授精；如果在16:00測出發(fā)情，則在發(fā)情后16 h和40 h進行人工授精。2e-TAI組母豬（n=110）分別在斷奶后24 h和96 h接受1 000IU馬絨毛膜促性腺激素和100 ug促性腺激素釋放激素，給促性腺激素釋放激素后16 h和40 h授精，在給促性腺激素釋放激素時或給藥64 h后出現(xiàn)發(fā)情的母豬再次授精，共授精3次。試驗方案見圖1。

圖1 對照組，2e-TAI組，eG-TAI組在初產(chǎn)母豬上的方案

3.3 卵巢超聲

如前所述，5名經(jīng)過訓(xùn)練的技術(shù)人員對每組50頭母豬進行了腹部超聲檢查來確定5個最大卵泡的平均大小和排卵時間。在斷奶后96～168 h，間隔8 h（6:00、14:00和22:00）超聲檢查1次，直到排卵結(jié)束。相比于前一次掃描，當(dāng)2個卵巢中仍存在少于3個卵泡或大卵泡的數(shù)量時，則判定為顯著減少。一旦確定為排卵期，母豬在排卵后8 h后再次進行確認(rèn)。

3.4 懷孕、分娩和產(chǎn)仔量

懷孕是通過檢查受精后是否定期恢復(fù)發(fā)情來確定的。在授精后28 d到35 d之間進行經(jīng)腹部超聲檢查，以確認(rèn)沒有恢復(fù)發(fā)情的母豬懷孕。記錄所有妊娠母豬的產(chǎn)仔和產(chǎn)仔參數(shù)。

3.5 統(tǒng)計分析

使用IBM SPSS Statistics for Windows，version20.0 （IBM Corp.， Armonk，NY，USA）進行統(tǒng)計分析，結(jié)果以平均數(shù)±SE表示。試驗前，用Wilcoxon檢驗評價母豬組的同種性，檢驗前一次妊娠的以下變量：出生仔豬數(shù)、出生活仔數(shù)和斷奶數(shù)。采用單因素方差分析比較各組卵泡直徑、發(fā)情持續(xù)時間、排卵時間、產(chǎn)仔數(shù)和斷奶仔豬。采用費歇爾精確試驗比較各處理組的發(fā)情率、繁殖母豬率、妊娠率和產(chǎn)仔率。由于這些數(shù)據(jù)不是正態(tài)分布的，因此死產(chǎn)數(shù)據(jù)采用Kruskal-Wallis單因素方差分析，顯著性水平設(shè)為P＜0.05。

4 結(jié)果

4.1 馬絨毛膜促性腺激素對發(fā)情和卵泡發(fā)育的影響

4.1.1 發(fā)情反應(yīng)

2e-TAI組和eG-TAI組在斷奶7 d內(nèi)分別有85.5%和85.7%的發(fā)情，顯著高于對照組（67.3%，P＜0.05）。2e-TAI組和eG-TAI組的斷奶至發(fā)情間隔分別為99.3 h和100.1 h，顯著短于對照組（113.5 h；表1）。注射馬絨毛膜促性腺激素后72 h，對照組、2e-TAI組和eG-TAI組母豬發(fā)情率分別為11.8%、60.4%和44.6%（圖2）。

圖2 斷奶后各時間點母豬發(fā)情的時間（h）百分比

4.1.2 卵泡反應(yīng)

通過間歇性超聲檢查跟蹤了卵泡從斷奶到排卵的發(fā)育過程（圖1）。發(fā)情開始時，對照組和eG-TAI組卵泡大小分別為7.5 mm和7.0 mm，顯著大于2e-TAI組（5.7 mm）；然而卵泡大小在排卵期組間相似（分別為8.2 mm、7.7 mm和8.0 mm；P＞0.05；表1）。

4.2 兩種定時人工授精方案中促性腺激素釋放激素注射時間對排卵的影響

4.2.1 促性腺激素釋放激素刺激時卵泡大小的分布

2e-TAI組在eGG注射后固定時間（72 h）注射GnRH。由于發(fā)情，eG-TAI注射GnRH的平均時間為eGG注射后83.3 h，比2e-TAI組晚11.3 h（表1）。卵泡大小分布在eG-TAI組中更為一致，大多數(shù)eGTAI母豬的卵泡為＞6 mm，而大多數(shù)2e-TAI母豬的卵泡為5—6 mm（圖3）。

圖3 母豬使用促性腺激素釋放激素和發(fā)情時卵泡直徑（mm）

表1 初產(chǎn)母豬不同處理組的發(fā)情率、WEI、EOI、卵泡大小

4.2.2 促性腺激素釋放激素刺激后排卵時間和分布

2e-TAI組的發(fā)情至排卵間隔（EOI）（39.2 h）明顯長于eG-TAI組（30.7 h），類似于自然發(fā)情后間隔在對照組（圖4）。與其他兩組相比，對照組的排卵時間分布更為分散，注射GnRH后0—48 h，2e-TAI和eG-TAI的母豬排卵率分別為91.2%和93.3%（圖5）。

圖4 母豬排卵時間

圖5 發(fā)情期開始后（對照組）和發(fā)情初期促性腺激素釋放激素（GnRH）注射（2e-TAI）或斷奶后 96 h（eG-TAI） 母豬排卵期的比例

4.3 定時人工授精方案對母豬繁殖性能的影響

2e-TAI組斷奶母豬的配種率為100%，高于對照組（67.3%，P＜0.05）和eG-TAI組（85.7%，P＜0.05）。2e-TAI組受精率（82.7%）顯著低于對照組（93.2%）和eG-TAI組（95.8%）。然而，考慮到所有母豬在斷奶時分配的情況，2e-TAI組（82.7%）和eG-TAI組（82.2%）的妊娠率相似，但顯著高于對照組（62.7%）。2e-TAI和eG-TAI組的產(chǎn)仔率（分別為75.5和76.8%）顯著高于對照組（56.4%）。3組數(shù)據(jù)中每窩總產(chǎn)仔數(shù)、每窩產(chǎn)活仔數(shù)、每窩產(chǎn)死仔數(shù)基本一致。而2e-TAI和eG-TAI組中，相比對照組分別多出196頭和224頭，每100頭斷奶母豬的產(chǎn)仔量分別為850頭和878頭（表2）。

表2 不同處理組初產(chǎn)母豬的授精率、配種率、妊娠率、產(chǎn)仔率、總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、死胎數(shù)

5 討論

本研究旨在確定4周批生產(chǎn)模式管理下，2e-TAI和eG-TAI方案對初產(chǎn)斷奶母豬繁殖性能的影響。初產(chǎn)母豬的繁殖性能是影響?zhàn)B豬業(yè)生產(chǎn)能力和經(jīng)濟效益的主要因素。初產(chǎn)母豬的發(fā)情率和產(chǎn)仔率是母豬批次生產(chǎn)管理的關(guān)鍵因素。提高初產(chǎn)母豬的這些比率對于減少非生產(chǎn)天數(shù)和延長其使用壽命是重要的。以往的研究表明，eGG與促黃體素（LH）和卵泡刺激素（FSH）功能相似，它可以誘導(dǎo)卵泡發(fā)育和發(fā)情同步。與對照組相比，試驗組中有更多的初產(chǎn)母豬在斷奶后7 d內(nèi)表現(xiàn)出發(fā)情。這與Ellen對初產(chǎn)母豬的研究相一致：斷奶后注射1000 IU eGG在7 d內(nèi)表現(xiàn)出高發(fā)情率。

經(jīng)腹部超聲檢查確定排卵時間。2e-TAI組母豬注射GnRH后39.2 h排卵，與外源性GnRH刺激時相同。但eG-TAI組母豬的斷奶至發(fā)情間隔與對照組相似，兩組均有較大的排卵前卵泡，但2e-TAI組卵泡較小，可能導(dǎo)致斷奶至發(fā)情間隔較長。外源性促性腺激素已被用于刺激卵泡發(fā)育和誘導(dǎo)母豬斷奶后排卵，在母豬排卵前2～5 h內(nèi)刺激黃體生成素分泌，可縮短母豬的發(fā)情排卵間隔。LH刺激卵泡的生長，注射后72 h卵泡直徑約為5～6 mm，發(fā)情時增大至6～7 mm。因此，與2e-TAI相比，eG-TAI能有效促進卵泡生長和排卵，縮短斷奶發(fā)情間隔。

LH峰與發(fā)情有關(guān)，但存在著很大的差別。如果母豬表現(xiàn)出同步的發(fā)情，它們的排卵時間是分散的。在斷奶母豬中，從發(fā)情開始到排卵間隔的變化降低了標(biāo)準(zhǔn)授精程序在排卵后24 h內(nèi)發(fā)生的可能性。當(dāng)使用eG-TAI方案時，排卵可以被精確地定時，從而通過確保至少一個人工授精發(fā)生在最大的生育時間，從而提高斷奶母豬的產(chǎn)仔率。如果在GnRH注射時或在2e-TAI組64 h后檢測到站立發(fā)情，則可進行授精。該方法可有效防止提前或推遲發(fā)情母豬的誤配，較定時人工受精技術(shù)提高該批次斷奶母豬的產(chǎn)仔率。

研究表明，eGG注射提高了排卵率，但也對胚胎生存能力產(chǎn)生了負(fù)面影響，可能是因為它增加了排卵前池的卵泡不均一性，導(dǎo)致了胚胎發(fā)育的不同步。因此，我們發(fā)現(xiàn)實驗組和對照組在總出生數(shù)和活產(chǎn)數(shù)上沒有差異。但試驗組中每100頭斷奶母豬的產(chǎn)仔數(shù)比對照組多196頭和224頭，顯著提高了母豬的繁殖性能。

6 結(jié)論

本文的結(jié)果表明，初產(chǎn)母豬采用TAI方案處理后，在斷奶和分娩的7 d內(nèi)顯著提高了發(fā)情率，使得初產(chǎn)母豬納入批次化生產(chǎn)管理成為可能，最大限度地減少非生產(chǎn)天數(shù)造成的損失。