吳朋朋張彩勤趙 勇譚鄧旭師長宏白 冰

(空軍軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,西安 710032)

隨著生命科學(xué)的發(fā)展,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物已成為其研究的基礎(chǔ)與支撐,是醫(yī)學(xué)教學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究不可缺少的實(shí)驗(yàn)材料。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確和課題研究的成敗,決定研究成果的可行性、重復(fù)性和科學(xué)性,特別是一些人獸共患性疾病,直接威脅動(dòng)物飼養(yǎng)人員和研究人員的健康與生命安全[1-2]。因此,做好實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量檢測與評估的相關(guān)工作,對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生產(chǎn)和應(yīng)用具有重要作用[3-4]。

本中心作為陜西省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量檢測機(jī)構(gòu)(陜西省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)督檢測中心),根據(jù)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法》、《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法》和《陜西省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理辦法》等相關(guān)法律法規(guī)以及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國家標(biāo)準(zhǔn)[5-8],除了每年對各實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位進(jìn)行質(zhì)量抽測外,近年來,加大對省內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位的質(zhì)量抽檢,并及時(shí)反饋檢測結(jié)果,對不合格的動(dòng)物進(jìn)行處置并做好后期的跟蹤監(jiān)測,確保本地區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用安全。本文對2017～2021年期間陜西省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位飼養(yǎng)的SPF級(jí)大、小鼠質(zhì)量抽檢結(jié)果進(jìn)行了總結(jié)分析,探討了影響動(dòng)物質(zhì)量的因素,以期為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中的質(zhì)量管理和監(jiān)測提供參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

抽檢的不同品系的S PF級(jí)大、小鼠均來自陜西省內(nèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位,各年度抽檢單位數(shù)量、動(dòng)物品種及數(shù)量見表1。

表1 2017～2021年陜西地區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測結(jié)果Table 1 Monitoring results of laboratory animals in Shaanxi from 2017 to 2021

1.2 主要試劑與儀器

大、小鼠酶聯(lián)免疫抗體檢測試劑盒購買于蘇州西山生物術(shù)有限公司和中國食品藥品檢定研究院,其中蘇州西山生物術(shù)有限公司小鼠酶聯(lián)免疫抗體檢測試劑盒批號(hào):鼠痘病毒(E22012201)、肝炎病毒(E22040801)、仙臺(tái)病毒(E22012802)、肺炎病毒(E22031411)、呼腸孤病毒III型(E21102902)、細(xì)小病毒(E22012601)、弓形蟲(E21112502)、支原體(E22012701)、泰澤病原體(E21120604);大鼠酶聯(lián)免疫抗體檢測試劑盒批號(hào):仙臺(tái)病毒(E22022503)、漢坦病毒(E22022502)、細(xì)小病毒 H-1株(E21102201)、細(xì)小病毒KRV株(E21102202)、肺炎病毒(E21121501)、冠狀病毒/涎淚腺炎病毒(20210702)、呼腸孤病毒Ⅲ型(20210702)、支原體(E21102901)、弓形蟲(E21122801)、泰澤病原體(E21101401);中國食品藥品檢定研究院小鼠酶聯(lián)免疫抗體檢測試劑盒批號(hào):鼠痘病毒(20210604)、肝炎病毒(20211125)、仙臺(tái)病毒(20211123)、肺炎病毒(20211003)、呼腸孤病毒III型(20211009)、細(xì)小病毒(20211017)、弓形蟲(20211109)、支原體(20211104)、泰澤病原體(20210917),大鼠酶聯(lián)免疫抗體檢測試劑盒批號(hào):仙臺(tái)病毒(20211111)、漢坦病毒(20211025)、細(xì)小病毒H-1株(20211023)、細(xì)小病毒 KRV 株(20211113)、肺炎病毒(20210914)、冠狀病毒/涎淚腺炎病毒(20210917)、呼腸孤病毒Ⅲ型(20210917)、支原體(20211118)、弓形蟲(20211008)、泰澤病原體(20211204);細(xì)菌培養(yǎng)平板(批號(hào):0032213)、鑒別培養(yǎng)基(批號(hào):20210314)和細(xì)菌生化微量管(批號(hào):20210917)由杭州微生物試劑有限公司提供,其余相應(yīng)檢測試劑均參照國家標(biāo)準(zhǔn)配備。多功能酶標(biāo)儀(Synergy LX)購于美國Bio-Tek公司;生物顯微鏡(BX3)購于日本奧林巴斯公司;全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)(VITEK 2 Compact)購于法國梅里埃公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 抽樣

抽樣按照GB 14922.2-2011《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 微生物等級(jí)及監(jiān)測》進(jìn)行,在每一房間不同籠架多點(diǎn)采樣,根據(jù)每個(gè)品系動(dòng)物的種群數(shù)量隨機(jī)采樣3～5只,按SPF級(jí)動(dòng)物進(jìn)行包裝、運(yùn)輸,包裝箱上注明動(dòng)物品種、級(jí)別、數(shù)量及檢測項(xiàng)目。

1.3.2 檢測

檢測項(xiàng)目及方法依據(jù)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 微生物學(xué)檢測方法》(GB/T 14926.1-2001～GB/T 14926.64-2001)和《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 寄生蟲學(xué)檢測方法》(GB 18448.1-2001～GB 18448.10-2001)執(zhí)行[7-8],涵蓋國家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的必檢項(xiàng)目(細(xì)菌、病毒和寄生蟲)。為避免交叉污染,所有檢測樣本的采集均在生物安全柜中實(shí)施。采集動(dòng)物糞便、體表毛發(fā)開展寄生蟲檢測;分離血清,酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)檢測血清中的病毒抗體;采取呼吸道分泌物和腸道內(nèi)容物,分離培養(yǎng)細(xì)菌并進(jìn)行生化鑒定,確定感染菌群類型[9-11]。檢測中發(fā)現(xiàn)的病毒和細(xì)菌陽性樣品均進(jìn)行二次復(fù)檢。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

按照相應(yīng)國家標(biāo)準(zhǔn)對檢測結(jié)果進(jìn)行綜合判定,符合該病原微生物檢測結(jié)果者作出陽性報(bào)告(感染),不符合者作出陰性報(bào)告(未感染)。用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件對近5年抽檢的大、小鼠微生物及寄生蟲感染陽性率(或血清抗體陽性率)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,結(jié)果以每年檢出的陽性動(dòng)物數(shù)占抽檢動(dòng)物總數(shù)的百分比進(jìn)行表示。用單因素方差分析法進(jìn)行每年間感染情況的差異性分析,以P＜0.05表示差異有顯著性,最后用GraphPad Prism 8軟件進(jìn)行作圖。

2 結(jié)果

2.1 2017～2021年SPF級(jí)大、小鼠寄生蟲檢測結(jié)果

5年間,累計(jì)抽檢小鼠2549只,大鼠503只(表2、圖1和圖2)。檢測范圍包括皮毛上的蚤、虱和螨等體外寄生蟲成蟲及其蟲卵;腸道內(nèi)的鞭毛蟲、纖毛蟲、蠕蟲及其蟲卵;血清中的弓形蟲抗體采用ELISA進(jìn)行檢測。

小鼠主要存在體外寄生蟲(螨蟲)和腸道鞭毛蟲的感染(表2、圖1),5年中均有檢出,但檢出率呈逐年下降趨勢。體外寄生蟲(螨蟲)的檢出率由2017年的5.26%(19/361)降為2021年的0.15%(1/670),單位檢出率由20.00%(3/15)降為3.12%(1/32);腸道鞭毛蟲的檢出率由2017年10.53%(38/361)降低為2021年的0.45%(3/670),單位檢出率由20.00%(3/15)降為3.12%(1/32)。弓形蟲抗體檢出率也呈現(xiàn)逐年降低的趨勢,由2019年的0.84%(5/598)降至2021年的0.15%(1/670),單位檢出率由10.00%(2/20)降為3.12%(1/32)。但是,腸道蠕蟲的檢出率卻由2018年的0.40%(2/506)增加至2021年的2.39%(16/670),單位檢出率由5.88%(1/17)增加至9.38%(3/32)。

圖1 2017～2021年陜西地區(qū)SPF級(jí)小鼠寄生蟲檢測結(jié)果Figure 1 Parasite detection results of SPF mice in Shaanxi from 2017 to 2021

表2 2017～2021年陜西地區(qū)SPF級(jí)大、小鼠寄生蟲檢測結(jié)果Table 2 Parasite detection results of SPF mice and rats in Shaanxi from 2017 to 2021

大鼠也存在體外寄生蟲(螨蟲)、腸道鞭毛蟲和蠕蟲的感染(表2、圖2)。檢測結(jié)果顯示,體外寄生蟲(螨蟲)檢出率由2017年的7.07%(8/113)降至2018年后無檢測出,單位檢出率由2017年的40.00%(2/5)降為0.00%;腸道鞭毛蟲的檢出率由2017年的11.50%(13/113)降低為2021年的0.83%(1/120),單位檢出率由60.00%(3/5)降低為7.69%(1/13)。蠕蟲檢出率由2017年的3.79%(3/79)增長為2021年的7.50%(9/120),單位檢出率由20.00%(1/5)增加至2021年的15.38%(2/13)。

圖2 2017～2021年陜西地區(qū)SPF級(jí)大鼠寄生蟲檢測結(jié)果Figure 2 Parasite detection results of SPF rats in Shaanxi from 2017 to 2021

2.2 2017～2021年SPF級(jí)大、小鼠病原微生物檢測結(jié)果

5年中109家單位的小鼠病原微生物檢測結(jié)果(表3、圖3)顯示,小鼠主要存在沙門菌、肺炎克雷伯桿菌、肺炎鏈球菌、泰澤病原體和支原體的感染,但檢出率呈下降趨勢。其余必檢項(xiàng)目5年內(nèi)均未檢出。其中,沙門菌2017年檢出率為2.78%(10/361)、2018年為1.18%(6/506)、2019年0.33%(2/598)到2020年以后均為0.00%,單位檢出率由2017年的20.00%(3/15)降低為2021年的0.00%;肺炎克雷伯桿菌僅2018年在1家單位(5.88% 1/17)中檢出0.20%(1/506),其余3年均未檢出;肺炎鏈球菌在2017年1家單位(6.67% 1/15)檢出0.27%(1/361)后,連續(xù)4年均未檢出;泰澤病原體血清抗體陽性檢出率由2017年2家單位(13.33% 2/15)檢出1.38%(5/361)降低至2021年的32家單位均未檢出;支原體血清抗體陽性僅在2017年1家單位(6.67% 1/15)中檢出(0.27% 1/361),此后連續(xù)4年均未檢出。

圖3 2017～2021年陜西地區(qū)SPF級(jí)小鼠病原微生物檢測結(jié)果Figure 3 Pathogenic microorganism test results of SPF mice in Shaanxi from 2017 to 2021

45家單位的大鼠細(xì)菌檢測結(jié)果(表3、圖4)顯示,大鼠中主要存在金黃色葡萄球菌、沙門菌、綠膿桿菌、肺炎鏈球菌和泰澤病原體的感染,但檢出率呈逐年下降趨勢。其余必檢項(xiàng)目5年內(nèi)均未檢出。其中,金黃色葡萄球菌2017～2019年連續(xù)3年均有1家單位檢出,檢出率分別為1.77%(2/113)、1.27%(1/79)和1.02%(1/98),此后至2021年再未檢出金黃色葡萄球菌;沙門菌僅在2018年1家單位(11.11% 1/9)中檢出(2.53% 2/79),其余4年均未檢出;綠膿桿菌在2017年(1.77% 2/113)和2018年(2.53% 2/79)均有1家單位檢出,2019年至2021年連續(xù)3年均未檢出;肺炎鏈球菌僅在2018年1家單位(11.11% 1/9)中檢出(1.27% 1/79),其余4年均未檢出;泰澤病原體血清抗體陽性僅在2017年有2家單位(40.00% 2/5)檢出(4.42% 5/113),此后連續(xù)4年均未檢出。

表3 2017～2021年陜西地區(qū)SPF級(jí)大、小鼠病原微生物檢測結(jié)果Table 3 Pathogenic microorganism test results of SPF mice and rats in Shaanxi from 2017 to 2021

圖4 2017～2021年陜西地區(qū)SPF級(jí)大鼠病原微生物檢測結(jié)果Figure 4 Pathogenic microorganism test results of SPF rats in Shaanxi from 2017 to 2021

2.3 2017～2021年SPF級(jí)大、小鼠病毒抗體檢測結(jié)果

病毒檢測主要采用ELISA方法檢測血清中的病毒抗體,檢測中發(fā)現(xiàn)的陽性血清樣本再次采用不同廠家的ELISA檢測試劑盒進(jìn)行2次復(fù)檢,兩次結(jié)果均為陽性則判定為感染,檢測結(jié)果如表4所示。

表4 2017～2021年陜西地區(qū)SPF級(jí)大、小鼠病毒血清抗體檢測結(jié)果Table 4 Virological test results of SPF mice and rats in Shaanxi from 2017 to 2021

小鼠病毒血清抗體檢測結(jié)果(表4、圖5)顯示,小鼠肝炎病毒、仙臺(tái)病毒、小鼠肺炎病毒、小鼠細(xì)小病毒和小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型在2017～2021年均有檢出。其余必檢項(xiàng)目5年內(nèi)均未檢出。2017年有3家單位(20.00% 3/15)檢出小鼠肝炎病毒(陽性率4.71% 17/361),1家單位(6.67% 1/15)檢出仙臺(tái)病毒(陽性率1.39% 5/361),2家單位(13.33% 2/15)檢出小鼠細(xì)小病毒(陽性率2.22% 8/361)。2018～2021年每年均有不同病毒檢出,但陽性單位數(shù)和病毒陽性率均呈逐年下降趨勢。至2021年,僅有1家單位(3.13% 1/32)檢出小鼠肝炎病毒且陽性率降為0.30%(2/670),仙臺(tái)病毒陽性率降為0.15%(1/670),32家單位均未檢出小鼠細(xì)小病毒。此外還發(fā)現(xiàn),對于小鼠肺炎病毒和小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型,這5年來的血清抗體陽性檢出率則呈現(xiàn)逐年上升的趨勢:2017年僅1家單位(6.67% 1/15)檢出小鼠肺炎病毒(陽性率1.11% 4/361),2019年增長為2家單位(陽性率2.84% 17/598),至2021年該2家單位(6.25% 2/32)小鼠肺炎病毒血清抗體陽性檢出率為(2.39% 16/670);而2019年1家單位(5.00% 1/20)檢出小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型(陽性率0.17% 1/598),至2021年,該單位(3.13% 1/32)依舊有檢出(陽性率0.45% 3/670)且比率較過去2年有所增加。

圖5 2017～2021年陜西地區(qū)SPF級(jí)小鼠病毒抗體檢測結(jié)果Figure 5 Virological test results of SPF mice in Shaanxi from 2017 to 2021

大鼠血清抗體陽性以仙臺(tái)病毒、大鼠細(xì)小病毒、小鼠肺炎病毒和大鼠冠狀病毒為主(表4、圖6)。其余必檢項(xiàng)目5年內(nèi)均未檢出。其中,仙臺(tái)病毒每年均有檢出,但陽性率從最初的3家單位(60.00% 3/5)的7.07%(8/113)降低為2021年1家單位(7.69% 1/13)的0.83%(1/120);大鼠細(xì)小病毒和大鼠冠狀病毒抗體陽性僅2017年和2018年在個(gè)別單位有檢出,此后2019～2021年連續(xù)3年各單位均未檢出;值得注意的是,小鼠肺炎病毒血清抗體陽性率卻由最初1家單位(20.00% 1/5)的0.88%(1/113)增長為3家單位(23.08% 3/13)的(10.00% 12/120)。

圖6 2017～2021年陜西地區(qū)SPF級(jí)大鼠病毒抗體檢測結(jié)果Figure 6 Virological test results of SPF rats in Shaanxi from 2017 to 2021

3 討論

隨著生命科學(xué)的發(fā)展與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證制度的不斷完善,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測顯得尤為重要[12]。定期的質(zhì)量監(jiān)測,不僅能夠?yàn)閷?shí)驗(yàn)動(dòng)物的生產(chǎn)和使用提供科學(xué)依據(jù),同時(shí)也能及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)中存在的問題,消除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攜帶的人畜共患病原體,減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生產(chǎn)和使用過程中對人群的感染[13]。對于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位而言,動(dòng)物質(zhì)量監(jiān)測的缺失會(huì)導(dǎo)致日常管理出現(xiàn)盲區(qū),動(dòng)物一旦感染烈性傳染病如鼠痘等,可導(dǎo)致整個(gè)動(dòng)物群全軍覆沒,造成巨大損失[14]。

通過對2017～2021年陜西省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位飼養(yǎng)的SPF級(jí)大、小鼠質(zhì)量抽檢結(jié)果的分析,發(fā)現(xiàn)5年間,陜西地區(qū)抽檢單位和動(dòng)物的數(shù)量均有所增長,從側(cè)面反映出本地區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用數(shù)量的穩(wěn)步提升。但值得注意的是,各單位使用的動(dòng)物質(zhì)量還存在著一定的問題,總體趨勢是病原微生物感染降幅明顯,但個(gè)別微生物感染控制水平有待提升。具體表現(xiàn)在寄生蟲方面,大、小鼠中主要存在體外寄生蟲(螨蟲)、腸道鞭毛蟲和蠕蟲的感染(表2);細(xì)菌方面存在金黃色葡萄球菌、沙門菌、綠膿桿菌、肺炎克雷伯桿菌、肺炎鏈球菌、泰澤病原體和支原體的感染(表3);病毒方面則以小鼠肝炎病毒、仙臺(tái)病毒、小鼠肺炎病毒、小鼠細(xì)小病毒、小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型、大鼠細(xì)小病毒和大鼠冠狀病毒血清抗體陽性為主(表4)。在我國廣東、四川等地區(qū)也有金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌檢測陽性的報(bào)道[15-16]。2014～2019年北京地區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量抽檢結(jié)果中,鼠群檢出的病原微生物以細(xì)小病毒、泰澤病原體、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌等為主[17-18]?？梢?本地區(qū)與國內(nèi)其它地區(qū)實(shí)驗(yàn)鼠群病原體污染的流行趨勢基本一致。我國現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測》中明確規(guī)定金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、肺炎克雷伯桿菌是SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)大、小鼠必須檢測和排除的病原菌[6],但上述病原菌均屬于條件性致病菌,可正常存在于動(dòng)物體內(nèi)和環(huán)境中,只有當(dāng)動(dòng)物免疫功能低下時(shí)方可感染動(dòng)物。國外多數(shù)企業(yè)將其作為環(huán)境監(jiān)測的參考指標(biāo),當(dāng)認(rèn)為該病原體可能會(huì)對正在進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)存在干擾時(shí)才進(jìn)行監(jiān)測[19-21]。對病原微生物來源進(jìn)行調(diào)查發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染病原微生物主要集中在3個(gè)方面:一是來自病原微生物控制不明確的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,占病原微生物來源的83.33%(20/24)。感染動(dòng)物主要來自于各單位構(gòu)建的基因編輯動(dòng)物,其微生物質(zhì)量狀況不明確,造成動(dòng)物間交叉感染。二是來自實(shí)驗(yàn)物品、生物試劑和實(shí)驗(yàn)人員的污染,占病原微生物來源的12.50%(3/24)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)區(qū)域人員流動(dòng)頻繁,個(gè)別實(shí)驗(yàn)人員生物安全意識(shí)不強(qiáng),物品消毒滅菌不徹底,潔凈與非潔凈區(qū)域?qū)嶒?yàn)儀器、試劑及物品交叉混用,感染性實(shí)驗(yàn)廢棄物的不規(guī)范處置均可造成動(dòng)物感染。三是屏障設(shè)施管理存在漏洞,占病原微生物來源的4.17%(1/24)。飼料、墊料和飲水滅菌消毒不徹底,或是存在污染死角,設(shè)施設(shè)計(jì)及布局的缺陷等均可導(dǎo)致病原微生物的入侵。

針對以上實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位的大、小鼠感染現(xiàn)狀,在陜西省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)和專家的監(jiān)督與指導(dǎo)下,對檢測不合格動(dòng)物所在區(qū)域?qū)嵭辛藝?yán)格消殺處理:不符合SPF級(jí)標(biāo)準(zhǔn)要求的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(C57BL/6J、BALB/c小鼠和SD大鼠等),須立即停止實(shí)驗(yàn)、處死感染動(dòng)物并封鎖該區(qū)域。區(qū)域內(nèi)所有動(dòng)物分區(qū)域、分批次進(jìn)行病原篩查,及時(shí)淘汰病原(血清抗體)陽性動(dòng)物(或整個(gè)種群),對房間環(huán)境及IVC系統(tǒng)進(jìn)行徹底消毒,檢測合格后重新引進(jìn)質(zhì)量合格的動(dòng)物開展實(shí)驗(yàn)。同時(shí)對同房間內(nèi)其他小鼠進(jìn)行嚴(yán)密監(jiān)控,每隔兩周進(jìn)行復(fù)查,確保沒有交叉感染。珍稀的基因編輯小鼠則可經(jīng)過相應(yīng)的生物凈化后(剖腹產(chǎn)、胚胎移植或體外受精),采用兩次檢測法確定是否達(dá)到SPF級(jí)要求,即在目標(biāo)小鼠離乳后檢測代孕母鼠,分窩留種后檢測淘汰的仔鼠,只有兩次檢測均符合SPF標(biāo)準(zhǔn)方可判定凈化合格。合格的基因編輯鼠群轉(zhuǎn)移至微生物最高級(jí)別控制區(qū)域進(jìn)行飼養(yǎng),加強(qiáng)區(qū)域管控和環(huán)境消毒,嚴(yán)防病原微生物侵入,動(dòng)物一旦出現(xiàn)污染,立即轉(zhuǎn)入低級(jí)別飼養(yǎng)區(qū),待重新進(jìn)行生物凈化后返回。此外,還需加強(qiáng)飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)人員生物安全、消毒滅菌等專業(yè)知識(shí)的培訓(xùn),降低動(dòng)物感染的風(fēng)險(xiǎn)[22]。

上述整改措施的實(shí)施,極大改善了本地區(qū)各使用單位實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病原微生物的感染狀況,陽性動(dòng)物檢出率總體呈逐年下降趨勢。其中,肺炎克雷伯桿菌、肺炎鏈球菌和綠膿桿菌等細(xì)菌感染動(dòng)物已經(jīng)連續(xù)4年未檢出。然而,腸道蠕蟲、小鼠肺炎病毒、小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型連續(xù)5年均有檢出且呈現(xiàn)緩慢增長的趨勢,這是因?yàn)闄z出的動(dòng)物都屬于正在實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物或珍稀的基因編輯動(dòng)物,無法淘汰處理,僅靠隔離與消毒,病原防治比較困難。帶毒(蟲)動(dòng)物也容易造成周圍動(dòng)物的交叉感染,只有通過微生物凈化才能徹底清除病原感染[23]。

通過對陜西省2017～2021年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位屏障環(huán)境飼養(yǎng)的SPF級(jí)大小鼠病原微生物監(jiān)測結(jié)果的分析,了解到本地區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量得到較大改善,但也暴露出很多問題。作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量檢測機(jī)構(gòu),要堅(jiān)持不懈的進(jìn)行日常病原微生物監(jiān)測,加強(qiáng)生物安全宣傳,促使相關(guān)單位明確實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量對本行業(yè)及生物醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)的發(fā)展至關(guān)重要。同時(shí),督促各使用單位持續(xù)采取嚴(yán)格的生物安全防控措施,不斷提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理水平。只有檢測機(jī)構(gòu)與各單位相互配合,才能不斷降低實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病原感染風(fēng)險(xiǎn),提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量,為生命科學(xué)的發(fā)展提供強(qiáng)有力的支撐。